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G. MASSUN. llhlTI'.lli

BIBLIOTHEÜUE DIAMANT

DKS Si'IKNCKS MKDIC.-VLKS I'M' BIOLOGIQl.'E

MANUEL DE PATHOLOGIE INTERNE

l'.ir M. !#9632; liquot; HiKii vi...v, a.-r.-jv a- !i !#9632;quot; umiIi.- ,1 ni.!d.H'iii.'. Nouvoll''(#9632;'.liüoii. '2 volumrs.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;\'gt; !;.

RfiSUME D'ANATOMIE APPLIQUEE I'.ir M. !#9632; H¹quot; I'Afi.r.T. |irigt;r.'s-.'iu':i la Kai'iilliMl.'. iui''ili'i;iüi' dr l.yon. :gt;#9632; oilitian, :iwc (i:! ii-ur.'- ilans !.#9632; i.'xti'. 7 tV.

MANUEL DE DIAGNOSTIC MEDICAL l':ir M. 1'. Si'n,i.M\NN. jirof.^^^ui' ;i la Kaculi.' lt;]#9632;#9632; m.'ili'-cin*' li'¹ Naiu\v. I'quot;¹ li^urcs tlaii^ i-- tfMi'.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; tV. #9632;#9632; '

MANUEL DE THERAPEUTIQUE

Par ]#9632;#9632; H' Hkuuiiz. piMlVvlt;.MU' a la l^'acult^ (!.#9632; iiii'i^ il'

Gr.niohl.-, av,a' i;---------------------------------n ulu, |gt;n.l'------nr

a I i [quot;acull.' 'Iquot; jnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;| ,nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; uiliiidii. 0 IV.

PRfiCIS D'ljnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;^ianbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; T SOGIALE

I'm- M.l.- [)^rA. y.\i\nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; I ' l'quot; M-iih.. a- nif-

do.-m-Uo I-vom.I ^

PRfiCIS

CIAIRE ------------ a la Kaouh.. rl

Par M. !#9632; Ii^r I. v.-----------------quot;

mi'ilriMin' '!#9632;#9632; Lymi, ?⁰ .'#9632;iliunn av.a: li^ur.-,- ilau^ If I'-M'' ,#9632;1 4 pi iiu-h.'- en ciiil, ur.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;7 IV. T.i'

PRfiCIS DE ZOOLOGIE MfiDICALE Par M. '#9632;. (quot;aiuk.t. ilnv.^ii il.' la I'aiaili.' il.-lt; sci.^ioi'- rl pror.-^fur a I'Kc.l.' il.'quot;m.'il,#9632;oino il.' llr.'nulili-, iquot; oililimi.

av.-c '#9632;?'gt;', tiL'in-i's ilaas ]#9632; toxl.'.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 7 IV, quot;iH

GUIDE PRATIQUE D'ELECTROTHERAPIE

ReJiije d'apros !#9632;#9632;lt; ti'avaux i'i li--; li'i-mis In l)^r OxiMrs. p.ar lo 1)quot; P.ONM-inv. #9632;!#9632; edilinn Ci'vik! i;i atiirini'iUtM; par lo Dr Onimis, av.-c '.'ii liu'iii'os ilia- ]#9632; ti'Xti'.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;G IV.

fiLfiMENTS DE PHYSIQUE

Ap}ili'/gt;'i''- lt;i I'i mrih-cin,' eta In phi/xiolor/ie, pal'M. Mol-rKssiKi;, d.iyou di' la I'Viruli.' ii.- rimdociiio do MompolliiM^-,

OjXiqii,', av.-c 177 ÜL'iiros dans lo toxto.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; i IV. Till

PARIS Sa topographie, son hyi/ii'iii: sr.i malndirs, par M. lo \)r Leon Cm.in. modooin inspociour do rarmoo, 1 vnlinno do r)32 paj-'os.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; G I'r.

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1:20, HoL'LKV.uui Saint-Geii.mai.n. 1'aiii-.

lllULItilllKijrK IHAMAXT

[)KS SCIKNCICS MKDICAI.KS MT Uh il.i m HgrKS

MANUEL DOBSTfiTRIQUE On Ahr-M/uioirr ,!:#9632; r,^:/,-r.- rt du pmtich'n. pm- M. !gt;#9632; Or Nii ; i v. 2^C iMlitinn, rrvui* iM [iiiLriut'iuet.', ivcc quot;raquo;7 ti^uri's

flans 1.' i.'\ii'.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;.quot;i |V.

PRfiCIS DES MALADIES DES FEMMES l':ir M. Ir Ik Litaiu, avrc iiigt;mi)i-,;iisi's liL'iiros dans li; t.-x: .nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 7 IV.

MANUEL MEDICAL D HYDROTHERAPIE

CiU'M.h'Dr Ukm-H.uuih. iii,Ml,-cin .#9632;n cli.'l'dlaquo; riuilili^,-

nn'iit li.vilrii|lii'i','i|iiiiuc'nieilical ilr Paris ri ill- I'lC'alilisso-

nii'Ul hv(li-igt;ilit'i'a|iii|iir d'Auii-uil. f edilinn, avro liLrnrcs

dans 1.' {#9632;w-.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 0 |V.

MANUEL DU MICROSCOPE 1)gt;i,ix x,'x np)ilir,iiin,i* 'at lUinjitustii: rt ii- la cluiiipif. par MM. l.'s Dquot; Matiiia- iii vai.' ri Lkrkiuiui.i.kt. 2laquo; edition, avgt;'C I'O tiiruri's dans 1.,- l.-xtr,nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;0 fr.

LES BANDAGES amp; LES APPAREILS A FRACTURES

IVu- M. !#9632;' l)^r Glii.l.KMis. ^ iMliiioi), avoc 10.quot;raquo; liunr.-s dans !lt;' U'\\'\nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; (gt; fr.

PRfiCIS THfiORIQÜE ET PRATIQUE DE L'EXAMEN DE LCEIL ET DE LA VISION

l':\v M. !o ducti'iii' I'livrvia., an'.I.'i-in principal do larineo, pivr'ssoni' a riv'oli' du \'al-d'^,-('gt;i'aco, avi'C 11'J li^nivs dans !#9632; i.-xi.'.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;6 fr.

LE MEDECIN D.'v.iii'- prives #9632;#9632;' pntilics, si's rappiiris avec 11 jnrisprmli'nci; ol I'ln'^anisalion nu'dicalos, par M. l)i-;iii \mi;.u:. mombre d rAcadeniiu iU.' mi'dociin'.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;(J n-.

LES EAUX MINERALES

DANS LES AFFECTIONS CHIRURGICALES

Par M. 1,-doct.Mir Kn^nc Uimiimui. mödocin ilo 1^ ,-lasso

d-¹ la inarint¹. avoc nno pivlaci; dt: M. Jidos lio* uaiid,

in^ndT.' di.' 1'Acadt'ini.- do mödocino, inspoctonr ^onri'al

du sorvico di.' la marino.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;rgt; fr.

MANUEL D'OPHTALMOLOGIE

I'll¹ M. 1 gt; [)quot; i Ti-,.ii;i,Ks ('ami.skt, avoc 123 li_'invs dans lo loxio.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;7 IV.

6gt;.

/*gt;

-#9632; V, #9632; ;

PRECIS

DE MICROBIE

MEDICALB ET VETER1NAIRE

BIBUOTHEEK UNIVERSITEIT UTRECHT 2911 057 8

2035-S9. ConBBit. Imprimerie Citfirfe

PRECIS

DE MICROBIE

MEDICALE ET VETERINAIRE

Dgt;- I..-I1. THOINOTnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;E.-J. MASSELIN

ANCIEN INTERNE DES HOriTAl Xnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; M E D E C I .\ - VET F. I\ I .\ i I 11 I:

AVEC To FIGURES NOIRES ET KN CuLLEUR


	i , ..#9632;-#9632; 1 1	laquo;
	ARIS quot;-	-.-#9632;_

G. MASSOX, EDITEUR

LIBRAIRE T)K L ACADEMIE DE M^DECINE v \i , boolerard Saint-GermaTii, en fure de l'Ecale de Hedecine.

.M ncr.c i.xxxix

^ .,

Droits de traductioo el do reproduction reservlaquo;

PREFACE

Les ouvrages traitant des microbes et des maladies microbiennes commencent h devenir assez nombroux eu France, et cependant ü nous a paru qunn l'rech. du genre de ce-lui-ci, avait sa [dace marquee parmi eux, et comblerait une lacune qui nous a souvent frappös au conrs de nos etudes.

Plusieurs de ces ouvrages publies en Franco ne sont que des (raductions de livres strangers, et ne repondent qu'imparfaitement aux bosoinsdu locteuriiancais; d'autre part, parmi les trop rares livres I'rancais, ipiel quo soil d'ailleurs lour merile, il nquot;en est pas mi qui jniissc etre regarde comme nn guide ebimen-taire, im manucl dc laboraloire, initiant I'eleve atix pratiques de la microbie, h sa technique, et ii ses applications a l'ötude des maladies microbiennes.

C'est ce guide elementaire et pratique quo

VInbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; PREFACE.

nous avons voulu faire, et que nous presen-lons au public medical et veterinaire.

Nous esperons aussi cpie les müdecins et vetörinaires qui voudraient acqucrir les notions aujourd'hui indispensables sur ces ma-tieres, sans s'astreindre a la longue pratique d'un laboratoire, trouveront dans notre Precis un expose sonimaire suliisant de ces notions.

Notre ouvrage se divise naturellement en deux parties : la premiere traite de la technique generale; la seconde est la technique appli-quöe, Tetudo specialo des diverses maladies microbiennes.

Un mot de chacune de ces parties, des tendances et du but de notre Precis dans chacune d'elles.

C'est on France qu'est nee la microbie, car c'est ä M. Pasteur qu'elle doit son existence: c'est eu France aussi qu'elle a trouve son expression la plus complete el la plus achevee dans les travaux de cet illustre savant et de ses eleves; les Annales de l'lnstitut Pasteur sont lo vivant tömoignage qu'aujourd'hui encore notre ecole tient bien haut le drapeau de cette science eminemment irancaise. Et cependant dans quels traites francais ou ctrangers la technique de l'ecole francaise se Irouve-t-ellc.indiquee ct expos(''C?

Que les ouvrages allemands passent sous silence les mcthodes francaises et n'exposent

PREFACE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;VII

que les procudes aUemands dont li. Koch ;i etc I'imtiateur, cola se concoil assez; mais que dans les livres francais la technique de l'ecolo de Pasteur soit pi*esque passee sous silence, ou consideree comnie n'ayant plus qu'un interet historique, ou enfin exposeo d'une faron incomplete ou derisoiic, cela ne peut s'expliquer.

La technique francaise esttoujours vivante, et bien vivante; eile fait partie integrante de la science microbique au meine titre que la technique plus recente de Koch.

Loin de nous la pensee de nier (pie cclle-ci ait fait faire un grand progres ä la microbie; mais enseigner la technique de Koch et eile seule, la presenter comme en tons points süffisante, c'est commettre une injustice, une inexactitude grave, c'est enfin n'enseigner sciemment qu'une partie de la verite. Les cultures en milieu liquide, pour prendre un exemple frappant, ont-elles nnhite de tomber en desuetude, et est-ce ä l'ecole de Koch que nous devons les procedes si essentials des cultures dans le vide que ses eleves sont si pen aptes ä pratiquer?

Eleves d'un maitre qui a garde precieusc-ment les traditions du laboratoire de I'EcoIg Normale, nous avons cherchu h allier dans co livre la technique francaise anx procedes aUemands, en elaguant de ceux-ci tout ce qu'ils

VIU

PREFACE.

contiennent trop souvent de grossier et d'im-parfait, en no gardant que ce qui ;i constilue uu veritable progrös; nous avons voulu faire en un mot dans ce 1'recis eo que nous faisons chaque jour uu laboratoire.

Nous csperons quainsi concuo et exposee, notre premifere partie trouvera un accueil favorable chez nos lecteurs.

La deuxieme partie, c'est-ä-dire Fetude spe-ciale de chaque maladiemicrobienne, se divise de la facon suivante :

Maladies communes a riiomme etauxani-maux;

Maladies speciales aux animaux:

Maladies speciales a riionune.

Le lecteur ne rencontrera dans cetle partie que de rares indications biWiographiques; il y trouvera, an contrairo. nous le croyons, tons les details uecessaires ä Tetude experimentale ot microbienne elemeutaire de ces maladies. Nous esperons qu'en suivant notre expose, en se conformant aux quelques indications pratiques qui y sont donnees, le lecteur pourra repeter facilement dans le laboratoire touts la serie dVxperieucos ot do manipulations qu'exige I'etude sommairc d'une maladie microbienne. el arrivora ä la counaissanco, ele-mentaire assuremont, mais nette et precise de la maladie qu'il choisira pour etude.

PREFACE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; I\

Nous ii'avons pusse en revue qu'un nonibre tres limittsect; ile maladies microbiennes; notre excuse est simple: ce precis n'est pas un cx[iose complet de la microbie, ct soules les maladies dont la preuve microbienne est absolument faite doiveut y trouver place; seules aussi doiveut s'y rencontrer celles qui peuveut etre etudiees i'ructueusement, et ä pen pros completemcut, dans le laboratoire, par I'eleve.

Aiusi s'expliquent les nombreuses lacunes de cette deuxieme partie, lacunes, an reste, souvent plus apparentes que reelles.

Chaque joar voit eclore la decouverte de microbes pathogenes plus ou moius fantai-sistes ou mal etudies sur lesquels le silence ne tarde pas ä se faire, et dont les lecteurs d'un ouvrage 61ementaire ne doivent avoir mil souci.

Les maladies microbiennes communes ä l'homme et aux animaux, et les maladies exclusivement veteriuaires occupent dans ce Precis un rang beaucoup plus large que les maladies microbiennes exclusivement hu-maines: cquot;est qu'en efl'et les premieres se pretent mieux et plus completement h Tetude de laboratoire que b^s secondes, la preuve experimentale on etant toujours possible; peut-etre aussi cette categoric de maladies microbiennes nous esl-ellc plus familiere,

Xnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;l'HEFACE.

ayant fait 1'objetde preference de nos etudes. Nous pensons d'ailleurs que le public medical ne nous saura pas mauvais gre d'avoir traite d'une facon plus detaillee ces maladies qu'il aura grand iiilenM, croyons-nous, äconnaitre, meme sommairement.

Uu mot encore qni s'applique a tout ce Precis : uous avons pvis comme regie absolue de ue parier quo de ce que uous avions pu etudier, repöter et contröler uous-memes. La oil force uous etait d'enoncer 1c dire des au-teurs sans avoir pu faire aucune experience de verification et de contröle, uous avons eu sein de prevenir le lecteur.

Ce Precis a etc concu et execute ii i'Ecole d'Alfort, dans le laboratoke de notre eher maitre M. lid. Nocard, sous ses yeux, et tout ce qu'il peut contenir de bon, nous le lui devons certainement.

Qu'il nous permette de le remercier, et de lui donner publiquement ce temoiguage de notre reconnaissance et de noire affection.

Notre editeur, M. G. Masson, a voulu faire de ce modeste Precispresqu'un livre deluxeoüles ligures en couleur ont, pour la premiere fois, dans un volume de ce prix et de ce format, nne large part. Ces figures, ainsi d'ailleurs que toutes celles que renferme notre Precis, ont etc dessinees sur nos preparations, ii Alfort, avec

PREFACE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; XI

le talent que le public medical et veterinaire apprecie depuis longtemps, par notre ami M, Nicolet. 11 n'esi quo juste de lui adresser id nos remerciments.

Alfort, mars 188'J.

TABLE DES MAXIERES

l'liKMIERK l'ARTll-:

CHAPITRE PREMIER

Pages.

A.nbsp; Historique sommaire : Pasteur et sos cloves.

li. Kncli.....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;1

B.nbsp; nbsp; Gencralucs sin- les microbes. 1. Lours formes, leur classification morphologique. 2. Structure des microbes. 3. .Mouvements des microbes. 4. Modes de reproduction des microbes. ,'gt;. Nutrition des microbes, les aerobics et los anaeroblcs. Leur diffusion dans la nature : microbes de l'air, de l'eau, du sol. Les microbes saprogeues, chromogencs ct patho-genes....................................... i

CHAPITRE DEUXIßME

A. Instruments do verrorio : Pipettes Pasteur. Matras Pasteur. Ballons. Ballons-pi-peites Ghamberland, Tubes a essai. Plaques de vcrre. Vases a serum. Appareils pour la culture des microbes anaorobies............ 19

15. Sterilisation de la verrerie : Four a flamber do Pasteur.................................... .31

XIV

TABI.K DES MAT IHK ES.

CHAPITRE 'IT.OlSlftME

Pages. Milieux de cii.tcre : leurs modes de preparation,

LEURS MODES DE STEiaLISATD)N. L'aVTOCLAVE. . . . 35

A.nbsp; nbsp;Jlilipux de culture lilt;[iudes : Lcs boiullons. Le lait. L'urine. L'humeur aqueuse. Le serum liquide. Liquide allantoidien et liquide de l'liydrocele........................ 3.'gt;

B.nbsp; nbsp;Milieux de culture solides : A. Milieux trans-parents : gelatine, gclose. B. Milieux demi-transparents : serum. C. milieux opaques : Pommes de terre, etc........................ 43

L'autoclave : son modo de fonctionnoment......... SU

CHAPITRE QLATRIHME

Experiences sen lf.s ammaux..................... 00

A.nbsp; nbsp;Dos inoculations. Matii'res d'inoculation. Procodes divers d'inoculation : inoculations sous-cutanees; inoculations intra-peritonoales; inoculations dans les veinos; inoculations dans la cliambre anterieurc de l'oeil; inoculations patios voies digestives ....................... Cl

B.nbsp; Hccoltc des produits pathologiques sur I'animal vivant...................................... OS

C.nbsp; Autopsie des sujets : nianiere do lixer les divers sujets; ouvorture des cadavres; recolto

des produits organiques (luunours ot tissus ... 69

D.nbsp; Conservation dos pieces pathologiques........ quot;(j

E.nbsp; Disinfection des cadavres.................... quot;S

CHAPITRE CINQIIEME

Technique genärale des cultures................. 79

A. Culture des microbes aerobics............... 79

I, Culture dans les milieux liquides : culture dans les bouillons, le lait etc............. 82

TADLE DES MATIERES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;XV

Pages.

11. Cultm'C dans les milieux solides transparents et demi-transparents : gelatine, s^loso, serum .................................... 'JO

ill. Culture sur milieux opaques : pommes de

tcrre.................................... 91

IV. Culture en plaque....................... 99

B. Culture des microbes anaerobies : culture dans les bouillons, lo lait, etc., sur gelatine, sur gelosc, sur pommes de terrc, en plaques...... 110

CHAPITRE SIXIEME

MATIERES COLOBANTES, RiACIlFS, XCIDES ET ESSENCES. 133

CHAPITRE SEPTIfiME. Examen uicroscopique des micro-oroanismes........ Ill

DEÜX1EME PARTIE

Introduction............................... ... 165

CHAPITRE PREMIER

Microbes non pathocenes........................ lquot;8

CHAPITRE DEÜXIEME

Maladies uicrobiennes communes a lho.mme et aux

animaux.......................................

is:,

I.nbsp; Cliarbnn bactoridien.....................nbsp; nbsp; nbsp;ISO

11.nbsp; Tuberculose____........................nbsp; nbsp; nbsp;198

III.nbsp; Tuberculose zooglceique..................nbsp; nbsp; nbsp;220

IV.nbsp; nbsp;Mono.................................nbsp; nbsp; nbsp;221

XVInbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;TA15LE DES MAT1EUES.

Pages.

V.nbsp; Scpticemic de Pasteur...................nbsp; nbsp; 238

VI.nbsp; Actinomycose...........................nbsp; nbsp; 345

VII.nbsp; Micro-orgaaismes de la suppuration.......nbsp; nbsp; 351

GHAPITRE TliOISIKME

Maladies microbiensbs sigt;eciai.es ai:x animaux.....nbsp; nbsp; 357

I. Cbarbon bactei-ieu......................nbsp; nbsp; 257

11. Cliolera des poules....................nbsp; nbsp; 3G7

III.nbsp; Cholera du pore........................nbsp; nbsp; 278

IV.nbsp; Rouget du pore.......................nbsp; nbsp; 285

Du diagnostic microbiologique du rouget du pore,

du cholera du pore, et de la posto porcine......nbsp; nbsp; 3!)2

V. Farcin du boeuf........................nbsp; nbsp; 29i

VI.nbsp; Mammito contagieuse des vaches laitieres.nbsp; nbsp; 300 VII. Jlammite gangreneuse des brobis laitieres.nbsp; nbsp; 310

VIII.nbsp; Septicemic spoatanee du lapin (Inidit)...nbsp; nbsp; 31!) IX. Deux maladies inicrohiennes e\perimon-

tales :

A.nbsp;Septieeiuie expörimentale dos souris de R. Koch.nbsp; nbsp; 334

B.nbsp; Microeoccus totragenus......................nbsp; nbsp; 338

CHAPlTRE QUATRIEME

Maladies micdobiennIbs speciai.es a l'hom.me........nbsp; nbsp; 343

I. Cholera asiatique........................nbsp; nbsp; 343

II. Ficvro typhoide..........................nbsp; nbsp; 350

III.nbsp; Lcpre...quot;.............................nbsp; nbsp; 308

IV.nbsp; Pnoumonie Bbriaeuse....................nbsp; nbsp; 373

V.nbsp; Diphtorie...............................nbsp; nbsp; 380

Table alphabetique des matieres. ..............nbsp; nbsp; 305

Table dos figures.............................nbsp; nbsp; 405

i'.\

PRECIS

DE MIGROBIE

PREMIERE PARTIE

CHAPITRE

PREMIER

A. iliRToiunur: sommaire : Pasteur et ?es ('U-vos. U. Koch.

li. G^NfiiiALiTEs st:u les siiCROiiEs. 1. Lüui's formeraquo;, leur classification morpholo^ique. 2. Structure des microbes. :i. .Mouvo-incnts des microln's. 4. Modes de reproduction des microbes. ri. Nutrition ties microbes, les aerobics et les anaerobies. Leur JilVusiou dans la nature : microbes do l'air, de l'eau, du sol. Les microbes saprogcncs, cbromogcnes el patliogenes.

A. HISTORIQUE SOMMAIRE.

Pasteur et ses felfeves. R. Koch.

laquo; Celui qni comprendra entiferement la nature des ferments el des fermentations sera probable-ment, bien plus quo celui qui I'ignore, on mesure do rendre compte d'une nianierc satisfaisante des divers phi-nomenos prescnles par plusieurs mala-

I'R. DE MICBOBIE.

2nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; HISTORIQUE SOMMAIRE.

tlios (los tlevres aussi bien que les antres), jiheno-menes qui ne seront probablement Jamals bien compris saus uno connaissauce intime Je la doc-trine des fermentations raquo;, ecrivait le savant phvsi-cien anglais R. Boyle, ä une epoque dejä bien eloi-ga6e de nous (svn⁰ siecle). Cette prophötie de li. Boyle, il iHait reserve a M. Pasteur de la realiser. Avant lui, on trouve eparsescäet ladans la science, ä la fin ilu wiiiquot; siecle et, au commencement du six⁰, quelques experiences qui souloverenl un peu le voile obscur qui couvrait tous ces ph^nomenes mysterieux de la vie des inliniment pelits : telles sout les experiences de Spallanzani (1763), de Gay-Lussac(1810), de Franz Schulze (1836). Cagniard Latour et Schwann (I8:i7i avaient meme reconnu la nature animee de la levüre qui produit la fermentation alcoolique, mais la doctrine de la genc-ralion spontunce et la doctrine de Liebig (1830), qui voulait que la presence d'une inatiere animale ou vögetale en putrefaction l'i'it la condition necessaire de ioute fermentation, rögnaieut sans rivales dans la science. M. Pasteur par des experiences desor-mais historiques renversa toutes ces Iheories. 11 montra, d'une part, que la generation spontanee n'etait qu'unc liction, resullaiit d'expöriences inexacles; de I'autre, que les fermentations sont fonetion de In vie d'ätrcs microscopiques auxquels il donna le nom de ferments. 11 suffll de rappeler la serie de ses beaux travaux sur les fermentalions alcoolique, butyrique, acilique, sur la bierc, sur les maladies du vin pour montrerle pas immense lt;iiie la science, crece tout entiere par lui, l'aisait en quelques anuees.

(Je u'est pas tout encore ; le role des inliuinieut pelits dans la genese des maladies, ce röle que H. lioyle avail entrevu, M. Pasteur le demonlrait bientöt dans ses Etudes sur la Maladie des vors ä

H1ST0RIQUE SOMMA1RE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;3

soio : la pifbrine, la maladie des corpuscuks ouvrait cellc s6rie qui chaque jour s'accroil de quelque nouvullo döcouverte.

En 1851, deux savants francais^ Rayeret Davaine, dücouvraient duns 1c sang des aniraaux morts du sang de rate, de petites baguettes immobiles, aux-((ueiles ils no paraissaieut pas d'ailleurs attacher a cette f'poque uno importance quelconque. La publication du niemoire de M. Pasteur sur le fcr-ment butyrique eclaira Davaine ; il pensa i[iie ces baguettes,qu'il avait.eiitrevucs en 18öl avecRayer, etaientlacausedu Charoon, et sesderniürcsannßes furent consaeröes a la dömonstration de cc fait, a la ndutation patiente et ingenieuse de toutes les critiques que rencontrasa decouverte. Le Gharbon f'si dime incontestablement la premiere maladie des animaux pour laquelle la demonstration de la nature microbienne ait ele faite.

Quelques points,cependant,6taient res tdsobscurs dans l'iHiologie du Charbön, et Davaine etait im-puissaut a les edaircir. ]_Ja decouverte de la spore charbonneuse par un savant allemand, li. Koch, dont le nom devait dans la suite acquerh- une si haute illustration, leva tons les doutes et dissipa tonlos les obscurites.

Cependant M. Pasteur continuait la sörie de scs decouvertes, et,so donnant tout entier a la recherche du röle des microbes dans la genese des maladies, publiait successivement avec scs eleves Joubert, Chamberland, Roux, Tbuillier, scs eludes sur le Gharbon, le Cholera des Poules, le Vibrion Sep-tique, le Rougetdu Pore, la Rage; en memo temps il dotait la science microbiologique de sos me-thodes si precises de culture dans les milieux liquides, soit en presence, soit a l'abri de Fair: en-fiu. mettan't lesceau a tons ces admirables travaux, il nous donnail les vaccins du Gharbon, du Cholera

4nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; GENERALlTfiS SUR LES MICROBES.

des PüuIcs, du Rouget, etc., en dernier lieu de la Rage, vaccin dont il faisait I'application a Thomme Ini-nn'me. En Ällemagne R. Koch poursuivaut ses travanx creaitla metlioile des culluressur milieux solides, decouvrait le bacille du Ciudeni asiatique, celui de la Tuberculose, et sc placait ainsi sans conlesle a la tete des microbiologistes allemauds.

B. GENERALITES SUR LES MICROBES.

I. Lews formes; leur classification morphologique. Les microbes (1) se presentent sous des formes Ires variees qui dependent non seulement de l'espece ä laquelle ils appartiennent, mais aussi des habitats de toute nature dans lesijuels ils evoluent. Leur aspect exterieur ne sul'lil, pas a dis-tinguer sdrement les ospecos les unes des autres; il nc pent donner qu'une iprdsomption; la certitude ne resulte que de la concordance parfaite des ren-scignements tires de la morphologie, de la reaction aux matieres eolorantes, des cultures et des inoculations experimentales. line Faul done, atta-cher a la forme des microbes qu'une importance relative. 11 serait cepondant tres intöressant de connaitrcles aspects differcnts que pent revfitirun microbe au cours de son evolution; mais cetto etude est a peine (liauchee, sauf pour un petit nombre d'especes hien connues aujourd'hui.

Nous prendrons pour exemple la baetöridie cliar-bonneuse. Les travaux de Koch et de Pasteur out rnonlro qu'elle accomplil son evolution complete en passant par deux formes speciales : la forme sporulairo on initiale, puis la forme bacillaire ou

t. Microbe, baeterie, -out des mots synonymes; microbe est lo mot fran^ais, baeterie le root Etllemand; nous emploierons done le pre-mierde pröf^rence.

FORMES DES MICROBES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; a

adulte; nous savons do inöme quo dans les cultures liquides olle ovolue en prenant un aspect particu-lier, une forme inlonnediaire, la forme filamen-touse.

Quelles que soient cepondant la multiplicite et la variability de formes sous lesquelles so presen-tent los microorganismes, ils peuvent toujours ötro ramenes a deux types extrömes, 1c type rond et le typo droit; auxquels nous ajouterons un type intermediaire, lo typo spirale.

A rexi'inple do Hueppo, nous divisorons done los microbes en Irois groupes, comprenant: le premier, les microbes a forme arrondie; le deuxieme, les microbes ä forme allongee; le troisiömc, los microbes ä forme spiraloe.

1quot; Microbes ä forme arrondie. Lo contour dos bacteries faisant parlio do cotte premiere catogorio cst generalemont rond; quelquefois cepondant il ost ovale. Los microbes qui aflfectent cette forme pari iculiere sent connus sous lo nom do laquo; Coccus raquo;.

La plupart des Coccus, a cause do lour extreme tenuite, sont qualiliös do laquo; MicrococcMS raquo; par opposition ä ceuxqui sont d'un volume supöriour et que Ton dosignc sous le nom do laquo; Macrococcus raquo;.

Les micrococcus recoivont suivant lours ditfe-rents modes do groupoment dos noms spöciaux.

S'ils sont ranges sans aucun ordre visible on lour donne simplomcnt le nom de Micrococcus. Example : Micrococcus prodigiosus.

S'ils sonl reunis par deux, on les appollo lt;gt; Diplo-coccus raquo;.

licunis par quatre, ils pronnent le nom do Micrococcus laquo; en telrades raquo;. Exemple : Micrococcus Tetra-genus. Dans certains cas, los Utrades peuvent so juxtaposer, il en räsulto alors une sorlo de masse cubique qualitiee de laquo; Sarcine. raquo; Exemple : Sarcina lutca.

#9632;

6nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; GfiNERALITES SUU LI£S MICROBES.

La reunion im'gulierc de plusieurs micrococcus cst connue sous 1c nom de laquo; Zooglees raquo;. Celles-ci, ii contours irr6guliers,plus ou moins etendues, pcu-vent quelquefois etre entouvees d'uno membrane d'enveloppe ; elles prennent alors le nom laquo; d'Asco-coccus gt;. Iixeiii|)le : Ascococcus Billrothii.

Los micrococcus peuvent so trouver places los uns au bout lt;!('gt; autres. 11 en resulte un veritable cha-pclet, ordlnairement sinueux, plus ou moins ionji, quelquefois si long qu'il donne liou a des enche-vedcments inextricables : on donne ä ces micro-coques ainsi disposes le nom de laquo; Streptococcus raquo;, ou celui de laquo; Torula raquo;. Exemple : Streptococcus de la mammite contagieuse des vaches luiliives.

Enfln les micrococcus peuvent etrc groupes les uns prfes des aulres de maniere ä simuler une grappe de raisin, dont chaque grain serait repre-scnle par un micrococcus. Dans ce cas, on les nommo lt;lt; Slapliijtovoceus raquo;. Exemple : Staphylococcus pyogenes aureus.

2quot; Microbes ä forme allongie. Les microbes rentrant dans eette deuxieme categoric prennent la forme J'un baton, droil lorsqu'ils sont courts, sinueua; lorsqu'ils sont longs : les premiers portent 1c nom de laquo; bacilles raquo;; les seconds celui de lt; h:igt;to-thrix raquo;. Exemples : Bacillus subtilis; Leptothrix hnc-calis.

Le leptothrix est le plus generalement ondule : il decril alors des courbes capricieuses et d'une röguluiite veritablementgöomelrique. Dans quel-ques cas, les leptothrix sont si longs, qu'en sere-pliant un grand nombre de I'ois sur eux-memes, iis ferment des amas considerables rappelant les echeveaux de 111 de Bretagne : teile esl l'apparence que prend la bacteridie charbonneuse dans les cultures.

On donne le nom de laquo; Cladothrix raquo; aux microbes

FORMES DES MICROBES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 7

ayant la forme droite, allongöe, mais dunL les articles sc ramilient en faussc dichotomisation : lei ost le microbe du farcin du boeuf.

1-cs bacilles, nettement lirnites par un profit rectiligne sont dits laquo; droits raquo;. lis sent dils laquo; en fuseau raquo; hirsque leur partie centrale ost plus on nioins renllee.

Certains bacilles, gonoralcnicnt courls, presen-(cnt dans leur milieu un point trös refringent qul u'a aucune affinite pour los matiöres colorantes, qul no se colore pas, tandis qu'au contraire los oxlremitös du bacille se colorent fortement, A cette forme spociale nous donnons le nnm do laquo; hn-cilles äespace dab- raquo;; qualification qui depeint bicn clairement dans le langagc le caractere typique de cos microbes. Exemplc : Bucillcs ä espace clair de untre Septicimie du lupin, bacilles u espace clair du Cholamp;a des poules.

Quelques bacilles prösentent un rcnflement brusque, nettement arrondi, a une de lours oxlro-mites.Tols son ties bacilles (pie Nicolaier a obsorvos dans le Titanos.

D'aulres affectentla forme d'une poire allongec : co sonl des laquo; bacilles en bultant de cloche raquo;. Exemple : Itacilles du charbon symptomatique.

3deg; Microbe* a forme spiralde. Dans cette calc-gorie, on range les agents qui prennent la forme dun arc de cercle on d'une spire. On les connait. sous los noms de laquo; bacilles-virgules, homma-bacilles, spirilles raquo;.

Dans certains cas, et vusau microscope, cos microbes peuvent paraltre droits, bien quo reelle-ment ils soient incurves. Co fait est du simplement a co ([u'ils se presenlont dans le champ raicrosco-pique suivant un plan perpendiculaire h leur rayon de courbure.

GENERAUTES sub les microbes.

CLASSIFICATION MORPHOLOOIQDE IIE3 MICROBES.

I Micrococcus. [ Diplococcus. I Micrococcus en Tötrades.

1deg; Forme arrondie...'

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; en Sarcincs.

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; on Zooglees. Ascococcus. Staphrlococcus. Streptococcus ou Torula. Bacilles droits.

jl ospalt;:e clair. i en fuseau. 2quot; forme¹ allongde.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; en Lantcrne.

I en battant de cloche. f Leptothrix. (lladothrix. / Bacilles Virgule. 3laquo; Forme spiraler... #9632; Komma bacilles. f Spirilles.

2. Structure des microbes. Les microbes adultes smit formes d'une cellule, protegee ä la peripherie par unc membrane d'enveloppe : la premiere con-tient un veritable protoplasma incolorc, refriu-gent, quelquefois granuleux, forme d'une substance albuminoide u laquelle Nencki a donne le nom do mvcopi'oteine; la soconde rösulte fort pi-obablement de la condensation des couches peripheriques du protoplasma de la cellule. Elle apparalt an microscope sous forme d'une ligne fine, legereinent grisdtre, formant aussi un con-traste frappant avec le protoplasma interieur qui apparalt nettement refringenl. Mais, pour la plu-part des microbes, cotte distinction no pent elre etaldie que si on les examine sans coloration. Leur afflnitd pour les derives basiques colorants d'aniline cst en elTet si grande et la puissance tinc-toriale de ces coulcurs est si prononcoe, que Ton ne pent plus distinguer l'enveloppe de la cellule surles microbes colores. Pour quelques-uns cepen-

STRUCTURE DES MICROBES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;9

tlant, cetle distinction esl possible, si on a soin d'employer pour les colorer des procedös speciaux. Cost ainsi quo dans les preparations colorees de pneumococcus, on voit parfaitement sur certains d'entre eux la membrane d'enveloppe ou capsule faiblement coloree, tandis qu'au contraire le con-tonude la cellule esl tres fortement teinte.

Les cellules ne contiennent janiais de noyaux. Cost lä un caractfere d'une grande importance ct qui les distingue nettement de la plupart des cellules organiques.

Elles ne contiennent nun plus janiais de chlo-rophylle : ce n'est qua de tres rares exceptions pres qu'on rencontre dans leur Interieur cetle substance verte, si commune dans les cellules ve-ge tales.

Le protoplasmaqui les forme esl d'une grande resistance a tel point qu'il resiste ä l'action dis-solvante des bases et des acides qui attaquent les cellules animates.

L'iode colore le protoplasma en jaunc : reaction cliimique qui nous montre quo le contenu cellu-laire ne renferme pas d'amidon.

3. Mouvemenl des microbes. Parmi les microbes los uns sont immobiles, tandis quo les autressont susceptibles do se mouvoir quelque pou dans les dillereuts milieux: liquides qui les contiennent.

Pour se rendro un compte exact de cos mouvc-ments, il Importe d'abord do no pas confondre le mouvenient brownien qui les agite tous, a la facon d'une poussiere quelconque, d'une molecule inor-ganique, avec le mouvemenl propre, permettant aux agents qui en sont doues de so deplacer ä lour guise dans le milieu qu'ils habitent et quelquefois nieme do resistor dans line cortaine mesure au mouvement moleculaire.

II est done necessaire de distinguer cos deux

GENfiRALITES SCR LES MICROBES.

niouvemcnts qui different essentiellement L'un do I'autre : c'est la d'ailleurs une ('#9632;liulo trfes simple ä faire.

Pour bien observer le mouvement brownien ou moleculaire, il suffit d'examiner au microscope (Verick : oculairc I, objectii'-l-, une goutte do sang charbonneux, sans coloration, i.a misc au point une I'ois faite, on verra les globules sanguins, empiles les uns sur les autres a la facon de piles Je inonuaies, former de veritables ilots plus ou moins considerables et nager dans un liquide qui n'est autre chose que le serum du sang; mais on remarquera bien que la direction du mouvement de ces globules so fait dans le meine sens que celui du serum lui-meme : ce fait indique done bien quo ces globules sont simplement mtraines dansle courant du serum, tout comme une barque abaudoimee, n'ayant par elle-meme aucun mouvement inlrinseque, est entrainee par le courant de 1'eau qui la Supporte. De meme, entre ces ilots, formes par i'agglomeration des globules sanguins, on verra les bacleridies^'epresentöespardes baton-nets courts, droits, r6fringents, opposes souvent deux a deux par un de leurs poles, suivre exacte-ment la memo marcho quo les globules : ellcs sont, elles aussi, entraiuees dans le courant du serum. Si Ton attend que le serum soil empii-sonne dans la coagulation poripheriquo du sang contenu sous la lamelle, on verra alors le courant, si rapide auparavant, se ralentir de plus en plus et flnir par cesser complfetemcnt : a ce moment les ilots globulaires sont immobiles ainsi (jue les bacteridies, quo Ton voit alors entasseos les unes sur les autres pres des bords des ilots.

Examinons mainlenant, et de la meme facon que nous venous de le faire, c'est-ä-dirc sans coloration et a un petit grossisscment, une goutte de

MOUVEMENT DES MICROBES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;11

sang provenant d'un sujet mort do la scpticomie dp Pasteur, depuis qucl([ucs heures drja.

Nous verrons les globules sanguins enlraines dans le courant du serum; puis do longs filaments refringouts, ondules, mais dont les courbes-d'on-dulation varient ä chaque instant.

Aussilut que le courant du serum aura cesse. nous verrons ees longs filaments, qui ne sont aulro chose que des vilirions septiques, se niou-voir au milieu des globules immobiles a la ma-niere des serpents: tout en ecartant les globules sanguins pour se livrer passage, ils decrivent soit un grand cercle, at prennent dans ce cas la forme d'un arc, seit des lignes sinueuses: ils sont alors ondules.

Les mouvements amiboides de certains microbes semblent dus a des oils, a de veritables fla-gellums qui seraient constitues par des prolonge-ments liliformes du protoplasma cellulaire ou do la membrane d'enveloppe. Ces mouvements sont variables suivant les espeees que Ton examine.

Certains microbes, notamment ceux qui se rat-lachent au genre leptothrix, decrivent do veritables courbes geomelriques, qui s'opposent sou-vent les unes aux autres et produisent ainsi I'effet d'unc veritable reptation. Au eontraire, d'autres, et ce sont les plus nombreux, semblent s'agiter autour d'un axe central et donnent ainsi lieu ä des oscillations variees : ce mode de deplacement restroint se rencontre surtout chez les microbes affectant la forme bacillaire.

Ces mouvements, quels qu'ils soient d'ailleurs, ne peuvent avoir lieu qu'a certaines conditions ambiantes indispensables. Pour qu'il on soit ainsi, il faut que les microbes so trouvent places dans un milieu liquide, expose a une temperature voi-sine de celle du corps (37deg;).

12nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;GEISEtUUTES SUR LES MICROBES.

Les mouvements seront d'autant plus accentues quo lo milieu sera tnoins visqueux ; c'osl pourquoi I'agitation cesse au bout d'un certairi temps sur les preparations non lutees dans losquclles, par suite de revaporiraquo;tion, la partie liquide flnit par disparaltre. Cette condition de milieu nous parait plus indispensable que celle de tompöraturo; ce-pendant, lorsqu'on aura a faire un pareil examen, il sera bon de se servir d'un microscope a platine chauffante.

4. Modes ile reproduction rfe.lt; microbes. Sur ce point, la microbiologie est encore peu avancee; aussi traiterons-nous cette question le plus simple-meat possible.

Jusqu'ici on pent dire que les microbes se repro-duisent suivant deux modes distincts , les uns par scissiparite, les autres par sporulation; ou, suivant la termiaologie de de Ban-, la reproduction se fait par arthrosporulation pour les premiers, et par endosporulation pour les seconds.

La reproduction par scissiparite parait otre le mode exclusif quo Fon observe cbez les germes affectaat la forme do coccus, tandis que la sporulation fait partie du cycle des microbes filiformos, c'est-ii-dire de ceux classes dans la forme allongec : bacilles, leptothrfx, etc.

La reproduction par scissiparile s'effectue do la facon suivante : le micrococcus de rond qu'il etait pi-end uno forme ovale, sa partie moyenne se re-trecit et finalement donne naissance par segmentation ä deux cellules lilies qui no tardent pas ä prondre la forme arrondie de la cellule-mere. Si le micrococcus primitif est isole des autres il donne ainsi naissance ä un diplococcus; si au coutraire plusicurs micrococcus sont les uns pres des autres, il en resulte vine zoogice.

Si la scissiparite se fait dans une scule direction

MODES DE REPRODUCTION.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 13

rectiligne, les cellules fillos se trouvent les unes au boul, des autros et forment ainsi un veritable cliapelet design^, nous l'avons dejä ilit, sous 1c nora de streptococcus ou de torula.

Si la scissiparitö s'effectue suivant deux directions distinctes, perpendiculaires I'uue a I'autre, il on resulte une disposition dos cellules fillos en tötrados.

Si la segmentation s'effectue en plusieurs sens differonts, ct sans aucun Systeme göometriqne ((uolconrpie, cllo donne naissanco a line reuiüon diffuse do cellules lilies, coiinuo sous lo nom de staphylococcus.

Mais il taut J)icn remarqucr quo chacun de ces differents modes do reproduction par scgmonla-tion est loujours le mümo pour une espece donnee; cquot;est ainsi qu'un streptococcus donnera loujours naissanco ä dos streptococcus; qu'un germo on tetrades reproduira loujours des tetrados qui, par leur agglomeration, simulorontparfoisunezooglöe; mais, avec un peu d'attontion, il sera facile do voir que cctto laquo; I'ausse zooglro raquo; ost constitute par I'union do plusieurs tetrades.

La reproduction par sporulation ost un mode de generation plus 61cvc ([ue le precedent et sem-ble ainsi appartenir a des ospecos plus complexes que cellos qui se multiplient par simple scissi-paritö. Los germos de forme bacillaire presontent souls ce pliönomeiie do reproduction.

Dans ce cas, il se forme a certains points do la longueur du bacille, do veritablos condensations protoplasmiquos qui devionuont d'aspect do plus en plus refringent; cos points refringonts s'ar-rondissent, landis que le protoplasma qui les en-globo finit par disparaltre par resorption.

Ces petits points r^fringeutsconnus sous le nom do spores, ou de corpuscules-gcrmes (Pasteur),

GE.NEHAL1TES SÜR LES MICROBES.

sont ainsi mis en liliorte. La spore possede line envelop[ie cxtreniemcnt resistanto qui lui permet do resistor aux causes naturelles de destruction et d'altcndrc les conditions de milieu et de temperature propices ;i sa fructification.

Tandis quo les bacilles meurent aussitöt que le milieu oil ils se trouvent no contient plus les elements ueccssaires ä leur vitalite, les spores au contraire vivent pour mnsi dire ä Fetat latent. Elles sont en tout point comparables ä la graine des planlos que Tun peut conserver indeliniment et qui u'attend pour donner naissance a la plante adulte que d'etre placee dans un milieu lavoiable a son developpement.

Tandis que la hacleridie fllamenteuse cst de-truite a une temperature inlerieure ä üöquot;, la spore charbonneuse resiste a I'eau bouillante, a nioins quo cette action ue soit prolongee pendant deux lieures. Dessdchees, les spores charbonneusespcu-ventresistermomontanementäl30⁰(l¹astourol.loLi-bert), tempörature elevee ä laquelle aucune forme adulte ue ser'ait susceptible de conserver la vie.

La resistance Jos spores h I'etat latent est done considerable; mais lorsqu'elles sont en formation on en fructilicaliou surtout, elles sont bien moins resistantes, quelquefois meme moins resistautes quo le liacille adulte lui-meme : se qui se comprend facilement. L'enveloppe de la spore, en ell'et, au moment de la fructification, devient do moins en moins resistanfe, prcsque gelatineuse, afin deper-mettre 1'allongemeiU'du jeune bacille auquel eile va donner naissance : on conceit aisement qu'ä ce slade de developpement, la spore ait une resistance moins grande que celle du bacille adulte lui-meme.

Outre I'etat sporulaire et I'etat adulte, il existe line grande variete di^ formes bizarres connues

MÜDES DE REPRODUCTION.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; lö

sous le nom elf formes laquo; involutives raquo;. Ou n'est pas bien lixe sur la cause et la signification des formes involutives; on les considere genöralc-ment comme l'expression dquot;iin trouble dans la nutrition ou revolution du microbe; nous n'y. insisterons pas pour le moment.

.^:i. Nutrition des microbes; les aamp;rohies, les uwic-robies. Leur diffusion duns la nature : microbes dc /'(/(gt;, rfe l'ean, du sol.

Les microbes saprogines, ckromogines etpathogenes. Los microbes, comme tons les vegetaux pri-ves de chlorophylle, ne possedent point le pou-voirqu'ont les cellules chlorophylliennes de puiser directement dans I'air ou dans le sol les elements nutritifs.

Ainsi quo les animaux et les champignons, il leur faul pour vivre et sc developper des mate-riaux organiques tout prepares, des combinaisons bvdrocarbouees et azotees. 11s trouvent ces inate-riaux dans les humeurs ou les tissus sur lesquels ils vivent en parasites; ou bien, en dehors do I'or-gauisrae animal vivant, ils les puisent dans les produits morts d'origine animale ou vegelale.

Ce qui est remarquable, e'est I'avidite qu'ils out pour I'oxygfene.

Ils s'emparent de ce gaz do deux facons diffe-renles: les uns le prennent directement dans Fair, les autres l'empruntent ä certains milieux organiques ou vegetaux, en les decoinposant, donnant ainsi naissance a des combinaisons ehimiques speciales, degageant toujoursune certaine quantite d'acide carbonique.

On appelle laquo; w'rohies raquo; les microbes qui vivent en presence de l'air, et laquo; mairobies raquo;, ceux ([ui se multiplient dans des milieux divers, prives d'air.

Quelques microbes sont susceptibles de vivre des deux facons que nous venous d'indiquer : ce

GENfiRALITfiS SL'R I.ES MICROBES.

#9632; I

sont les (i aamp;ro-anairohies raquo;. Ils vivent done aussi l)ion en presence de Fair que sans air. On leur donne encore 1c nom laquo; iVairohics facultatifs gt;#9632; par opposition anx laquo; aerolites stricts raquo; qui ne peuvent sc multiplier qu'en presence de 1'oxygeno libre.

C'est en ehidiant les fermentations quo M. Pasteur a decouvert que certains; germes pouvaient. vivre sans air, tandis que d'autres ne pouvaient se multiplier qu'en presence de l'air.

Nous ne pouvons faire ici une elude complete du role dos microbes dans la fermentation, pas plus que des reactions chimiques auxquolles ils donnent naissance; mais nous etions obliges d'en parlor quelque peu dans Ic but pratique de faire comprendre au lecteur ce qu'en cntendait par microbe aerobie slrict, aerobic facultatif ou anaerobic. Ce sont des expressions qualiflcatives qui demandaient ä etre expliquees au debut de cet ouvrage, car nous les emploierons souvent on trai-tant de l'histoire des microbes en particulier.

On appelle microbes saprogenes ceux qui, en provoquant des putrelactions variables, degagent en meine temps une odeur speciale, presque tou-jours (li''sagreable.

On nomme microbes chromogenes, ceux qui, en se devcloppant sur les milieux de culture arti-liciels, produisent une culture coloree en brun, en rouge, en jaune, etc.

Enfin, on nomme microbes pathogenes ceux qui vivent en parasites dans I'economie de rhomme ou des animaux et y doteiminenl des lesions diverses, generalomcnt tres graves, qui ne tardenl, pas äamener la mort rapide des sujetsinfectes.

Ce sont surtoutces bacterics pathogenes qui nous intcrcssent au plus haul point, et c'est a cause d'elles que la microbiologie a pris une place si importante dans les etudes medicales.

MODES DE REPRODUCTION.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;17

Los microbes patliogenes donnent lieu a des maladies de forme pyeraique ou de forme septique. Unebacterie donneepeut, suivant 1'espfece animale dans laquelle clle se multiplie, provoquer une maladie pyemique ou unc septicemie. Cost ainsi que le microbe du cbolera dos poules tue rapide-ment les oiseaux par septicemie, sans que jamais on trouvo truce de pus ä l'autopsie, landis qu'au contraire il produit chez le cobaye une affection bc'iiigne, se traduisant par la formation d'un abces clos au point d'inoculation.

Les microorganismes patliogenes agissent sur rorganisme do I'liomme ou surcolui dos animaux, non seulemont par les troubles fonctionnols qu'ils y provoquent, mais aussi par les diitritics qu'ils y laissent. Ces detritus, veritables prod nits de dechet des microbes sont des substances solubles, toxiques, produisant dos effets aussi terribles que ceux des poisons les plus violents : ils sont conuus sous le nom de ptomaines. Mais jusqu'ici lour etude chimi-que ost tres imparfaite. Quelques-uns d'entre eux sont tellement toxiques, que les sujets meuronten quelquesheures,et qu'ä l'autopsie on ost etonne de la petite quantite do microbes quo Ton rencontre dans les iissus.

Les microbes qui pnraissent produire les ptomaines les plus toxiques sont ceux qui donnent lieu aux sopticemios. Dans cos maladies, en efl'et, les sujets atteints mouront avoc une rapiditö sur-prenante; quelquefois on constate memo des cas toudroyants.

La plupart dos microbes palbogonos no sont pas chroinogönes, e'est-a-diro quo, cultivds sur certains milieux solides, opaques ou transparents, leur culture reste blanche, mais no prend jamais de teintc speciale jaune, rouge, verte, etc. II est quelquos exceptions pourtant, dont la plus romarquable ost la

GENERALITES SÜR LES MICROBES.

cullurc dubacilledelamorvesurlapommedeterre.

Les microorganismes sont repandus en grand nomine snrfout cequi nous euvironne : on en ren-contre dans I'air, clans les eaux de toutes natures, snr le sol et meme dans la profondeur de la terra.

L'air contient notamment un grand nombre de microbes cbromogenes ot ce n'ost, nous le pensons du moins, quo tres exceptionnellement (ju'ou y observe des germes pathogenes. Cost qu'en effet les microbes, comme d'ailleurs toutes les granulations, memo les plus tenuos, subissent laclion de la pesanteur tout comme les autres corps, de sorte qu'ils tendent toujours a se deposcr sur la surface du sol. En un mot laii- ne leur seil quo de vehicule.

11 laut d'ailleurs ne pas oublierque cos microbes palhogencs emanent des döbris ou des excreta des animaux infectes; or, ces matieres sont plus ou moins humides et retiennent ainsi les microbes emprisonnes comme dans une sorte de bouiilie, de sorte quo la contagion volatile ne so pout faire qu'ä la condition que ces matieres soient d'abord dessochees, pnis reduites en une poussiere assez fine pour pouvoir etre diil'usee dans l'atmosphöre par les courants d'air ou les coups de vent.

A ce point de vue, on pent considecer Teau commo le veliicule le plus ordinaire des microbes palliogeues. L'histoire de la lievre typhoide et du cholera on esl un oxoinple frappant. Un pent done dans certaines circonstances y rencontrcr lies germes virulents. Los eaux de source scules pas-sent pour' etre pures de tout gerrue vivant.

11 existe a, la surface du sol une grande variete de germes zymogenes, cbromogenes ctpalliogenes.

L'interieur du sol en renferme aussi un grand nombre; mais nous no pouvons insister sur tous ces details : ce serait sorlir du cadre que nous nous sonimes trace.

CI1APITRE II

, IsSTRnlENTS HE VERHER1E : PipcttOS PftStOUr. --- Mutl'it^ PastCUl'.

nbsp; Ballons. Ballons-pipettes Cliumlierluiui. Tubes ;\ cssai.

nbsp; nbsp;Plaques tin verpe. Vases ä laquo;örutn. Appareils pour la culture dos microbes anaerobies.

!. STtaiLiSATiON ue la vEimEniE : Four ü Ilamber tie Pasteur.

A. INSTRUMENTS DE VERRERIE

Nous nc mcnlionnerons dans cct article que les instruments d'un usage courant et general. Xous rejetons absolument une fonle d'appareils d'uno utilitö ou contestable on trop restreinte, qui ne servent qu'ä encombrer les laboratoires et ä sur-charger les descriptions techniques.

Xous omettons, pour I'instant aussi, certains appareils dontilsera parle plus ntilement ailleurs, par exemplc aux articles : milieux de culture, technique den matures.

Xous allons decrire successivement :

I.nbsp; La pipette Pasteur.

II.nbsp; Les matras Pasteur.

III.nbsp; Les balbns.

20nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; INSTRUMENTS DE VERRERIE.

IV.nbsp; Les ballons-pipettes Chamberland.

V.nbsp; Lcs lubes a cssu't.

VI.nbsp; nbsp; Lcs phvitii's Jc verve pour cultures en plaques.

VII.nbsp; Les vases ä serum.

VIII.nbsp; Les appareils pour la culture des microbes anaerohies.

D'une facon geiK'rale tons cos appareils doivent etre prepares a I'avance, laves, sterilises, ot conserves dans lo laboratoire, en attendant cpi'il en soil fait usage, a l'abri de la poussiere.

I. Pipettes Pasteur.

La fifirnre ci-contre (flg. I) donne la representation do oe petit instrument, qui est d'un usage journalier dans la pratique de la bacteriologie. La preparation des pipettes Pasteur est d'une exlreme simplicity; un court apprentissage donnera I'habi-lote manuelle necossaire.

Prenez un tube de verre dc cinrj h. six millimetres de diametrc, d'epaisseur moyenne, long de I^m, 20 centimetres environ ; essuyez-en soigneusoment la surface; coupcz-le par des traits do lime enquatre fragments dc treiite centimetres environ ; vous aurez ainsi quatre pctits tubes droits. I'renoz un do cos tubes, chauffez-le ä la flamme du chalumeau ä gaz ä sa partie moyenne en lui imprimant enlre los doigts un mouvement de rotation rapide : quand lo verre cntre on fusion oeartoz de la flamme etetirez lentement de facon ä obtenir unc longue eflilure ; separoz alors la partie effiloe on son milieu. Vous aurez ainsi deux pipotles ter-minees par uno extrßmitö capillaire que vous scellerez immediatement a la flamme.

PIPETTES PASTEL'li.

Bordez alors ä la thimmc les bords Jo la grosso extromilö rion cflilee, ct garnissoz cette extremilu en A d'un tampon d'ouate.

A cet cfl'et prenez un petit mor-ceau d'ouate et a I'aidc d'unc pointe mousse enfoncez-le dans la pipette sows pression Idgerc.

Prepavez de memo chacun des autres pctits tubes droits, faisant deux pipettes d'un memo tube, et construisez dans la memo seance lo plus grand nombre possible de pipettes, car il est indispensable d'avoir toujoursuno certalno quantity do cos petits instruments a sa disposition.

Los pipettes terminees, on les placera, pour les steriliser, dans le lour a flamber dont nous parle-rons ei-dessous.

La ligure ci-contre (flg. 2) mon-Ire des pipettes d'une forme un peu diffcrente des pipettes Pasteur. On les obticnt en etranglaut celles-ci a la flamme sur un point, en B.

La petite oxtromito est scollee a la lampe; I'autro exlromite est rodee ä la flamme et garnie d'un tampon d'ouate.

Cos pipettes servent a conserver ii l'abri de l'air une petite provision de matiöre virulente (liquide do culture ou produit pathologiquej; nous en expliquerons 1c mode d'emploi en temps et lieu.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; Fig. i. Fij

INSTRUMENTS DE VERRERIE.

Ces pipettessont, apres leur preparation, porlees ogalement dans le four a flamber.

II Mal ras Pasteur.

i C'est un pelil

ballon a fond plat en verro lugcr, ferme par un bouchon a I'c'inori a recouvrement, qui lui-mcme n'cst pas plein,niais su termine par un tube de verre obstruö par un tampon do colon laquo; (Duclaux) (flg. 3). Mais avant dc garnirle bou-clion du matras Pasteur do son tampon d'ouate, avant de mettre I'instrument en iHul, d'etre flambe, il esl necessairc do le laver parfaitement, et nous allons exposer ici, une fois pour toutes, la facon dont on doit proceder au lavage dc la verrerie.

Fig. 3

LAVAGE UK LA VERRERIE.

Lavez d'abord I'objet avec une solution dc po-tasse; puis rincez a grande cau pour enlever l'excfes de potasse.

Plongez alors dans un bain d'eau aeidulöe ä un ou deux pour cent d'acide sulfurique; rincez a I'eau pure et faites i'goulter soigneusement. A eet ell'et le inieux ost de placer les objets bumides dans I'etuve sfeche que nous decrirons plus loin, ride les ylaisserjusqu'ä complete siccitü.

Lorsque le matras a etc soigneusement lavesui-vant la methodc ipic nous venons d'indiquer,lors-qu'il esl. bien sec, il faut garnir le bouchon de

BALLONS.

verre d'un tampon d'ouate. On procedora conune on l'a fait pour la pipette, en faisaut piinetrcr, sous kH/ere pression, a I'aide d'uue jjointe mousse, un petit fragment d'ouate dans 1c tube elroil lt;iui termine le bouchon ä sa partie superieure. 11 no reste plus alors qua sleriliscr le matras dans le four ä tlamber.

Les matras Pasteur sont d'uno extreme commo-dite pour les cultures dans los liquides, tolles quo les pratique I'Eeole francaise: ils doivent servir ä cette usage a I'exclusion de tout autre appareil.

On se les procure faci-lement dans le commerce.

III. Ballons.

On doit avoir un certain nombre de ballons en verre de dimensions diffe-rentes, pouvant contenir 2öü ä 1,000 c.c. (fig. 4).

Cos ballons servent spe-cialement dans la preparation des bouillons, ainsi que nous le dirons en trai-tant de ces milieux de culture.

Les ballons seront soi-gnciisemen t font's et seches; on les bouchera alors avecnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Fig. 4.

un tampon d'ouate. V'oici une bonne facon de preparer ces tampons.

Prenez dans un paquet d'ouate un fragment de dimension variable, suivant le diametre du tube qu'il faut boucher, mais dc forme ä peu pros rcc-tanffulairo.

INSTRUMENTS DE VERRERIE.

Pliez ce fragment en deux pour lui donner unc

plus grande epaisseur; placez alors rcxtromitc de votre nulex gauche au centre de la surface ainsi obtenue, et coiffez votre phalange avec I'ouate que vous ramenerez et prcsserez doucement aulour de cette phalange ; retirez 1'index : vous aurez ainsi un tampon d'ouatc termine par une surface lisse et

)ien ar-^ rondie : e'est lä un point important que cette petite manoeuvre bien simple permet jitteindre facilement. Bouchez aiors la tubulure du ballon avec votre tampon, la partie arrondie, lisse, celle ijui coiffait l'extremitö de 1'index etant dirigee en bas. En regie abso-luelesbouchons d'ouate doivent etre peu scrres ct penetrer dans les tubes qu'ils obturcnt sous une legere pression.

IV. Ballon-pipette Chamberland.

Ce ballon ligure ci-eontre (fig. S) portc a sa partie superieure un leger renllc-ment qui so prolongc par un tube A incline a 4o⁰. Ce lube ouvert a son extro-mite superieure porle un ou deux etran-glemontsdestines ä maintenirle tampon d'ouatc : un seul etrangloment ost neces-sairc.

A la partie spherique du ballon cst soude un tube B plus fin que le lube su-

TUBES A ESSAI.

pörieur, doublemont rocourbe qui sc termine en s'amincissant. Cc tube ost dosigrio sous le nom d'ct'lilurc latä'rale, Onlave soigneusement le ballon-pipette; on garnit le tube supericur d'un tampon d'ouate qu'on pousse en fornmt jusqu'ä l'ötrangle-ment; on scelle ä la lampe Üextrömitö de l'effilure laterale, et on porte le ballon ainsi prepare dans le four a flamber.

Cos ballons-pipettes sont destines, ainsi que nous I'expliquerons plus longuement ailleurs, ä eonserver les bouillons sterilises jus-qu'au moment dc leur transvasement Jans les malras Pasteur.

V. Tubes ä essai.

Ccs tubes (fie;. 6) scrvent aux cultures sur milieux solides (gelatine, gelose, serum, etc.). Leur diametre cst ordinaire-ment denn centimetre 1/2 ädeux centimetres. Ils doivent se termiuer ä la par-lie superieure par des bords droits; il faut rejetcr les lubes dont les bords circonscrivant 1'ouverture se renversent en dehors : eel evasemont conslitue une dil'ficultc dans l'application des capu-chons en papier-filtre dont nous par-lerons plus loin.

Les tubes ä essai seront laves, seches Fig. ü. et bouches iirouate. Nous avons,cnpar- , ¹quot;^lquot;^!. lanl ci-dessus dos ballons, decril un procede commode pour confectionner les tampons d'ouate: ce procede trouveson application ici. Les tubesa essai laves, seches, bouches, seront sterilises dans le four a flamber.

I'll. DE niCROBIG.

-20

INSTUUMENTS DE VERUERIE.

VI. Plaques de verre pour cultures en plaques suivant la methode de Koch.

On so serl duns ce procedu du culture, dont le but et la technique seront decrits plus loin, de plaques do verre rectangulaires de dimensions variables , 12/10 en raoyenne, ot do-paisseur un pen superieure ä colle des porte-objets usites en micro-graphie. (Los plaques employees par les photogra-phes et connues

Fig. 7.

Fig. s.

sous 1c nom de quarts de plaque scrnnt d'un lion usage) (fif;. 7). Les plaques prealaldomciit lavoos et sechöos seront plaueos pour subir la sterilisation dans uno bolte on lölc de 0,14 de long sur 0,18 de haut : la figure ropresenle cctto boilo et son couvercle 'fig. 8).

VASES A SERUM. VII. Vases ä sfirum.

Prenez un vase (fig.

d'une ussez grande capa-A

cite, deux li-

tres environ, (celui quo re-presento la figure ci-conlro est d'un bon emploi), et faitos choix pour le boucher d'un bouchon dc lieg-e dont le diamfetre soil un peu infcrienv au diametrc intericurducal du vase.

Prepare;; d'autre part un tube en verre A que vous recourberez ä angle droit ä son cxtremite superieure, et que vous fermerez a courle distance de la courbure. La partie droite du tube A doit avoir unc longueur süffisante pour plouger dune part jusqu'au fond du vase, et einer-ger d'autre part au-dcssus du col.

Assemblez alors les deux parties, vase et lube devorro,de lafacon suivante : enlevez sur lacirconferencodu bouchon un petit coin de

liege qui donnera pas-

fig. (I. Vase ;i

sage au tube de verre; puis, pour boucher I'intervalle qui doit, ainsi que

INSTRUMENTS DE VEBRERIE.

nous l'avons dit, exister entre lo Louchon et \e col du vase, garnissez la circonfereiicc du bou-chon d'un anneau d'ouate; placez alors le bou-chon, traverse par le lube et garni d'ouate ii son pourtour, sur 1c col du vase. Donncz au tube de verre daus 1c vase une position tolle que son extremite inlrricuro seit d'une part a courte distance du fond du vase, et aftleure presque d'autre part la circonierencc de l'appareil; on evitera, en faisant ainsi, les eclaboussurcs du sang tombant dans le recipient.

Le tube de verre elanl en bonne place, faitos sur sa circonference, pres de son extremite fermee,un trait au coutcau a verre.

Une dernifere operation consisle ä llltrcr Fair qui pönetrera dans l'appareil; pour cola on enve-loppera la partie lenninale du col du vase et röniorgence du tube A d'une coucho epaisse et serree d'ouate, qu'on maintient par quelques tours de fil.

11 ne roste plus qu'ä steriliser Tapparoil en le portant dans le four ä flambor.

vm. Appareils pour la culture des anaerobles.

1deg; Tube double de Pasteur. Ce tube employe autrefois par MM. Paslonr Joubert et Cliamberland pour eultiver le vibrion septique laquo; consiste dans un lube ä deux branches auquel est soude un tube de verre elrangle en A... chaeune des branches porte un petit tube efllle raquo; (Roux). Pour le mettre en etat de servir, lavez-le soigneusement, söchez-le, garnissez le tube superieur d'un tampon d'oual.e que vous pousserez jusqu'ä IVtranglement A, et fermez ä la lainpe les lubes efliles lateraux. II ne restera plus qu'ä steriliser l'appareil dans le four a flamber (fig. 10 .

TUBES A CULTURE.

2deg; pie

Tube simple de Pasteur. C'esl un lube sini-surmonte d'uno tubulure etrangleo en uu point A, ct garni latörale-ment dun lube B recourbe el effllö.

Lavez-le, sechez-lo,

poussezun tampon d'ouate

-A


	*'r\*	i\
i #9632; #9632;		\
\| ]		f
Ü		ji

-B

Fis. 10.

Fig. 11.

on A, fermez le tube effilö lateral a la lampe et porlez dans le four ä flambor (fig. it).

3deg; Tubepour la culture des anaerobies dans la gala-tine. La figure ci-contre (fig. 12) montre cot appareil. Cost un tube a ossai surmonle d'une tiibulure I! ä sa partie superieurc.

A la tubulure B est soudee une tubulure A qu'on etrauglera en d.

INSTttUMENTS DE VERRERIE.

L'apimreil sera lavö; on pousscra un tampon de colon jusqu'en d, on fermera B par un tampon de colon place a son oxlreniile superieure. Ainsi

//amp;

Fig. 12 hk

Fig. 12

apprelc 1'apparcil sera porlö dans le four ä tlamber.

4quot; Tiifce pour la culture en 'plaque den anaerobic*. II consists en un tube A, long de 2'n k 30 cenli-

STERILISATION DE LA VERRERIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; :31

metres environ, d'un diametre de 3 centimetres, portant ä cliacune de ses extrömites un tube H, B' de pcüt diamelrc. Cos tubes BB' so recourbent ä an^lc droit, et sont fernies ä leur exlremite par un tampon d'ouate (flg. 12 bis),

L'appareil alnsi prepare et lave scra portö dans le four ä ilamher (lig. 13).

B. STERILISATION DE LA VERRERIE

L'appareil le plus pratique pour la sterilisation des instruments de verrerie cst incoutestable-mcnt le four Pasteur (voyez fig. 13). C'est un ap-pareil en föle, ä double paroi, ä retour de llammes, avec briileur a gaz a la partie inferieurc, et clie-minee laterale.

Los dimensions en sont tres variables. Ce four est forme ä sa partie superieuro par un couvercle pcrcc d'un trou dans lequel on fera penetrer un bouclion traverse par un thermoraetre.

Dans Finterieur du four on disposorales instruments ä llambor; cos instruments seront ii cot etl'et places, rextrömite qui piorte I'ouate tournee en haut, dans un panier en tolle melalliquo, ot ce panier sera porte dans la chambre du four. Lors-quo le panier cbarge des objets ä flambcr cst en place, mettcz le couvercle, placez le bouchon portant un thormometre, allumoz le gaz, et laissez monier la temperature ä 170 ou 180quot;.

A ce moment reglez la temperature par tdton-ncmont en fermant etouvrant le robinet d'amenee du gaz, dc facon ii obtenir uno temperature moyenne de 170deg; quo vous maintiendrez pendant

INSTRUMENTS DE VERRERIE.

une heure et demie a deux heurcs. Ce temps ecoulö, t'teignez lo gaz, laissez descendre le Ihermometre et rotirez le panier raelallique. L'ouate qui obture

les vases doit ctre roussie et non carbonisee ; tout recipient dont l'ouate serait carbonisee est iuu-lilisable.

GHAPITRE III

MILIEUX DE CULTURE : LEURS MODES DE PREPARATION, LEURS MODES DE STERILISATION. LAUTOCLAVE.

A. Mll.lFXXDE CLLTL-RK I.IIJtJlDES '. I,0gt; llOuil lOIlS. Lu !;iit. ---- L'tirillP.

L'faumeur aqueuse. Le serum liquide. LiquideallaQtoidieo

et liquide de l'hydrocele. I!. Miliel'x de cültliie solides : A. Milieux tiMiiFpitreuU ; Gelatine,

gelose. B. Milieux serai-transparents : Serum. C. Milieux

ü[gt;:iqucs : Pommes de terre. hetteraves^ etc. L'Autoci.avk : Sou mode de fonctionnenient.

Los microbes qui tivolucnt aaturellcraont Jans reconoinie de l'homme et des animaux, dans les matteres liquides putroscibles, etc., sont suscep-tibles de vivre et de pulluler dans de veritables terrains artiticiels que los microbiologistes out composes, et auxquels on donne le nom do milieux de mltwe.

Cos milieux de culture doivent, pour so preler ä la vie des microbes, remplir les deux conditions suivantes :

1deg; Ils doivent contonir les prindpes nicessaires ä la nutrition de ces organismcs.

2deg; Ils doivent etre absolument steriles, c'est-ä-

3 V

MILIEUX DE CULTURE.

dire no conlouir aucun germe avant leur ense-mencement, Ajoutons enfln ([u'ils doivent, sauf (luelques cas excoplionnols, etre do reaction neutre on Ugamp;rement alcaline.

Lc tableau ci-dessous resume la division syste-matiquc et pratique des milieux do culture.

1deg; Milieux liquides.

Liquides mineraux. {

i i'eu employes

Liquides vegetauv. ( Liquides organiques natui'els.

I ('.(#9632;IntillO

/ iranspi

rents......lt;

( Geloi 2deg; Milieux soU'les. ' Semi-transparent.. [ Sein

Opaques.......

Pommes de terre,

etc.

Los milieux do culture liquides, dont lc type le plus parfait est assuröment le bouillon, tel quo nous lo decrivons ci-dossous, sent ignores on de-daigncusement rejetesdans certaines ecoles etrau-geros. On a lo droit d'etre singulierenient etonne, quand on connait les immenses services que res milieux out rendus dans la pratique des cultures ontro los mains dc Pasteur et de sos eleves, do voir quelles lantasliques accusations on eleve centre leur emploi, do lire, paroxemplo, dans certains ouvrages allemands, quo les milieux liquides no pouvent donner que des cultures impures! II faut laisser passer cette accusation lt; on la saluant d'un sourire raquo; (Duclaux).

En France nous pratiquons et la culture¹ sur milieux solides, ot la culture sur milieux liquides, lt;lt; on demandant a chacune ce qu'elle peut donner : ä la metliode des cultures sur gelatine ot sur

LES BOUILLONS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;3o

gelose un incomparable inoyen dc separation et d'isolement des microbes, et los renseignemonts parl'uis tres interessants que t'ournissent I'aspect et rexamen des colonies; ii la culture dans les milieux liquides, nous deraandons non seulemcnt des renseignemonts surlamorphologie du microbe, qu'elle pout nous donner ä 1'egal do la precedonte, mais surtout des notions sur sa biologie, la nature

dos

aliments qu'il prolore, des transformations

ju'il leur fait subir, etc., toutos choses que la

ethode do culture sur milieux solides no nous

rovolo que d'une faeon insuffisante raquo; Duclaux).

A. MILIEUX DE CULTURE LIQUIDES

Les liquides minoraux ou vogetaux sont aujour-d'hui, sauf pour certaines rechercbes sjiocialea, ä peu pros delaissos dans les laboratoires francais. Nous ne parlerons done ici que des bouillons et dos liquides organiques nalurols.

I. Les bouillons.

Les bouillons constituent par excellence les milieux do culture liquides.

Preparation. On pent so scrvir de viande do hoeuf, do cheval, d'dne, do mulet, do reulaquo;, do mouton, do pore, de lapin, do poule, etc.

.Nous consoillons outre toutos la viande de 6(rlaquo;/', de vena et de poule.

On prend öOO grammes do la viande choisie, dibarrussde des os, do la graissc, des tendons, des aponevroses, et hacMe finoment.

On place cos 500 grammes do viande dans un recipient conlenant 1 000 grammes d'eau dislillie. Avec uno spatule en porcelainc on miilanqe soi-

#9632;I

MILIEUX DE CULTURE LIQUIDES.

gneusement la viande ä l'eau, et on luissü macerer pendant 24 heures ä froid.

On jicut, pour gagner du temps, remplacer la maceration ä froid par la muneration ä chawl: on place alors les öOO grammes de viande dans 1 000 grammes d'eau distillee portce prealablc-ment ä la temperature de-j-SO⁰ environ, et on laisso macerer dans rautoclave pendant une demi-heure ä -{- 50deg; environ ; cetle temperature ne doit pas etrc depassee, car, au delä, I'albumine se coagulerait, et reliendrait une certaine quantity de matieres solubles.

La maceration ä froid est preferable a la maceration ä chaud.

Apres 24 heures dc maceration, on filtrc sur un linge mouille, et Ton obticntune certaine quantity d'un bouillon legerement rougoatre : on pese alors exactement ce bouillon, ot on ajoute au-tant do grammes d'eau distillee qu'il faut pour que le poids du bouillon atteigne le double du poids de la viande employee, soit 1000 grammes.

On introduit dans le bouillon un demi p. 100 de sei marin et une trace de phosphate de potasse : le bouillon ainsi addilionuö est le bouillon pur.

On prepare encore des bouillons peptonisis qui sont d'excellents milieux de culture : pour cela, outre le sei marin (1/2 p. 100] et le phosphate de potasse, on ajoute 1, 2, ou 3 p. 100 de peptone Cha-poteaut.

On portc le bouillon pur ou peptonise dans Fautoclave ou on le fait bouillir (a 100deg;) pendant une heure. On filtre surun linge.

Le bouillon, resullant de ces diverses operations, rougit plus ou moins le tournesol bleu; il est acide et par consequent impropre a faire un milieu de culture : il faut le reudrc alcalin.

Four cela, on ajoute par petitos quantites une

LES BOUILLONS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 37

solution de potasse ou do carbonate de soude jusqu'a ce que le papier de tournesol donne a I'essai une reaction nculre, ou tres legörement al-calinc.

Lc bouillon est aloi's soumis a l'autoclave ä la tempörature de i 13deg; pendant 10 minutes, et on le laisse ensuite reposer juscju'au lendemain, afin quo la graisse so solidilic a la surface par lc refroidisse-inent, et que les matieres insolubles se deposent.

Le lendemain, on decante le bouillon, en ayant soin de laisser de cötc la graisse, ct le depot s'il y en a; puis on transvase le produit decante dans nnballon en verre bouclie a I'ouate, prealablement sterilise; on recouvre, apres I'operation, le ballon do son tampon d'ouatc, et sur celui-ci on place un capuchon en papier liltre.

On porte le ballon ainsi rompli dans l'autoclave, et on le soumet ä. -|- Hoquot; pendant un quart d'heure au moins, une demi-heure au plus.

Au sortir de l'autoclave le bouillon est pret et sliirile: ii no reste qu'a le repartir dans ses recipients, e'est-a-dire dans les matras Pasteur sterilises.

L'operation se fait en deux temps de la facon suivante : le bouillon est d'abord aspire du ballon qui le contient dans le ballon-pipette Chamber-land, et de cette pipette il est ensuite distribue dans les matras.

Prenez une pipette Chamberland sterilisee (V. chap. I), brisez l'extremite de reffllure laterale par un trait de couleau ä verre, et steriliscz toute la surface exterieure de cette eflilure en la passant plusieurs fois dans la flamme de la lampe a alcool. Saisissez dans la main gauche le ballon qui contient le bouillon; par surcroit de precaution, re-passez une ou deux fois dans la flamme l'effilure laterale de la pipette Chamberland, que tient la I'll. r.K microbie.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;3

MILIEUX DE CULTURE LIQUIDES.

main droite; aveclepouce etl'indexdecette mfime main eulevez le tampon d'ouate Ju ballon; plon-gcz dans ce ballon l'effllure de la pipette, que vous fere/, penetrer dans le liquide, sans aller jus-qu'au fond, oil un depot s'est le plus souvent forme; aspirez le lii[iiide dans la pipette par le tube superieur de celle-ci.

11 faut ne pas recueillir tout le liquide du ballon, et uotamment il laut arreler l'operalioii de faeon a ne iias aspirer la partie superficielle qui pendant les manipulations aurait pu etre souillee par quelque germe atmosphärique.

Le bouillon recueilli dans la pipette Cbamber-laud doit 6tre maiulenanl distribue dans les ma-tras Pasteur.

On prcml un matras dans la main gauche, et on Vindine de fagon que son ijrand a-cc soil horizontal: cette position soustraira rinterieur du vase de-bouche aux germes de ratmospherc; on saisit la pipette Chamberland de la main droite; on sterilise encore l'effllure laterale en la passant dans la flamme; avoclepouceel l'index de la main droite on dobouche le matras; on introduit rextreinilo de l'effilure de la pipette dans le matras, on souffle par le tube superieur, et on einplit ainsi lo matras jusqu'au quart ou au cinquieme de sa contenance; on retire alors l'effllure de la pipette, et on recou-vre immediatement lo matras de son bouchon protocteur.

On recommence pour chaque matras ä remplir cette delicate operation, qui doit etre faite tres rapidement, car plus on manipule vite, moins on expose les matras aux souillures atmospberiques.

Les deux conditions essentielles pourreussirsont:

1deg; Tenir les matras a remplir dans la position liorizontale et immobile.

2deg; Soil avant de recueillir le bouillon dans la pi-

MILIEUX ORGA.NIQÜES NATÜRELS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;39

pette, soil avant la distribution dans chacun Jos malms, a.\oir soin dvpwfditcnimt stdriliscr Veffllure htlrnile de la pipette dans la flamme de la lampe ä alcool.

Les matras Pasteur remplis seront poites dans Feluve Pasteur et soumis a -f- 37quot; pendant au moins deux jours avant d'etre mis en usage.

Au bout de quarante-huit heures on les examine, et on rejette ceux dont le bouillon csl trouble, ce qui indique qu'une impurete s'y est introduite au cours des manipulations. #9632; On ne doit conservcr que les matras dans les-quels lo bouillon osl rigoureusement limpide et transparent. Les bouillons ainsi prepares constituent un excellent milieu de culture danslequel la pluparl des microbes pousseront tres vite.

Comine on a pu le remarquer, ces bouillons concentres, comme on les appelle, contiennent une partie de viande pour deux parties d'eau dis-tiilee : la fraction 1/2 ropresente done lidelement leur degre do concentration.

Dans la pratique, on peut varier ce degre, et faire li volonte des bouillons non concentres au 1/3, au 1/4, au I/o, etc. C'est aiusi que M. Cbau-veau cullive ses vaccins charbonneux dans du bouillon de voau u I/o.

On pent aussi, independamment de leur concentration, faire varier la composition des bouillons en leur ajoutant dc la gheerine, du sucre, etc.

II. Les milieux organiques naturels.

Cos milieux sont : le lait, Vurine, Yhimcw aqueuse, lo serum, le liquide allantoidien, ou de V/iy-drocele.

A. i..\ir.

Dans quelques cas, que nous aurons a preciser

MILIEUX HE CULTURE LIQUIDES.

plus tard, le lait forme un excellent milieu de culture.

Preparation. On prend uno certaine quantite de bon lait, ii reaction akaline, que Von introduit dans un ballon prealublement sterilise ; on porte ä rautoclave et on sterilise a 1L^:gt;⁰ pendant un quart d'heure. On laisse reposer ensuite. Par le refroidissement les parties grasses remontent a la surface. On recueille alorsdans une pipetteCham-berland storilisee, on ayantsoin dene pasprendre la graisse. Pour cela il sufflt de pionger I'effllure de la pipette jusqu'au fond du liquide, et de ne ' plus aspirer des qu'il ne roste plus qu'un peu de liquide au-dessous de la couclie graisseuse super-ßcielle. On distribue ensuite le lait dans des ina-tras Pasteur.

Dans tonte l'operation (aspiration du lait dans la pipette Chamberland, distribution dans les ma-tras), on s'entoure de toutos les precautions que nous avons indiqnees en traitant de la meine manipulation porlant svir les bouillons.

On place les matras remplis au quart ou au cin-quiemea l'ötuve (IST⁰!. Apres vingt-quatre on qua-rante-huil heures on les examine; on rejolte cenx dont le lait cst coagule on couvert de inoisissures. Quant aux autres matras, il faut, avant de se servir pour le culture du lait qu'ils contiennent, examiner ce lait au microscope comme on examine-rait une culture, do facon ä s'assurer ciu'il ne con-tient pas de microbes.

Si on veut operer avec pins de rigueur et de sü-rcte,oii pout, avant de se servir d'un de ces matras, cnaemenccr unbouillon avec une goutte du lait qu'il contient: on porte le bouillon al'^tuve; si apres vingt-quatre heures ce bouillon a garde toute sa limpidite, le lait eprouve peul etre considerc comme absolument pur. Ce precede de verification

MILIEUX ORGANIQUES NATURELS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 41

de la puietc du lait exigo une perte Je temps, il ost vrai; mais les occasions ou le lait servira comme milieu de culture sont rares; 11 est iloiic jjrcferahle d'apporter dans cette vcrilicatioii toute la rigueur voulue.

La haute temperature ä laquelle on soumet le lait pour le priver de gcrmes module sa composition. laquo; II faul pouvoir conserver ce liquide dans I'etat meme oil il sort du pis de la vaohe. II y a plusieurs procedes pour cola.

laquo; Le plus simple de tons, et le plus facile a meltrc en a?uvre partout, consiste a prondre des tubes ä essai raquo; bouches ä Touate et sterilises prea-lablement. laquo; Poury introduire du lait, on lave bien le pis de la vaelie, et quand les premiers niouve-ments de mulsion out bien nettoyö los parois du canal, on enleve doucement avec une pince le bouchon de colon qui ferme le tube, et Ton dirige dans rinterieur le liquide qui s'eeouk', en ayant soin de tenirle lube tout pres de la mamelle, sans pourtant la toucher. On ne peut eviter qu'unc portion du lait ne coule ä l'extörieur du tube ; cela est sans importance, et il vaut mioux le perdre que chercher ä le recueillir. On remet le bouchon qu'un aide a garde ä l'extremite de la pince, ot on re])orte le tout au laboratoire.

laquo; On doit preparer ainsi plusieurs tubes; quel-ques-uns s'altörent, cela est inevitable avec une manipulation aussi delicate, mais il y en a tou-jours un grand nombre qui restent inalleres, si on a bien opere. raquo; (Duclaux, Annules de I'lnstitul agronomique, 1882, p. 24.)

On s'assurcra Je la purete du lait au moment de l'emploi par les procedes inJiques ci-dessus.

B. I'RINK.

Cost Jans I'urine que M.Pasteur a cultive d'abord

MILIEUX DE CULTURE LIQUIDES.

la bacturidie charbonneuse. Cost un milieu qui peut ii l'occasion rendre des services.

Prcparatiun. On recueille Jo riirino; on la filtre sur un papier Laurent; on 1'alcaliaise, puis on la sterilise comme un bouillon. On la laisse reposer, et on la distribue dans des mal ras Pasteur qua Ton place ä I'eluve; eeux qui se troublent dans les vingt-quatre heures sent rejetes.

On pout ajouter ä Furine tonte espoce de pro-duils, Sucre, glycerine, etc., etc.

C. HUMEUR AQOEUSE.

On emploie avantageusement I'humeur aqueuse

dans les cultures speciales connuos sous le nom do cultures en cellules. Koch s'ost servi de cetle culture en cellules avec I'humeur aqueuse pour otudier revolution do la bacteridio charbonneuse.

Preparation. On extirpe I'ceil d'un sujet sa-crilie tout recemment; Fospece do Fanimal est indidoroute. On recueille alorspiwementI'humeur aqueuse contenue dans la chatnbre anterieure de cet ceil de la facon suivante :

On saisitl'cBlI dans la main gauche; on cauterise la surface externe do la cornoe avec rexlremito d'une baguette dc verre chauflee dans la flamme d'une lampe ä alcool. On prend unc pipette Pas-tour preparöe et slorilisoe comme il est dit au chapitrell, on on brise lapointe offilee, et on passe I'effllure plusieurs foisdans la flamme do la lampe a alcool pour en steriliser la surface cxlorieurc. Avec cette pipette on ponctionne la cornee au point cauterise ; I'humeur aqueuse sVleve dans la pipette; uns legere pression du globe oculaire permet d'obtenir la quantitö de liquide voulue. On retire la pipette et Ton forme son extremitö ä la lampe.

MILIEUX TRANSPAHENTS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;43

I). ?KIiUM PUB 00 COCPE DE BOUILLON OU d'eAU STERILISES.

Le serum pur, recueilli comme nous le dirons plus tard, et non gelatinise, constitue un bon milieu liquide de culture, utilisable dans certains cas. 11 sera avantageux de coulter ce serum d'eau ou de bouillon sterilises.

E. LIQUIDE ALLANTO'IDIEN ET LIQUIDE DE l'iIYÜROCELE.

Nous ne mentionnons ces liquides que pour me-moire. Leur usage n'entre guere dans la pratique.

B. MILIEUX DE CULTURE SOLIDES

I. Milieux transparents.

Ces milieux sont la gelatine et la gelose.

Le but ä atteindre dans la preparation de ces milieux est d'obtenir un produit solide, iucolore, aussi transparent que possible et sterile. Les methodes que nous aliens indiquer permettent d'atteindre ce resultat dans la mesure du possible.

II nc faut pas preparer la gelatine et la gelose en trop grandes quanlitös ä la fois, surtout pendant I'ete, car ces milieux, perdant par I'evaporation I'eau qu'ils contiennent, se retractent, devienncnt cassants et par suite difficilement utilisables.

A. GELATINE.

1'our preparer la gelatine, prenez 2,^!i0 grammes de viande de ba'nf, de veau, de poule, de mou-ton, etc., debarrassee des os, tendons, aponevroses,

MILIEUX DE CULTURE SOLIDES.

graisse, etc., hachoft finemenl; mela agez ä 500 grammes d'cau dislillee, el lui.sscz maceror pendant vingl-quatre heures ä froid. Filtrez alors sur un linge; posez le bouillon qui a passe, ct ajoutcz aulant d'eau distillee qu'il taut pour quo le bouillon peso 1c double dupoids do la viande, e'est-a-dire 000 grammes.

Placez ee bouillon dans un vase cmuilU et ajoulez :

50 grammes de yelutine, yoit 10 p. 100. (Getto gelatine cst livree dans le commerce sous forme de plaques, et connue sous le nom de gelatine extra-fine, blanc-manger.) 11 faul, avant de l'introduire dans le bouillon, la coupor on petits morceaux qu'on lave dans 1'eau distillee ;

5 grammes do peptone Chapoteaut (soit 1 p. 100).

#9632;Z gr. 1/2 do sol marin (1/2 p. 100);

line trace de phosphate do potasse.

On melange bion lo tout, et on fait bouillir une houre ä 100deg; dans 1'autoclave.

On filtre ensuitoa traversun linge proalablcment mouille; on neutralise 11] le liquide filtre par la potasse ou lo carbonate do soude, et on porte dans l'autoclave ä 4- 10.^!)⁰ pendant 10 minutes.

On passe alors sur le papier-flltre. Le produit rccueilli doit ötre, si Ton a Men snivi ces indications, absolument transparent, dc teiute citrine.

A I'aide d'un petit enlonnoir, on le distribuo dans des tubes a ossai prealablement sterilises, en ayant soin dc no pas laisser tomber do gelatine sur

(1) La neutralisation exacte d8 ti gelatine est fort importante; si cotto neutralisation n'esl pas parfaite, si le milieu cst alralin, il preiulra urn; couleur foncee quand on le soumettra aux hautes temperatures aecessaires ä la sterilisation. Nous conseillons de comparer sur le papier de touniesol bleu et rouge la reaction dc la gelatine essayee avec la reaction d'une goutte d'eau distillee : e'est le morenle plus simple et le plus efficace de bienneutraliser.

MILIEUX TRANSPARENTS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;4S

la partie supamp;rieure Ju tube dcstinee ii loger lo tampon d'ouatc; faule do cottc precaution, ce tampon, apresle rofroidissoment, adhererail au verrc. On remplit cliaque tube jusqu'au quart ou au tiers inferieur environ.

Ceci fait, on met en place les tampons d'ouate, et ou les recouvre d'un capuchon en papier-flltre.

On sterilise cnsuite une I'uis encore la gelatine en soumettant les tubes dans rautoclave ä-t- I0ö^opendant un quart d'heure.

On les retire ; on en place un certain nombre, destines aux cultures en strie sur un plan incline, on laisse les autres dans la position vertieale. Par le refroidissement la gelatine fait prise et ost prete pour les ensemencements (1).

B. liELOSE.

La gelose est le produit colloidc retire par Payen d'une algue a laquelle les Allcmands out donne le nom d'agar-agar: on trouve cetto gelose dans le commerce.

Präparation. On precede comme nous 1'avons dit pour la gelatine; on remplace 10 grammes de gelatine par 1 gramme de gelose, seit ö grammes de gC-losc pour Ö00 grammes de bouillon. On ajoute egalemcut 1 p. 100 de peptone, 12 p. 100 do sei marin, et une trace de phosphate de potasse.

La gelose avant son emploi doit etre coupee en petits fragments et lavee dans Teau distillee.

(i) Voici un moyen plus rapide do fabriquep la gelatine : oa met dans le bouilloQ prepaie comme il est dit ci-ilessus laquantite vüulue de gelalino, de peptone, do sei marin, et on porte le tout dans rautoclave. On elevo la temperature a luUquot;, et tout aussitöt ä 115deg;. Lorsque cette temperature est atteinte, on eteint le gaz. On attend quo le manonietre descende ä 0; ou retire alors, ou Qltpe et on acheve comme ei-dessus.

MILIEUX DE CULTURE SOLIDES.

On porte lc melange ä 100deg; dans l'autoclaye pendant une heure; on alcalinise; on laissc alors tomber la tempörature au-dossous dc 50deg;, et on ajoute un Mane d'ceuf que Ton agitc fortement dans le liquide. Le tout cst ensuite mis ä l'auto-clave et porte jusqu'a la temperature de 113deg;.

Ili'-s quo 1c manometre indique cette temperature, on etoint lo gaz. Lorsque le manometre est ä 0, on oirvre i'auloclave, on retire et on filtre sur un papier epais et dense prealablement mouille. La filtration so fait tres vite, et le liquide obtonu cst presque incolore et transparent.

11 ne reste plus alors qu'a distribuer la geloso dans des tubes ä essai sterilises, comme nous 1'avons dit pour la gelatine.

On sterilise les tubes remplis ä -j- iOliquot; pendant un quart d'heure ; on pent meme sans inconvenient porter la temperature jusqu'a US⁰.

Les tubes seront laisses, pour la solidification, soit dans la position verticalo, soit plutöt dans la position indim'c, la gelose se pretant mieux, ainsi que nous le dirons jilus tard (chap. V} aux cultures en surface, en strie.

La gelose a sur la gelatine un grand avantage : on pent I'exposcr a la temperature de l'etuve (:!7⁰ ä 41deg;) sans qu'elle sc liquelie, comme le ferait la gelatine, qui fond au-dessus de - - 18deg;. Le seul reproche qu'on puisse lui faire, e'est qu'elle est toujours legeroment louche; cependant un peu d'habitude et d'adresse fera obtenir un produit presque transparent.

On pent ajouter a la gelatine et ä la gelose de la glycerine, du glycose, de la leucinc, de la dextrine, comme le font MM. Nocard elHouxponr cultiver la tuberculose. Nous reparlcrons en son lieu de cette pratique.

MILIEUX DEMI-tBANSPARENTS.

II. Milieu de culture demi-transparent.

On 1c prepare en uekUinisanl par la chaleur, le strum du sang de bwuf, de veau, de cheval, de inon-lun, dc c/tien. Les meilleurs serums sent ceux du inoulon, du bceuf ou du cheval. Celui du cliien n'est pas aussi bon parce que la coagulation du sang est trop rapide dans cette cspece.

Hvcolte du sang sur I'animal et solklificatiun du

scrum d'aprcs la technique dc MM. No-card cl Ruux.

La niethode que nous allons de-crire nous parait devoir, par la surete du procedö et l'excellence des rcsultals obtenus, se substituer entiörement ii la rnethodc de Kocli iinparfaite, pen sure, et donnant un serum de mauvaise qualite et de mauvais aspect.

On a prepare d'avancc plusieurs des vases que nous avons decrits au chapitre ii sous le norn de wises ä scrum.

On apprete tout d'abordla cnnulc, qui doit etre enl'oncee dans le vais-seau de 1'aBimal qui fournira le sang.

Cette canule (flg. 14) se terminc d'une part par un bee mousse tailie

en biseau, et de l'autre par une

Vis. 14.

extremite d'un diametre suporieur ii celui du corps de la canule; sur cette extremite on adapte un tube de caoutchouc d'environ 0^m,40 de long.

L'appareil forme par la canule et le tube de

MILIEUX DE CULTURE SOLIDES.

;

caoutchouc qui lui cst adupte doil etre sterilise. A cet effet on introduit le bee de la canule dans rexlremite libre du caoutchouc (V. fig. 13); I'appareil, qui prend ainsi une forme legerement ovale, est soumis dans Tautoclave a Hoquot; pendant un quart d'heure. La sterilisation de la canule et de la surface Interieure du tube de caoutchouc sera ainsi par-failenient realisce.

11 est, bon de preparer deux de ces appareils alin d'etre a. I'abri de tout, accident opera-.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;toire.

La canule, le vase ä serum t^tant prets, on fait disposer pour roperationl'ani-mal que Ton a choisi.

L'operateur place ä sa portee sur une table une lampc a alcool, une ou deux baguettes de verre, un bistouri tres propre, une paire de ciseaux, des pinces anatomiques, du 111 a ligature, ainsi que les recipients et les canules sterilises; rextremito en bee de Hüte de ces dernieres demeure cachee dans le tube de caoutchouc.

On pent prendre le sang dans la carotide ou la jugulaire. Lorsqu'on choisit la jugulaire, Fope-ration pout ötre faite simplement et sans plaie; mais il van I, tnieux s'adresser ä la carotide, la pression arterielle favorisant l'arrivöe du sang dans le recipient.

[/operation sur la carotide se fait de la facon suivanle: on met ä nu le vaisseau et on le fait saillir avec nno pince passee en dessous. On en cauterise la surface avec rextremite de la baguette de verre fortement chaullee sur la kunpe ä alcool

MILIEUX ÜEMI-TRANSPARENTS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 40

et on incise avec le bistouri rapidement flambe. Le sang jaillil. On retire alors vivement le bee de la canulo du tube en caoutchouc, on en tlambe la surface oxterieure sur la flamme de lalampo a alcool, et on I'introduit dans le vaisseau; les doigts d'un aide en assureut la fixile. On fait aussi comprimer le tube de caoutchouc pour eviter toute pcrte de sang inutile. On saisit alors le vase a serum; on brise l'extremitü de la tige de verre qui le surmonte, et sur laquelle on a fait ä l'avance, nous .I'avons dit ailleurs, un trait de couteau a verre pour faciliter cette ouverture; on flambe rapidement les bords de celle-ci et on adapte la,tige de verre sur l'extremite libre du tube de caoutchouc. On fait cesser la compression exercee sur co tube, et le sang coule librement dans le recipient.

Lorsque ce premier vase est rempli, on fait a nouveau comprimer le caoutchouc pour arreter IV'coulcment du sang, on retire le vase; on en apprete rapidement un second, qu'on adapte au tube do caoutchouc et qu'on laissc remplir comme le premier, etc. Lorsqu'on a rempli le nombro de recipients voulu, on retire la canule, on ligature l'artere, et on terme la plaie par quelques points de suture.

L'operalion sur la jugulaire est plus simple : laquo; les dimensions de ce vaisseau, sa situation sous la pcau rendent I'operation facile. raquo; On prendra un trocart sterilise, tel que le tube de verre ajuste sur le vase a serum puisse penetrer dans sa canule et la fermer exactoment.

laquo; On pratiqucra I'lioniostasc ä la base du cou, et la veine jugulaire apparalt sous la forme d'un cordon cylindrique, saillant et fluctuant. On coupe les polls au niveau du point oil Ton veut faire la ponction, et on brüle ensuite fortementla peau au moyen d'une tige de for rougie au feu. A travers la

MILIEUX DE CULTURE SOLIDES.

peau luLileo on fait penetrer lo trocart flambe duns la voino; on retire lo dard, et dans la canule restce en place, le tube de verrc est introduit apres que son extremite a ete coupee et passee dans la flamme. Le sang s'ecoule alors dans le recipient ä l'abri de toutes les irapuretes. raquo; (iS'ocard et lloux, Annales Pasteur, t. 1, p. 21.)

On transporte les recipients dans un endroit frais apres avoir enleve la tige de verre qui les surmoatc : il suflit pour ccla de mainlenir do la main gauche le tampon d'ouate qui recouvre le vase, tandis quo la main droite enleve cette tige : I'ouate comble immediatement le vide laisse par le passage de la tigo.

La retraction du caillot so fait on vingt-quatre on quarante-huit heures; il vautmieuxattendre qua-rante-huit heures.

Lorsquc la retraction du cailiot est complete, on recueillc lo serum.

Pour accomplir cette operation, prenez une pipette Chamberland sterilisee; brisoz I'extremite de reflilure laterale et iiassez deux ou trois fois cette effilure dans la flamme de la lampe ä alcool. Soulevcz alors legerement le tampon d'ouate du vase dc serum, ,/quot;*'lt;-' assez pour donner passage d Vdffilure de la pipette, et plongez celle-ci dans le serum, en uyunl soin que ton exlremitc nc louche pas le caillvt, mais se rapproclie des parois du vase, et aspirez.

Lorsquo la pipette est remplie, on la retire, et on ferine l'extrömitö de son effilure ä la lampe. On precede ensuito a I'emplissage d'uno nouvello jiipotte, etc.

On place les pipettes remplies de serum dans un endroit frais, et on laisse au repos douzo heures au moins, de facon que les quelques globules rouges en suspension se deposent au fond du vase.

MILIEUX DEMI-TKANSPAHENTS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;bl

Cette serie de manipulations donno un serum transparent, jaunc cilrin, quo Ton pout conserver dans les pipettes aussi longtemps qu'on 1c desire.

Distribution du sirumdnns les lubes a essai;gdlati-nisation duns l'appareil de Koch ou de Roux.

On prend pour cette operation des tubes a essai sterilises el bouehes quo Ton place sur une table, en meine temps qu'un couleau a verro, une lampe a alcool, at la pipette Chamberland contenant lo serum.

On brise d'un trait do couteau a verro I'extre-mite de l'effllure laterale do la pipette; on prend la pipette dans la main droite, et Ton sterilise l'effllure dans Unite sa longueur sur la flamme de la lampe ä alcool.

De la main gauche on saisit un tube ä ossai; on appuie solidementcottemain surlo bord delatable, et Ton donno au tube qu'ello tient une direction presque horizontale. Le tube et la main doivent des lors roster immobiles pendanttoutel'operation du remplissago, car tout mouvemont inopportun ferait peuetrer do I'air dans le tube, et avec I'air dos germes qui infecteraient le serum. On passe une fois encore l'effllure de la pipette dans la llammo, et des doigts libres de la main droite on enlevc le tampon d'ouate du tube ä essai.

On introduit alors l'effllure dans le tiers supe-rieurdutube; on souflle par la tubulure supe-rieuro dela pipette, et onromplit le quart du tube : il no taut pas depasser cotte hauteur, car la couche de serum trop epaissc so gelatiniserait dit'licilc-ment. On retire l'effllure sans la laisser toucher a la paroi du tube, et on recouvre colui-ci de son tampon d'ouate. On recommence, pour chaquc lube a remplir, la memo operation.

Toutcs ces manipulations doivent etro faitcs vivement, ce qui diminue les chances d'infection.

o2nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; MILIEUX DE CULTURE SOLIDES.

Les tubes ä ossai remplis de serum sont places dans l'appareil de Roch ou de Roux sur le plan incline du plancher, les tampons d'ouate en haut (llg. 10;.

Sterilisateur ä serum.

Le serum s'etale en couche oblique dans les tubes.

On ivide la temperature de l'appareil ä 68deg;, et on surveille la solidilication. Le serum en so ge-latinisant devient jaunc clair, opalin, semi-transparent.

Leraquo; tubes solidities sont retires de l'appareil; des rju'ils sont refroidis, ils sont prets ä etre mis en usage.

MM. Roux ct Nocard addilionnent le serum de glycerine peptonisee et sucree; nous reparlerons de cette pratique entemps et lieu (V. Tuberculose).

MILIEUX OPAQUES.

III. Milieux opaques.

Ils sont de toutos cspeccs, mais nous parlerons ici surtout, dos pommes do lorre; co quo nous di-rons de celles-ci sera facilemont, le cas echoanl, applique ä tons aulres milieux de culture opaques.

Nous prepnrons cos milieux suivant deux pro-cedes difterenls :

1deg; Le premier est le proccdv de Koch modifit¹. La

Pun

ne dc terro en cnstallUoir clos.

mcthode que cet eminent savant avail imaginee presonlait plusiours inconvenicnts marques, ^ols quo longueur des manipulations, souillure ä pou pres inevitable des pommes do terra pendant la preparation, ou a l'oceasion de Fensemencement, et de I'examen. La methode que nous allons de-crire et qui n'est qu'une modification, une simplification du procedö de Koch, suppriine tons les inconvenicnts de celui-ci; eile est d'un usage cou-rant dans les laboratoires. 2deg; Le second est le procc'dt' indiqud par lioux,

MILIEUX DE CULTURE SOLIDES.

proceJe d'une precision et (Tune surcto parfaites. 1deg; Procede de H. Koch modifii. Culture sur pommes de tcrre en grande surface, en eristallisoirs clan.

On prend des pommes de terre do honne qualite; on les lave avec une brosse, et on les plongc dans une solution de sublime ii l/1000^e pendant une heuro.

On lave dans la solution de sublime dos eristallisoirs ä couverele rode, de la forme roprescntee ci-contre (V. fig. 17); on decoupe dans une feuille de papier-filtre des disques que Ton place sur le fond de chaque cristallisoir. On divise alors les pommes de terre en deux moities egales, don't chacune est placee dans un cristallisoir, sur 1c disque de papier-filtre, ct Ton humeete colui-ci avec la solution de sublime.

Les eristallisoirs fer-

mes hermetiquement

par leurs couvereles

rodes sont places dans

l'auloclave, et soumis

ä -f-100deg; pendant une

heure, puis ä .1 t;i⁰

pendant au moins un

quart d'licure. Un

etoiut le gaz de l'ap-

parcil; on laisse re-

froidir, et la ponime

^FiS- I^s-nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; de tcrre est prete pour

rensemencement.

lgt;ii pent avec avantage se servir de eristallisoirs

(tig. 18) presenlant vers le tiers superieur une

Ouvertüre spherique d'un centimetre de diametre

MILIEUX OPAQUES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; Im

environ, qu'on oblurc avec un tampon de ouate.

Cette petite ouverture sert a ronsemencernent, qu'clle rend plus simple et plus sur, ainsi que nous le dirons au chapitre IV. Ces cris-lallisoirs ont, comme les precedents,un couvorcle rode; ils doivent etre äparoi mince et en verre de Holieme pour

pouvoir, sans se fendre, supporter les

hautes temperatures auxquelles on les soumet.

iquot; Culture sur pommes de tcrvr. par le TpnimW de llou.v.

M. itoux conseille do se servir, pour la culture sur pommos de terre, de tubes a essai de 2 centimetres et demi de diametre environ (V. lig. 10). Cos tubes portent vers le quart inferieur un laquo; iHranglement qui empeche la tranche de pomme de terre de tomberau fond;

dans la partie interieure se rassem-

blera 1c liquide quisort de la pomme de terre apres cuisson raquo; (Roux). Ces lubes sont bouches ä 1'ouate, et il n'est pas necessaire qu'ils soient stch'ilises ä 1'avance.

On coupe des pommes de terre on des betteraves en I ranches rectangulaires

d'environ ö centimetres de long sur un centimetre de large au moins; on in-troduit chaque fragment dans un lube,

Figr. 10. Tube ä pomme de terre de Üotix.

on recouvre le tube de son tampon d'ouate sur lequel on place un capuchon en pa-pier-liltre.

On place alors les tubes dans 1'autoclave pendant une demi-heure ä 100deg; et un quart d'heuro au moins a I Hi⁰ on -\- 120deg;.

On voit combien la preparation des pommes de

.#9632;ili

MILIEUX DE CULTURE SOLIDES.

torre ost simple, parce procöde; ajoutons que I'en-semencement se fait ici avec la meme sürelö et la nienio rigueur que dans un tube de gelose ou de golaline, et qu'enfin, en modiflant legüroment la forme du tube, on pent faire sur pomme de terre la culture des anaerobies, ce qui ost absolumenl impossible avec tout autre procedii (V. chap. V).

L'autoolave. Son mode de fonctionnement.

L'autoclave de Chämberland est un pr^cieux

instrument de sterilisation, d'un fonctionnement, parfait, remplissant egalement bien deux indications :

1quot; II fonctionne sans pression, comme une etuve humide, oü la tomperaturc pout etre portöe a 100quot;.

2deg; 11 fonctionne avec pression, et la vapcur humide sous pression peut y etre portöe ä une derni, une, une et demie et deux atmospheres, avec les temperatures correspondantes (de 100deg; a 134deg;).

L'autoclave (flg. 20) se compose d'une marmitc cylindrique en cuivre pouvant etre fermeo herme-tiquement par un couvercle en bronze, portant sur une rondelle en caoutchouc, et maintenu par des boulons mobiles. Ce couvercle est muni d'un manometre M'indiquant la pression et la temperature; d'un robinet K; d'une soupape de sürelc S. La marmito est supportee par une sorte de boite en töle a la partie infericure de laquelle se trouvent deux rampes a gaz circulaires (j et;; de (liametrcs dilTercnts et indiipendantes l'une de Lautre. Un panier en fil de for P, d'un diametre inferieur ä celui de la marmite. est destine ä recevoir les vases contcnant les milieux a steriliser.

Modr dc fonctionnement. On verse d'abord dans la marmite E 1 ou 2 litres d'eau, suivant

l/AUTOCLAVE.

Fig. 20. R, robinet; S. soupape tllt;' stkrete ; G, grande rampe tip gaz; u, petite rampe do gaz; P, panier en iil de fer: E. rnarmile.

la capacitä de cette marmite; on met en place

L'AUTOCLAVE.

le panier contenant les objets ii steriliser, on udaplc lo couverclc el on visse les bouioos.

On ouvre le robinet U, et on allume la petite rampe de gaz ;/. Si la pression est trop forte, on modere Farrivee du gaz. L'eau contenue dans la marmite entre en ebullition; un jet de vapour sechappe par R; la temperature intörieure est -I- 100deg;, temperature qui pout etre maintenue pendant une heure au moins.

Veut-on maintenanl faire fonctionncr 1'auto-elave sous pression pour atteindrc les temperatures au-dessus do -f 100deg;? voici comment on pro-cede :

On met I'appareil en marcho comme il vient d'etre dit, puis, quand la temperature interieuro atteint -|-100^o, c'ost-a-dire quand la vapour sechappe violemment par le robinet R, on ferine colui-ci et on sorre a fond les boulons du couverclc.

L'appareil cnlre en pression, et l'aiguilie du manonietre montc lentement. Lorsqu'elle marque la temperature voulue, 10ö^o, llö⁰ etc., on regie l'arrivee du gaz par tätonnernent, en fcrmant jilus ou moius le rol)inet de la conduite, et on obtient ainsi pendant un quart d'houre, une demi-lieure, la temperature fixe voulue pour la sterilisation {I L

Lorsqu'on jugc la sterilisation süffisante, on steint complfetement le gaz, on attendqueTaiguille du nianometrc descende äO; on ouvre alors le robinet R; un leger sifflement indique la rentree de l'airdans la marmite; on desserre les boulons,

(I) Ho^t bou, dans In fonctionnpriiünt de l'aatoclave sous pression, de pratiquer une ou ileux dilentes dr. vapeur, comme cola se fait dans la manoeuvre des appareils de dcsinl'ccliou par la vapeur humide sous pression du srstamp;ne Herscher; pour cela, des quo l'aiguilie du manomctre commence :t raonter,ou ouvre le robinet R et on le renferme apres queliiues instants; on lepeto cctte manoeuvre une ou deux fois.

I.'aUTOCLäVE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; a9

on enleve lo couvorde ot on retire les objets sterilises.

Teile est la manoeuvre, vraimcnt simple, de l'autoclave, qui remplace ii lui soul toutos les etuves et tous los bains-marie plus ou nioins compliques dont s'est inutilement surchargee la technique bacteriologique.

Gil A PURE IV

EXPERIENCES SLR LES AMMAUX.

A.nbsp; nbsp;IIl? iNOcuLiLTiONS. Miitieres d'inoculation, Procedes divers d'inoculation: inoculations sous-cut;inees; inoculiitions iutra-p^ritoneales; inoculations dans les veiues; inoculations dans la chambre antcrieure deTceil; inoculations par les voios digestives.

B.nbsp; nbsp;Uecoltb des pnonulTS patholoc.iqces suit l'animal VIVANT.

C.nbsp; nbsp;Autopsie des scjets : tuaniere de fixer les divers sujets; Ouvertüre des cadavrcs; recolte des produits organiques {hutnours et tissus.

U. CüSSERVATUJN llES PIECES AN ATOMIQLES, li. Desineectiun DES CADAVBES.

Les aiiimaux sur lesquels portcront les experiences Ijacteriologiques sont presque exclusivo-ment le cobaye, le lapui, la souris, le pigeon, la poulc et 1c moineau.

Le chien, d'un si grand emploi en physiologie, esl röfractaire ä la plupart des maladies bactc-riennes que nous passcrons en revue : on n'aura done ijuc rarement 1'occasion d'experimenler sur lui.

Le moulon ct le pore sent exceptionnellement eniplo3'es ä cause de leur valeur pecuniaire, Quant

DES INOCULATIONS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 61

aux animaux de grande taille, ils sont beaucoup plus coüteux, par consequent plus impropres encore aux expediences simples de laboratoire : nous n'en parlerons done pas ici.

A. DES mOCULATIONS

Nous allons exposer rapidement la conduite

genorale ä lenir dans la pratique des inoculations; nous reviendrons en temps et lieu sur les cas spe-ciaux. Nous conseillons do se servir exclusivement pour les inoculations (les inoculations super-licielles, dermiques excepteos) de la seringue de l'ravaz. Elle pennet tin dosage exact de la matierc inoculee, eile cst d'un maniement facile, ä la difTe-rence de la seringue ä ballon imagiuee par Koch, seringue dont les pieces s'ajustent mal et laissent trop souvent fuir le liquide pendant les manoeuvres opöratoires; enfin eile se sterilise facile-ment si Ton veut bien choisir un liquide (jui, comme le cresi/l ou crioline, est un bon desinfec-tant et ne deteriore aucune des pieces de l'appa-reil. Dans 1'Intervalle des inoculations, la seringue de Pravaz sera remplie du liquide disinfectant; au moment oil Ton devra en faire usage, on chassera le disinfectant et Ton rincera plusiours fois le corps de pompe ;i I'eau distillee.

1. Matieres d'inoculation.

Les matieres d'inoculation sont de deux sortes : 1deg; Produits dcndtaic; 2deg; Produits pathologiques.

iquot; Produits de culture. Les cultures proviennent lantöt de milieux liquides, tantot de milieux solides.

PH. DE MICROBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 4

EXPKRIENCES SCR LES ANIMAÜX.

Pour les cultures liquides (bouillon, gelatine liqneliee), nulle dil'liculte. Recueillez purement (1) avec uno pipette Pasteur une portion du liquide de culture, versez-la dans un petit vcrre a, pied, ou dans une capsule bieu neltovee, ot remplissez votre scringue de la quantity voulue. II est facile, avec un peu d'adresse, et il est preferable, d'emplir directement la scringue do Pravaz a la pipette, en engageant I'extrömitö de l'aiguille dans Feffilure de celle-ci ot en aspirant.

Pour iuoculcr les produits de cultures sur mi-lieux solides (gelatine, gelose, serum, pomine de terrc, etc.) prenoz purement avec une aiguille de platine sterilisee uno parcelle do la culture, de-layez-la dans une petite quantitc de bouillon sterilise (l'opöration se fait dans une capsule de verre, etc.), et emplissez votre scringue de la quantitc voulue do ce melange.

2deg; 'Produits patkologiques. Ces produits sent egalcmcnt ou solides ou liquides.

Les produits liquides (sang, pus, liquides peri-toneaux, etc.) ayant etc recueillis purement dans une pipette Pasteur, d'apres une mcthodc quo nous aliens exposer ci-dessous, on ouvrira la pipette suivant un precede que Ton trouvera decrit dans la Technique gencrale des cultures, et on y puisera avec la seringue de Pravaz la quantite neccssaire ä l'inoculation.

Les produits patliologiques solides (fragments de rate, de ganglions, do muscles, de substances nerveuses, etc.) seront pour l'inoculation prepares de la facon suivante :

Plaeez le fragment dont vous voulez inoculer la

(I) On trouvera :quot;i I'article Teclmiijue gencrale des cultures tous leraquo; details aecessaires sur la maniere d'ouvrir purement les tubes ou matras de culture, et sur la mauiere d'ailer y prelever une (larcclte de la culture.

DES INOCULATIONS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;63

substance dans un petit mortier Men propre; versez Jans le mortier une petite quantity de ijouillon on d'eau sterilises; avec le pilon du mortier ecrasez le fragment dans le liquide; lorsqu'il est suflisament hroye, passez sur un linge fin on sur un papier liltrc, et rccueillez la substance filtree dans un petit verre a pied. Remplissez la seringue Pravaz de la quantity voulue du liquide iiltre.

II. Prooedes divers d'inoculation.

1raquo; Inoculations superßcielles, endemUqties. Apres avoir rase les polls de la region oü Ton vent effec-tuer 1'inoculation, on fait au bistouri de petites plaies paralleles, en ayant soin de n'intöresser quo la partie superücielle du derme. Lorsque I'hömor-ihagio, presque nulle d'ailleurs, acesse, on depose a la surface des scarifications la substance virulente, quo Ton etale par frictions.

2deg; Iiwoulalions sous-cutanees. Ellcs sont tres simples : Coupez les polls de la partie surlaquelle portcra I'inoculation; arrachcz quelques plumes s'il s'agit d'un oiseau. Tout lavagc avec la solution de sublime de la partie ainsi denudee nous parait inutile; si Ton desirait realiser une sterilisation parfaite de cette region, on y pratiquerait une cauterisation avec Fexlremite d'une baguette de verre fortement chauflee sur la flamme d'une lainpe a alcool, d'un bee Bunsen, etc.

L'animal etant bien maiutenu par un aide, faites un pli a la peau et enfoncez l'aiguille ä la base de ce pli. Poussez alors doucement la quan-tite de liquide voulue, quantitö qu'on aura marquee d'avance au moyen du curseur sur la tigo du pis-Ion, et assurez-vous que le liquide a bien penetre dans rhypoderme.

Chez les cobayes, les lapins, nous chcisissons

EXPERIENCES SUR LES ANIMMJX.

dquot;une facongöneralecommelieud'inoculation sous-cutaneo, la l'acc interne dos cuisses, on la paroi anterieure dc I'abdomen; cliez les sourls, la base de la queno ou la face interne des cuisses; chez les pigeons et les ponies, la region pectorale.

L'inoculatlon sous-cntanee cxige chez la souris, particulieremont lorsqu'il s'agit d'injecter une assoz forte quantite de liquide, un manuel opera-loire un pou special. L'introduction d'une aiguille ä pointe elTilee, comme laiguillc ordinaire, pent, causer des lesions mortelles chez ce petit animal lorsque I'aiguille est poussee un peu profonde-ment: on risque ainsi do faire peiuHror, par cxem-plo, laiguillo dans la cavite peritoneale, alors qu'on se proposait de faire l'injection dans le tissu cel-lulaire do la base de la cuisse.

Pour oviter tons cos accidents, operez do la facon suivante :

Prenez une aiguille ii extremite mousse, pou-vant, cela va sans dire, s'adapter sur le corps de pompe de la sorihgue da Pravaz. Introduisoz dans cotte aiguille un petit Irocart ä extremite pointne. Faites avec cot appareil une ponction dans lo tissu celiulairc au lieu choisi. Retiroz le trocart, laissoz en place raiguille mousse ainsi transformee en canule; adaptez sur sa grosso exlremilo la seringue de Pravaz remplie du liquide d'inoculation, et poussoz rinjeclion. L'aiguille mousse pourra che-miner aussi profondement qu'on le voudra dans I'hypoderme sans y causer de degats.

.#9632;5deg; Inoculations intrapdrilondales. Coupez les polls ou arrachez les plumes sur une certaine etendue de la region abdominale; cauterisez, si vous le voulez, la surface denudee avec 1'cxtreniito d'une baguette do vorrc fortemont chauffeo.

Contiez I'animal a un aide qui le maintiondra soli-dement; faites un pii qui compronne toute lepais-

DES INOCULATIONS.

Gö

seur de la paroi abdominale, ce qui est facile chez les animaux de petite taillc, lapins, cobayes, etc., dont nous traitons ici, et enfoncez raiguille ä la base de ce pli. Abandonnez le pli et assurez-vous que raiguille est libre dans la cuvite abdoininalo; ajustez le corps de pompe sur raiguille et injectez la quantile voulue de liquide.

L'inoculation Intraperitoneale prati-quee comme nous venons do le, dire est simple et n'offre aucun danger le plus souvent, chez le cobaye et le lapin; 11 n'en serait pas de _Ameme cliez le pigeon et les animaux de tres petite taille, chez lesquels on risquerait fort, par le procede indique, de blesser Tinlcstin et d'a-mener une perforation. Void un procede que nous devons ä MM. No-card et Houx, et qui met äl'abride tout accident. C'est sur 1c pigeon que nous le mettons en pratique ; il va sans dire qu'ilreussiraitdememe sur tout autre animal.

Les figures 21, 21 bis et 21 ter representent le jeu d'aiguilles necessai-res ä loperation.

A est une aiguille

Fig. 21. Fig

21 bi:

Fig. 21 ter.

creuseqnis'adapte d'une part sur la seringue de Pravaz et se termine de lautre par une extremite mousse. 1? estune aiguille

til)

EXPERIENCES SUB LES ANIMAUX-

crcuse termiiKJe par une extremite pointue, ct d'un Jiametro interieur tel qu'elle pent recevoir A. Ajoutons, et c'est lii le point esscntiel, quo la tige A cstplus longue quo la tige R, de teile sorte que rexlremite mousse de A, lorsque cette aiguille est engagee dans riuturieur de raiguille 1$, depasse de un domi-centimetrc environ I'extremiti; pointue de B.

Lorsqu'on veut pratiquer une inoculation intra-peritonealc sur un pigeon, on conlie I'animal a un aide qui lo tient le ventre en l'air et les paltes rauieru'cs en avanl.

Avecune äponge imbibce d'une solution desln-fectante on ecarte le duvet outre la pointe du sternum et 1c cloaque. On saisit enlre les mors dune petite pince anatomique la peau et la paroi mus-culaire abdominale sur la ligne mediane ä 1 centimetre du sternum, et on souleve la pince.

On a d'autre part dispose une aiguille ä coudrc porlaut un 01 trcmpe d'abord dans une solution desinfectante; on enfonce laiguille a. la base de la partie soulcvee par la pince, on passe le fd, qui traverse aiusi le peritoine et penetre dans la cavito abdominale; on abaudonne alors la pince.

Do la main gauche on saisit les deux extremites du lil, qu'on attire'en haut et en avant, et do la main droite on ponctionne avec raiguille I! a la base du pli; Taiguille B ne doit penetrer que tres peu dans la cavitö peritoneale.

On preud alors la seringue do Pravaz chargee de la matiere ä inoculer et sur laquelle on a adaptii Taiguille mousse A ; on engage A dans le canal de B et l'extremite mousse de A vicnt saillir dans le periloine en avant de li, dont la pointe est ainsi eutierement masqueo. On abaudonne le lil; la partie soulevee retombe; on retire le lil et Ton pousse I'lnjection : lout danger de perforation

DES INOCULATIONS.

intestitiale cst ccarte pur rctte petite vumaurre.

4deg; Inoculations dans lex veines. Ces inoculations precienses dans certains cas, que nous pr6cis6rons plus tard, se pratiquent aisement ehez le {aptn, la poulc et le pigeon.

Ici, plus quo dans tout autre mode d'inoculation, il no taut employer quo des niatieres soigncu-sement prcpai-ees, et liltrees : une embolie mor-telle serait le resultat de la penetration de tout fragment solide dans le Systeme circulatoire.

Chez les lapins, on choisit la raquo;eine du bord pos-tero-cxterm de I'orcUle, on fait saillir la veinc par compression digitale ; on introduit alors I'aiguille dans le vaisseau : une goutte dc sang sourd, indi-quant que I'aiguille cst en bonne place; on pousse alors doucement rinjection.

Si le liquide se repand dans le tissu perivascu-laire, I'iaoculation est mauquee; il laut la recom-mencer du cöte oppose.

Chez la poulc et le pigeon on pratique facilcment rinoculation intraveineuse sur la veine du bras : on arrache quelques plumes pour mettre ä decou-vert le vaisseau, tres saillant d'ailleurs et tres visible. On le fait gonfler par une compression ä la base du membre ct on opere comme chez le lapin.

'.)quot; Inoadations dans la chambre antrrieure de Vail.  L'lilisees dejä par Conheim, i)ar Baumgarten pour scs experiences sur la tuberculose, ces inoculations sontdevenues entre les mains de MM. No-card ct Roux le moycu s\mph: le plus efllcace de conferer la rage aux animaux.

La pratique de ces inoculations est simple : on insensibilisc d'abord la surface oculaire en y versant quelques gouttes de cocaine; on attend quelques instants pour obtenir I'msensibilisation complete, puis on faitpenetrer raiguille de laseringue dans la chambre anterieure et on pousse rinjection.

EXPElUEiNCES S'JR LES AMMAUX.

0deg; Inoculations pur votes digestives. Mett.ant ä part le procedo tout special de Koch pour I'ino-culation au cobaye du bacille-virgule, precede dont il sera question plus tard, lemoyen leplus simple est do faire peuetrer les substances virulentes avoc les aliments.

Les animaux inocules seront places aussitutdans dps cages; mention sera, faite sur une etiquette de la nature de la maladie inoculee, ainsi que de la date de roperalion.

B. RECOLTE DES PRODUITS PATHOLOGIQUES SUR L'ANIMAL VIVANT

Au cours de plusieurs maladies inoculees (tuber-culose, morve, farcin du boeuf, etc.) on pent avoir ä examiner du vivant de l'unimal certains produits pathologiques en evolution.

Le plus souvont 11 s'agit d'un ganglion superli-ciel, envahi par la maladie, a extirper, d'un abces sous-culane, ganglionnaire ou non, dont on vent se procurer le contenu pour I'exaiuen, la culture, ou une nouvclle inoculation.

Les ganglions superflcielss'extirpent facilement: on les traite ensuite comme nous le dirons en par-lant dos autopsies des sujets.

Pour les abces superflciels, voici comment il faut proceder : coupez les polls do la region qui re-couvre I'abces; avec une baguette deverre chauflee lortoment sur la flamme d'une lanipe ä alcool, cauterisez la region ainsi denudee : mieux quo tout lavage desinfectant, ce procede sterilisera la peau.

Prenezune pipette Pasteur, brisez-en I'extremite fermee, soit directement avec le doigt, soit, et

AUTOPSIE DES SUJETS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 09

c'ost mieux ainsi, avec le couteau ä verre; passcz deux ou trois fois reffilure dans la flamme de la lampe, de facon ä debarrassor sa surface exterieure de tons los gormes aeriens qui s'y sont deposes; enfoncoz l'effllure do la pipette dans l'ahces a tra-vers la paroi cutanee cauterisee, et aspirez le pus. Vous aurez ainsi recueilli puiemeut le contenu de l'alices.

C. AUTOPSIE DES SUJETS

1quot; Manirre de fixer les divers sujets. Pour les souris prenez uno planchotte de liege et fixez L'ani-mal ä la planchette, le venire en l'air, par quatre epingles plantöes sur les pattes etendues.

Les. moineaux seront tixes pgalement sur une planchette en liege par trois epingles; une traver-sera lo cou, les deux aulres seront plantees sur les pattes : inutile de dire que la partie correspon-dante ä la planchette est le dos, le ventre etant dirige en haut.

Les cobayes, les lapins, les poules, los pigeons, seront ötendus sur des planches de plus grande dimension en bois, en zinc, etc.; cos planches de-vront porter pres des angles, sur la face oü sera fixe l'aniinal, des crochets ou des clous ä extremitc superieure recourbee ä angle droit sur la partie s'enfoncant dans la planchette.

Les cobayes, les lapins seront disposes le ventre en l'air sur la planchette; sur chaeuno des pattes on nouera rextremite d'un lil ou d'un rnban, dont l'autre extremile sera attachee de court au crochet ou clou correspondant de 1'angle de la planchotte: il est nocessaire que les membros soient fortement otendus et les noeuds tres series.

Les piijeons et los poules seront etendus sur la planchette le ventre en l'air; on devra au prea-

EXPERIENCES SUR LES ANIMAÜX.

lable couper les ailes; 1c cou rocovra une anse de fil ou de ruban ; cette anse correspondra au milieu du lien dont les cxtremites seront ä droite et ä gauche nouees sur le clou ou crochet dont il a etu question. Les deux pattes seront ensuite atta-checs conunc il a etc dit pour les membres pos-tericurs des lapius et des cobayes.

La fixation des sujets äautopsier est fort impor-tante; on ne saurait bien faire une autopsie si rauimal est mal attache ou simplement dispose dans un plateau, une cuvette.

L'animal etaut lixv, on coupe soigneusement les poiis des lupins et des cobayes sur toute la face anterieure de la poitrine et de rabdomen; 011 arrache sur les meines regions les plumes desvola-tiles.

iquot; Ouvertüre des cadavres. Sur les lapins, les cobayes, hides une incision verticale allant de la fourchette sternale ä la partie inferieure tie rabdomen; dissöquez soigneusement la peau, et pour donner plus de jeu, prolongez rincision sur la naissance de cliacun des membres. Falles une bou-lonniere a la paroi musculaire abdominale sur la ligne mediane, et ouvrez alors cette paroi sur toute la longueur; la cavite abdominale sera ainsi mise a 1111.

Pourdecouvrirles organes thoraciques incisez le diaphragme, coupoz les cötes sur les parties late-rales, relevez et rabattez en haut le plastron costal aiusi obtenu.

Tel est le inanuel operaloire de Fautopsie ordinaire. S'il est necessaire de pousser rautopsie plus a fond, d'enlevcrles centres norveux par exemple, on procedera a cette operation, que nous n'avons pas ä decrire ici.

L'ouverture des cadavres des pigeon*, poules et moineaux se fera d'une facon un peu difierente :

AUTOPSIE DES SUJETS.

apres dissection do la peau on pratiquera unc incision courbe, profonde, partaut de i'cxtremitö sup6rieure du thorax, passant sur les cötes de la poitrine, descendant au-dessous de la pointe du sternum qu'elle embrasscra dans sa concavite, et remontant sur le cöte oppose du thorax; la partie interieure de cette incision ouvrira la cavitö abdominale au niveau du foie; im coup de cisoau sur la ligne mediane achevera en bus l'ouvcrture de la cavile abdominale; on decouvrira 1c thorax en sectionnant la cage osseuse dans la direction de riiicision; on coupera les doux clavicules, et le plastron thoracique sera rabaltn en haut et enleve.

De L'autopsie des gros animuux nous n'avons rien ä dire : eile se fait suivant les regies propres pour chaque cspece et sortirait du cadre de notre sujet.

3deg; lii'-colle des produits organiques. Humcurs ct lissus. C'est la partie essentielle de Tautopsie, celle qui doit fournir le micro-organisme a etu-dier, les matiercs de semeuce et d'inoculation : eile exigo des conditions de purete absolue.

jN'ous n'avons jusqu'ici, on 1'avu, prescrit aucun lavage dösinfeetant du sujet, aucune sterilisation de la peau ou des instruments d'autopsie; ces pratiques nous paraissent inutiles et superthics : ia technique que nous aliens indiquer realise dans la recolte des produits organiques toutcs les conditions de puretii desirables.

Envisagee d'une facon giiuerale, 1'operation com-prend trois temps :

A.nbsp; nbsp;Sterilisation parfaite de la surface de Vorgane qui doit fournir la matiere;

B.nbsp; Prise de la matiere d I'eHat de purete parfaite dans les profondeurs de l'organe;

C.nbsp; Conservation pure ilc la matiere recoltee.

A. La sterilisation parfaite do la surface de Tor-

EXPERIENCES SÜR LES ANIMA.ÜX.

gane s'obtient en cautdrisant cette surface avec Texlrrmitö d'une baguette en verre, fortement chauffäe dans la flamme d'une lampe a alcool, dquot;un

bee liunscn, elc.

B.nbsp; La prise pure de matiere se fait dans la pro-fondeur de l'organe, äl'abri de tout gcrme aerien, avec lino pipette I'asteur parfaitement slerilisee a. linlerieur et a li^xlerieur.

La sterilisalion de rinterieur de la pipette a etc realisee par le flambage dans le four Pasteur; an moment de se servir de la pipette on brise son exlremite fermee, on passe ä plusteurs reprises I'effilure dans la flamme de la lampe ä alcool, etc., de facon a en steriliser entierement la surface exterieure; on la fait penetrer dans l'organe du sujet aaniveaa de la surface cuuterisee et on aspire.

C.nbsp; nbsp;Pour conserver pur le produit recolte, on ferme a la lampe Textremite effilee de la pipette, et par surcroltde precaution, on chaulle fortement I'extremite par laquelle on a aspire. 11 arrive en effet quo, surtout lorsque I'operation a ete difficile et a exige des efforts d'aspiration, I'extremite superieure de la pipette se remplit de salive qui vient souiller le tampon d'ouate; il faut chasser cette salive et purifier entierement le bouchon d'ouate; e'est ce qu'on realise en chauffant fortement le bout ouverl de la pipette et ses parois, au niveau du tampon.

Teile cst la technique generale do I'operation; eile realise entierement les conditions de pureto exigees. C'est dans la profondeur de l'organe intact, nun ouvert, qu'on recolte les matieres; cette recolte se fait dans un instrument parfaitement sterile a l'interieur et a rexterieur, n'apportant ancun germe capable de souiller la recolte; enfin c'est a Iravers une surface sterilisee que I'mstru-ment penetre dans l'organe.

AUTOPSIE DES SUJETS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;73

Getto technique entiijrcment frangaise differe de la technique allemande, dont voici [quot;economic genorale :

L'organe du sujet etant soigneusement lave au suhlinic u 1/1 000, de facon ä debarrasser sa surface de tout germe, on rincise avec un bistouri sterilise, et on recueille les matieres avec des lils de platine sterilises.

Getto technique präsente les inconvenients sui-vants : la maliere a recueillir, matiore dont la pu-j'ete parfaite est indispensable, se trouve exposee a l'air, se souille et deviant inutilisable an hont de peu de temps; de plus il est impossible par ce pro-cede d'eu recueillir et d'en conserver puremenl unc certaine quantitö pour uno etude ullih'ieure. Toutcs les operations d'cxameu, d'ensemencement doivent etre l'aites sur-lo-champ et sans perdre de temps, sous peine de n'avoir plus qu'un produit impur.

Nous aliens maintenant entrer dans le detail et montrer comment on doit traitor chaquc organe oü Ton veut prelever de la mauere.

L'operaleur disposera pres de lui une lampe ä alcool, une on plusieurs baguettes de verre, un certain nombre de pipettes Pasteur, prealablement slerilisees, et un couteau a verre pour briser Tcx-tremite dos pipettes.

I. Abcbs superficiels soüs-cütanäs. On en re-cueillera le produit avant l'ouverture du cadavre.

Coupez les polls ä leur niveau, cautorisez la surface cutanee avec la baguette de verre, onfoncez la pipette, ouverte et flarabee ä l'extörieur, dans I'abces au niveau de la surface caulerisee, el aspirez. Fermez immediatement ou failes d'abord les operations d'examen, d'ensemencement neccs-saires, operations rpie nous decrirons plus loin.

PR. DE SIICR0B1E.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Ö

74nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; EXPERIENCES SLIR LES ANIMAUX.

2.nbsp; LiyciDEs i.NTHA-p^RiTONiiALX. La paroi inuscu-laire abdominale etant ä nu, cauteriscz un point de sa surface avec unc baguette de verre, faites en ce point une boutonniero avoc des ciseaux llambes, et glissez par I'ouverture la pipette ouvertc et flambee dans les regions laterales, entre le paquet intestinal et la paroi; aspirez doucement en promenant la pipette. Fermez immediatement ou aprfes avoir fait avec le liquide recueilli les exa-mens et operations nocessaires.

3.nbsp; Sang. C'est dans le caiur qu'il convient de prendre le sang. Incisezlc periearde de maniere a metlre a nu la surface musculaire du coeur, caute-risez sur run ou sur l'autre ventricule pres de la base, et enfoncez votre pipette ouverte et ilambee a travers la paroi musculaire dans la cavite ventri-culaire. Cette manoeuvre ne presente aucune difli-culte; Forgane fuit parfois sous la pression do la pipette, il suflil alors de le maintenir legerement avec la main en evitant de toucher a la surface cautörisee et ä l'effllure de la pipelte.

Des que la pipette a penetre dans la cavite ven-triculaire, le sang monte dans I'effilure; asjiirez pour emplir la pipette; retirez-la ot fermez imrae-dialement ou apres les operations necessaires (ensemencement, examen, etc.).

On pent faciloment recommencer Toperation et remplir unc seconde ou plusieurs autres pipettes, suivant Tcspf-ce et la faille du sujot; on suivra alors la voie deja frayeo apres une nouvelle cauterisation ä la baguette de verre, si ropcration est faite immediatement apres le premiere. Dans le cas oü la nouvelle operation ne serait faite qu'au bout d'un certain temps, il est preferable do puiser dans le ventricule encore intact.

4.nbsp; Hate. Dctachez cntierement la rate; saisis-sez-la entre l'extremite du pouce et de deux ou

AUTOPSIE DES SUJETS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;75

trois doigts de la main gauche, luissant saillir au-dessus de cos doigts unc dos extremites de l'organe. Caulerisez cette extremile avec la baguette en verre, enfoncez la pipette ouverte et flambee dans la profondour de i'organe, en ayant sein de nc pas perforer la capsule ailleurs qu'au iioint d'introduc-tion, et aspirez fortemmt en )nemo temps que des doigts de la main gauche, vous jircssorez douce-ment l'organe, de facon ä faire montcr la pulpe dans la pipette. II va sans dire quo la pression excrcee sur la rate, par les doigts de la main gauche, devra varier avec 1c plus ou moins de densite de la pulpe. 11 est des cas, le charbon par cxemple, oü l'organe est d'une friability teile que tout, son contenu pent etre aspire sans effort dans la pipette et oü une pression intempestive risque- . rait d'amener une rupture de l'organe, et par suite la non-röussite absolue de l'operation.

L'opöration est assez delicate, mais un tres court apprcutissage pcrmcttra d'arriver ii d'excellents resnltats.

ci. Ganglions. Los ganglions seront traites comme la rate; cauterisation d'un point de la surface avec la baguette de verre; maintien de l'organe entre le bout des doigls de la main gauche, aspiration avec la pipette aidee par la pression excrcee sur Vorgane par cos doigts, etc.

(i. Moelle des os. Brisez un os long, perpen-diculairemcnt ä sa surface, de inaniere a decou-vrir le canal medullaire. Cauterisez la surface de section avec la baguette de verre; faitcs penetrer profondement la pipette ouverte et flambee dans le canal medullaire et aspirez.

7. Foie. L'organe rcstant en place ou elanl detache, cauterisez sa surface, enfoncez la pipette ouverte et flambee, dans Fepaisseur du paren-chyme et aspirez.

76nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; EXPERIENCES SIR LES ANIMAL'X.

8.nbsp;Substance nerveuse. 1deg; Modle. Lc cordon iiK'dulluire etant mis a uu, ineisoz les moninges de faoon ä docouvrir la substance nerveuse, cau-terisezdircctcmenteelle substance avecla baguette de verre et aspirez dans la pipette ontoncee obli-quenient. au centre de eette substance.

2deg; ISulbe. Le procedu est exaclement le meme, on operera sur le plancher du qualrieme venlri-cule ou sur la surface des olives.

9.nbsp; Urine. I.iez I'urelbre ; eauterisez la surface de la vessie et aspirez dans la pipellc plongoe dans la cavite vesicale au niveau de la surface caute-rlsee.

(les exemples s'appliquant aux prises les plus ordinaires de malicres organiques dicteront la conduite atcnir clans les casque nous ne decrivons pas ici, conduite qu'il sera toujours facile d'inia-giner quand on connalt les principes generaux qui doivent servir do guides.

D. CONSERVATION DE PIECES PATHOLOGIQUES

liest souvent nöcessaire deconserver dos jiieces pathologiques. Tantöt il s'agit de liquide ou do pulpes pris sur I'anirnal vivantou sur le cadavre, et dont on ajourno les inoculations, les cultures, les examens h uno epoque ulterieureplusou moins eloignee (comme cela a Lieu dans une expedition scicntilique ou I'installation indispensable fait defaut sur los lioux); tantöt, ne pouvant examiner soi-nienio ces liquides ou cos pulpes, onveul. en faire I'envoi a quelque personne plus competmite; tantöt onlin on desire garder pour des experiences futures soit de la semence, soil de la matiere d'inoculation.

CONSERVATION DE PIECES PAT110LOGIQUES. Tt

11 arrive encore journellemcnt qu'aprfes une autopsie on desire conserver pour des coupes histologiques ultdrieures des fragments d'organes.

Un mot de la technique de res petiles operations, qu'il est indispensable do bien savoir pratiquer, est done necessaire.

1. Les liquides ot les pulpes peuvent etre conserves dans les pipettes memes oü ils out ete recueillis : cela so fait Journelleinent dans les laboratoires. La pipette remplie est fermee ä sou extreiuitö eflilee et munie d'unc etiquette indi-quant la nature de la uialiere qu'elle contiont; eile est döposce, l'efülure en has, dans un lube ä essai garni de colon dans sa partie profonde, de nianiere ä preserver reflilure de tout choc.

Mais lorsqu'il s'agit d'un envoi ou de la conservation d'une matiere qui perd ses proprirtes virulentes au contact del'air, il fautagir difieremment. Voici deux procedes utiles dans ces circonstances.

a. L'effllure do la pipette etaut remplie a, une hauteur plus ou moins grande de la substance donnee, on ferme son extrensile inferieure, puis tenant cette effilure horizontalement ou oblique-ment au-dessus de la lampe ä alcool on dirige la flamme de ceile-ci do teile facon qu'cllo tonde le verrc en un point voisin duniveau superieurde la substance recueillie, mais au-dessous de ce point: la separation se fera done de teile sorte que le petit tube constilue par Teffilure sera entiferement rcmpli par la substance ä conserver, et qu'il n'y restera pas trace d'air libre. Le petit tul)e sera depose alors dans un tube a essai garni de coton a ses deux extremites et porteur d'une etiquette indiqnant la substance contenue dans le petit tube.

ti. l.a pipette Pasteur teile que la represente la llgure 2, e'est-a-diro etrauglee en un point H au-di'ssous du tampon d'ouate, convient ä mcrveille

EXPERIENCES SüR LES AMMAUX.

pour la conservation, a l'abri de Pair, J'une quan-titc plus forte de substance, surtout quand cette recolte est dostinee ä un envoi.

On remplit la pipette jusqu'en B; on fond lo verre en B, puis on le fond au niveau du col de la pipette la on commence Teffdure. 11 ne reste pas d'air ou sculement unc trace qui sera bientut absorbee. On a ainsi un tube resistant qui pent etK! mis dans une boite garnie de colon et exprdie sans aucun risque.

2. La conservation des fragments d'organcs pour coupes se fait dans lalcool absolu, d'apres une teclmicfuc tres connue en histologie : I'essentiel est quo les fragments soiontde petites dimensions, un centimetre carre au plus.

E. DESINFECTION DES CADAVRES

L'autopsie terminee, il faut faire disparaitre le cadavre ou du moins ecarter tout danger provc-nant de sa virulence. Pour cela, plongez-le dans une solution do sulfate de cuivre ä 5 0/0, ou dans I'acide sulfuriquo d'apres le procede Aime Girard (1'acide est conserve dans des vases en plomb). On pent encore briiler le cadavre dans un petit four crematoire.

GHAPITRE V

TECHNIQUE GENERALE DES CULTURES.

A. CCLTDBE DES MICRÜUBS AEROIllKä.

I.nbsp; Culliiro duns les milieax liquides ; culture dans les liouillons, le lait, etc.

II.nbsp; nbsp;Culture clans les milieux solides tronsparentset demi-tpanspa-

routs : gelatine, gelose, serum. HI. Culture sur milieux opaques : pommes de terre. IV. Culture en plaques, li. Cultliie nES MicnonEs ASAEtioniKS ; Culture dans les bouillons, 1c

tail etc., sur gelatine, sur gelose. sur pommes dc terrc, en plaques.

Les cultures se font tantöt en presence de l'air, tantöt ä l'aljri de l'air, soit dans le vide, suit en presence d'un gaz inerte.

Le premier procede convieut aux microbes aerobics, 1c dcuxiemc aux microbes absolument on fa-cultativement anaerobies.

Nous decrirons done successivemont :

A.nbsp; La culture dca microbes aerobics;

B.nbsp; La culture des microbes anaerobies.

A. CULTURE DES MICROBES AEROBIES

Les milieux dc culture employes sont, ainsi que nous l'avons dit ailleurs, liquides on solides, et les

TECHNIQUE DES CULTURES.

milieux solides sont cux-memes transparents,demi-tramparenls, opaques. Nous aurons done ii trailer successivement de la culture sur ces differents milieux.

Mais avant d'aborder notre sujet, disons un mot de l'emploi do deux appareils qui sont les instruments essentiels do la pratique des cultures : la pipette Pasteur et 1c til de platine.

Pipettes Pasteur. Nous avons indiqne ailleurs (V. chap. II) ce qu'etait la pipette Pasteur, comment on la construisuit, comment on la sterilisait ä l'interieur : nous avons dit aussi duns une autre partie {V. chap. IV) quelles precautions on devait observer quand on se sort do cet appareil. Une rapide redite ä ce sujet ne saurait cependant etre inutile.

Pour faire usage do la pipette, preparez-la do fa-con suivante : prenez un de cos petits appareils prealablemcnt flambös dans le four Pasteur; deta-chcz-cn la pointe it) en laissant a l.'effilure une longueur variable : lorsque la pipette doit etre portee dans un vase a culture, matras ou tube, reffllure doit raster assez tongue. Flambez la surface exterieure do i'eftilurc sur la lampe ä alcool, de facon ä y detruire tons les germes atmosphe-riques qui s'y sont deposes pendant Fexposition ä Fair; la pipette est alors pröte pour I'usage voulu.

Fits dc platine. On doit avoir des tils do platine dedifferents diametres, et il est indispensable d'en posscder dont rextromite libre soil aplatie a la facon d'une petite palette (fig. 22 et 22 6?quot;s).

Les fits de platine doivent etre d'une longueur superioure a celle dos tubes a cssai; its sont mon-

(I) On detacho hi pointe d'une pijictte soit avec le doigt direc-toment, soil apres avoir marque un trait de lime ä l'endroit elloisi pour la coupure.

CULTURE DES MICROBES AEROlilES.

fes sur lo iiclit appareil connu en histologic sous le nom tic porte-aiguille, appareil dont la garniture en cuivrepermetde variera volonto la longueur du fil qu'elle cngaine, et assure la fixite parfaite de celui-ci.

Les Allemands montent ordinai-remout les fils dc plaline sur unc baguette de verre plein, et cette monture se fait cxtemporanerncut. Nous ne la conscillons pas, car il cst impossible avec clle do varier la longueur du fil; la fixite est uioius grande; et la pratique du llainbago fait a, tout instant eclater rextremilö du verre dans laquelle s'enchdsse 1c lil dc platine.

Lorsqu'on doit se servir du lil de platine, on commence par 1c steriliser, ce qui se fait en le por-tant au rouge dans toute son etendue sur la flamme de la lampe ä alcool, d'un bee Bunsen, etc., el on attend qu'il soil refroidi, ce qui n'exige, on le salt, que quelques sccondes; I'appareil est alors pre t pour I'usage voulu, mais il laut s'en servir des qu'il est froid, sam dilai, sous peine de perdre tout le benefice de la sterilisation.

En regle ahsolue, des quo le lil de platine a etc mis en usage, il iloit itre soigneuscmeiU stärüisi, de facon ä ce qu'il no reste ä la surface aucune parcelle de substance virulente.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; Fig. 2

TECHNIQUE DES CULTURES.

I. Culture dans les milieux liquides. Culture dans les bouillons.

Nous no parleroris dans cot article quo de la culture dans les bouillons; ce que nous en dirons sera faciloment applique, s'il y a lieu, au lait, ä Vurine, aux liquides minamp;raux, etc.

On prend un matras Pasteur conlenantun bouillon sterilise suivant les regies indiquees, et ayant, sans se troubler, supporte repreuve d'un sejour prolonge a l'etuvc entre I3ö⁰ et 40deg;. La technique ireneralc de la culture qu'on se propose de faire dans ce bouillon comprend deux operations:

A.nbsp; Vensemcncenn'ul;

B.nbsp;Lamise a la temperature vouhte.

A. Ensemencement. Cette operation comporte :

a)nbsp; L'ouverture du matras;

b)nbsp; nbsp;L'ensemencement proprcment dit, e'est-a-dire lquot;acte de deposerla semence dansle bouillon;

c)nbsp; La l'ermeture du matras.

Savoir ouvriret fermer purement un matras, e'est-ä-dire de facon a n'y introduire aucun gcrme etranger, ost chose essentielle; qu'il s'agisse de porter ou de prelever la semence dans le matras, la manoeuvre est identiquement la meine; eile exige les memes precautions.Nous aliens, une lois pour toutes, decrire la mauiere de l'executer.

Pour ouvrir un matras, placez-le dans la paume de la main gauche tenue horizontalementjiMcimez-le de teile facon quo son venire repose dans La paume de cette main, et quo son col fasse avee celle-ci un angle de 4;i⁰ tout au plus.

Maintenez le matras en position avee le pouce el las doigts de la main gauche. Debouchez-le de la main droite. lonez le bouchon entre le troisiemeet le quatriemr doigls de la main droite, et, sans chaiKjer la position du ballon, sans bouger la main

CULTURE DES MICROBES AEKOlilES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 83

qui le tient, efl'ectuez Foperation (ensemencement on prelevement de semence).

Pour fermcr le matras, rebouchoz-lc, mainte-nant toujours et Vinclinaison du ballon et Yimmo-bilitc do la main; quaml il est bouche, vouspouvez le redresser, mats seulemenl alors.

En ouvranteten fermant le matras suivant cette technique, vous evitcrez quo les poussieros atmos-plieriqucs no viennent en souiller le conlenu.

L'ensememement proprement dit consiste, des que le matras est ouvert, u porter avec la main droite la semence contcnue dans une pipette Pasteur on a rextroraite d'un fil de platlne stihnlise sur le fond du ballon. On depose en cct endroit rapidement la semence, et on retire aussitot la pipette on le fil de platine.

Les matras ensemences doivent etre pourvus tout aussitöt d'une etiquette indiquant la nature de la culture, sa provenance, et la date de rope-ration.

Teile est la techniquegändrale de 1'ensemencement d'un bouillon; nous aliens maintenant passer en revue les divers cas qui peuventse presenter dans la pratique de cet ensemencemont.

1. Ensemencement immediat des produits recueillis ä l'autopsie. Ces produits sont, ainsi que nous i'avons dit (V. chap. IV.) recueillis dans des pipettes Pasteur. Des que la semence est prelevee dans 1'organe, scms fermer la pipette, prenez un des matras Pasteur que vous aurez places a votre police, disposez-le dans la main gauche, ainsi qu'il a ete dit, debouchez-lc et portez rapidement I'extremite fie la pipette surle fond.Si la semence est liquide, une goutte tomhera d'ellu- meme en donnant ä la pipette une legere inclinaison; si la semence est plus epaisse, souftlez a travcrs le tampon d'ouate par la grosse extremitd de la pipette, de facon a

84nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;TECHNIQUE DES CULTURES.

faire tomber unc parcelle de cetto semence sur 1c fond du niatras.

Dans cci'tains cas (quelques lesions tuberculeu-sos par exemple), l'ensemensement des pulpes exige certaines precautions prualables; il faut broycr la pulpe pour mettreles bacilles en liherle ; on devra, dans cos cas, renoncer a I'ensemenc'e-ment immcdiat, fermer la pipette, et agir comrno nous allons le dire ci-dessous.

2. Ensemencement tardif des produits recueillis ä l'autopsie. Dans ce cas les pipettes ont ete fer-inees et c'est dans leur intörieur qu'il faut aller prelcver la semence.

Disposez a votre portee 1c matras ä ensemencer, une pipette b ou un fll de platine. Prenez la pipette A qui renferme la semence, enfoncez le tam-pon d'ouate dans rintericur du tube jusqu'a petite distance dela face superieuredela semence; faites sur le verre, au niveau du milieu du tampon d'ouate un trait de lime circulaire, et coupez en cct endroit la pipette avec le charbon de Berzelius ou une pointe de verre rougie ä blanc sur le ehalu-meau a gaz.

I'reparez alors la pipette 15, e'est-a-dire brisez son oxtremite eflilee et flambez sa surface externe, ou le lil de platine, c'est-ä-dire jiassez-Ie dans la llamme.

Enlevez le tampon d'ouate de la pipette A que vous venez de couper, tlambez son extremite ou-verte (1) el portez la pipette B, ou le fll de platine, dans l'effilure oü est contenue la semence.

(I) Cetle pratique ost fort importante : elie a pour but ile de-truire tous Irs germes qui se sont deposes sur ia surface exti-rieure de la pipette au niveau du poiut oü Ton a fait Touverlure. Ces ger-fu-'s pourraieut souitier rextremite de la pipette B ou du til de platine si.au moment oil OD va ies porter dans reffilnrede la pipette A, ces instruments venaient ä entrer en contact avec cette surface.

CULTURE DES MICROBES AEROB1ES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;85

Si vous faites usage de la pipette pour prelever la semence, operez Je la facon suivante : la main gauche tenant la pipette A, aussiinclin^eque possible, avec la main droite portez l'effllure de la pipette 15 sur la semence et aspirez.

Itejetez aussitotla pipette A, et, sans deposer la pipette B, qui restera dans la main droite, saisis-sez 1c matras, disposez-le dans la main gauche, ouvrez-le et portez-y la semence.

Si vous faites usage du fit de platine, il sera commode de placer horizontalement la pipette A de-boucliee, onverte et llambee a son extremite entre deux des doigls de la main gauche ; dans cette memo main on disposera le matras, on le debou-chera, et la main droite tenant le (il de platine sterilise le plongeradans l'effilure de la pipette A, et immediatement apres le portera dans le matras.

Dans certains cas, avons-nous dit, la pulpe doit etre broyeeavant d'etre ensemencee. Cette pratique a pour but de mettre en liberte les microbes em-jn-isonnes dans les tissus. L'operation sc fait faci-lement avec un lil do platine fort, de diametre un peu inferieur au diametre Interieur de reffilure de la pipette qui contientla semence. On introduit le 111 de platine ^Irrilisc et ref'roidi dans reffilure de cette pipette coupce, ouverte et flambde, comme nousl'avons dit ; on imprime au til de platine des mouvcmcnts de rotation, de va-et-vient, et lors-([u'on juge que la trituration est süffisante, on procede ä l'ensemencement du matras soil avec ce meme lil de platine, soit avec une pipette qu'on plonge dans la substance broyee. Une precaution fort importante h observer est de laisser Textre-mile du lil de platine cachee dans reflilurc de la pipette, si on sc sertde cetappareil, jusqu'au moment precis de l'ensemencement.

3. Ensemencement de matras a matras. Dans

TECHNIQUE DES CULTURES.

un malras A contcnant la culture donneo, pröle-vcz pvrement avec unc pipette quelques gouttes de liquide.

La manoeuvre est simple : nous en avons indique, en traitant do la facon d'uuvrir et de ferner pure-ment lesmati'as, les elements esscntiels.

Ouvrez done purcment le matras A; allez, avec une pipette bion flambee ä l'extorieur, cueillir quelques gouttes du liquide qu'il conticnt; fermez lo matras A, prenez immediatement, et sans de-poser la pipette (1), le matras Ba ensemencer, ou-vrez-le ot portcz-y une gouttc de la semence dont est chargee la pipette.

4. Ensemeiiccment dans un hmrillon d'une culture provenunt d'un milieu solide. Que la 'culture pro-vienne d'un tube gelatine, de gelose, do serum, d'une pommc de terre, la technique est la memo. Recueillic purcmout avec un fil de platine, sui-vant des precedes que nous indiquerons en traitant dos cultures sur milieux solides, la parcelle do culture priilevee est portee tout aussitot dans le matras 1'asleur, en observant toutes les precautions de regle.

B. Mise de la culture ä la temperature voulue. La temperature exterieure avec ^es variations in-tinics, ses minima tres bas, convient pen au de-veloppement cyclique parfait des cultures. 11 est done necessaire do soumettro celles-ci, quand le milieu de culture tie s'y oppose pas, ix uno temperature de 33 ä 40deg; qui permettra une multiplication reguliere, normale et rapide des germos.

L'etuve de M. Pasteur representee ci-coutre

(i) 11 arrive parfois qu'une pipette charjröe ile semence ne pent -#9632;#9632;tre ulilisee immediatement, niiiis seulemont apres un court lielui; ilconviendra liiin? ce (ms de cejeter. eil leä laissant ecoulcr de l.i pipelte sur un papicr-filtre (que Ion brülera onsuile) les premieres gouttes de laselneoce; oa ensemeacera ensuite Sans crainte.

CULTURE DES MICROBES AEROBIES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; HI

(fig. 23) remplit partaitement le but, et se prole

Fi;;. 2:1. Etuve Pasteur.

aux temperatures jusqu'ä 4.^:i⁰. C'est une etuve en hois, avec double paroi, double porte vitrec,

TECHNIQUE DES CULTURES.

chiiulTee par la vapeur d'eau circulaut a la partie infeiieiuo de l'ötuve, co quipennet d'obtenir des tempdratures diffdrentes d'environ 2quot; par elairo, allant en docioissant vers la partie supörieure de l'etuve. üappareil dechauffagccst en cuivre braslaquo; ct est numid'un rögulateur.

Les matras enseinences seront done places dans ['(#9632;hive Pasteur; on choisira l'ötage (jui convient le mieux ä la temperature clierchee; un thcrmo-metre devra toujours, a cet effet, Stre place a chaque etage.

Pour certaines experiences (et nous citerons ici l'attdnuation des virus, la recherche du degre de resistance a, la chaleur etc.) il est de toute neces-sito d'avoirdes eluves avec regulateur permettant de lixer la temperature, d'une facon invariable pendant un temps iiidelini. Cette condition est entiereinenlrealisee parl'appareil de M. le D^r d'Ar-sonval represente ci-contre ct ([ue nous aliens sommairement decrire, tol que Font fait les der-nieres modifications que I'auteura apportäes a sa construction (fig. 24).

L'appareil ä doulde paroi se compose d'un cylindre vertical termine i)ar deux cones. L'etuve s'ouvre par une porte laterale, et est divisee par une tablette eu deux etages independants. Le cöne inferiour porte le rigulateur entiercment metal-lique et les deux brCileurs munis chacun d'un ro-binel d'arret. Le cöne superieur porte ä son som-met la douille par laquelle se fait I'emplissage.

L'espace annulaire qui existo entre les deux corps de Teluve est rem])li d'eau.

Cetlceauest chauffee par la flamme des brüleurs qui s'engage dans des tubes traversant le liipiide, mode de chauffage analogue a celui d'une cliau-diere tubulaire.

Pour mcttrc l'appareil on marche, on verse par

CULTURE DES MICROBES AEROB1ES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 89

Fig. -i. Etuve de d'Arsonval.

TECHNIQUE DES CULTURES.

la douille centrale situce au sommct du cöne su-pörieur, do I eau bouillic nicemment, c'est-ä-dire privüe d'air. Onallumo los brüleurs.

Quand on veut fixer unc temperature, il sufilt do boucher cotte douille avec 1c bouchon qui porl.e un tube do verrc vertical; ce reglagc est fait uno fois pourtoutes pourune tempörature determinee. Si on etoint I'eluve, ello rctombcra exactement au meine point quand on la rallumera : I'appareil par sa construction metallicjue est indereglable.

Lors done que Ton voudra faire agir sur unc culture en milieu liquide une temperature fixe et devant etre maintenue tolle pendant un temps determine, on placera lo matras qui contient la culture dans lY'tuve de d'Arsonval (11.

II. Culture dans les milieux solides transparents et demi-transparents.

Cos milieux sont, ainsi qu'on le salt, la gelatine, la gelose (simple ou additionnöe de glycerine, glycose, dextrine, etc.) et le serum.

La culture dans I'un quclconque de ces milieux comprend deux operations :

1deg; L'emcmcnccment du tiiilieu:

2deg; Ln mise a la tempirature roulue.

La gelatine, la gelose et le serum sont ren-fermes, pour la culture, dans dos lubes d'essai bouehes a I'ouate.

(I) [,es objets placsect;s dans des ötuves (Pasteur, d'Arsonval, etc.) :i air ne se niettent que tres ieiitenient eu equilibre de tenipei-atiire avec I'air ainliiant. C'est un inoonveuiciit grave, lorsqu'on veut pre-parer des vaccius, etudier rinduent-e d'une temperature denude pendant un temps long sur tel ou tel microbe. II faul alors ou employer des ballons sejamp;uraant depuis plnsieurs jours a la temperature determinee, on. ce qui vaut mieux. les plongera demi rlans lean d'une etuve i eau munie d'un regulateur quelconque [Schlösing, Koux. etc.).

CULTURE DES MICROBES AEROÜIES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 91

Ensemeivw un de ces tubes comprend trois phases:

o) L'ouverlure du tube;

6) L'ensemencement proprement dit, ou inoculation, c'est-a-dire I'acte do deposer la semence dans IVpaisseur on ä la surface du milieu;

c) la fermeture du tube.

Indiquons tout d'abord, et en tete dc cet article, la manieiv d'ouvrir etdc fermcr un tube de culture purcment, c'est-ä-dire de faoon a, n'y introduire aucun germe etranger. Qu'il s'agissc dun tube dc gälatine, de gelose ou de serum; qu'il s'agissc de porler la semence dans le tube ou dc ly prelovcr, la technique est la memo : en I'exposant ici nous evilerons des redites incessantes.

Pour ouvrir purcment un tube do culture, placez-lo entre le pouce et Tindex gauche, le pouce en dessus, I'index en-dessous; donnez-lui entre ces deux doigts une position ou horizontale ou ä peine inclinee (1); enlevez le bouchon d'ouate, en lui im-primant un mouvement de torsion, avec la main droite,. et placez-le entre deux des doigts de la main gauche.

Des qu'il est debouche le tube doit roster im-mobilc dans la main qui le tient, et celle-ci doit pendant toute roperation, quelle quelle soit, garder une position invariable. On evitera, en suivant strictement ces regies, que les germes atmospheriques no viennenl souiller la surface du milieu do culture.

Pour former le tube, replacez le bouchon et seu-lement alors redressez 1c tube; chaulTez ensuilo fortement los parois du lube au niveau du tampon

(1) Hans le fas tout particuller oil roperation porte sur un tube de gelatine liqueflee il va siiiigt; dire que la position ä ilonner ne pout etre I'linrizijutale. On se boraera ü placer le tube dans uue [io-sitiou aussi peu incUnee que pussible.

TECHNIQUE DES CULTURES.

d'ouate sur la flamme de la lampe a alcool, en ayant soin do no pas carboniser 1'ouate ; cc flam-bage dötruira Ions les germes dont le tampon ouateauraitpu secharger pendant son exposition a I'air. luifin pour preserver l'ouate de touts sonillnre nlterienre, pour evitcr Tevaporation, coiffez le tube du manchon de papier iillre dont il etait pourvu avaut roperation, on d'un capu-clion de caoutchouc : cette dcrniere pratique doit etre preltree quand il s'agit de cultures qu'on veut garder longtemps.

CULTURES SLR LA GELATINE.

La gelatine eslreparlie dans les lubes d'essai Je deux facons, ainsi quo nous 1'avons dit ailleurs.

(a) Elle forme un cylindre remplissant exacte-ment le tiers infericur du tube;

(6) Elle est elalee on couche oblique reposant sur une seule paroi, et allant en s'amincissant vers la partio superieure du lube.

Nous designerons, par ellipse, les tubes dc la premiere categoric sous le nom de tubes droils, eeux do la deuxieme sous le nom do tubes obliques.

Les lubes droils seront ensemences par piqiwe; les lubes obliques seront ensemences par strie.

ENSESIENCEMENT DK LA GKI.AT1XE PAR PIQURE.

{quot; Techniqueginirale. Le tube do gelatine etanl ouvert avec toutes les precautions do regie, portez avec la main droite le 111 do platino sterilise et charge de la semence a son extremile dans Tin-terieur du lube, et piquez-le droil dans Taxe du cylindre gölatineux, on ayant soin do 1c pousser jusqu'au loud du tube; cecifait, retirezdoucement le ill do platino, et fermez le tube.

2deg; Technique des divers ensetnencemenls pur piqiire dans hi yeluliite. Coraine nous I'avons fait pour

CULTÜKE DES MICROBES AEROBIES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; n

les ensemenceme'flits dans les milieux liquides, nous allons pusser rapidement eu revue les cas diver? qui se prösentenl. dans lu pratique des ensemencements par piqüre.

1. Ensemencement des pi^oduitsrecueiUis (il'autopsie. Ces produits sont contenus dans des pipettes fermees, rensemencement immediat et direct avec la pipette n'etant i)as possible ici comme il l'etait pour les matras.

L'operation comprend deux temps : on va d'abord, suivant la techaique que nous avons exposöe ailleurs, cueillir avec le lil de platine stirilisd, la semence dans la pipette ouverte etflambie ä son extrömitö; puis on porte par piqure cette semence dans le tube de gelatine.

#9632;gt;. Ensemencement d'une culture provenant d'un milieu liquide. Ouvrez purement le matras qui contient la culture; avec le lil de platine sterilise allez cueillir une goutte de liquide, et piquez-la dans le tube de gelatine.

3. Ensemencement d'une culture provenant d'un milieu solide transpai'ent ou demi-opaque. l^a technique csl la meine, que le tube oü Ton va puiser la semence soit im labe de gelatine, de gelose ou de serum, et qu'il contionne ces milieux nulritit's sous forme de cylindro droit ou sous forme de couche oblique.

l'lacez les deux tubes, le tube qui porte la culture et le tube a ensemencer, cöte ä cöte entre le pouce et l'index gaucUes, le pouce elant en dessus et donnez-lcur une position exaclement horizontale, ou tres legerement inclmcc. Kulevez les bouebons d'ouate de Tun et l'autre lube, et posez-les entre les doigts libres de la main gauche dans le meine Intervalle ou ä des intervalles differents. Avec raiguille de platine slerilisce, allez puiser la culture dans le lube ensemence, et piquez-la imme-

94nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;TECHNIQUE DES CULTURES.

diatement dans i'autre tube. Achevcz Toperation en fermant uussitöt les deux tubes.

Uh cas particulier est celui oü la semence doit etre puiseo dans un tube de gelatine liqnellee; il raudradans ce casdonner aux deux tubes disposes entre le pouce et l'iudex gaudies, non ]ilus la position horizontale quo la liquel'uction de Fun d'eux rend impossible, mais unc position aussi voisine fju'il se pourra de Vhorizontale.

L'operation so fera d'ailleurs, sauf cette modi-lication, comme nous FaTOns indique ci-dcssus.

4. Ensemencement d'une culture provenant d'un milieu opaque, Allez prendre purement (nous dirons plus tard de quelle faeon) sur la poinme de tcrre, etc., unc parcoile de semence, a I'aide da lil de platine sterilise, et piquez-la dans la gelatine.

EN SEHEN CEMENT LIE LA Gamp;ATINE PAR STR1E.----Ell

regie generate, pourroussir un ensemencement par strie, il Caul, choisir de la gelatine tralchement prepareo. La gelatine ancienne s'ecaille sous la pointe du lil de platine ou sous la friction de la palette de platine et 1c resultat obtenu est defec-tneux. Cette regie s'applique egalemcnt a la gelose.

1deg; Technique gindrale. Le tube etant ouvert, introduisez le fit ou la palette dc platine charges do la semence, et promenez-en doucement I'extre-mite sur la surface dc la gelatine de la profondeur du tube vers rouverture. La strie pent so faire aussi a I'aide de la pipette chargee do semence liquide, et dont on promenc doucement Textremite fine-ment effllee sur la surface gelatineuse : une goutte de semence se depose en trainee.

2deg; Des divers ensemencements par slrie sur la gcln-tine. Ce serait une reditc inutile que de decrirc ici rensemencement par strie sur la gelatine dos

CULTURE DES MICROBES AEROB1ES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;93

produits reeueillis ä l'autopsie dans des pipettes,

des cultures provcnant de milieux solides, transpa-rents, demi-opaqiies et opaques. La technique spe-ciale est la memo en tout point que dans le cas d'ensemeucemont par plqiae, et nous prions le lecteür de s'y reporter. Senl le mode d'inoculation differe : le lil de pialine porteur de la semence est promeue sur la surface de la gelatine, au lieu d'etre pique dans son epaisseur.

Pour les produits en provenance de milieux de culture liquides ou liquelies (gelatine liquetiee) nous conscillons de rejeter 1c lil de platinc et de proceder avec la pipette de la facon sulvante : effllez tres finement sur la lainpe a alcool rexlvemitc d'une pipette, de facon a la terminer pflir un tube capillnirc dont vous briserez la pointo. Allez cueillirpurement avec cotte pipette, dansle matras de bouillon ou dans le tube de gelatine liquetiee, quelquesgouttesdu liquide do culture; introduisez la pipette dans le tube de gelatine, et promenez son oxtrenute sur la surface de la gelatine : le liquide s'y deposeraen fine trainee.

Co precede elegant nous conduit h parlor d'une methode genorale de transplantation des cultures en provenance d'un milieu solide, quel qu'il soit (gelatine, gölose, serum, pomme dc terre) sur un nonveau milieu solide, quel qu'il soit.

Le precede quo nous avons decrit pour transporter sur la gelatine une culture sur milieu solide on provenance de la gelatine, do la gelose, du serum, de la pomme do terre, so resume en ceci : aller avec un lil de pialine recueillir la semence sur le milieu solide, et la piquer dans le cvlindre gelatineux, ou la deposer en trainee sur la surface etalee do la gelatine avec ce lil do platinc

Ce precede est bon et correct, mais il presente le

96nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; TECUNIQUE DES CULTURES.

legor inconvenient que voici : la semence fait une trainee apparente sur le nouveau milieu, etI'obser-vation cle son dovcioppoment s'en trouve gönöe.

Pour (hiter cet inconvenient, qui se reproduit avec la f,'elose, le secum et la pomme de terre comme avec la gelatine, procedez de la facon sui-vanle ;

Recueillez avec un iil de platinc sterilise la semence sur le milieu solide; portez-la dans une pipette sterile A quo vous aurez remplie de bouillon sterile el qui, pour recevoir la semence, sera coupes, ouverte et llanibee comme il a ete dit bien des t'ois. Hepandez la semence dans le bouillon en agitant le liquide avec le iil de platine.

HeLirez alors le Iil de platine qui ne porte plus aucune parcelle compacte de semence ä la surface, mais est seulement mouille par le bouillon en-semencö, et piquez-le dans le tvibe de gelatine droit qui doit elre onsemence.

Si Toperalion doit porter sur la geluline, lagdlose, le serum a surface obliquement elah'e on sur la pomme de terre, introduisez dans la pipette A oü la semence vient d'etre delayeo une pipette 1? fincment effdre a son extreinito; euelllez quelcjues goutles du liquide de A etportezla pipette B dans le lube de gelaliue, gelose ou serum, ou sur la pomme de terre; la pipette promenee a la surface de ces milieux y deposera le liquide d'ensemence-meut en fine trainee.

Gelte manoeuvre, qui esl infiniraenl moins com-pliqueeque la description ne le laisserait supposer, donnera avec un pen d'adresse et d'habitudc d'excellents rcsullats : la semence elant deposee sous forme insensible a la surface du milieu de cull ure, son developpement sera aussi facile qu'in-teressant a suivre

Les cultures sur gelatine, precicuses parce

CL'LTURE DES MICROBES A.EHOB1ES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 07

qu'elles permettent d'observer des formes dc developpement souvent caractöristiques, out I'in-conveuiout de ne pouvoir 6trc portöos a l'iHnve, oil ellcs se liqu6flent; dies serout done laissöcs a la temperature atmosph^rique, et phicees soil dans des vases garnis de coton au fond, soit dans des supports en bois.

CULTURES SUU LA GELOSE.

La gelose cst, ainsi quo nous I'avons dit, repartio duns les tubes ä essai soit en cylindre plein, soit, etplutdt, en plaque etalee. Tout ce que nous avons dit sur rensemenceinent des tubes de gelatine par piqilre ct par strie, sur la iiianierc d'ourrir et de fenner purcment les tubes, d'y transporter la semence de provenances diverses s'applique absolument aux cultures sur la gelose : il cst done inutile dc re-peter ici 1'article precedeut.

Les cultures sur gelose seront mises ä reluve Pasteur, ou ä l'etuve d'Arsonval suivant le cas.

ciLTinEs sun skkum.

Nous pouvons dire de la culture sur le serum ce cjue nous disions de la culture sur la gelose, e'est-a-dire renvoyer le lecteur pour la pratique de ccs cultures ä notrc article sur la gelatine.

Ajoutons seulement que le serum ne so eultive que sous forme etalee; son peu de transparence en ferait un milieu impropre a l'obscrvation du developpement des cultures, sül etait reparlidans les tubes en cylindre plein.

III. Cultures sur milieux opaques. Ce mode de culture comprend la culture sur

PH. DE .lilCUOUIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 0

TECHNIQUE DES CULTURES.

pom mo de tone, etc. Nous no parlerons ici quo Jo la culture sur pomme de terre : on appliqtiera mix autres milieux opaques tout ce quo nous dirons do la ponune do tcrre.

On doit, nous I'avoiis dit au chapitrc IV, cul-tiver la pomme do terre suivant deux precedes.

1deg; Enpetits ciistallisoirsclos, suivant la mäthode de Koch modifiee;

2deg; En tubes d'essai, d'apres la molhode de Uoux.

1quot; Cultihe kn CRisTALLisoms clos. La technique generate differe tres legerement suivant quo le cristallisoir ost ou non muni d'une Ouvertüre laterale.

o)Cnsiaifeoirs sans ouverture laterale. Soulevez obliquement, et tris pen, le couvercle du cristallisoir; portez la pipette ou 1c lil de platine charges de lasemence surla surface de la pomme do terre el deposez, en tracaut des stries supcrlicielles, la semence sur cette surface. Replacez le couvercle, et portez 1'appareil a I'otuve.

h) Cristallisoirs ä ouverture laterale. Enlevez le tampon d'ouate qui garnit rouverture; glissez par roriflce la pipette ou le fil'de platine porlant la semence, et deposez cette semence en stries sur la pomme de terre; replacez le tampon d'ouate apres I'avoir passe rapidement dans la flamme, et portez I'appareil a I'etuve.

.Nous conseillons d'em[doyorla pipette k extri-mitc finement efßlamp;e pour l'ensemencement des pommes de terre aussi souvent qu'il sera possible de le faire. Avecla pipette on portera directement surla pomme de terre los cultures provenant do milieux liquides ou liquefies; on y portera aussi suivant la metliode generale que nous avons exposec ci-dossus Ions les produits de culture en provenance de milieux solides.

Lc fil de platine et surtout la palette de platine

#9632;

CULTURE DES MICROBES AEROBIES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 99

seront employes ii defaut de la pipette, et dans les circonstances oü cclle-ci est inutilisable; its rom-plissent d'ailleurs parfaitement le but.

2deg; Mi'rnioDE de Rodx. Dans les tubes contenant tine tranche de pomme de terre, tubes dont la forme et la preparation out, ete decrites ailleurs, I'ensemencement est d'une extreme facilite, et se fait comme dans untuhc de gilatine ou de gilose.

Ouvrez le tube qui contient la pomme de terre avee les precautions d'usage, c'est-a-dirc en lui donnant une inclinaison teile que les germes atmospheriques no puissent y tonibor. Portez la semencecontenue dans une pipette finementeffllee, ou ä I'extremite d'nn til de platine, sur la surface de la pomme de terre, et deposez-la en tracant quelquos strios superliciolles.

Uebouchez le tube, flambez 1c verreauniveau du tampon d'ouate, couvrez Fextremite d'un capuchon de papier filtre ou de caoutchouc, et portez ä l'etuve.

Tel est ce precede qui fait de la culture sur pomme de terre, autrefois si compliquee, si peu sure, un precede qui egale en simplicity et en sürete la culture sur milieux transparents.

IV. Cultures sur plaques.

Nous aliens decrire ici un procedc tout, special, imagine par Koch, et qui, malgre quelques imperfections, rend les plus grands services.

La culture sur plaques se fait soil, dans la gelatine pure, soit dans la gelatine additionnee d'une petite quantite de itelosc, ce qui rend le milieu plus rapidement solidifiable, et moins facilomeut liquetiable aux liautos temperatures de Fete.

Le principe general de la methode est le sui-vant :

100

TECHNIQUE DES CULTURES.

On repand dans une faible quantity de gelatine

fou do g('latiiic-gelose) liqueliee un nombre de germes anssi faiblo que possible. Puis on fait so-lidifler le milieu en Fetahmt sur une surface plane. Los germes se diffusent et se developpent, chacun isolemeul, lä oil ils out ete einprisonnes par la solidification.

La culture sur plaques se prete admirablement a trois operations :

1deg; Isolement des divers germes contenus dans nn milieu quelconque : eau, sol, matiercs fecales, tissus, etc.

2deg; Puriflcation d'une culture impure par la separation des especcs microhiennes qu'elle contient.

3deg; Etude do la forme que prend la colonie pure do lei ou tel microbe; cette forme est parfois caractenstique pour un microbe (fievre lyphoide, cbolera, etc.).

Nous decrirons :

A. Leproccdr clasaique de Koch ;

IL Une modification de ce precede, qui dans certains cas pent remplacer avec avantage la me-thode un peu compliquee de Koch [mithode d'Es-murch);

C. Kuliu nn excellent procede du ä Roux, pro-cede dont 1'indication a etc donnee par lui dans les Annales dc I'Institut I'aslcur (1887, p. 25).

A. Cdltcbes sur plaques pab la .MKTIIODK de R0CI1.

.Nous exposerons ceprocedo en supprimanl tout ce qui n'est pas essentiel, et constitue une surcharge d'appareils inutile. Les instruments noces-saires sent :

Iquot; L'n triangle en bois a viscalanles (fig. 23);

2ⁿ Un niveau a bulle d'air;

3quot; Une large plaque dc verre ;

CULTURE UES MICROBES AEIIOB1ES. 101

4deg; Des petits bancs en verre (flg. -20); ;i⁰ Ucs plaques do verre stirilisies et contenues jusqu'au moment oü elles devront etre mises en

Fig. 25. Triangle en ljui.s ä iis cslantes.

usage ilnns une bolte on töle störilisöe; nous avons decrit ailleurs cetteparlie do I'appareilet sasteri-lisalion (voyez chap. If);

Fig.

- Petit banc en vlaquo;

6deg; lino cloche on verre composöe do deux parties : a) un cristallisoir reconvert par, b) un cou-verck de memo forme, plus grand ot portant sursa face suporieure un boulon do verre (flg. 21 j.

G-

102

TECHNIQUE DES CULTURES.

Pour iiiiinix faire saisir l'economie geuerale de l'operation nous choisirons un exemple :

Un a Jans un tube de gölatine, dans un matras, une culture impure contenant un grand nombrc degermes diff6rents, ou bien cncoreon viont d'en-semoncer un lube de gelatine, un matras avec une goutte, une parcelle d'une substance qu'on sait cliargee d'une quantity de genues divers (eau, terre, maliercs lecales, etc.;.

Fig. '27. Cloche formant chambre humide

II s'agit de trier cos germes, de les isoler, d'en faire, en un mot, la culture sur plaques.

L'opörateur commence par se laver et brosser soigneusement les mains, qu'il trempe ensuite dans la solution de sublimö ä un millieme.

II lave ensuite, dans la meme solution, la plaque de verre (3), dispose cette plaque sur le triangle ä viscalanlcs (1) et elablil.r.ippareildans I'liorizonta-lite parfaite a l'aide du niveau ä bulle d'air (2); il suftit pour cela de vissor ct devisser les vis calantes, jusqu'a ce que le rcsultat soil obtcnu.

11 taut alors preparer la cloche (6), en faire, suivaut I'expression connue, une chambre humide 'iseptii/ucct antiseptiqiic. A cet elTet les deux parties

CULTURE DES MICROBES AEROlilES. 103

qui la composcnt nvant cto cral)ordsolgneusciTioii(, ncttoyöcs, on place dans 1ü cristallisoir inferiour une feuille de papier ültre tailloe en rond, el d'un diametrounpeu moindre que le diametre interieur dc ce cristallisoir. On verse duns chacune des deux parties de la cloche une solution dc sublime a 1 p. 1000; on la promene sur toute la surface in-terieure du cristallisoir; on vide completemeut 1c cristallisoir superieur, mais on ne fait ecouler qu'en partic la solution desinfectante du cristallisoir inlerieiir; on y laisse la quautite neccssaire pour lenir 1c papier liltre humide. On ferine la cloche, et on la place sur la plaque de verrc.

On disposealors äportee, dansunrecipientrem-plide sublimeau millieme, trois bancs de verre, el aussi dans ce meme recipient trois bandes de papier liltre de la largeur et de la longueur des bancs de verre; on numero te I. II. III. ces ban des de papier.

On place encore a portee la holte on teile conte-nant les plaques de verre störilisecs, uns lampe ä alcool, un 111 de platine fort, et des pipettes.

On prend alors trois lubes de gelatine I'aiblement remplis; en hiver onscservira de gelatine pure ; en etc on prondrade la gelatineaddilionnee de gölose.

On porte ces tubes ä I'etuve ou dans un bain-marie pour les liquefier.

Le contenu du tube 0 qui renferme la culture dont les germes doivenl itre Isolds sera lui-momo rendu liquide de la möme facon, s'il no 1'est de.ja.

On saisil alors le tube 0; on le place entre le pouce et l'index de la main gauche cöle ä cöle avec un des tubes de gelalinc fondue ä I'etuve ou au bain-marie. Ondebouche Fun et l'autre lube; avec une pipette slerilisee (1), el dont I'effilure vient

(1) La pipette nous paniit rcmplacer avantageusement le fit tip, platine fin, termine en anneau, que les Allemaixls ernploient dans ie meme but.

104nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; TECHNIQUE DES CULTURES.

d'etre passöe dans la flamme de la lampe ä alcool nu aspire un peu du liquide du tube 0, et on en porte une goutle dans un des tubes de gelatine. Cc tube sera immediatement boucho ot inarqne I. On I'agitera logereincnt pour röpartir la semenee dans toute l'epaisseur de la gelatine.

Si la cult nie impure est contemie dans un nia-tras, foperation est auasi simple : avec la pipclte on prelevc un peu du liquide du matras et on en reporte une goulle dans le lube de gelatine I.

Daus ce tube I on preleve avec une nouvello pi-pelte un pen de liquide, dont on laisse par le nieme procedo tomberuue goutte dans lo second tube de gelatine liqueliee; on marque co tube 11; on le bouche aiusi que le tube I et on repand la semenee dans son coiitenu en agitant legerement. Du tube II on porte par la meme manoeuvre avec une nouvello pipette une goutte daus le troisienie tube de gelatine : tube III.

On doit veiller ;i ce que les tubes I. II. III. restent toujours en etat de liquefaction jusqu'au moment oil on les verse sur les plaques de vcrre : il est bon de les plouger dans nn bain-marie tiede, s'ils out de la tendance a la solidification.

On place alors dans le eristallisoir inferieur de la cloche, sur le papier liltrc aumide, un banc (l(; verre qu'ou retire a cet instaut de la solution de sublime on il ('tail plonge, qu'on laisse egouttcr une seconde, et qu'on recouvre du papier-flltre I. On referme aussitöt la cloche.

On couclie la bolte de tölo, contenant les plaques, horizontaleinent sur le bord d'une table ; on retire le couvercle; on saisit une plaque avec une pince llambee et on la pose dans la cloche sur le banc de verre I, perpendiculairement a la direction de celui-ci.

On fait maintenir par un aide le couvercle de la

CULTURE DES MICROBES AEROR1ES. 10b

cloche au-dessus, et ä aussi petite distance que la manoeuvre 1c permet, ducristallisoir inferieur. ün debouchc le tube 1; on en verse le contenu, ou une partie du contenu, suivant la dimension de la plaque de verre, sur celle-ci; alors avec un lil de

Fig. 28. Appareil do Koch pour cultures on plaques. (Lacloche demi-ouverte laisse voir ii 1'lnterieur la disposition des plaques sur les petits bancs de verre.)

platine forl, rccourbo a angle droit vers sa termi-naison, llambe sur la flamme de la lampe h al-cool, etrefroidi, on etale la gelatine sur la plaque de verre.

L'aide maintenant toujours le couvercle en bonne position, ou fcrmant et ouvraul la cloche suivant le besoin, on dispose au-dessus de cette plaque do verre un banc de verre reconvert de son papier-filtre TI; les pieds de ce banc de verre repo-scront sur le banc sous-jacent. Sur ce banc de verre on place perpendiculairemcnt asa direction

106

TECHNIQUE DES CULTURES.

une deuxiöme plaque störilisöe, sur laquelle on

verse et on etale do memo le contonu du lube II.

Enfin on dispose au-dessus de cette plaque II un troisiöme baue de verre avec son papior-liltre III, et on verse et on elalc sur cette plaque lo contenu du tube III (fig. 28).

On tail alors fermer la cloche : roperation est terminee; il ne reste qu'a atteudre, pourproceder älexamen et a reusemencemenl des colonies, que cclle-ci se soient döveloppees.

On devra s'absleuir, avaul le moment opportun, de toute Ouvertüre intempestive de la cloche, qui permettrait aux germes aeriens de se deposcr ä la surface des plaques.

En regie genorale la plaque I, qui occupe le rang Interieur, est trop chargee de germes, et souvent 11-quefiee en totalite ou en partie: les plaques II et III se pretent mieux a i'examen et ä la prise des colonies.

Nous aliens maintenant decrire ces deux operations.

Examen des plaques. Portez sur la platine du microscope (cette platine doit etre large, et tons les microscopes ä l'usage bacleriologique sont au-jourd'hui pourvus d'une teile platine) la culture en plaque. Kcartcz l'öclairage Abbe, servez-vous du plus petit diaphragme et d'un faible grossisscment. Vous apercevrez en faisant passer la plaque sous l'objectif des colonies de formes diverses.

Pri!lamp;oement de la colonie. Si vous voulez cueillir une de ces colonies prenez un 111 de platine bien sterilise, ou de preference une pipette tinement eflilee et legerement recourbce a son extremilc. Xous conseillons plutöt la pipette ainsi preparee, a cause de sa flxiteplus grande quecclle du III de platine dont rextremite oscille souvent d'une faron genante. Procedez alors de la facon suivante;

CULTUBE DES MICROBES AEROBIES. 107

Si la colonic a cueillir est bion isolee, bien en vue sous I'objectif, allez directement la cueillir avec le fil de plat!no on la pipctlc en dirigeant la manoeuvre do roeil.

Si la colonie est entoureo d'autres colonies ä proximite, et par consequent mal isolce, main-tenez I'oeil sur le microscope; dirigezpar tatonne-ment l'extreniite de votre lil de plaline ou do votre pipette jusqu'a ce que vous I'aperceviez sous Tob-jectif au milieu de la colonio choisie. Piquez alors celle-ci, et chargez-en i'extremile de rinstrumont.

Dans Tun et Tautre cas on verra que I'operation a reussi lorsque la colonie aura disparu du champ du microscope et qu'il ne rcstera plus a sa place qu'une surface de gelatine dissociee.

La colonie enlevce sera immedialement ou examinee sur lamelle, ou onsemencce dans un tube do gelatine, geloso, etc., etc.

Nous avons dit en commencant cet article quo la culture sur plaques permettait d'eludier la forme quoprond la colonie d'une bacterio donnee. Lorsque possedant une culture pure do tel ou tel microbe on desire connaitre la forme des colonies de co microbe sur la gelatine, on procedo do la 1'acon que nous avons indiquee, mais il n'cst pas necessaire alors de faire un aussi grand nombrc de plaques : une ou deux suffisent, la premiere contenant une goutte de la culture originale, la deuxiome contenant une goutte du tube d'ense-mencement de la premiere plaque : on aura do cotte facon sur Tune et I'autre plaque des colonies suflisamment isolees.

B. Cultures sub plaques par la uethode ü'ksmarch.

Esmarch a propose do modifier la methodo do Koch do la facon suivante :

108

TECHNIQUE DES CULTURES.

laquo; II so sert d'un lube a cssai ordinaire sterilise, renfermant de la gelatine nutritive, et ijouchc par un tampon d'ouate. On liquelie a uno douce cha-leur, et on y seme avec un ill de platine on une pipette sterilisöe line I race du licfuide a examiner (eau, sang, pus); on replace Ic tampon do coton et on agite Icntement deux ou trois fois do Facon a röpartir ögalement les gcrmes dans la gelatine. raquo; (Straus, Aimales Pdtlciir, t. J, p. 93.)

On repartil alors uniformement sur la surface interne du tube ä essai la gelatine qu'il contient, et on la laisse s'v solidilier on placant le tube, ho-rizontalement maintenu, sous le robinct d'eau I'roidc et en lui imprimant un mouvement rapide de rotation : on a alors la iilaqiie enroulie d'Es-march.

laquo;Au bout de quelques jours, suivant la temperature, on voit apparaitre ä la lace interne du tube lescoloniesbactcriennes, qui se comportent comme cellos qu'on observe sur les plaques ordinaires. On pout les examiner äla Joupe, ou a un faible gros-sissement au microscope. Si on vout prelever uno parcelle d'une colonie i)Our I'examiner au microscope ou la somcr, on se servira d'une aiguille de platine comme a 1'ordinaire; cette recherche pent se faire aussi aiseuient au microscope, I'aiguille pouvant ölre appliquee centre le rebord de l'ou-verture du tube, ce qui a Favantago dc donner un point d'appui facilitant la manipulation. raquo;

Le precede d'Esmarch presente sur celui de Koch l'avantage qu'on pout, sans crainte d'infection do la nappe de gelatine, examiner les colonies, et les cueillir.

Un point defeclueuxesl la forme droite du tube; on ne saurait on efiet donner ä ce tube une hori-zontalite parfaile pendant les manoeuvres du rc-froidissement, sous poino do mouiller le tampon

CULTURE DES MICROBES AEROBIES.

109

d'ouate avec la gälatine ct do determiner d'abord radherence dc ce tampon a la surface de la gelatine et plus tard la souilluro decelle-ci.

C. Cl'LTL'RES SLR PLAQUES PAR LE PROCHDE DE RüUX.

Roux a indiqne un procöde de cultures sur plaques qui a l'avantage de permettre la conservation pure des microlies a (#9632;volution tres leute, tels que celui de la tuberculose.

Aux plaques 11 snbstitue laquo; des tubes de verre longs de 2.') ä :i() centimetres et larges de 2 ä 3 centimetres (V. fig. 29). Une petite quantite raquo; de gelatine, de gelatine et gelose ou de gölose glvcö-rinoe (suivant les cas) laquo; est introduite au fond des lubes, que Ton ferine avec un tampon decotonet que l'onsterilise a 1'autoclave ä 113deg;. Pour les utiliser 11 suflitdo faire fondrelagelee nutritive, ct de l'ensemencer alors qu'elle est encore liquide.

laquo; On agile vivement, et on couche le tube surun plan horizontal: la gelee nutritive s'etale et se moule sur la paroi inferieure du lube. Elle est, ainsi re-

rensemoncement a öte convenablement

fail, los colonies qui se developperont

seront parfaitement isob^es. La couche

Fig

(1.

solide doit etre mince pour que l'on puisse facilement examiner les colonies, au microscope, a travers le verre. Lc tube est ferine avec un capuchon de caoutchouc, et 11 peut rester ä l'etuve, lc cas eeheant, aussi longtemps qu'il

l'R. DE MICROBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 7

ill!

TECHNIQUE DES CULTURES.

cst besoin sans qu'il se dessi-cho. II est facile de l'examiner, et memo de faire uno prise dans une colonie isolee sans avoir a craindre 1'introduction des germes strangers de 1'air.

laquo; S'il se forme des colonies a la surperflcio dc la couche nutritive, et s'il est nöcessaire de les examiner par leur surface libre, avec nn diamant monte sur une tigc rigide, on fait un trait sur la paroi inlerieure du tube de chaque cole ctparal-lelement a la surface de la gelee nutritive; on separe ainsi le tube en deux demi-cylindres dent I'un conlient la culture etalee. II est facile d'examiner cetto gouttiere tout comme une plaque sur la phi tine du microscope. raquo;

B. CULTURE DES MICROBES ANAEROBIES

Lcs procihtcs que nous allons cUcrire appartiennent exclusivement ü Vdcole fntiwihc L'ecole allcmande a ignore a peu pres enlieremont, jusqu'ici, la maniere do cultiver les anaerobies, on n'a fait ces cultures (jue d'unc facon peu rigourouse et peu pratique. Les principaux ossais tentes par les Allemands n'ont porto que sur la gelatine.

Koch avait indique un precede de culture sur plaques de gelatine rocouvcrte d'unc fenille do mica flambo ; ce precede, dont il s'etait servi Jans scs recherches sur le cholera asiatique, avait pour but d'isoler dc I'air le milieu de culture.

Hesse et Liborius faisaiout leurs ensemence-ments dans les conches inferieures d'un tube a ossai rempli de gelatine (1).

Dans un pareil tube les coucbes eloignees do la surface aeroe peuvont se trouvcr a l'abri do

1) V. Dnclaus, Annales de Vinstitut Pasteur, t. II, ]rage 3U.

CULTURE DES MICROBES ANAEROBIES. ill

l'oxygene, et les anaerobies peuvcnt s'y dove-lopper.

Mais ootte metUode sc prüte mal laquo; ix roxamon, a L'etude,et äla reiiioculationdes colonies formecs, qu'il taut, aller peuibleincnt chercher, apres avoir casse le lube, au milieu de la masse gelatincuse qui les contient raquo; (Duclaux, locu citato).

Unc aulre mcthode allemande consiste a laquo; faire rouler sur la paroi Interieure du tube la gelatine ensemencee jusqu'ä ce qu'elle y fasse prise, lais-sant ainsi un vide central qu'on remplit de gelatine sterile raquo; (Duclaux). Ccttc methodo n'a pas donne ä ses auteurs le resultat attendu.

Liborins et Prsenkel ont imagine un procede base sur le remplacement de Fair par un gaz inerte.

Liborius faisait laquo; barboter de Fhydrogene dans le milieu nutritif contenu dans un tube muni dune cftilure laterale, et ccla jusqu'ä elimination des dernieres traces d'air. raquo;

Cot auteur tcntait aussi, mais avec asscz peu de succes, de cultiver les anaerobics sur plaques dans une atmosphere de gaz hydrogenc.

La methode de Fraenkel cst assez simple. laquo; II se seit d'un simple tube a cssai, ferme par un bouchon de caoutchouc par lequel passent deux tubes coudes, un lube d'arrivoe, qui s'enfonce Jus-qu'au fond du tube, et un tube de sortie, qui commence au-dessous du bouchon. Cos deux lubes quot;sont au prealable efflles dans lour partie extc-rioure et fermes avec des tampons d'ouate. Le lube ä essai et le milieu nutritif ayant ete sterilises convenaldement, on fait passer un courant d'hyilrogene obtenu avec du zinc pur et de l'acide sulfurique pur, el lave, de facon ä le debarrasser des produits sulfures arsenicaux et de la petite quantile d'oxygene qu'il pourrait encore contenir.

112

TECHNIQUE DES CULTURES.

Quand l'air cst tout a fait chasse, on forme a la lampe en leurs effllures, d'.ibord le tube do sortie, puis 1c tube d'cutreo, et on elend 1c liquide gelatinise sur la paroi du tube raquo; (Duclaux).

Lo boucbon de caoulebouc et les tubes de verre doivent 6tre soigneusement slerilisus. Pour eviter la diffusibilitö de Fbydrogone iju'on est toujours expose ä voir remplacer par de l'air, Franke] recommandiquot; de couvrir 1c boucbon et l'extröinitö du tube de paraffine.

Soul des auteurs allemands, Grüber emploie lu pompe a air. laquo; 11 eftile im tube ä essai ä environ io centimetres du fond, le bouelie avee de Touate, lo sterilise, et v faitarriver au moyen d'un enton-noir capillaire un peu de gelatine nutritive; apres (juoi il sterilise a nouveau. 11 ensemence en enle-vant le tampon d'ouale, au moyen d'un ill de pla-tine, fait le vide en portant la gelatine de 30deg; a liri⁰, de facon a la faire bouillir, ferine a la lampe, et roule en manchen suivant la metliode d'Es-march raquo; (Duclaux).

Teiles sent les principales methodes allemandes de culture des anaerobics; (dies ne datent guere que d'un an ou deux, et il semble quo leurs auteurs ne les aient imaginees ([ue pour eviter d'employer les mclhodes francaises, qui ont depuis longtemps fait leurs preuves. Elles ne s'appliquent d'ailleurs qu'ä la culture sur gelatine et sent peu precises; elles ne se sent guere, et pour cette raison sans doute, generalisees en Allemagnc meine, onla culture des anaerobics rcslo line exception.

Les methodes francaises datent des travaux de M. Pasteur; elles ont rccu d'importants perfec-tionnements de M. Houx, a qui nous devons la connaissance de la culture des anaerobics sur les milieux solides. Cos methodes precises ot simples, plus simples que leur exposition necessairement

CULTURE DES MICROBES ANAEROB1ES. m

un pen compliquee ne le laisserait croire, et dont hi pratique donnerait rapidement I'habitude, s'ap-pliquent a quatre procures de culture :

I.nbsp; Culture dans les bouillons(ou toutautre liquide);

II.nbsp; Culture duns la gdalinc ensemencde par piqüre;

III.nbsp; Culture sut la yelatine en plaques;

IV.nbsp; Culture sur pommes dc terre.

Ces cultures se font dans lo vide ou dans un gaz inerte, qui pent etrc I'acide carbonique, I'hvdro-gene, I'azote. L'acide carbonique est le plus ordi-nairement employe.

Les instruments neccssairos ä la culture des anat'robics sent il'unc parties instruments ä faire le vide, d'autre part des ijtizometrcs remplis du gaz inerte clioisi.

Gazomethbs. Nous n'avons pas ä insistcr sur la disposition etla construction de ces appareils, tion jilus que sur la preparation du gaz inerte H ou CO². La ligure 'M montre un gazometre tres simple qui consiste en deux tlacons tubules a leur partio inle-rieure, et cominuniquant par un gros tube de caoutchouc. Ces flacons 1'ermes par des bouclions decaoulchonc munis de robinets, contiennent I'un le gaz, I'autre do I'eau, a laquelle, suivant le con-seil de M. Roux, on fera bien d'ajouter une trace d'hydrosulflte do chaux pour ahsorber les dernieres traces d'oxygene.

LOS INSTRUMENTS A FAIRE LE VIDE SONT :

A.nbsp; nbsp;La machine pneumatique ä mercure (d'Alver-gniat);

B.nbsp; La trompe dean d'Alvergniat.

La trompe ä eau est d'un prix infiniment moins eleveque la machine pneumatique a mercure, mais eile exigo une forte prcssion d'eau, qui nc se rencontre pas partout, et eile est un extracteur de Fair moins puissant que la pompe ä mercure. C'est ä la machine pneumatique ämercure qu'on doit donner

114

TECHNIQUE DES CULTURES.

la preference, en n'oubliant pas qu'a son defaut la trompe pent rendre los plus grands services et permet, sans grands frais, d'arriver a d'excellents resultats.

Avant d'entrer dans le detail de la culture des anaerobios, nous allons decrire sommairement les deux appareils cxtracteurs do Tair, ot la t'acon de les employer a la production du vide.

A. Machine pnedmatique a mercdre (1). Cette machine (fig. 30) se compose on principe d'un lube barometrique ä largo chambre A, relic ä un resorvoir li par un lube en caoutchouc. A Faide do la manivelleC, 1'operateur fait ä son gre niontor et doscendro Ic reservoir B 1c long dn support en bois. Au-dessus de A cst un robinet a trois voies 1) qui permet do faire communique!' A :

1quot; En G avec lo recipient dans loqucl on veut faire lo vide;

2quot; En R avec Fair atmospherique.

Entre (i et 1) est en 11 un reservoir ä acide sul-furique concentre, servant d'appareil ä desseclier ot muni d'un barometre trouque M indiquant le degre du vide; entre ii et D est le robinet inde-pendant E.

Seit maintcnant un recipient F (qui dans la ligure ci-conlre est un tube double de Pasteur) dans lequel on veut faire lo vide, I'operatiou se fera do la facon suivauto :

Le robinet E etant ferine, le robinet ä trois voies etant dans la position ci-conlre J de facon a intercopter toute communication entre A et (!, A enlin etant vide do morcure, on relic le recipient F a G par un tube de caoutchouc et on ouvre le robinet du tube G. On ötablit alors par le ro-

il, N'ons empruntons l:i plupart ties dt'tails ci-dessous a la notice de M. Alvergaiat.

CULTURE DES MICROBES ANAEROIilES. Hi

Fig. 30. Machine pneumatiquo ä mercure d'AlvergDiat.

116

TECHNIQUE DES CULTURES.

binet D la communication entre A et G, c'est-ä-dire aussi avec lo recipient F; une pari ie de 1'air eontenu dans ce dernier penetre en A; on etablit la communicaliün de A avec 1{ tout en maintenant E forme, et Ton (Meve lo reservoir B jusqn'au haul. du support. Le mercure montc en A, et 1'air qui s'y trouvait vient se comprimer sous le robinet E (1); on ouvre alors ce dernier, et Fair comprime s'eclia[ipo duns l'atmosphöre ä travers la couche de mercure qui gain it R, avec un bruit caractoris-tiquc. On referme D et E et Ton opere do nouveau commc il vient d'etre indique. A chaque operation une cortaine quantity d'air est extraite du recipient; on ropete cos nianoeuvres jusqu'a ce quo le baroriiöl re M n'indique plus do difference do nivcau appreciable.

Le vide avec la machine pneumatique ä mercure d'Alvergniatpeut6trepouss6 jusqu'ämoins del/öO⁰demilliniotro. 11 n'cstdoncpas nocossairo, comino il le sera quand on opfere avec la trompo h eau, do remplir le rocipient de gaz inerte ä plusieurs reprises pour chasser lo rösidu de Fair.

Si on veut cepondant procoder a cette operation, et si on veut d'autre part remplir dofmitivenicnt le recipient vide (Fun gaz inerte CO² on 11, un dis-positif ingonieux de la machine permettra d'arri-ver ä ce rosultat sans döplacer le recipient, v K g reprosonlo un syslorao do tubes dont on com-prend facilemontFulilite : ajustez en g un tube de caoutchouc relie au flacon a gaz; ouvrcz K, fermez le robinet do (quot;#9632;; le gaz passcradansF ; si vousvoulcz extraire cc gaz, fermez K, ouvtoz G; F rcstant en

(i) Quand 1'air opt (Ii'jä ä un certain (iegre de rarefaction en A. i! faut n'elevep lo reciptenf li qu'au fier? du support, et laisser le mercure monlep tieiui-meme; on rcleve eusuite li au haut du support. En elevaat I! sans precaution, on projetterait le mercure vio-lemment en A et on risquerait de briser le robinet E,

CULTURE DES M1CK0BES ANAEROB1ES. 117

[iliice, vousy terez levide comma nous I'avons (lit. B. Troupe a eaü. La figure (3f) ci-contre

Jonnela repvesentation raquo;le ce pelil appareil si coni-inode et d'un prix si mo-dique. On I'installe a de-meure au moyen dun tube de caoutchouc bien serre, mi d'uno monture metal-lique, sur un robinet d'oii I'emi s'dchappe a forlc pres-sion : e'est lä une condition essentielle. II sul'lira d'ouvrir co robinet jiour mettre I'appareil en mar-che, et produirc lo vide dans un recipient en com-munication avec la tubu-lurc T de la trorupe.

Mais le vide avec la trompc, pour etro pousse aussi loin quo le vide avec la machine pmsumatique a mercure, demande un temps fort long : pour abreger 1'operation il cst neccssaire de rempiir et vider plusieurs I'ois le re

mpe u euu.

cipient de gaz inerte afin d'en chasser les dernieres traces d'air. En outre, le vide fait, on peutdesirer rempiir detinitivement le recipient de CO² ou doII.

Le recipient doit done etre mis en communication d'unc part avec la tubulure de la trompc, d'autre part avec lo gazometre; Tun des deux dis-positifs suivaats, egalcment simple, reunira toutos les conditions voulues :

IISnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;TECHNIQUE DES CULTURES.

i⁰ Pros de la trompe, sur un support, installez un o tube en T, qui communiquera par sa brauche F

avec la trompo, ct par sa branche E avec un gazo-melro contenant de l'acide carbonique... Les deux branches F et E portent chacune un robinet raquo; (Roux) (flg. 32).

Hatlachez par un caoutchouc epaisle recipient ä vider d'air (ce recipient, dans la figure ci-contrc d'apres Itoux, estun tube double de Pasteur) au tube on T; reliez chacune iles branches F et E avec la tubulure laU'ralo de la trompe et avec le gazo-metrc. Pour faire le vide fermez le robinet de la branche E, ouvrez celui de F ct mettez la trompe on marche. Lorsque le vide est partiellement fait, il laut, pourle completer, riucer I'appareil deux on trois fois avec CO²ou 11 qu'on extraira en-suite. Fermezle robinetF, ouvrez le robinet E ; le gaz passe dans le reci

fermant E et ouvrant

pient ; videz le gaz en

'; recommencez deux ou

trois fois cette manoeuvre; vous aurcz extrait tout Fair du recipient, qui pourra alors etre laisse vide ou etre rempli de gaz inerte.

CULTURE DES MICROBES ANAEROB1ES. 119 2deg; La figure 33 reprusente un autre dispositif

qui repose sur 1c jeu (i'un robinet a trois voics

120

TECHNIQUE DES CULTURES.

Le tube en T ABC maintenu par un support porte en 0 un robinet ä Irois voies. Le tube A sera relie ä la tubulure laterale de la trompc par un tube en caoutchouc S; le tube B sera mis en communication avec le gazometre par le tube U; enfin le recipient ä vider d'air sera suspendu ä C par un troisiemo tube du caoutchouc.

On comprendra facilement comment le jeu du robinet 0 permet de faire le vide dans le recipient (qui dans la figure ci-contre est un tube simple de Pasteur), d'y amener ensuite CO- on H et de vider ce gaz autant de fois qu'il est necessaire, et enlin de laisser I'appareil vide on rempli d'acide carbo-nique.

I. Culture des anaerobies dans les bouillons (I).

Ces cultures se font dans deux appareils qua nous avons decrits au chapitre II; le tube double ct le lube simple de Pasteur.

La technique comprend :

1deg; La preparation du tube;

2deg; L'enseniencement;

3deg; L'extraetion de l'air, et la substitution eventuelle de CO² on II.

4deg; La fermeture du tube ensemence, vide, ou rempli de CO- ou II. Cette operation ne merite pas une place ä part; eile sera decritc ä la suite de la troisieme.

1deg; Prcparalion du tube. Nous nous occupons d'abord du tube double. (Fig. 34). Sur un lube double de Pasteur, tel que le representc la ligure 10, chapitre II, sterilise et bouche a i'ouatc, etirez a la flamme du chaluineau ä gaz la partic B qui

{{) Nous FL'petons ici co que nous avons ecrit plus haut en par-lant tie la culture des aerobics: tout ce que nous disons lt;lc la culture dans les bouillons s'appliquera, le cas echeant, au lait. k I'u-rlne, etc.

CULTURE DES MICROBES ANAEROBIES. 121

surmonlc le tampon tleouate; coupozle tulje droil

en II au-dessus

de cetle efülure,

el rodez lt;i la

flamme l'extre-

mite coupuc en

lui donnant la

forme rcprescn-

tee ci-eontre.

Donnez alors sur la flamme de la lampe a al-eool ä cliacun des pelits tubes lateraux la direction DEF, D'E'F' (la direction premiere MEG, D'E'G' est marquee en pointille sur la (igure), ct etirez alaflammeassez iinementrexlre-mite F, F'.

Ainsi prepare, Ic tube double prend la forme ci-contre.

La preparation d'un tube siinplc est exac-tcment lameme,

et ce tube (flg. 11) prend alors la figure represon-

-'!i. Tube double de Pasteur pro-pare pour I'ensemencemeut.

tee dans la li

urc 3;) a la page suivante.

122nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; TECHNIQUE DES CULTURES.

2deg; Ensmencement. Portez la semence, quelle

qu'ello soil, quelle qua soil sa provenance, dans lebouillon sterile dun matras Anbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; Pasteur.

Goupez alors rextremite Hnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; effllee F d'un des petits tubes

latöraux, flambez sa surface exterieure, et laissez refroidir. Introduisez reffilure V dans gnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;le matras, et aspirez par I'ex-

treniiir || le bouillon ense-mcnce dans la brauche I du tube. Retirez 1'effllure quand vous jugez la quantity de liquide süffisante dans la brauche 1, soufflezpar II de facon a expulser le liquide qui reste dans F, et flambez fortement la surface de cette eflilure. Fermez alors rextremile de F sur la lampe a alcool.

Emplissez par unc niaiucuvrc

identique la branche J par

reffilure K' d'un bouillon non

ensemena! qui servira de te-

moin, ou qui pourra plus lard

ä son lour elre ensemencepar

une goutte ile la culture con-

tenue en 1.

L'ensemencement d'un lube

\ J) !#9632; ^gt; ^'quot;'l¹'⁰ ^sc fait pur les niemes

^-^nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;procedes : ce quo nous avons

'#9632;'=' ^3ä-nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; dit de l'ensemencement de la

branche I du lube double s'ap-

plique ä l'ensemencement du tube simple.

3deg; Extraction de fair, et substitution eventuelle de CO² ou II. Le lube double ou simple elant onse-

CULTURE DES MICROBES ANAEROB1ES. 123

mcace, il faut y faire los operations de vide simple, ou de vide suivi de substitution dun gaz inerte.

Ces operations se resument de la faoon suivante :

d. Culture duns le vide ä l'aidc de la machine pneumatique a mercure;

1. Culture dans GO³ ou H avoc la machine pneu-matique ä mercure ;

:j. Culture dansle vide ä l'aide de la trompeacau.

4. Culture dans CO- ou H avec la trompe a eau.

1.nbsp; Culture dans le vide ä l'aide dc la machine pneumatique a mercure. Suspendez ä rextremite du caoutchouc S de la pompe ä mercure l'extrömitö 11 du lube double ou I'extremiti'! corrcspondante du tube simple, apres en avoir enduit la surface ex-lericurc de vaseline : la vaseline rend plus complete Tadherence du verre au caoutchouc.

Faites alors le vide dans le tube double ou simple par les manoeuvres decrites jusqu'a ce quo le manometre vous indique quo le resullal cherche e.st atteint.

Pendant les manoeuvres do vide laquo; au moyen d'une petite flamme a, gaz, appliquoe avec precaution, on determine I'eliullition ä basso temperature dans les deux branches (oulabranche unique) pour bien chasser tout I'air. Les bulles produitos viennent crever sur les parois du tube legerement chauffe dans sa partie suporioure raquo; (lioux).

Lorsque le vide ost realise, on pent, pour plus de sürete, faire passer une fois de l'acide carbo-nique ou do I'hydrogene dans le tube. .Nous avons decrit ailleurs cette manoeuvre.

On extrait ensuite CO² ou 11, et on fenne le tube en fondant a la flamme du gaz le verre en 1! dans sa partie 6trangl6o au-dessus do I'ouate.

Lc tube ainsi parfaitoment vide sera place ä l'etuve u la temperature vouluo.

2.nbsp; Culture dans CO- ou H avec la machine jinewna-

124

TECHNIQUE DES CULTURES.

tique ä mercure. Itolioz 1c lube double ou siiii[ile a la machine pneumatique a mercure, conimc il a ele dit ci-dessus. Fnites le vide. Falles passer unc pieiuiere fois CO- ou H dans le tube, extrayez 1c gaz; remplissez alors unc fois encore avec CO- ou H, el fermez le tube en Bsous le courant de ;/'/;, Portez la culture dans l'ötuve.

3.nbsp; Culliirc dans /e vide avec la trompe a euu. Disposez rextremitij H du tube double ou du tube simple comme il est indique dans la figure 32, ou reliez-le a la brauche C du tube ABC (V. lit;. 33), suivant quo vous aurez adopte l'un ou l'autre des dispositifs que nous avons indiques (11 va sans dire que Ton peut en imaginer tel autre aussi simple et pratique).

Videz le tube d'air pur le jeu de la trompe : il sera necessaire ici, comme avec la machine pneu-matique a mercure, do determiner IV'liullition du liquide abasse temperature avec une petite flamme de gaz, et de faire eclator les bulles sur la paroi superieure du tube legeremenl chauffee. Le vide etant partiellement fait, remplissez ä deux im Irois reprises le tube de CO² ou de 11 que vous extrairez chaque fois a l'aicle de la trompe, et apres la derniere operation, le lube etant comple-tement prive d'air, fermez-le en fondant a la flamme du gaz le verre au niveau de l'etranglement B, au-dessus du tampon de ouate.

Portez le tube de culture ä reluve.

4.nbsp; Culture dans CO- ou 11 ä l'aidc de la trompe ä ean. L'opöration diü'ere pen : le vide etant fait dans le tube simple ou double, faites-y jiasser ä plusieurs reprises CO² ou H pour chasserles der-nieres traces d'air; remplissez une derniere l'ois avec CO⁸ ou 11, et, le gaz passant toujours, fermez ä la flamme le tube, qui restera ainsi rcmpli du gaz inerte.

CULTURE DES MICROBES ANAEROBIES. {%lt;

Portez le tube ä Fetuve.

laquo; Pour faire une prise du liquide contcnu dans rinterieur du lube (simple ou double) saus iuho-duire d'impurete dans la culluro, il taut casser le tube ellile B au-dcssus du tampon de ouato, lais-ser rentrer Fair (1) et incliner le tube pour faire sortir im peu du liquide par Feffilurc lalerale prealablement ouverte et passee dans la tlamme. L'introduction de Fair arrete la culture. Si on veut qu'cllc continue, il laut ouvrir le tube de facon ;i ce qu'il so remplisse du gaz inerte. Pour cela, apres avoir fait un trait ä Fextremitö du tube B, on I'adapte a untube de caoutchouc relie au gazo-metre, on casse la pointe dans le tube de caoutchouc, et le gaz rernplit I'appareil raquo; (Roux).

II. Culture des anaerobies dans la gelatine (}) ensemencee par piqüre.

Getto culture pout se faire seit dans le vide, soil en presence de CO- ou de H.

Le tube qui sort ä cette culture a 6t6 represente flg. 12 dans le chapitre II.

Nous le supposons rempli do gelatine sterile dans son quart inferieur et pret pour 1'usage.

On elranglera alors lo tube B on un point, c de sa longueur, et on poussera le tampon donate jusqu'en c. Ainsi prepare et rempli de gelatine I'appareil est pret a fonctionner (flg. 30).

L'operation quo nous allons docrire coinprend les phases suivantes :

1quot; LiijUi'ficr la ijclatinc;

2deg; Faire le ride dans le lube, et chasser l'air du milieu nutritif;

(1)nbsp; L'air rouli-.int tlltre sur lo tampon d'ouate.

(2)nbsp; Ce quo nous dirons do la gelatine sera facilement applique ä In gälose, lo oas echeant.

126

TECHNIQUE DES CULTURES.

;J⁰ Faire solidifier 'It: la gälaline dans un courant de gaz inerte CO- ou II; #9632;tquot; Enscincncer pur piqüre n Vabri de Vair;

ri⁰ Fennar le inhc. qu'on laissera viele ou rempli de CO- ou H.

r.es instruments osscntiels de l'opöra-tion sont done la ma-^v quot;nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;clüno ä laiic le vide

pompe ä mercure ou trompe ä eau) et lo gazometre a CO² ou II. a) Nous decrirons d'abot'd la manoeuvre avec la pompe a mercure.

Iquot; La premiere ojje-ration consiste ä termer le tube en c au-dessous du tampon de ouate ; on le porte ensuite a I'etuve on dans un bain-marie pour liquefler la gelatine. 2quot; On suspend la ^gt;''^s' 'quot;'#9632;nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; tubulure A munie de

son tampon de ouate an caoutchoucs delamacliine pneumatiqueämercure ; on relic d'autre part le flacon ä gaz hydrogene ou acide carhonique a g de la pompe a mercure; ilo la sorte le lube communiquera tacilement par un jeu de robinels, que nous n'avons plus a expli-quer, soit avec la machine ii vide, soit avee 1c gazometre. On dispose rexlremite inferieure du tube dans un bain-marie tiede, de facon a maintenir la

CULTURE DES MICROBES ANAfiROBlES. 127

gelaline en liquefaction jus((u^,ä co que tout 1'air en soit chassc, et on commence k faire lo viilc : la gölatine entre bienlüt en ebullition, el de grosses bulles sont projotees vers l'extremite supörieure du tube : on evite ces projections en ebauffanl Tex-tremitö superieure du lube avec un jot de gaz; au cas oü rlt;'bullilion serait trop forte on I'arretorail en laissant entrcr du gaz inerte.

Le vide elant fait, on pourra remplir le tube a. deux on trois reprises avec lo gaz inerte qu'on en-levera ensuite.

:!⁰ On forme la communication avec la machine a vide; on fail passer CO² ou II dans 1c tube, eu mome temps qu'on plonge rexlremile inferieure du tube dans I'eau froide : la solidification de la gelatine sc fait sous le courant du gaz inerte.

4deg; Lorsque la gelatine est prise on dispose un 111 de plaline d'une longueur teile qu'il puisse alleindre la surface de la gelatine, elant introduit par c el penetrcr dans son epaisseur. On sterilise ce 111 ct on le charge de la semence. On souleve alors le llacou a eau du gazomelre de facon ä pro-duire une legere pression dans le tube; on fait un trait de lime sur c, on tlambe le verre en cet en-droit el on casse la pointe avec une pince flambee : le gaz s'echappe par I'oritlcect einpeche renlreede Fair. On introduit le iil deplatine avec precaution dans le tube et on pique la semence dans le cylindre de gelatine. On retire le 111, et on ferine c (fig. 36 bis).

ygt;ⁿ On peul alors ou vider complelement le lube du gaz inerte et 1c fermer ensuite eu fondaul lt;/, ou le fermer inimediateiuent en J eu le laissant plein dn gaz CO² ou II.

6) L'operation avec la trompe a eau est absolu-menl la meme. Fermez d'abord c et liqu6flez la gelatine ; disposez alors le lube on commuuicalion avec la trompe ot le gazometre par la lubnlure A

128

TECUNIQüß DES CULTURES.

au tftoyen d'un des deux appareils que nous avons cnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;iiuliques, soit le tube

en TFE avec ses deux robinets, soil le tube ABC avec son robinet ;i .^nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;trois voies 0.

La marche genörale de Toperation est iden-lique a cello quo nous avons decrite ci-dessus: on fait le vide dans la gelatine liquefiee; on passe ä deux on trois reprises du gaz CO² ou II dans le tube; on ex-trait easuite cegaz; on laissc solidificr la gelatine en la maintenant en communication avec le gazometre, etlorsqu'elle a fail prise on I'ense-mence par l'extrömitö c qu'on a ouverte et llam-Fig. sä bis.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;bee, en ayant soiu de

donner au courant de gaz une pression plus forte a cc moment. On ferine c; et on vide I'appareil ouonle laisse remplidu gaz inerte ; on le detaclio enfln par un trait de clialu-meausurrf.

III. Culture des anaerobies sur la gelatine en plaques (I .

Nous'transcrivonstextuellementladescriptiondu procedede Roux (in AnnalesPasteur, 1.1,p. 58). laquo; Le dlspositif suivant que nous employons depuis long-

(I; I,a culture eu pla(|iie sur gplosr., ou plutüt sur gclatiae addi-tionnee do gelose, sc fait par ]lt;gt; rapines procedes que la culture sur gelatine: le lecteur appliquera ä la premiere, le cas ccheaut, ce que uous aliens dire de la seconde.

CULTURE DES MICROBES ANAEROUIES. 120

temps pcrmct la separation des colonies et la re-colte do la semence dans les colonies isolees. 11 se

composed'un tubedeverre fermö,large dc :.t centimetres environ, long de 25 a

30 centimetres, et tcrmine par un tube

plus ctroit obture par un tampon de cofon. Ce tube (tig. 37) contient, un peu de gelatine sterilisee : on fond la gelatine, et on introduit avec les precautions ordinaires une quan-tite de semence convenablc pour avoir des colonies separees. En eusemencanl plusieurs tubes avec des quantites de semence dc plus en plus pctites, on arrive toujours ä une-separation parfaite des colonies. On etrangle le tube ä la lampe (lig. 37 bis) un peu au-dessus de la partie ren-tlee en c. On pousse 1c colon o b t u r a t e u r j u s q u' a c e t etranglcment, et on elire le tube en A. L'appareil ainsi dispose est mis en communication avec la machine ä vide, et il est purge d'air comme nous l'avons dejä i'xplique. On le separe en le fondant au chalu-meau en A, et on le cou-

che sur un plan horizontal.

La gelatine s'elale sur la paroi inferieure. Elle fait prise, et comme la couche est, tres mince, on pourra examiner a travers la paroi du verre la

130

TECHNIQUE DES CULTURES.

forme des colonies. Pour puiser dans Tune d'elles, on ouvre la pointe ei'lilue, on fait rentrer de l'air on du gaz inerte qui est (litre sur 1c colon c; on

coupe le verre en e, otavecunlong fil de platine on une tige dc verre un pen re-courbee a I'extre-mite, on peutattein-dre la colonie que Ton vent ensemen-cer. Si les microbes liqueflent la gelatine, et que I'on ne puisse pas renvcrser le tube pour 1'exa-men au microscope, on fait en d un trait avec un con loan a verre, puis avec un cliarbon de lierzelius on complete la section du tube. Par I'ouverture on pour-ia introduire un dia-niant monte sur une tige rigide, et faire Fig 37 ,,,,.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;un trait interieursur

chaque paroi du tube ; on detachera facilemeutlagoultiöresuperieure, et la goutliere inferieure pourra elre examinee sous le microscope ä la facon d'une plaque ordinaire, laquo; On peutevilerl'omploid'uno machine aspirante, et cbasser l'air du lube par un courant de gaz inerte. raquo; Pour cela le tube decrit au chapitre II (flg. 12 bis) estd'un usage commode. Le lube A est. rempli avec un petit entonnoir capillaire) de gela-

CULTURE DES MICROBES ANAEKOBIES. 131

line sterile qu'on ensemence et qu'on maiatient liquide. On Strangle B et B' en d d', on pousse 1c colon jusqu'a, res eli'HUgloments, et au-dessus du colon on el'lile en m m'. Le lube Best alors rclie au llacon ii acide carbonique du gazometrc, on fait barbotter le gaz inerte dans la gelatine, il ressort par B'. Lorsque 1'appareil cst bien purge d'air, on laisse la gelatine faire prise sous le courant du gaz et selaler sur la paroi inferieure de A, et on ferine m' puis m. (flg37 (er).

IV. Cultures des anaerobies sur la pomme da terre.

Cette melhodc est encore due ä Koux :

laquo; On soude an lulie, que nous a v o n s decrit ailleurs pour la culture sur pomme de terre en presence de Fair, au-des-sousdel'elran-glcment, un tube lateral,

etire en a (voyez lig. 38), et muni d'un tampon de colon.

laquo;Aprös avoir intro d u i t la tranche de jiommc de terre dans le tube, on sterilise le tout ä l'auto-nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Fig. 38.

132

TECHNIQUE DES CULTURES.

clave, comme il a lite dit plus haut, puis, quand la surface de la pommc de terre est egouüöe, on seme rorganisme anaerobic que Ton vcul. cultiver, ^nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;et on forme a

*\nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;la lampe la

partie supe-rioure du lube comme on le voit. La tuliu-lure laterale est reliee a la pumpe a mer-cure,el on fait soigneuse-inenl le vide. La tranche de pomme de terre est maiute-nue pendant quelcjues instants sous le

vide de la ma-chine pour

([lie Fair

___qu'ellc con-

tient s'echap-

pe, puis avec

un trait de cha-

i-ig. 38 bis.

lumeau porte

en a, on deta-cho le tube. 11 est facile do suivre a travers laparoi du verro le progres do la culture (fig. 38 bis).

Au lieu de faire le vide, on pourrait, apres avoir etire la partie supörieure du tube, faire passer un courant de gaz prive d'oxj'gene, et fermer ensuite ä la lampe le tube en haut et en has. raquo; (Roux, An-nales Pasteur, t. II, p. 30.)

GHAPITRE VI

MATIERES COLORANTES, REACTIFS, ACIDES ET ESSENGES.

On se sort, pour la coloration des microbes, des malleres colorantes derivees de la houille (cou-leurs d'aniline) possädant un pouvoir tinctorial considerable. Weigert, Koch, Ehrlich, Gram, etc., les ontetndiees et, reinarquantpourcertaines d'en-tre clles des proprietes electivcs vis-a-vis des microbes, sont arrives ä force d'etudos ä Irouver les methodes de double coloration qui donnent de si beaux resultats.

Ehrlich a divise les matieres colorantes extraites du goudron en deux classes: dans la premiere, la classc des laquo; basiqves raquo;, il range les matieres colorantes qui out comme point special d'election les microbes et les noyaux des cellules organiques; dans la seconde, la classe des laquo; acides raquo;, il fait cnlrer les matieres colorantes qui teinlont surtout le protoplasma, qui out pourcelui-ci unepropriete elective speciale.

Le tableau ci-dessous permetlra au locteur de saisir dquot;un seul coup d'ceil cette division; seule-ment nous n'v mentionnerons que les couleurs que nous employons journellement, celles qui

PR. DE llICHOliU!.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;8

134nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; MAXIERES COLORANTES.

donnent les meillcurs resullats, et que nous re-commandons tout specialement.

Puchsine. Diamant. Rubiue.

I Violet de mcthyle (IB, SB, 6B).

I Violet de gentiane. / A. Couleurs basiques. . Violet dahlia, ki-ystall-vi jlet. Inbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; I Bleu do metliyle.

COÜLEUBS Inbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; f y

Brun de Bismarck.

Eosine.

B. Couleurs aeides... #9632; Tropaeoline.

' Kluoresceme.

Toutes ces couleurs se trouvent dans 1c commerce sous forme do jioudros oa de cristaux. Elle? sont toutes solubles dans l'alcool.

1deg; Solutions alcooliques saturees. Pour so servir de ces couleurs on en fait des soluiiom alcooliques sursaiwecs que Ton conserve dans des fla-cons a large ouverture, bouches ä remeri. On met dans un flacon uno assez grande quantite de la coulcur en poudre, puls on verse de l'alcool absein: celui-ci dissout une partie de la poudre; la Saturation est indiqueo par le depot que forme au fond du tlacon l'exces de mauere colorante.

2deg; Solutions hydro-alcooliques. On les emploie, comme cela sera dit longuement au chapitre sui-vant, dans le but d'oblenir des colorations instau-lamvs.

Preparation. On prend un verrc de montre bien propre dans lequel on verse de l'eau distillee. On colore cette eau au moyen de deux ou trois goutlcs d'une solution alcoolique saturee d'une coulcur d'anilinc quelconquo; rouge, violette, bleue ou brune.

Cos solutions doivont etre preparees au moment precis de l'usage et doivcnt donncr un liquide plutöt pale que fence en couleur. Pour puiser la solution

REACTIFS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 135

alcoolique saturee, on eraploie une pipelle propre. liquot; Solutions spdciales. Bleu Löffler; bleu Ma-lassez; bleu de Kühne; liqueur de Gram; liqueur d'Ehrlich ; liqueur de Weigert,

1.nbsp; Bleu Löffler. Nous ne saurions trop recom-mander son emploi. 11 remplace tres avantageuso-inent la solution hydro-alcoolique au bleu de methyle.

Priparation. Melez ensemble :

Potasse au 1/10,000'...................... 3 cent. c.

Solutiüu alcoolique tie hleu de methyle.... 1

2.nbsp; nbsp; Bleu Malassez. De meine que lo bleu Löffler, on pent l'employer avantageuseinent ä la place de la solution hydro-alcoolique du bleu de methyle.

Preparation. Melez ensemble :

Kau d'anUine............................ 9 cent. c.

Alcool absolu............................ 1

Solution alcoolique de bleu de methyle.... 1

Pour preparer VEau d'aniline on place dans un flacon de verre colore une quantity il'huilc d'ani-lino süffisante pour remplir le quart du flacon : on remplit ensuite le flacon d'eau distillee et Ton aji'ite fortement. On laisso doposer. L'exces d'huile tombe au fond du recipient et Supporte l'eau cliargee d'huile ä laquelle on ilonne lo nom laquo; d'ealaquo; iVaniline raquo;.

3.nbsp; Bleu de Kühne. Ajoutez ä une quantitä de solution de carbonate d'ammoniaqiie a I p. 100 con-term dans un verre de montre quelques gouttes d'une solution aqueuse conccntreo ou d'uno solution alcooli que de bleu de mothylo. Cette mati^rc colorante qui se prepare exlemporanement a un pouvoir tinctorial encore superieur ä la liqueur

136nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; MAT1ERES C0L0KA.NTE3.

de Loffler et ne surcharge pas non plus les la-melles.

4. Liqueur de Gram. Preparation. Melez ensemble :

Eiiu d'anilioe.............................nbsp; nbsp; 10 cent.c.

Alcool absolu............................nbsp; nbsp; nbsp; 1

Solution ulcoolique sursaturäe de violet de

jrcntijuie...............................nbsp; nbsp; nbsp; 1

.quot;l. Solution iodo-logt;iuree de Gram. Molez ensemble :

lode inet;tlliraquo;|ue..........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 1 gr.

lodurc de pohissium...................... 2

Eaa distillee............................. 3UÜ

0. Liqueur d'Efrrlich,

Preparation. On peut la preparer soil u la fuchsine ou rubine, soil an violet de gentiane.

A. Melcz ensemble :

Eiiu d'aniline.............................nbsp; nbsp; nbsp; 9 cent. c.

Alcool aiisoln............................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;1

Solution alcoolique saturce de fuchsine ou

de rubine..............................nbsp; nbsp; nbsp; i

if. Melez ensemble :

Eau d'aniline............................nbsp; nbsp; nbsp; 9 cent. c.

Alcool absolu............................nbsp; nbsp; nbsp; 1

Solution alcoolique saturce de violet de gentiane [violet 6 B ou de krystaltviolet).....nbsp; nbsp; nbsp; i

Solution acide decolorante d'Ehrlich.

Eau distiller............................. ;} cent. c.

Acide azotique........................... I

11 est preferable de rernplacer dans ce melange I'eau distillee par de Talcool absolu suivant la formule ci-apres :

Aleool absolu............................ 10 cent. c.

Acide azotique........................... 1

KEACTIFS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 137

1. Liqueur de Weigert. Nousrecommandons spö-cialement cettc liqueur, car ello permet d'obtenir facilement des doubles colorations. Le soul iu-convönient qu'elle presonte, e'est que les preparations qu'elle sert iquot;i faire, ne peuvent guere se conserver.

Melez ensemble :

Methyl violet 6B, solution saturec ä chaud. tiS giquot;.

Alcool alisülu............................ II

Haue d'aoiline........................... 3

Toutes ces solutions, ä l'exception de la liqueur de Weigert, quelles qu'elles snient, doivent elre preparees auiuoment, precis oil I'oudoit sen servir, et doivent etre fillrees avant d'etre versees dans 1c verre de montre. Elles sont employees d'une facon generate; nous indiquerons plus tard celles qui sont d'un cmploi special.

Nomenclature des reactifs. essences, etc... necessaires clans un laboratoire pratique de bacteriologie.

1.nbsp; Eau distillcc. Absolurnent indispensable. On la conserve dans de grands tlacons d'environ dix litres de capacite, a robinet et bouches. On doit s'assurer de sa purete.

2.nbsp; nbsp;Solution de sublime ä 1 j). i 000. Elle sert ä desinfecter certains instruments, scalpels, ciseaux, etc. Dans le cas d'autopsies presentant un certain danger pour I'operateur, it est bon que celui-ci sc desinfecte les mains en les plongeant dans cetto solution.

3.nbsp; nbsp;Crrsyl ou crcoiine en emulsion a .^:i p. 100. On squot;en sert surlout pour la desinfectiou des se-ringues de Pravaz, etc.

4.nbsp; nbsp;Alcool uhsolu. Alcool ä 90quot; 70quot;. Ces alcools servent comme liquides d'exlraction dans

138nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; MATIERES COLORANTES.

la decoloration des lamcllos, des coupes; ils ser-vent ä inimergor les pieces pathologiques que Ton tient ii conscrver.

;i. Ether sulfwique ä ßöquot;. On l'emploie melö en quantites egalos a I'alcool, dans le but do lixer les globules sanguins et de debarrnsser les produits quo Ton examine sur lamelles de la graisse qu'ils sont snsceptililes de contenir. On remploie aussi lorsqu'il s'agit de faire des coupes au microtome ä congelalion.

0. Votasse caustique. On on fait des solutions ä 40 p. 100 pour la dissociation des produits epi-denniqucs. a 10 ou .^:i \i. 100 pour alcaliniser les bouillons; puis une solution ä 1 p. 10 000 qui rontre dans la preparation du bleu Lofflcr.

7.nbsp; nbsp;Phosphate de potasse. Ce sei csl employe dans la fabrication des milieux de culture.

8.nbsp; nbsp;Acide acctiquc. Sun emploi est indique dans le mode de coloration de Loftier.

9.nbsp; nbsp;Acides ehlorhydrique, sulfurique, azotique. Liquides d'extraction employes dans cortaines methodes de double coloration.

10.nbsp; Carbonale de soude en solution ä 2 p. 100. On l'emploie comme liquide d'extraction dans la melhode de coloration de Malassez; on peut aussi I'ajoutcr aux milieux de culture dans le but de les rendre neutres oü legerement alcalins.

H. Sei marin. 11 sert dans la preparation des milieux de culture.

12.nbsp; nbsp;Glyc'rine pure ii -Wquot;. Rentre soil dans la composition de certains milieux de culture, soil dans le montage de cortaines preparations. C'est dans la glycerine quo le docteur Houx conserve les nioelles rabiques ä leur etat de virulence initiale.

13.nbsp; Huile d\iniline. Eutre dans la composition de cortaines formules colorantes; sert aussi comme liquide d'extraction. Elle doit etre blanche

KEACTIFS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 139

et conservec en flacons de teintc bleue ou jaunc.

14. Curmin. Lc carmin dont on fait usage esl connu dans le commerce sous le nom de carmin numoro 40. On en fait les preparations suivantes :

1deg; Carmin boracique : a une solution ä 4p. 100 dc borax ajoutoz 4 p. 100 de carmin et chauffe/. deux fois a ebullition; ajoutoz au liquide chaud quantity egale d'alcool a TOquot;; laissez reposer et flltrez au bout de cinq jours.

2deg; Picro-carmin de Ranvier. laquo; On verse dans une solution saturee d'acide picrique du carmin dissous dans l'ammoniaquc jusqu'ä, saturation; puis on evapore dans Ueluvc aprrs reduction des qualre cinquiemes; la liqueur refroidie abandonne un depot peu riche en carmin, qui est separe par lillration. Los eaux-mferes evaporees donnenl le picro-carminate solide, sous la forme d'unc poudre cristalline de la couleur do I'ocre rouge. Cette poudre doit so dissoudre ontieroment dans I'oau distilloe. Une solution au centieme est la plus convenablo raquo; (Ranvier).

3deg; Picro-carmin de Ortli.

Eiiu satui-rc (it) carbonate de liUiiiie........ 100 gr.

Carmio.................................. ^s^r.D0

[inn saturee d'acide picrique............... 20 gr.

lö. Xylol. Son emploi est indique dans lc montage des preparations; il sort aussi a preparer le bauine destine ä monter les coupes d'organes.

10. Essence de girofie. JE.s.s-eraquo;ce de bergamote. Buile dc cedre. Ces produits servent a eclaircir les preparations; ressonco de girofie est aussi employee comme liquide d'extraction.

17. Baumedu Canada. Baume du Pärou, Rcsine d'Ammar. Servent a monter les preparations. Pour los lamelles on emploie le bäume liquide en

140nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; MATIKKES COLORANTES.

lube; pour les coupes on se sert des baumes sees dissous dans du xylol.

11 y a encore boaucoup d'autres reactit's employes, mais nous no les mentionnons pas iei, car ils tie soul pas d'un usage journalier; certains d'entre eux seront inenliounes au fur et a mesure que leur eniploi sera indiquö.

CIIAPITRE VII

EXAMEN MICROSCOPIQUE DEs MICRO-ORGANISMES.

Nous ne saurions trop insister sur rexlrömc Importance de l'examen tnicroscopique des microbes. C'est par le microscope (iito robservateur se trouvera en rapport direct avec ces organismes, qu'il en etudicra de visu les formes variees, les mouvements, les diilercnts modes dc reproduction; c'est l'examen histologique des tissusqui lui montrera les lesions provoqueespar les microbes, lesions qui nc sont autrc chose que I'expression dc la lutte des tissus vivants centre le parasite, veritable lutte pour I'existence.

Les microbes h examiner au microscope sout contenus dans les cultures sur milieux liquides ou solides, dans les divers liquides ou les tissus orga-niques. Ces lissus organiques peuvent el re etudies sous forme dc pulpe fraiciic, on sous forme de coupes histologiques. Enfin l'examen peut se faire avec ou sans coloration : de lä les divisions sui-vantes necessaires pour mettre de l'ordre dans un sujet un peu complexe.

I.nbsp;Examen des cultures liquides et solides suns coloration.

II.nbsp; Examen des cultures liquides avec coloration.

112nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;EXAMEN DES MICRO-ORGANISMES.

tll. Examen des cultures solides avec coloration.

IV.nbsp; Examen des liquides et des pulpes organiques.

V.nbsp; Hechercke des microbes dans les coupes de tissus.

Nous ferous preceder cos divers articles de quel-ques mots sur les instruments aecessaires a l'cxamen : lames, lamollos, microscopes.

Lames porte-objets, i.amellks, microscopes.

Lames. Ce sont des plaques rectangulaires de verre on do glace, rodees ou non, sur lesquelles seront monlecs les preparations. Elles doivent ötre aussi minces que possible; eile seront soipueuse-ment essuyecs au moment de l'usage.

Lames creuses. Ces lames, unpeu plus epaisses que les precedentes, sont crouseos en lour milieu, sur une des faces, d'un godet arrondi : ellos ser-vent aux cultures en cellules (V. ci-apres).

Lamelies. Ce sont de petites plaques de verre tres minecs, de forme ronde, carree ou reetangu-laire. Elles servent a recevoir les cultures ou les liquides organiques ä examiner, et a recouvrir les coupes montees sur lames.

On les conserve dans de Talcool, et on ne les retire de ce liquide qu'au moment d'en faire usage.

Microscopes. Nous n'insisterons pas, et pour cause, sur la description dc ecl instrument; nous allons seulement indiquer les conditions que doit remplir un microscope destine a l'usage bacterio-logique.

Ce microscope doit etre pourvu d'une large pla-^('jie pour les examensdes cultures surplaques; d'un edairage Abbe; d'un revolver porte-objectif ä 2 ou 3 branches quipermet d'amener sans aucun change-ment dc position, sur le champ de la preparation choisi, des objectifs fournissant les divers grossis-semenls les plus usitos.

EXAMEN DES CULTURES LIQUIDES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;1laquo;

Enfin il est de toute neccssitö de possöderwn 06-jeetifä immersion homogine, en outre des divers obj 00 tifs ordinaires dounant des grossissemeuts varies.

Les maisons Verick et, Nacbet de Paris, Zeiss et Leitz (Allemagne), Powell (Angleterre), fournissent d'excellenls instruments.

I. Examen des cultures liquides et solides sans coloration. Cultures en cellules.

On doll bien sc familiariser avec le mode d'examen des micro-organismes sans coloration, car e'est le scul qui permette d'observer les microbes, aussi naturellement qne possible, leur forme n'etant pas modiliec paries reactifs, et leur volume n'etant pas augmente ou dimiuue par les matieres colorantes. Uc plus, on les voit ainsi vivants, et on se rend compte des mouvements propres a, certaines cspecos.

a. Examen des cultures liquides sans coloration.

Pour faire cet examen, on dispose ä sa portee une larape a alcool, une ou plusieurs pipettes Pasteur sterilisees, et le matras contcnant la culture ä examiner. On eftile finement a la lampe Texlremite d'une pipette, en donnant ä la partie etiree une direction un pcu oblique : 1'effilure de la pipette est ainsi terminee par un petit tube plus iin, obliquement dirige; on brise lextrömito de ce petit tube, et on flambe I'effllure surla tlamrne de la lampe ä alcool. On ouvre le matras en prenant toutes les precautions que nous avons indiquees au chapitre IV, on y plonge la pipette et on aspire une petite quantite de liquide. On retire et on bouche le matras. On prend alors une lamellc (les lamelles, nous Pavons dit, doivent etro conservees dans 1'alcoolj; on I'essuie avec un linge fin; on verse alors ä sa surface une goultelette de la cul-

144nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; EXAMEN' DES MICRO-ORGANISM ES.

ture contenue dans la pipette; on prend une lame propre sur laquelle on place la lamelle, la face chargee de la gouttelette reposant sur la lame; on a soin de ne pas laisser introduire d'air entre la lame et la lamelle.

II ne reste plus qu'a examiner au microscope au grossissement voulu, en ecartant le condeusaleur Abbe, et en se servant du miroir concave. On volt alors des points, des bätonnets on des filaments suivant la culture que Ton examine, refringonts, entralnös dans le courant du liquide ou doues de mouvements propres.

On pent aussi examiner les cultures en so servant d'une lame creuse, e'est-a-diro du pvocede de vulture en cellule*.

On lave la lame creuse representee ci-contre (Pig. 39 et 39 bis) ä l'acide sulfurique, on I'essuie; on la passe plusieurs fois dans la flamme de la lampe ä alcool; lorsque la lame est refroidie, on applique sur sa partie creuse la lamelle sur laquelle on a verse une goutte de la culture ä examiner : il laut prendre garde que cette goulte ne toucbe pas les bords du disque creux, sans quoi, par capillarite, eile disparaltrait entre la lame et la lamelle. Ceci fait, on enduit avec un pinceau les bords de la lamelle de vaseline blancbe, afin d'eviterl'evaporation de la goutte. On obtient ainsiune veritable cbambre humide, dans laquelle on voit, sous le microscope, revolution naturelle de la culture. Koch a employe ce procede pouretudier le cycle de la bacteridie charbonneuse, et il est en efl'et facile, pour faire evoluer la culture, de porter la lame creuse dans l'ötuve ä la temperature favorable ; en I'examinant frequemment on suivra les diverses phases de revolution du microbe. On donne ä ces sortes de preparations le nom de cultures en cellules.

EXAMEN DES CULTURES LIQUIDES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;140

b. Examen des cultures en provenance de milieux solides sans coloration. Sur une lamello bien propre, on depose, avec une pipette finement el'filee a son extriimitö, une gouttolette Je bouillon sterile. Avcc un fil Je platine lin et sterile, on va prelever une trace Jc la culture ä examiner, ct on

Fie. s;).

Fig. 39 bit

Pig. 30. Lame creuse.

Fig. 39 bis. (Joupe de hi lame creuse au niveuu (in godet.

depose cette trace sur la goutte de bouillon. L'operation s'achevc ensuile commo ci-dessus.

La culture en cellules avec une culture en provenance Je milieu soliJo est egalcmont facile. On ensemonce avec une trace de la culture choisie, portee ä l'extremite d'un iil de platine, la goutte-lette de bouillon sterile deposee sur une lamelle; on renverse cette lamelle sur Texcavation de la lame creuse, et on acheve comme ci-dessus.

II. Examen des cultures liquides avec coloration.

a. Technique ycneralv. Prenez une lamelle, essuyez-la; versez sur une des faces une gouüo-lette de la culture recueillie dans une pipette Pasteur; etalez cette gouttelette sur la lamelle avec rextremite de la pi[)Otte promenee ä plat sur la surface de celle-ci; sechez la lamelle (calefaction en la placant, la face enduite tournee en haut, sur I'll. UK uicrobie.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 9

146

EXAMEN DES MICHO-ORGAMSMES.

une platinc chauffante (V. flg. 40); lorsqu'elle est seche on la passe deux ou trois fois dans la flamme ; puls on la depose,, la face enduite en dessous, dans la solution colorante choisie. Lorsqu'on juge la coloration süffisante, on retire la lamelle en la saisissant avec une pince, on la lave dans un cris-Inllisoir contenant de l'eau distillee, poureulever l'oxces de couleur. Avec un Huge flu on essuie la lace non enduite, ot on seche sur la platinc

Platine chauffante.

chauffante. Lorsque la lamelle est sechc, on eclair-cit la preparation en versant sur la face coloree une goutte d'essence de girotle, de bergamotte ou d'huile de cedre; on cnleve I'essence avec le xylol. On verse alors une goutte de bäume sur la face coloree de la lamelle, qu'on depose aussitöt sur une lame : le bäume s'etale, et la preparation montc'e est pretc pour 1'examen.

L'examen so fait ici avec des grossissements variables, mais toujours avec l'eclairage Abbe et le miroir plan.

Quel quc soit le procedi de coloration employi, le mode de montage de lit lamelle est le meine: aussi ne reviendrons-nous plus sur ce sujet dans la suite.

b. Technique spiciale. Nous aliens maintenant

EXAMEN DES CULTURES LIQUIDES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; i47

passer en revue les divers proc^des de coloration des lamelies.

1.nbsp; Coloration des lamelles dans les solutions hydro-alcooliques. Placez la lamelle, la face enduite en bas, sur la surface de la solution; laissez-la cinq rniiiutos dans les solutions rouges ou violettes, un (juart d'heure dans la solution bleue.

Les solutions rouges et violettes colorent d'une facon intense, mais grossissent les elements. La solution bleue colore plus legerement, mais donne des preparations d'une finesse extreme.

2.nbsp; nbsp; Coloration des lamelles pur la melhode de Löffler. Placez la lamelle, la face enduite en bas, sur la surface de la solution bleue de Löffler, proa-lablemont liltree et contenue dans un verre de inpnlre, et laissez pendant cinq minutes au moins, une demi-heure au plus.

Oecolorcz rapideraent dans de l'cau aciduleo par l'acide acetique (une ou deux gouttes d'aeide pour le contenu d'un verre de montre).

Lavez avec soin pour enlever tonte trace d'aeide, sechez, montez.

Les microbes sont colores en bleu fonce, le reste de la preparation en bleu päle.

3.nbsp;Coloration des lamelles par la melhode de Malassez et Vignal. Placez la lamelle, la face enduite en bas, sur la surface d'une solution fraiche et filhve de bleu Malassez. Laissez colorer pendant cinq miautes au moins, une domi-heure au plus.

Decolorez vapidement dans la solution suivante :

Solution aqueusc tie carbonate de soudo ü 2 p. iOO. 2 cc. Alcool absolu.................................... 1

Lavez, sechez, montez.

Los microbes seront colores en bleu fonce, le reste de la preparation en bleu pale.

4.nbsp; Double coloration des lamelles pur la. methode de

148nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;EXAMEN DES MICHO-ORGANISMES.

Gram. l'lacez la lamellc, la face enduite en Las, sur la surface du violel ile Gram, pendant au moins cinq minutes. Portez ensuile la lamelle dans la solution iodo-iodurce pendant uno ä deux minutes; la lamelle prend une teinle brim fonco.

Dt'coloroz aussi completemont que possible dans I'alcool aisolu.

Lavez et sechez.

Placez ensuite la lamelle dans une solution hydro-alcoolique faible d'eosine, de brun de His-marok, ou de yesuvine pendant une minute. Lavez, seclicz, monlez.

Les microbes sont colores en violet fonco, les elements ligures en rose ou bien en brun, suivant qu'on a employe comme coloration Jc fond, l'öosine, le brun de Bismarck ou la vesuvinc.

Nota. It sen laut, et de beaueonp, que Ions les microbes traites par lo precede de (Jram resis-tcnt au troisifeme temps, e'est-a-diro a la decoloration par I'alcool absolu, laquo; prennent le Gram gt;gt;, pour nous servir dc la locution usitee en bacte-rlologie.

Les microbes qui ne laquo; prennent pas le Gram raquo; se colorent alors comme le fond, e'est-a-dire en rose pale par I'eosine, ou en brun par 1c brun de Bismarck ou la vesuvine.

La metbode de Gram doit toujours etre tentöe pour tout microbe donnä, car eile fournil un ele-monl diagnostique important, suivant ipie le microbe prend ou non le Gram.

Dans les cultures pures en milieux solides ou liquides, onobtient des preparations fort nettes en traitant les microbes par la methode de Gram, lorsque cette methode esl apte a les colorer : le microorganisme tranche alors plus vivement sur le fond, dont le distingue sa coloration späciale, que dans les preparations a coloration simple, oil

EXAMEN DES CULTURES LIQUIDES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;149

il ne so detache ties eltiiuentsenvironuants quo par sa coloration plus forte.

;gt;. Double coloration des lamelles far la mdtlwdn d'Ehrlich (employee pour les bacilles de la tuber-culose et de la lepre).

Placez la lamelle dans le liquide d'Ehrlich (violet ou rouge) contenu dans un verre de montre, et chauffez sur la platine jusqu'a co quo dos vapours so degagent ä la surface du liquide.

Laissoz la lamolle en contact, avec la solution colorante pendant au moins cinq minutes.

Döcolorez trcs rapvlement dans Falcool absolu contenant un dixiemc d'acidi; azoliquo.

Lavez a fond et scchez. Faites la double coloration avec Feosino, 1c hrun de Bismarck ou la vesu-vine, si vous avez employe I'Ehrlich violet; avec le bleu hydro-alcoolique, le brun do Bismarck ou la vosuvine,si vous avez employe rEiirlich rouge.

Lavez, sechez, montez.

Les bacilles sont colores en violet, lo fond en rose ou brun; ou bion les bacilles sont en rouge, et le fond en bleu ou brun.

0. Double coloration des lamelles par la mühode dc Weigert. Colorez d'abord la lamelle au picro-cannin ordinaire, ou micux an picro-carmin do Orth : cinq minutes de contact au plus suflisent. Lavez alors la lamelle dans I'eau distillee, secliez-la etplacez-la dans la liqueur de Weigert pendant environ dix minutes.

Passoz la lamelle dans la liqueur iodo-ioduiee. Sechez alors completement avec du papier-flltre fin, ou mieux avec une ou deux fouilles bien propres de papier a cigarettes.

Lorsque la lamelle ost Men suche, placoz-la pour la decolorer dans :

ifuile d'aniline blanche.................. - portiof.

Xvlol................................... I -

150nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; EXAMEN DES MICROORGANISMES.

Surveillez la decoloration. Lorsque la leinte violette a completement disparu, et qu'il ne reste plus i]ue la leinte du picro-carmin, lavez au wrjlul pur, et monlez dans le bäume.

Los microbes sont colores en violet; le reste de la preparation en rose.

Nota. Tout ce quo nous avons dit do la me-Ihode de Gram s'applique a lametliode de Weigert; il faul ajouter seulemont que beaucoup de microbes qui ne prennent pas le Gram, prennenl k Weigert, beaucoup plus puissant, mais aussl inlV'-rieur en linesse de coloration.

III. Examen des cultures provenant de milieux solides avec coloration.

On prend puremcnt, suivantlamethodc indiquee au chapitre V, avec le 111 tie platine, une parcelle minime de la culture ä examiner; on la melange a nne goutte de bouillon sterilise, place sur une lamelle bien propre. On a ainsi un liquide lactescent. On nettoie une seconde lamelle qu'on applique sur la face enduite de la premiere; avec le pouce et l'index on les fait glisscr Tune sur I'autre. Las deux lamelles sont ainsi uniformement en-duites. II ne reste plus qu'ä les sechcr el les co-lorer par les precedes indiques au paragraphe II ci-dessus.

IV. Examen des liquides et des pulpes organiques

1. Examen des liquides sans coloration. Los liquides iHant recueillis comme nous l'avons dit au chapitre IV dans des pipettes, il suftit d'en placer une goutte sur une lamelle, de ronverser celle-cisur une lame. Lagoulle s'etale entre cllos, et Ton porle la preparation sous le microscope en

EXAMEN DES CULTURES SOLIDES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;131

procedaut comme nous l'avons dit au paragra-phe Kl).

2. Examen du sang twee coloration. On place uno gouttelette Jo sang sur uno lamolle; avec l'effl-lure do la pipette prouienee a plat, on Fetale en couche mince et uniforme sur toute la surface de la lamelle, ou micux encore, on ('#9632;erase el on etnle cotte goutolelte ontro deux lamelleä. On seche sur la platine chauffante.

On traite alors par le melange d'alcool el d'e'ther d parties egales, afin de bien fixer les globules et de dissoudre les parties grasses; on seche, et 1'on co-lore par Tun des precedes indiques ci-dessus de coloration simple ou double (Gram ou Weigert), si la coloration double est possible.

Dans les colorations simples, la liqueur de Löf-fler donnc d'excellents rusultats, car elit pormot. une sorte de double coloration : les minrobi.^,! sent en bleu vif, et les globules en vert pale.

Dans les preparations de sang des oiseaux

poule, pigeon), la solution bydro-alcoolique de

violet Je gentiane donne de tres beaux resultats.

Le bleu de Lofflor teint le noyau du globule san-

guin en bleuvif, lapartie peripberique en vertpalo.

Dans les doubles colorations il faut colorer les globules a Yiosine qui est ici la couleur ^.'election.

#9632;i. Examen de la scrosite peritoneale, pleuralc, pe-ricardique acec coloration. On etaleuno gouttc du liquide recueilli dans une pipette sur une lamelle; on seche, on colore et on monto comrne s'il s'agissait d'une culture liquide.

(1) 11 ne faut j;im;us nöglijjer de proceder :'i eel examen dans uue autopsie, surtout pour le sang, ('.est par eo procede que Pasteur el ses eleves ont decimverl le microbe du cholera des poules, du rougel, etc. On sail que pour le charbou il donne des resultats frappants, et plus irnportauts peut-etre que ceu\ qu'on oblient par la coloration.

4 52nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; EXAMEN' DES M1CR0-ORGANISMES.

Pourla sevosito peritoneale, lemeilleur precede consistc ä placer des lamelies bien propres sur la surface du loie qui se Irouvo toujours enduilc de serosite. On sf-che et on colore. La lamelle est ainsi enduite d'une coucho uniforme aussi mince que possible.

4.nbsp; Examen des pulpes d'organe, et de la moellc os-seuse avec coloration. Les pulpes ont ete recueil-lics purement dans la rate, lo foie, etc.; la ruoelle osseuse a ete puisee dans le canal medullaire

V, chap. IV) : pour en faire unc preparation, il suffltde placer une goutte de la pulpe donnee sur une laraeile; on applique alors une seconde lamelle sur la premiere : la goutte est incluse entre (es deux lamelles; cn pressant legerement entre le pouce et l'index, et en faisant glisser les lamelles l'une sur l'autre, on ecrase et on etale la pulpe. On seclie et on colore par les precedes divers ci-dessus indiques.

5.nbsp; Examen des muscles avec coloration. La msect;-thode la plus simple est la methode du laquo; frottis raquo;. On coupe un fragment do muscle a l'endroit oü la lesion est le plus marquee, et on en trotte legerement la surface d'une lamelle. On seche et on colore par les precedes cennus.

ö. Examen du pus avec coloration. Quand le pus est liquide, on Telale sur los lamelles comme les pulpes. S'il estcaseeux, on en depose unc par-celle sur une lamelle, et on verse surcelte lamelle une goutte do bouillon sterilise. Avec la palette cn platine slrrilc, on melange le pus au bouillon. On obtient ainsi un liquide opalescent epais. On place une deuxieme lamelle sur la surface enduite do la premiere, et on les fait glisser Tune sur I'au I re. On a ainsi deux lamelles que Ton st-che et colore.

aECBERCHES DANS LES COIPES DE TISSUS. 1 ü3 V. Recherche des microbes dans les coupes de tissus.

La coloration des coupes constitueun des iminls les plus importants de la technique bacteriolo-gique : c'est grace ii ce procede quenous pouvons reconnaitre la presence et 1c siege des microor-ganismes dans les divers tissus, et nous rendre compte des lesions qu'ils y provoquent.

11 serait a desirer que Ton possedät pour la recherche des inicroljes dans los coupes dos agents dueolorants speciaux qui, epargnant le microbe donno et lui seul (tel l'acide azotique au dixieme dans 1c proeöde d'Ehrlich pour la tuberculose et la lepre;, nous fourniraient une methode d'cxa-men et de diagnostic d'une süreto parfaite : mais on est encore loin d'en etre arrive ä ce degre de perfection.

Les coupes se colorent par deux sortes de me-Ihodes :

1deg; Les methodes do coloration simple (Loftier, Malassez et Vignal, etc.) : toute la preparation est unilorniement coloroe ; mais les microbes tran-chent sur le tissu par une teinte plus vivo ;

#9632;1quot; Los methodes de double coloration (Gram, Weigert, Ehrlich) : les microbes sont teints d'une couleur, le fond d'une autre couleur.

Enliu nous exposerons en terminant la methodo du docteur Kühne, qui pent donner do beaux re-sultats lii oil les autres methodes ont echoue.

La technique do la manipulation des coupes dif-fere legerement suivant ([uo la coupe a ete faite par un jirocede ou par un autre : les deux sortes de microtome auxquoiles nous donnons la preference sont:

a) Le microtome ä congelation;

h) ho microtome a la paraffine.

Toute piece destinee a etre coupee pour 1'exa-

IÖ4nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;EXAMEN DES MICRO-ORGANISM ES.

men bactöriologique doit ötre, aussitöt apres I'au-lopsie, delntee en petits fragments cubiques d'un demi-centimetrc de cöte au plus, et les fragments doivont fetreplacös dans l'alcool absolu : il faut so servir ü, cet effet de flacons elroils et hauls, de teile facon que les fragments soient reeouverts d^:une haute couche d'alcool.

A. Preparation, coloration et montage des

COUPES FAITES AI MICROTOME A Cu.NCKLATIo.N (1 ).

Preparation. l.apieceayant sejourne au moins 24 heures dans l'alcool absolu, on la place pendant 24 heures dans une solution de gomnie sterilise: lagomme s'inflltre dans toutes les mailles et les anfractuosites du tissu : eile formera, pour ainsi dire, une charpento Interieure, qui dounera de la I'ermete au tissu : lorsque la penetration de la gomme est süffisante, la piece tombc au fond du vase qui contient la solution.

La piece gommee est portee sur le microtome oü eile est coupoe d'apres la technique speciale a I'instrument, technique quo nous n'avons pus a rappeler ici.

Les coupes sont recues dans un cristallisoir rempli d'eau dislillee : on les laisse degommer pendant une heure. On les transporte ensuiteavec la palette de platino dans l'alcool absolu, oü on les laisse se deshydrater pendant une heure.

Les coupes sont alors pretes pour la coloration (2).

Mi Nous trailmis ici de la technique avoc le microtome i coagela-tion. (In rapportera aiscment cette technique aux coupes failes avec toutautre microtome automatique, ou avec le microtome a main (le microtome ä paraffine excepte).

(2) Ou pout avec le microtome a congelation faire des coupes de pieces I'raichcs; on eougele la piece sur le microtome, on la coupe, et on la rccoit daus do I'eau dlstilleecontenanl 1 p. 1U0 de sei marin. Les coupes sulnroul eusuite les diverses methodes de coloration.

RECHERCHES DANS LES COUPES DE TISSÜS. 155

Coloration et montage des coupes. 1. Coloration simple pur la mclhodc de Löfßer. (mmergez la coupe dans une solution fralche et liltree de bleu Loftier pendant dix ii quinze minutes. Decolorez lapidement dans de l'eau distillue, contenant une ou deux gouttes d'acido acetique pour le contenu d'un verre do montre.

Montez alors la coupe : cette operation se fait de la facon suivante. Porlez la coupe ä Faide de la palette de platinc dans un cristallisoir reinpli d'eau dis-lillee ; prenez une lame bien essuyre, plongez-la obliquement de la main gauche dans lo cristallisoir, et avec une aiguille ainenez doucement la coupe sur la lame, et placez-la do facon h ce qu'elle ne fasse aucun pli. Enlevcz la lame chargee de la coupe; deshydratez par I'alcool absolu. Sechez et lixez la coupe sur la lame a l'aide de fcuillos de papier a cigarettes.

Eclaircissez alors a Vesscuce de girofle; enlevez I'exces d'essence par lexylol; laissez tomber sur la coupe unegoutte de bauine du Canada dissous dans le xylol, el recouvrez d'une lamelle bleu propre. La goutte de bäume s'etale el la coupe cslmoutec.

Un peul eclaircir la coupe avec l'essence de ber-gamotte, ou I'huile de cedrc, el on peut monier dans la resinc d'Ammar.

Les microbes, dans celte methode, se colorenten bleu fence, les autres elements en bleu pale.

2. Coloration simple par la mithode de Ualassez et Vi-gnal. Immergez la coupe dans la solution de bleu Malasscz, fraicbe el liltree. pendant dix minutes.

Decolorez rapidemcnldans la solution suivante :

Solution aquouse do carbooate de soudß

i i p. 100............................... 2 cc.

Mcu.il absolu.............................. 1

Montez la coupe suivant le proeede indiqud ci-dessus.

1Ö6nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;EXAMEN UES MICRO-ORGANISMES.

Les microbes sont teints en bleu fonai, les autres elements en bleu päle.

3.nbsp; Coloration double par la mithode de Gram. Placez la coupe dans le violet de Gram pendant un quart d'heure, puis dans la solution iodo-ioduree une minute. Decolorez ä fond dans I'alcool absolu.

Placez alors la coupe, pour obtenir la coloration du fond, dans une solution hydro-alcoolique faible d'eosine, de brun de Bismarck, de vesuvine, on dans le picro-carmin de Orth, pendant deux ou irois minutes.

Montez par le prucede indiqui plus hunt.

Les microbes sont colores en violet foncc, les elements anatomiques en rose ou en brun piilc, sui-vant qu'on a employe Feosine et le picro-carmin, ou le larun de Bismarck et la vesuvine.

4.nbsp; Coloration double par la mrthode d'Ehrlich.  Placez les coupes dans le rouge ou le violet d'Ehrlich, d/Void,pendant 12heures aumoins, i-iheures au plus.

Decolorez ensuite dans I'alcool absolu coulenant un dixieme d'acide azotique ; ne laissez la coupe au contact de cette solution que quelques se-condes, at achevez la decoloration dans I'alcool absolu.

Faites la double coloration avec I'eosine, le brun de Bismarck on la vesuvine, si vous avcz employe le violet; avec le brun de Bismarck, la vesuvine ou la solution hydro-alcoolique de bleu de methyle, si vous avez employe le rouge d'Ehrlich.

Montez par le procede indique ci-dessus.

Les microbes sont colores en violet, et les elr-nionts anatomiques en rose ou en brun pale ; ou bien les microbes sont en rouge, et les elements en brun pale ou en bleu, suivant le procede employe.

:i. Coloration double par la mctlwdede Weigert.

RECHERCHES DANS LES COUPES DE TISSÜS. 157

Colorez d'abord la coupe duns l'eosine, le brun de lüsinarck ou micux dans le picro-carrnin de Orth. Lorsqu'apres quelques minutes la coupe est suffi-saniment coloree, on la met dansdel'eau disUUee, elon la inonte sur lame; on la deshydi-alca 1'alcool absolu, on la seche et on la fixe sur la lame en memo temps ä l'aide de feuilles de papier a cigarettes.

Sur la coupe sechöe et fixee, on verse deux ou trois gouttes du violet de Weigert, qu'on laisse en contact pendant dlx minutes.

On laisse ecouler alors l'exces de mauere colo-ranle, et on verse sur la coupe quelques gouttes de la solution iodo-ioduree, qu'on laisse une minute en contact. On seche alors complelcment avec le papier a cigarettes.

On decolore en versant quelcjues gouttes d'huile d'aniline blanche sur la coupe : on renouvello I'huile d'aniline au besoin plusieurs fois jusqu'ä dccoluration complete. On cnleve l'exces d'huile par le xylol, on laisse tomber sur la coupe une goutte de bäume ou de resine d'Ammar et on recouvre d'une lamella seche et propre.

l.es microbes sont colores en violet fence, et les elements anatomiques en rose.

li. Preparation, coloration et montage des

COUPES FAITES AC MICHOTOME A LA PARAFFINE.

Los manipulations preparatoires que Ton fait subir ä la piöce qui va etre eoupee par le microtome a paraffine sont longueset delicates; la coloration et le montage exigent du soin et de l'adresse, mais les avantages du precede sont tres marques : coupes d'une regularite part'aile, d'une finesse qui pent aller jusqu'au millieme de millimetre. Ces avantages compensent tres largement les inconve-

1Ö8

EXAMEN DES MICR0-0RGAN1SMES.

nienls. (Test done la un proeude des plus recom-mandables el qu'il osl neecssaire d'indiquer.

On pout avec le microtome a la paraffine couper des fragments d'organesnon coloresou couper dos fragments colords prialablement au carmin (picro-carmin ou carmin boraoiquoi : de lä deux proi^'des distiiu'ts quo nous aliens decrire. Disons de suite qu'il est trös avantageux d'employer le second pro-cödo lorsque la double coloration est possible, cai' la pioce etant coloröe au carmin il y a moins de manipulations k faire siil)ir aux coupes si lines et, par consequent si fragiles.

Premier protvde : La piece nest pas calorie avant de passer /tu microtome.

On coupe en forme cubique un petit fragment de l'organe que Ton se propose d'examiner, et on le laisse durcir dans ralcool absolu pendant au moins 24 heures. Au bout de ce temps, et pour passer au microtome, la piece doit subir les manipulations suivantes :

1quot; Sejour dans un melange ä parties egalosd'al-cool et d'ether pendant 24 heures.

2deg; Sejour dans l'öthcr sulfurique pur pendant 24 heures.

3deg; Sejour dans une solution concentree do paraffine dans Father sulfurique pendant 24 heures.

4deg; Enfin sejour dans la paraffine fondue a -j- 43deg; pendant 24 heures.

On laisse alors refroidir la paraffine qui, ease coagulant enrobe la piece; lorsqu'elle a atteint le degre de durelo uocessaire, c'esl-a-dirc lorsqu'elle est susceptible d'etre nettement coupeo aueoutoau, on taille autour do la piece enrobee, ä l'aide d'un bistouri bien tranchant, un cylindre quo I'on fait ensuile penetrer par frottement dans un des go-dels ronds du microtome, et Ton procede ä la coupe qui pent so faire ä des öpaisseurs trös variables,

BECHERCHES DAMS LES COL'PES DE TISSUS. 159

qu'indique uno talile spikiale placee sur le microtome, table ä Faide de laquelle on regie mathema-tiquement rappareil. On obtient ainsi un ruban de coupes rappelant la forme du toenia solium, dans chacun des anneaux cluquel se trouve au centre une coupe entouriie de paraffine.

Dcuxicme prociidiJ : La piece est roloree au cannin avanl d'etre coupec.

On coupe un tres petit fragment de 1'organe que Ton veut examiner, de teile facon quo Ton obtienne un volume de 1/2 centimetre de long sur environ 1/4 de centimetre do large. On le durcit d'abord par un sejonr dans L'alcool absolu d'au moins 24 heures. Ensuite on le soumet ä 1'action des diflerents reactifs suivants :

1deg; Sejour dans une solution de cannin nouvel-lement filtreo pendant 12 heures (coloration en masse);

2deg; Sejour dans l'alcool absolu pendant une heure;

3deg; Sejour dans un melange d'alcool et d'essence do bergamotte a parties egales pendant une heure ;

4deg; Sejour dans Fessence do bergamotte pure pendant deux heures;

^:)quot; Sejour dans une solution äpaisse de pa-ral'line (paraffine Dumaige) dans 1'cssence do bergamotte, pendant au moins deux heures, ä l'etuve ( 20deg; a W⁰);

0deg; Sejour dans la paraffine pure fondue, ä l'tituve entre 40deg; a -j- SO⁰, pendant au moins doux heures.

On laisse la paraffine se prendre en masse; et Ton agit do la facon. indiquee au premier precede pour obtenir les coupes. Los anneaux du ruban ainsi obtenus contiennent chacun une coupe co-loree en rose par le cannin, et limitee par une zone de paraffine.

iOOnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; EXAMEN DES MICRO-ORGANISMES.

Fixation sur les lames des coupes dunners par Ic microtome ä paraffine. Qm; la coupo damp;bitöe par le microlome soit ou noa coloree, lo procede est 1c meine. On prend dans le ruban de coupes deux fragments de cinq ä six coupes chaeun, et on les dipose sur une lame prepares de la t'aeon sui-vante : la lame bien propre, bien cssuvee, a ete endüite il'un cöte et sur une surface de trois centimetres de long sur un et demi de large d'une solulion tres legere de gomme. On dispose sur cette surface enduite de gomme les deux fragments du ruban de coupes. Tun au-dessous de l'autre, et tons deux parallelement au grand axe de la lame.

On fait ögoutter la lame, ot on laisse secher a l'abri de la poussiere pendant quinze heures environ. Au bout de ce temps on porte la lame sur la platinc chauffante jusqu'ä ce que la paraffine emprisonnant les coupes devienne transparente. On enleve la paraffine par le xylol, et 1c xylol par Talcool; on sfeche alors avec des feuilles tres propres de papier ä cigarettes. Les coupes sont ainsi solidement tixees sur la lame et pretes a subir les manipulations destinees ä la coloration des bad lies. Nous n'avons pas ä revenir sur ce sujot quia ete dejä traite longnement ^le lecteur se reportera aux pages precedentes; repetons seulo-ment que, lorsque la double coloration est possible, il est toujours indique de donner la coloration du carmin ä la masse du lissu avant tie la soumettre au microtome.

On pent parfois operer plus rapidement la fixation sur la lame, suitout lorsqu'll ne s'agil quo d'un examen histologique de la coupe carminee. Sur la lame, on etend avec un pinceau une legere couche de la solution suivante (Sclucllibaüm),

Essence do girode............................ 3 v.

Coilmliuu.................................... ! ^,f.

RECHERCHES DANS LES COUPES DE TISSUS. 1G1

puis on dispose les coupes coinrne il a ete dit, on los fixe avec le pinceau, on fond la parraffine, etc. coinnio il est dil ci-dcssvis.

Rbchercbe dks microbes dans les tisscs par la methode üe kühne.

Getto methode est tres avantageuse ä employer, car eile permet de colorer dos especes micro-biennes qui so colorent mal par les procedes ha-bitnels. 11 est done indiqiie de l'employer non seulement dans la recherche de microbes connus, mais surtout lorsqu'il s'agira d'examiner des coupes susccptibles de contenir un agent inconnu.

Cost par l'emploi ccjinbine du bleu de melhylc et du krystalviolet quo Kühne est arrive ä colorer tous les microbes, sauf le preleridu microbe de la syphilis. D'aprts le resnUat de sos experiences, il divise les microbes au point de vue de la facon dont ils se comporteut vis-ä-vis de ces deux nia-tieres colorantes en trois classes:

1deg; Ceux qui se colorent par le bleu seulement.

2deg; Ceux qui so colorent par le krystalviolet seulement.

3deg; Ceux qui prenuent indifTeremment les deux matiercs colorantes.

Lorsqu'on a ä examiner des coupes dans les-quelles on squpconne l'existence de microbes, il faul done les trailer des deux faoons pour etre certain de colorer les micro-organismes.

Manuel opcnitoiie. Avant de placer les coupes dans les solutions quo nous allons indiquer, il taut lesdeshydraler dans I'alcool ahsolu.

1deg; Solution mi bleu de mdthyline :

l'lacez les coupes pendant 15 minutes dans une solution äl p. 1(10 decarboiiatod'ammoniaquedans laquello vous ajoutez goutle il goutleune solution

162nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; EXAMEN DES MICRO-ORGANISMES.

aqueuse coucontree de bleu de methylc jusqu'ä ce que vous ayez obtenu une leinte bleu funce.

Lavez rapidement ensuite les coupes dans une solution d'aeide chlorhydrique a un milliöme, puis dans l'cau distillde.

Montez la coupe sur une lame; sechcz sans employer l'alcool; öclaircissez par le xylol et montez dans le bäume.

S,⁰ Solution au kristallviolet:

Placez les coupes pendant 10 minutes dans une solution de carbonate d'arnmoniaquea 1 p. 100, dans laquelle vous ajoutez goutte a goutte une solution aqueuse concentric do krystalviolet, jusqu'ä ee que vous ayez obtenu une leinte violet fonce (pour la liiberculose, les coupes doivent roster deux heuros dans le bain colorant). Traitez onsuite les coupes pendant deux minutes par la solution iodo-ioduree de Gram.

Portez onsuite la coupe dans une solution al-coolique conccntroe de fluoresceine, jusqu'ä decoloration presque complete. Achevez la decoloration dansFalcool absolu; eclaircissez par I'essence de ijirollc; enlevez Texces d'essence par le xylol, et montez dans le baume.

En employant cos deux procedes simultanornont on colorera sürement los microbes contcnus dans les coupes, soit en bleu, soit en violet ou indillo-remmont en bleu ou on violet.

On pent obtenir des doubles colorations avec le krystalviolet on solution alcaline, en colorant la coupe au picro-carmin avant de la placer dans la solution violette.

Kühne est arrive ä remplacor l'alcool comme liquide d'extraction par Fhuile d'aniline; soule-mont, ici, /(t solution colorante est acide. On pent obtenir par ce procede do belles doubles colorations on colorant au prcalablo la coupe par le

H EC II EUCH ES DAN'S LES COUPES DE TISSUS. 163

picro-camiin, le brun de Bismarck ou la veäuvinr. I'laccv. la coupe coloree au picro-carmin Jans le liquide suivant, pendant un quart d'heure :

Solution aqueuse concentree lie krystaltviolot. yO gr. Acide cblorhydrique........................ 1 gae.

Lavez ensuite la coupe dans I'eau; lraitez-la pendant deux minutes ])ar la solution iodo-ioduree de Gram. Montez sur lamelle; sechez; decolorez par I'liuile daniline; enlevez I'exces d'huile par le xvlol et montez Jans le baurue.

DEUXIEME PARTIE

INTRODUCTION

La deuxiöme parlic de ce livre sera consacreu h passer sommairement en revue quelques maladies infoclieuses de l'homme et des animaux, et a enexposer les caraetferes microbiologiques. Depas-sanl cependant le cadre strict d'une etude bacte-riologique pure, nous entrerons dans les quelques details de pathologie experimentale que comporte chaeune des affections dont nous traiterons.

Le cercle des maladies infectieuses est vasle, et il s'en taut de beaueoup que 1'agent pathogene soil aujourd'hui connu et demontre pour chaeune d'elles : la ruriole, la rougeole, la scarlalinc, parmi les maladies humaines, sont incontcstablement des maladies infectieuses, et nous ne savons rien de leur cause reelle, cquot;est-ä-dire de leur agent pathogene; il en est de meine de la clavelie, de la päripmumonie, etc., parmi les maladies animales. L'exemple le plus frappant, ä ce point de vue, n'est-il pas la rage, dont le virus est attenue par M. Pasteur, alors que l'agent de la virulence est entierement inconnu?

A l'hcure actuelle, on peut poser de la faeon sui-

100nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; INTRODUCTION

vante la serio dos problemcs ii resoudre pour uno maladie infectieuse donnöe :

1.nbsp;Quelles especcs animales (et 11 estbien entendu que ce terme comprend rhorame) la maladie atteiat-elle spontanäment, c'est-ä-dire dans las conditions ordinaires de la vie, en dehors de toute intervention experiinentale? Quelles especes sont S|iontaiiemeiit rdfractaircs?

2.nbsp; Quelles especes sont susceptibles do prendre la maladie experimentalement, et quelles autrcs sont refractaires?

Comment agissenl sur les especes susceptibles les divers modes experimentaux que nous posse-dons pour conl'erer les maladies aux animaux : inoculations superflcielles a la lancctte, ou par scarification; inoculation dans riiypoderme ; inoculation dans le peritoine; injection dans les voincs; infection par lo tube digestif?

X Quel est le micro-organisme pathogene do la maladie infectieuse en causequot;? Quols sont les carac-teros do ce microbe? Comment so fait la prouve que la maladie ost, suivant rheureuse expression do II. Houlov, fonction du microbe et de lui soul?

Reprenons les divers terraes do ce probleme.

1. L'ne maladie infectieuse donnee n'a d'action quo sur un groupe plus ou moins large d'ospeccs animales; ii iron est peut-elre qu'une soule, la rage, qui dans I'elat do nos connaissanccs actuelles atteint [.'ensemble des especes animales.

Mais en dehors de la rage, parmi les maladies infoclicnses, quelques-unes sont exclusives ä l'homme et ne frappent jamais les animaux : tols la rougeote, la scarlatine, la lepre, la fievre tijphoide, le cholera : d'autres frappent Thomme et quelques especes animales, rcspectant les autres. Aiusi la morve frappe dans les conditions naturelles riiomme, le cheval, l'ano et jamais les bo-

HE LA DEUXlfeME PARTIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;167

vieles; le charbon baetdridien atteint rhomme, le inouton, le bumf, 1ü cheval, tres rarement le porc et le einen, mais Jamals les oiseaux; d'aulres encore ne frappent que les animaux et jamais l'homme, tels la clavelde, la piripneumonie, le rouget, le charbon symptomatique; et parmi les animaux elles n'atteignent que certaines espeees, le degre de frequence des atteintes etunt tres varudile de l'une a lautre de ces especes : c'estla uno caraeleristique des plus nettes, et qu'il Importe de bien mettre en reliel'quand on traite des maladies infectieuses.

Ces donnees de pathologie coinparee auront encore le grand avan tage de replacer rhomme dans son cadre naturel, et de ne pas l'isoler des animaux dont le rapproche la pathologie aussi bien que l'anatomie et la physiologie.

2. L'experimentation a grandement elargi la limite d'aetion de certaines maladies infectieuses. A cöte des especes prenant naturellement une maiadie, eile a demontre la possibilite d'infecter d'aulres especes naturellement refiactaires; eile a prouve aussi que certains animaux resisteut a la transmission experimentale aussi bien ((u'ä la contagion naturelle; eile a enlin montre qu'il existait pour teile maiadie une espece animale qui pouvait etre consideree comrae un veritable reactif de cette maiadie. Chacun de ces points doit etre soli-dement etabli dans la limite du possible pour toute maiadie inl'eclieuse, dont l'etude ne saurail etre d'ailleurs qu'incomplete sans ces notions de pathologie experimentale.

L'u mot. de developpement seulement sur ces propositions.

La tuberculose de la chevre et du mouton esl inconnue: ces animaux sont a peu pres complete-inent refraetaires a l'inoculalion sous-cutanee ; ils suecombent rapidement avec une tuberculose

108nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; INTRODUCTION

miliafre type, ä la suite de ['injection intra-vei-neuse.

Ue memo, il n'existc que de tres rares exeraples de chats coiitraclaut uaturellement la tubercuiose, et cependant 1'infection tuberculeuse experimeu-tale (par la vole digestive) est facile chez cet animal.

Le cobaye no prend certainement pas le charbon bacli'ridien par contagion naturelle : l'inoculation lui coufere la maladie ä coup sür.

Rofractaircs a la morve sponlunee.les bovitles soni tout aussi refractaires a la morve experimentale.

Le lapin est devenu par les enseiguemeuts do la pathologic experimentale un reactil' dillerontiel parfait outre le charbon bactamp;ridien qui le tue ä coup sür, et le charbon bacu'rkn qui n'a aucune action sur Lui.

h'dne ost lo reactif le plus sür, un reactif infail-liblo de la morve, dans les cas doutcux.

Le cobaye est employe couramment comme un excellent roactif do la tubercuiose : l'inoculation en fait la piorre de louche experimentale de l'affec-tion.

Lo cobaye encore rend les plus grands services quand on se trouve devant uno affection porcine epidemique affectant les allures du rouget : si le cobaye succombe ä l'inoculation des produits viru-lonls du pore suspect de rouget, on pout affirmer (ju'il y a erreur do diagnostic, qu'il s'agit d'une affection autro quo le rouget.

En dehors dc la preuve bactoriologique, a laquelle doit roster le dernier mot, quand il s'agit du diagnostic certain d'une maladie infectieuse, et pour les affections oü cette preuve ne pout etro faite par suite do notre ignorance actuelle de l'agent, ainsi que pour le praticien qui ne pout s'assurer le secours do la microbiologie, le dia-

DE LA DEÜXIEME PARTIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 169

gnostic d'uue maladie infectieuse par rexperiinen-tation sur les especes de choix pout rendre de grands services en ecurtant tolle ou teile hypothfese, en affirmant au contraire teile ou teile autre.

Ce n'cst pas tout encore, et voici um ccHe fort interessant de rexperimentation : les diverses especes animales susceptibles de prendre experi-iiicutalement unc maladie infectieuse ne la pren-nont pas toutos de la meme facon. La tuberculose peut fitre facilement conierue au cobaye, au lapin par inoculation sous-cutanec, alors ipie cette meine inoculation eclioue sur lo chat qui ne peut etre etre iufectö que par la voie digestive; lo cheval echappe ä tonte tentative d'infeclion tuberculeuse experimentale : seule l'injection intra-veinouso peut reussiret vaincre son immunity.

Les examples se multiplicraieul aisemout pour les autres maladies; nous renvoyons le lecteur ä l'expose que nous ferons de chacune d'elles.

En pathologie infectieuse humaine nous sommes malheurousement, sauf quelques cas (tuberculose, morve, charbon), prives de ce mode precieux de diagnostic.

3. A) llechorcher et dömontrer la presence d'un micro-organisine dans Torganisme malade;

H; Caracterisor ce microbe par les difTerenles reactions dont nous disposons actuellement;

C) Faire la prcuve de son röle patliogeniqvie reel et exclusif, en reproduisant la maladie par l'ino-culation de ce microbe et de lui seul :

Tel est le troisieme forme et le plus important dans l'etude d'une maladie infectieuse.

A) 11 convient. done d'abord de poursuivre la recherche du microbe dans les tissus, liquides, secretions et excretions de l'individu (homme ou animal) qui viont de suecomber ä la maladie infectieuse; c'est-ä-dire en d'autres formes de faire la

Pll. DE MICROBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 10

170nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; INTRODUCTION

demonslration du microbe, et d'elablir ses localisations dans I'organisme.

Deux procedes qui doivent marcher de pair sont usites pour cette recherche :

a. L'examen au microscope sw tamelles des pulpes organiques, des liquides, des secretions normales ou pathologiques, etc., et l'examen histo-logique des coupes de tissus.

6. Lcs cultures : avec cos pulpes, ces liquides, ces secretions recueillis puremcntonensemencera les divers milieux qua uous avons enumeros : bouillons, tail, gelatine, gelose, serum, pomme de terre, etc. La technique de ces operations a ote decrile tout au long dans notre premiere partie. Les cultures sur gelatine en plaque lourniront un precieux moyen d'isoler le microbe cherche, dans les produits qui le contiennent, mais associe a des germes etrangers.

Les cultures devront se faire en presence de fair et aussi dans le vide.

Le procede des cultures est infiniment plus de-licat, plus sur quo l'examen microscopique sur lamelies et en coupes. Pour pcuque Tagentpatho-gene seit rare dans un milieu donne, scule la culture, qui permettra au germe, liU-il meme unique, de se multiplier a rinfini, reussiraä faire la preuve de son existence.

Cette recherche du microbe pathogene, soit par l'examen microscopique, soil par les procedes divers de culture, doit toujours se faire dans le delai le plus rapproche de la mort : la putrefaction commencante, en introduisant des micro-organismes laquo;rangersdans les tissusetleshumcurs, pourrait donner lieu a des erreurs grossiferes.

Au cas oil 1'exameu microscopique et la culture feraient reconnaitre plusieurs micro-organismes associes, on les isolerait par la culture en pla-

DE LA DEÜXIEME PARTIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 171

ques, et l'on ferail sur chacun d'eux la serie d'ope-i'ations demonstratives qu'il nous roste ä indiquer.

Le microbe elant demontre dans rorgamsme malade il reste a etahlir ses caractöres (B) et ä faire lapreuve de son röle pathogeniquo (C),

B) Les caracteres d'un microbe peuvent se ranger sous trois cliefs.

1.nbsp; nbsp;Los caractires iiologiques (forme, mobility, etc., etc.!.

2.nbsp; nbsp;Les reactions vis-ä-vis des divers milieux do culture artificiels.

3.nbsp; Les riactions vis-a-vis dos matiires colorantes.

1.nbsp; Caracteres biologiques. Ils comprennent : La forme du microbe : bacille, microcoque, ou

spirille;

Le mode de reproduction 'sporulation s'il s'agit d'un bacille, forme et caracteres de la spore);

La mobiliie ou l'immobüite;

Le caractere aerobie, ou unaerobie, on encore aero-anadrobie; il faudra determiner dans ce dernier cas quel est l'etat le plus favorable au diive-loppementdumicro-organisme: la vio on presence de l'air ou ä l'abri de l'air;

La räsistance ä la chaleur, au froid, ä la lumiere, a la dessiccation: le degre thonnomelrique aiujuel le microbe cesse de vivre; si le micro-organisme a une spore, il faudra determiner le degre de resistance de cette sporo ä la chaleur (1).

2.nbsp; Reactions vis-ä-vis des divers milieux artificiels de culture. La serie dos divers milieux conuus

(I) L'c'talilis?emt completdc ocs caracKres biologiques d'un microbe a une poi'tee plus haute encore : c'est lä que se trouveut les plus solides bases etinlogi.jues d'une maladie ini'ectieuse. En raon-trant que la spore charbonneuse se conserve dans le sol indrliiii-ment, resistant tgt; toutes les causes de destruction, et n'attendant que le moment oü eile sera absorbee par l'animal avee ses aliments

172nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;INTRODUCTION

devra 6tre passöe en revue, car ici intervieut un caractere diagnostique important. Certains microbes prennent sur tel ou lei milieu artificiel, et en particulier la gelatine et la pomme do tcrre, une apparence specialo qui leur est particulifere et ost presque pathognomonique : tels le rouget du pore dans la gelatine en piqürc,la morve sur la pomme de terre, etc.

On devra döterminer les temperatures les plus favorables an developpemont, les maxima et les minima auxquels s'arretc ce devoloppement.

3. Reaction* vis-ä-vis de* mutieres colorantes et des prorede* de cotortition. Onrecherchera quclles colorations sont le plus favorables, et ici nous ren-controns encore des caraetöres diagnostiques d'une reelle valeur. Tel microbe pent se colorer par un precede qui echone sur Ions les autres : il en est ainsi du bacille dc la tuberculose et de celui de la Upre qui sent colores par le procede d'Ehrlich, alors que tons les autres micro-organismes actuelle-ment coimus no resislent pas a la decoloration par l'acide nitrique ä l/10^e qui est la base de cette methode.

Un caractere de premier ordrc encore est de savoir comment se comporte un microbe trade par les meUiodes de Gram ou de Weigert; on peut d'une facon schemntique etablir dans les micro-organismes pathogenes deux groupes : dans run on rangerait ceux qui sc colorent par Tune do ces methodes ou les deux, dans I'autre ceux qui ne peuvent 6tre colores par elles.

Enlin dans les bains colorants quelques micro-pour reprendre son cycle raquo;ital, Pasteur a Stabil fetiologie du char-bon ^ur des liases iuebraiilables.

En monlraul la destruction du vibrion du cliol.-ra asiatique par la dessiccalion, sa vitalito dans 1'eau, les milieux humides, Koch nous a donni la clef etiologique de cettc affecüon.

DE LA DEUXIEME PARTIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 173

bes prennent des formes assoz remarquables, auxquelles il faut d'ailleurs se bien garder d'atta-cher uno signification diagnostique exag6r6e : Ids les bacilles granuleux dela morveet de la tubercu-lose, les bacilles en Imttanl de cloche du cliarbon bacterien, etc., etc.

G) II rcstc oalin, et c.'ost la la caractdristique la plus importante, .i faire la preuve quo le microbe que Ton a trowoä, caractärisi biologiquement, cultivö, colori, esl bion l'agent pathogens de l'affection en cause, quo cette affection est fonction de la vie du microbe ot de lui soul. Cette preuve est donnoe par I'inoculation des cultures pures du microbe d Ves-pece animate qui präsente la maladie spontanie, etpar la reproduction typique de cette maladie ä la suite de cette inoculation expirimentdle.

Ainsi done : existence d'un microbe particulier dans rorganisme atteint d'une maladie infectieuse, et localisations anatomiques de col agent patho-geno; caraclores biologiques de ce microbe; röae-lions vis-a-vis des milieux de culture et des matteres colorantes; reproduction de la maladie par l'inoculation dos cultures pures auxanimaux : toi est le cycle quo doit parcourir l'etude complete dela microbiologie d'une maladie infectieuse.

Cette elude complete ost possible pour quelques maladies infectieuses (tuberculose, morve,charbon bacterien, rouget du porc, cliarbon symplomati-que, etc.); eile est ä peine ebauchee on tres incomplete pour quelques autres, et notammont pour les maladies humaines.

Voici par exemple le cliolora : roxistence d'un microbe special choz le choi^rique est demontree; les caracteres biologiques, les reactions do culture et de coloration de ce microbe sont dotermiiios et vraiment speciaux, mais la preuve absolue de l'aclion pathogeno, c'est-ä-dire l'inoculation a

10.

mnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; INTRODUCTION

1'honmie on aux animaux et la reproduction t^xpo-rimentale de la maladie sponlanee, manque. Ce-pendant les caractöres bien tranches du microbe, le fait qu'il nc se trouve que chez le cholörique et la seuloment oü existent les lesions, c'est-ii-dire dans 1'intestin, tout cela constitue un faisceau de preuves süffisant on faveur de faction palhogene du microbe do Koch.

Voici encore la lievro typboide : la preuve finale manque aussi, c'est-ä-dire la reproduction de la maladie sur I'homme ; le microbe dc la lietrc typhoido inocule a quolqucs animaux lour donne line septiccmie mortelle, mais ce n'est la qu'une experience interessante, et uon decisive; eile ne prouve rien pour la specilicite du microbe. Cepen-dant les caracteres tranches du bacille d'Eberth, sa presence constaute dans l'organisme malade, et la seulement, forment un ensemble süffisant, sinon complet pour la dömonslration.

Plus incomplelenunit prouvee encore est faction pathogöne du bacille de la lepre (bacille de Hansen). Ce bacille ne se cultive pas, et ne produit aucun trouble chez les animaux auxquels on I'inocule. On pent admetlrc cependant sa specificite en con-siderant scs caracteres vraiment speciaux de coloration, et sa presence en quantite innombrable dans les lesions leprcuses, et la seulement.

II est encore dans feinde des microbes palho-aenes des questions de haut intcret, mais qui sor-tent tout a fait du cadre rdementaire de noire Precis : nous voulons parier de la question des substances solubles toxiques (ptomaines) secrelees par les microbes, et des atloiuiations de virulence, en d'autres termes des vaccinations, decou-vertes qui sontla gloire de fecole francaise : nous renvoyons nos lecteurs aux communications de M. Pasteur, de M. Chauveau, et aux divers articles

DE LA DEUX1EME PARTIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Hö

de MM. Houx et Chamberland pour ies notions sur cos belles etudos.

Voici dans sos lij.'nes gencrales le plan (ilemen-taire que noussuivrons duns Fexposö des quelques maladies infectieuses que nous passerons en revue: ceplan est coneu defacon äpouvoir dtre räpttipresque compUtenwnt dans les laboratoires d'dtude.

Nous indiquerons d'aljord pour unc maladie donnee quelles especes animales sont soumisos ä la contagion naturelle, (juellosautressont refrac-taires; pulsen quelques mots nous dirons les voies de la contagion naturelle.

Nous ferons ensuite connaitre les principales doimees de pathologic experimentaledo l'alTection, c'est-ä-dirc (fuels animaux sont susceptibles d'etre infectes oxperiraenlalcment. Nous indiquerons lespecc animale qui doit ctre consideree comme le meilleur reactil' experimental de l'affection. Nous dirons ensuite quels sont les nnimaux ;(.'/)#9632;(laquo;-faires, ce qui, dans l'espöce, ne präsente pas, on le sail, un moindre interet.

Les diverses maniercs d'infecter experimentale-ment les animaux, celles qui conviennent exclusi-vement ä teile ou tolle espece, scront indiquecs.

Arrivant alors a l'agent pathogene, nous decri-rons ses localisations dans Torganisme, ses carac-töres biologiques, ses reactions vis-a-vis des malleres colorantes et, des cultures.

Enfin nous terminerons par un rapide resume oü les carneteres diagnostiques du microbe seront condensös.

A ccs points prineipaux nous joindrons acces-soirement quelques lignes sur les lesions causees par la maladie spontanee, sur les phenomencs symptomatiques et les lesions de la maladie experimental c.

170

INTRODUCTION

Co cadre ne sera pas toujours rempli, il s'en faut; dans les affections exclusivcs ä riiommc il v aura plus d'une lacune, ce qui se concoit sans qu'il soit bcsolu d'insister.

Nous a'admettrons dans iiotre description quo les maladies dent la preuve bucterienne est aujour-d'hui indiscutable, rejetant toutes celles qui ne prc-Hcntrnt pas im caractire de certitude dbsolue.

.Notre classification est des plus simples.

I.nbsp; Maladies microbiennes communes aux animaux el ä Vhomme.

II.nbsp; Maladies microbiennes sprciales uux animaux.

III.nbsp; Maladies mirrobiennes speciales ä Vhomme. Dans noire second groupe nous etablirons une

division. Des maladies microbiennes des animaux quelques-unessontpurementexpörimentales.c'est-ä-dire que creees de toutes pieces par I'experi-mentation, elles ne sent Jamals le produit de Tin-fection naturelle : teile lasepticeinie dessouris, etc. Ces maladies experimentales sent nombreuses; nous n'avons nulle intention de les passer toutes en revue, mais seulcrnent d'en donner, en presentant quelques types bien defmis, im apercu süffisant.

Ceci dit, void l'6num6ration des maladies quo nous ctudioiis.

Maladies microbiennes communes ä Vhomme et aux animaux : charbon bacteridien; tuberculose; morve; septicemie de Pasteur; actinomy-cose; les suppurations.

Maladies microbiennes speciales aux animaux : charbon baclorien (charbon symplomatique);--cholera des ponies; rouget du pore; farcin du boeuf; maminite contagieuse des vaches laitiercs;

nbsp; maminite gangröneuse des brebis (araignee);

nbsp; seplicemic sponlauee du Lapin (inedit). Maladies experimentales : septicemie des souris;

nbsp; nbsp;telrauenus.

DE LA DEUXIEME PARTIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;177

Maladies microbiennes spdciales ä l'homme : clio-lera; fifevre typlioide; pneumonic lepre; diphÜKTie.

Avant d'entrer eu inatieic, nous croyons bon de dire quelques mots de certains microbes non paiAo-ijines, mais dont l'etude prösentc quelqu'interet (iratiquc a trois points de vue.

a) L'ctudc d(! ces microbes, generalomcnt simple et typique, [amiliarisera les debutants avec les precedes de la microbiologie.

6) Ces microbes viciinent souvent souiller les cultures; ils doivent 61 re reconnus et distingues des microbes pathogenos.

c) Enfin ces microbes peuvent offrir parfois une analogie apparento asscz grande avec quelques especes palliogenes : tel le bacillus suhtilis qni pre-sente quelque resscmblance avec Ja liacteridie charbonneuse.

GHAPITRE PREMIER

MICROBES NON PATHOGENES.

I. Baoille du lait bleu (Bacillus syncianus).

Ce microbe a la propriele de colorer le lait en bleu. Cost, un petit bacillo droit, mobile, fin, pourvu de spores.

11 pousse rapidement dans les bouillons, sur la gelatine qu'il ne liquefie pas, ainsi que sur la gelose. 11 donno sur ces milieux solides et transparen Is une culture blanche au debut, puis lögere-ment bleutee par transparence. En vieillissant, les cultures deviennenl. nn peu brunes.

Enfin sur pomme do terre il pousse trös bien et produit une culture bleu fonce, tres abondante. 11 se colors facilement dans les solutions bydro-alcooliiiucs.

II. Bacille de la pomme de terre [Kartoffelbacillus).

Sur les pommes de terre, preparees pour la culture et incompletement stcrilisees, il se forme parfois en peu de temps une pellicule grisatre au debut, mamelonnee, ridee, qui no tardc pas a envahir toute la pomme de terre. En vieillissant, la culture brunit. Cette pellicule est due a la pul-lulation du Kartoffelbacillus.

MICROBES NO.N PATHOGENES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 179

Ces bacillcs munis do spores sont mobiles. Ils lilt;[uelicnt la gelatine et ferment alors un depot blanc nuageux qui reste en suspension dans le liquide.

III.nbsp; nbsp;Bacterium termo.

Hacilles gros, mobiles, bacilles vulgaires de la putrefaction, formant sur les liquides en putrefaction une sorte de pellicule, ce ifui iudique leur avidile pour I'oxygene.

Ils poussont aisement sur Lous les milieux de culture liquides on solides, on presence de l'air.

Ils donnent sur gelatine une culture blanche qui ne tarde pas a liquelier. Ils se cultivent egalemenl bien sur le serum, la gelose et la pomme de terra oil ils donnent une culture blanc sale.

Dans los bouillons ensemences avec le iaclc-lium termo, il se produit a la surface une pellicule mince, resultant do I'amoncellement des bacilles.

IV.nbsp; nbsp;Bacillus subtilis.

Ce mkro-organismeesttres intcrcssanta etudier, car sa morphologie, ses reactions do coloration, ses caracteres dc cultures meme, le rapprochent objectivement du bacillus anthracis, dontle separc d'ailleurs absolument sa reaction experimentale : le bacillus subtilis n'est pas patltogene.

Le bacillus subtilisest Ires repandu. On le trouve dans I'eau, dans la poussiere, mais surtout a la surface des plantes, des gramiuecs. Aussi est-il communement appele bacilli: du foin.

11 esl Ires simple dc se procurer le bacillus subtilis, voici le precede qu'il convient d'employer a cct eiTet:

Prenez un ballon sterilise dans lequel vous ver-serez une quantity d'eau distiüee süffisante pour

180

MICROBES NON PATIIOGKNES.

le remplir a moitie. Placez-y ensuitc un peu de foin coujie en petits fragments. Alcalinisez le liciiiide Houchoz le l)alloii avec un tampon d'ouate et exposez-lo dans I'autoclave a -\- 100quot; pendant un quart d'heure environ : vous obtiendrez ainsi une decoction d'un beau jaunc d'or. Transyascz #9632;purement une partie du liquide dans un ballon Pasteur stcrilUii et portez ä l'etuve \Ti⁰). En deux ou trois jours le bouillmi sera trouble ot reconvert le plus souvent d'une pellicule qui resulte de l'amoncellement des bacilles ä la surface du liquide.

Dans cette decoction de foin, le bacillus subtilis examine sans coloration apparalt sous forme d'un bdtonnet, morphologiquement semblable ä la bac-teridie charbonncuse, mais mobile, a extremites ar-rondies et laquo; arnie ä scs deux extremites d'un fla-gellum ou cil extrdmement fin raquo; (Strauss).

La coloration du B. subtilis est simple ; les solutions hydroalcooliques, le bleu de Loffler, le procede de Gram lui conviennent egalement.

Cultures. Si Ton seme dans du bouillon 1c bacillus subtilis, laquo; on voit le liquide se troubler dans sa totalili; au bout do quelques heures, puis presenter ä sa surface un voile sec qui peu ä peu s'epaissit et devieut rugueux (I. Strauss) raquo;.

Seme en piqüre dans higelatine,il forme une culture blanche qui ne tardc pas a liquetier la gelatine; sur la pomme de tore il so developpe rapi-dement et donne lieu ä une pellicule visqueuse. luisante, blanc jaunatre.

Dans les cultures, le bacillus subtilis prend comme la bacteridie charbonneuse la forme fila-menteuse, et comme celle-ci encore il so sporule.

Le meilleur moyen do prendreunc idee exacte de la spore est l'examen ä l'etat frais sans coloration ; les spores apparaissent dans le corps du filament

MICHOBES NOW I'ATllOGKN'ES.

181

sous forme de pelils corps ovoides, refringeints. Les spores laquo; döbordent un peu la membrane de la cellule more, elaut plus larges qu'elle, tandis que les spores du bacillus anthracis y soul nelte-meut inscrites raquo;.

V. De quelques microbes de l'air.

Nous u'avons pas h. rappeler Lei meme sommai-rement les experiences fondamentalcs de Pasteur

A, vevl d'eau (nuii liquöfiant). f.uitz. U, Sarcina lutea. Calturc. Lcitz, oc.

3, obj. 1/12 obj. 1/12.

sur la presence des microbes dans l'air, non plus que les mcUiodcs de numeration et d'isolement de ces microbes imaginees recemmenl, par Dticlaux, Miquel, Straus, Pietri, Hesse, etc.

PH. DE 9IICIIOBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; I I

185

MICROBES nun: PATHOGENES.

Cc que nuns vuiilciiis mettre plus particuliöre-tnent en liiiniöro, c'est I'envahissement Jos milieux de culturo insufflsamment slerilises ou Lnsuffi-samment proteges par les microbes vulgaires de l'air; on möme temps nous d.6crirons quelques-iiiigt; de ces organismes, ceux qui se rencontrenl le plus frequemment a la surface des culturi's exposees a l'air.

Exposez a Fair pendant quelques instants une plaque de gölatine, une pomme de terre pröpariäe pour la cullure; steiilisez insufflsamment les divers milieux de culture solides ou liquides; ouvrez sans precaution un lube de culture, un matras : vous verrez au bout d'un temps plus ou moius long sed6velopper surces milieux des orgauismes de l'air :

liacilles et microcoques fonnant sur les milieux solides des colonies chromogenes de nuances variecs blanches, jaunes, grises;

Cluimpignons ct moisissures do couleur blanche, noire, rosee, etc., a chevelu delieal et eletraut {(ispergiUus niger, ulbus, etc.. etc.).

11 serait superflu et fastidieux do passer en revue tous ces organismes; un mot seulement des plus remarquables d'entre cux.

A. Micrococcus prodigiosus. Co microbe esl tres interessant a connaitrc a cause do la couleur rouge sang qu'il produit sur les difrei'onls milieux do culture.

11 so devoloppc spoiltauemenl sur lo hlanc d'oeuf et sur le pain.

(tn le rencontre accidentellement sur les cultures de gelatine en plaques oü il forme des colonies roses.

il pousse dans les bouillons. II pousse dans la gelatine qu'il liquelio el, donne par piqüre une culture d'almrd blanche, puis rose et eulin rouge sang.

MICROBES NON PATHOGßNES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 183

Quand tout le cylindre gelatineux cst liquc'fie, la culture se depose au fond du tube sous forme d'un sediment rouge sang. 11 se cultivo egalement sur go-lose oü 11 donne sa couleur caractcristique.

Surpomme de terre, il produit unc helle culture rose, qui, par la suite, devient peuäpeurouge sangr.

B.nbsp; Micrococcus luteus. On le rencontre dans la gelatine et sur les pommes de terre oil il donne des cultures jotme citron.

C.nbsp; nbsp;Micrococcus uurantiaciis. Un peu plus rare que le laleus; onle voit ögalement sur les pommos do terre : ses cultures sont dquot;un beau jaune (lore.

I). Sarcina tutca. Cette sarcine se trouve dans l'air. Elle vient dans quulques cas souillerles milieux de culture.

Les sarcines sontpresque toujours agglomerees : elles ferment ainsi de grandes zooglecs. Los elements qui composentchacune d'ellos sont ovoides, tres refringents immobiles, reunis eutre eux de teile facon qu'ils forment un cube.

Les sarcines jaunes se colorent tres facilement; mais le plus souvent les colorations se font en masse, de sorte qu'il est impossible d'obsorverles details. Pour arriver a un bon resultat, il faut employer des solutions hydro-alcooliques tres fai-bles. Le brun de Bismarck et la vesuvine en solutions legeres donncnt d'excellents resultats.

Le Gram et le Weigert ne colorent pas la sarcine jaune.

Rien n'est plus aise que de cultiver les sarcines jaunes.

Elles poussent en presence de Fair dans les bouillons. Sur la gelatine qu'cllcs liquelicnt, et lagelose, elles forment ä la surface, du jour au lendemain, un enduit blanc, epais, (jui en deux ou Irois jours deviant jaune serin. Sur la gelatine en plaques, elles donnent des colonies rondes et jaunes.

' 11'

184nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; MICROBES NON PATHOGENES.

Enfin, sur la poninie de terre, elles produisent une couche epaissc, luisante, qui prend avec le temps la leinte caractßristlque.

VI. Microbes de l'eau.

Un mot seulement a ce sujel. L'eau de source prise au point d'dmergence est pure, ello ne ren-ferme aueun micro-organisme, ainsi que Tont demontrö les premiers travaux de Pasteur. Los autres caux contienncnt des micro-organismes en nombre plus ou moins grand suivant lour degre de souillurc. De ces micro-organismes la plupart ne sent pas pathogenes; nous savons cependant que l'eau peut servir de vehicule aux bacilles de la tievre tvphoule et, du cholera.

Les divers microbes que contientune cau seronl facilement isoles par la metliode de Koch (cultures sur plaques). Nous ne voulons entrer dans aucun detail a ce sujel, ni mentionner les divers perfec-tionnements que cette technique a recus, nou plus que les procedes de numeration des colonies usi-tos dans nos laboratoires.

ludiquons rapidement un certain nombre d'es-peces chromogeni's banales que conlienncnt äpeu pres toutes les eaux.

A et li : deux bacilles a reaction chromogene verle sur la gelatine et la gelose : I'un d'eux lique-fiela gelatine, I'autre nou.

(',. I'n bacille a reaction violette (liquefie la gelatine).

I). Un bacille a reaction chromogene rouge dans la gelatine qu'il liquelie, etc., etc.

Oil APITUE

MALADIES MICROBIENNES COMMUNES A t BOMME ET AUX ANlMAliX.

CHARBON BACTERIDIEN

FIEVRE CHARBONNEÜSE. SANG DE RATE, ETC.

I. Historique.

La decouverte de la bactdridie charbonneuse cst due ä Davaine et Rayer. Les points principaux de l'histoire de cetle affection out ete etablis par Davaine, Koch, Pasteur, Chamberland et Uoux.

Le lecteur trouvera dans le livre de Straus : laquo; Le charbon des animaux et do riiomnic, raquo; un expose magistral de toute la question.

II. Charbon baotferidien spontane (1).

Le charbon bacteridien esl une maladie commune aux animaux et ä l'homme.

(1) 11 est bien enteodn quece terme spontanä apfiiquamp; ii unc maladie tmcrobieone quelconque indique I'afloction contraclee par contagion nalurolle et non artilicielle. Le terme #9632; spontane gt; s'op-pose ainsi au terme a experimental ou inocnle raquo;.

180

MALAIHES MICRORIENNES.

a) Charhon spontani des animaux, La voie d'introduction naturelle du charbon chez ranimal est lo tube digestif : e'est en ingerant avec lours aliments des baetöridios sous la forme de spores que les animaux prennent le charbon.

Des animaux domestiques, los uns sont douös de röceptivitii pour le charbon ; les autres sont refrac-taires a la maladic.

Les animaux de la .premiere categoric sont : le mouton, le barnf, le cheval; le mouton et le boeuf offrent uno receptivite plus grande que le cheval.

Les animaux refractaires sont le chien, le chat, le pore, les oiseauw, etc., etc.

L'immuiiite naturelle pent cepeudant etrc vain-cue dans certaines ciroonstances rares et toutes specialos. II cxisle des fails authentiques de charbon chez des pores et chez des chiens qui avaient mange de la viande ou des visceres d'animaux charbonneux; dans la plupart de ces cas, la maladic affectaitla formed'ongröe ou de glossanthrax. M. Nocard a cite I'exemple d'un chat qui mourut d'une amygdalitebacteridionne.

h) Charbon spontane de l'homme. #9632; L'organismo humain ne conslitue pas un milieu trös favorable au developpement de la bacteridie; Fhomme peut cependant contractor le charbon de Wois facons dillerentos :

dquot; Par inoculation cutanee accidentelle : bles-sure, piqüre, excoriation de la peau chez les indi-vidus qui manient les cadavres charbonneux (vete-riuaircs, bergers, bouchers, equarrissours) ou les poaux d'animaux morts do charbon (tannours, inegissiers).

L'accidont initial dans cette forme, qui est la plus frequente, est la pustule maligne.

2deg; Par les voles digestives : e'est lo charbon intestinal, resultant de L'ingestion de substances souil-

CIIARBON BACTERIDIEN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;187

löes de bacteridies on de spores charbonueuses (viandes charbonncuscs, etc., etc.).

3deg; Par les voies respiratoircs : e'est le charbon pulmonaire, forme rare, decritechezleschifTonniers de Vienne, et chez les triours de lainc de Bradford en Angleterre (Woolsorters' disease), qui est evi-demment le resultat de la penetration dans les voies respiratoires de poussieres chargces de spores charbonueuses.

Les lesions maoroseopiques trouvees a I'autopsie d'un sujet charbonneux (homme, mouton, boeuf, cheval, etc.) sont identiques dans leurs traits prin-cipuux, ceux-ci etant d'ailleurs plus ou moins accuses suivant I'espece : sanij noir, poisseux, incoagulable; veines gorgees de sang et congestions visceralcs diverses; rale enorme, noire, dif-fluente; muqueuses de l'inteamp;tin grele, du gros intestin, parfois de t'eslomac, parsemees d'ecchymoses noi-rätres, et de saillies d'aspect furonculeux, noi-rätres, brunätres ou verdätres, ulcerees ou non, en partie gangrenees; jioumoraquo; presentant des foyers congestifs ou apoplectiques; putrefaction, rapide du cadavre, etc., etc.

Le sang, les pulpes organiques et la rate au premier rang, la inoellc osseuse, les ganglions, etc., sont virulents.

III. Charbon experimental. Charbon inocule.

a) Rrceplivite des diverses espices pour le charbon experimental. 11 y a divers moyens de conferer le charbon aux animaux d'experience : I'infection par les voies digestives, I'inoadation intra-vasculaire. I'inocutation sous-mtanee.

L'infection par les voies digestives reproduit 1c mode de contagion naturelle; sauf pour ccrtaines experiences, eile ne prescnte pas un grand intenH.

INS

MALADIES MICROBIENNES.

Le veritable modo experimental, le mode de pratique conrante cst ['inoculation sous-eutanc'c.

Les animaux reagisscnt ä son egard d'une fanon tres variable, qu'il est bon d'indiquer rapidement.

Le mouton prend le charbon inocule avec la meine facility que le obarbon spontane : le baeuf, si sensible au charbon spontane, oppose au charbon inocule une grande resistance; le cheval prend mieux que le boeuf le charbon inocule.

Le porc udulte resiste ii L'inoculation charbon-neuse, le porcelet succombe ; les c/i/ew et les chats adultes sont entierement rel'ractaires ä rinocula-lion, tandis ((u'on pout ä la rigueur vaincre la resistance des jeunes sujets, des jeuncs chats, plus encore que des jeunes cliiens.

Les oüeaux, ä l'exceptioB de tres jeuncs sujets, sont insensihles ä l'inoculation charbonneuse : on peut cepcndant par un dispositif special arriver ä triompher de leur immunity : c'est ainsi qu'en plongeant partiellement une jioule pendant douze ä quinze heures dans l'eau courante on abaisse sa temperature et on la rend apte ä contractor le charbon inocule (Pasteur).

Les veritables reaetifs expcrimentaux du charbon sont, en dehors du mouton : le topin, la souris et surtout le cohayc : ce seront la les animaux dquot;Election du laboratoire pour toute recherche expiri-mentale ou diagmslique, portant sur le charbon ; ce seront les veritables reaetifs du charbon.

Assez resistants a l'inlection par la voie intesti-nale, la souris, le lapin et surtout le cobaye prennent admirablement le charbon inocule.

h) Inoculation'. L'inoculation sous-cutanee se pratique a Faide de la seringue de Pravaz : on choisit de preference pour lieu (l'inoculation chez le mouton, le lapin, la souris, le cobaye, la face interne de la jambe. La mattere (^inoculation est

CllARBON BACTfiRIDIEN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;189

ties variable : culture virulente; pulpes de rate, tie ganglions, de toie, moelle osseuse, etc., broyecs et delayees dans du bouillon on de l'eau störili-ses, et passees sur le papier liltre.

c) Symptomen et lesions du churbon cxperimeutal. Au bout de dix ä quinze heures on volt, chez 1c lapin, la souris, 1c cobaye, laquo; un empdtemeat csde-mateux assez prononce, facile h scntir par la palpation, se developpor au point d'laoculation; en meine temps la temperature centrale de 1'animal .s elevera d'un on deux degres.Lesautres symptdmes accuses par les animaux sont insigniliants; ils con-tiuuent ä manger et a se bien porter en apparence jusquä quclques heures avant la mort; celle-ci survient ordinairemont trcnte-six a quarante heures apres 1'inoculation chez le cobaye, quarante-huit ä soixante heures chez le lapin. Elle est pre-cedec dquot;une courte periode pendant laquelle I'ani-mal parail, inquiet, change souvent de place, urine frequemment; la respiration s'accelerc; I'animal devient comme indifferent et assoupi; il ne cherchc plus a fair, et quand il le fait e'est avec des mou-vemonts inccrtains et mal coordonnes. Puis 11 tombe dans une sorte de coma; la respiration devient plus superlicielle, el il meurt apres quel-ques legeres convulsions, et une temperature centrale fortement abaissee, ä 34deg;, h 32deg;; quelque-fois a 30deg; raquo; (Straus).

C'est dans les dernieros heures de la vie seule-ment que les bacteridies apparaissent dans le sang : il sera facile de s'assurer de leur presence en pronant de temps a autre quelques gouttes du saug de l'oreille et en examinant ce sang par les precedes que nous indiquerons ci-dessous.

laquo; A Vautopsie on ne trouve plus a la peau de trace de la piqure (linoculalion; mats ä ce niveau, dans une etendne parfois fort grande, le tissu

190

MALADIES MICROBIENNES.

cellulaire sous-cutane estlc siege dune infiltration a'Jematcuse tout ii fait caracteristique; c'est un '.cdeme gelatineux, tremblotant, transparent, ä . peine teinte de rouge, rappolant un peu la consis-tance du corps vitre de I'teil raquo; (Strauss).

Get oedeme est d'autant plus prononce que la survie a ete plus longue.

quot; Los ganglions lyinphatiques correspondant ä la region inoeulee sont augmentes de volume, rouges, ecchymotiques, entoures d'une zone d'oedeme.raquo;

La rate est tumefiee, dil'flnente, le foie est vive-raent congestionne; les poumons sont hyperemies ainsi que les reins, etc. liest ä remarquer, et c'est un point interessant, que les lesions intestinales, qui sont de regle dans le charbon spontane, man-quent le plus souvent dans le charbon inocule.

IV. La bacteridie charbonneuse (bacteridie de Davaine). Sa recherche dans les liquides et les tissus orgauiques de 1'animal charbonneux.

a) Le sang. Le sang doit clre autant que possible pris dans le cceur, et examine dans le plus bref delai apres la inert : I'examen se fera sans coloration, etavec coloration.

Examen laquo;raquo;js coloration. Si Ton depose sur une lamelle une goutte de sang charbonneux, et qu'on la porte sous le microscope (grossissement de 400 ä ü00 diametres, sans eclairage Abbe), laquo; on aura sous les yeux le spectacle saisissant si bien decrit en quclques mots par M. Pasteur :

laquo; Ues globules rouges, plus ou inoins agglu-tines, coulant commc une gelee un peu fluide, des globules blaues en nombre plus grand quo dans le sang normal et des batonnets qui nagent dans le serum limpide. raquo; Ces batonnets sout droits, tlexibles, cylindriques, immobiles, homogenes comme du verre. Les uns paraissent constituer

CHARBON liAGTElUDlEN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;191

un bdtonnet unique, les autres sont formes de Jenx ou Irois articles (rarement davantage)places bout a bout, söpares par une scissure netto, ['adherence des segments contigus nc so faisant plus qua d'une facon lache et souvent pur un dos angles seulemenl. L'epaissour des batoiinets esl d'euviron 1 a 2;) y.; la longueur esl tres variable, enlre ii et 20 v. Tel est Faspect quo präsente le badllus anlhrads, examine dans le sanf? ou dans les autres produits charbonneux frais, sans autre mode de preparation. raquo; (Straus.)

Examen aveo coloration. Le sang charbonneux se colore bienpar les diverses rnethodes de coloration simple exposöes dans le cliapitre vi. Onpourra placer la lamelle snr laquelle lesang a ete etale dans une solution hydro-alcoolique do violet de gen-liane, do fuchsine, de rubine, de bleu demethyle.

La solution bleue do Lofflor donne aussi d'ox-cellents resultats : les bacteridics apparaissent en bleu fonce, les globules en vert pale.

Los methodes de double coloration de Gram et do Weigert donnent d'excellentes preparations; la coloration du fond, c'est-ä-dire ici des globules, doit, litre t'aite ä l'eosiue : les bacilles teints en violet loucotranclicnt biensurles globules coloreson rose.

Los examens avoc coloration do la bactcridie cbarbonneuse doivent se faire au grossissement de 4 ä iiOO diainetres avcc I'eclairago Abbe.

b)nbsp; nbsp;CEDEME GELATINECX DU CUABIiO.N KXFKniMENTAL

ai: point d'inocülation. On trouvera dans cot uedeme, examine avec ou sans coloration, des bac-ti'Tidies en petite quantite, beaucoup plus longues (jue dans le sang.

c)nbsp; Pulpes ouoANiguEs. Les pulpes dc rate, de foie, do poumon, dc ganglionlaquo;, la moelle osseuse seront examinees sur lamelles jiar coloration simple ou double.

192

MALADIES M1CR0BIENNES.

On traitera k-s lamelles par les solutions hydro-alcooliques de violet do gentiane, de fuchsine, de

rubine, de bleu de melliyle, par le Men de Lofller quand on voudra faire la coloration simple.

CHARBON BACTERIDIEN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 193

La coloration double so fera par la methodo do Gram ou de Weigert, le fond sera colorö ä l'eo-sine, au brun de Bismarck ou au carmin.

d) Les divers organcs du sujet charbonneux se-ront examines en comics histologiques: les organes a choisir seront le foie, le poumon, le rein, la rate, rintestin. Ces coupes seront traitocs par les methodes de double coloration de Gram ou de Weigert, qui reussissent egaloment bien;la me-thode dc Gram a plus de finesse. Les bacteridics apparaissent en violet fence au milieu du tissu coloro en rose par le carmin, on Feosine, ou en brun päle par le brun do Bismarck.

Une preparation fort interessante est celle du nu'scntcre des sujets charbonneux : rien ne met mieux en lumiere la localisation vasculaire de la bacteridie. On obtient dans ces preparations une veritable injection hactcridicnnc des petits vais-seaux de l'organe. Voici comment se fera la preparation (1): sur un disque excave en son milieu (une tranche prise sur un bouchon de liege et dont on excavera toute la surface interieure rem-plira parfaitement le but), on charge une portion de mescntere, en evitant les vaisseaux de trop gros calibre. On detache du resto du mesentere la partie de cclte membrane chargee surle disque, et on la passe au melange d'ether et d'alcool ä parties egalcs. On la plonge ensuile dans le violet de Gram pendant une demi-heure.

On detache alors la membrane colorec en violet du disque qui la supportait; on la divise en plu-sieurs fragments qu'on passe ä la solution iodo-ioduree et qu'on porte onsuitc dans I'alcool ahsolu jiisqu'ä decoloration. On acheve en colorant ä Feosine et on monte comme une coupe.

(i) It est avantageuv de choisir pour cette pr^poratiOD un sujet maigrc.

11'

1 '.11

MALADIES MICROBIENNES.

Le mesenture ])eut etre aussi traits par la mo-thode de Weigert: on commence par en charger la portion choisie sur un disque comme il cst dit ci-dessus, et on traite ensuite cotto partie de la membrane pur la metliode de Weigert.

Lorsque la preparation est bien reussie, los vaisseaux se detachent en fines trainees violettes dans lesquellcs on distingue une quantity innom-brable do bacteridies sur le fond rose de la membrane.

V. Culture de la bactferidie charbonneuse.

Adrobic, la Lacteridie se cultive en presence de l'air a toute temperature do 10 a 43quot;. La temperature la plus favorable est de 30 ä 3;gt;⁰.

La bacteridie so developpc dans les milieux liquides et sur les milieux solides transparents et opaques: gelatine, gelose, pomme de terre.

On choisira do preference pour semence le sang, ou la pulpe de rate et de ganglion.

o) Culture ue la bacteridie charbonneuse dans les milieux liquides. Urine. Cost dans l'urine neutre que M. Pasteur fit sos premieres cultures de bacteridie. Lo bouillon doit etre prefere.

Bouillons. Tons les bouillons, qu'ils soiont, faits de viande de poule, de moulon, de veau, de boeuf, etc., se pretent bien a la culture de la bacteridie. Le bouillon, ensemence aveeune goutte de sang ou de pulpe organique charbonneuse, cst mis ä Tctuve ä la tenipöralurc convenable.

laquo; Au bout de quelques houres, on voit des flo-cons tenus nager dans le liquide; cos flocons grossissent et consorvent une certaino cohesion, de sorte((uils rösistent ä une legere agltalion im-primöe au liquide qui reste limpide dans lour Intervalle. Dans los houres suivantes cos flocons de-viennent assoz volumineux pour former comme un

^;i ^;'

CHARBON BACTERIDIEN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;195

image au sein du liquide. Cet aspect tloconueux de la culture delabacteridio dans le bouillon est carac-leristique. laquo; Aprfes quelques Jours de söjour ä l'e-tuve, le bouillon dans lequol a jiousse la bacteridie a legerement bruni et cstrodevonu limpide, etsur le fond du vase s'est döposöe une fine poussiere qui se souleve quand on agite le liquide raquo; (Straus).

amp;) GOLTÜRE DE I-A RACTEHII1IE DANS LA GELATINE. ----

La bacteridie liqiu'fie la gOlulinc; la culture no doit se faire qu'en piqürcs ou en plaques : ello donne une apparencc parfois assez caracloristique.

La gelatine ('#9632;taut ensemencee par piqöre, et laissee ä la temperature du laboratoire, lt;lt; au bout d'un jour on la verra se fluiditior ä la partie su-perienre, et de haut en has, en memo temps qu'il s'y forme dos flocons blaues, d'oü partent presque toujoursde lius filaments oncheveires et ramifies qui donnent a la culture une apparence arbores-cente raquo; (Straus).

Aprfes un certain temps, la gelatine est flui-difiee dans loute sa hauteur, et les flocons blancs formes par les bacleridies tombent au fond.

quot; Cultivee sur la gelatine elalee encoucbe mince sur une plaque de verre (culture sur plaques de Koch), la bacteridie charbonneuse se developpe sous forme de colonies arrondies qui, examinees a un faiblc grossissement, preseutent au centre un aspect filamenteux enchevetre; ä la peripherie de la colonie, ces filaments sent assez reguliere-ment onduleux raquo; (Straus).

c)nbsp; Culture de la bacteridie si-r la gelose. Sur la gelose en strie, ä 1'eluve, la bacteridie se developpe bieu en 24 ä 48 heurcs sans apparence caracteristiquc.

d)nbsp; Culture raquo;e la bacteridie sur pomme dr tehhe. La bacteridi(^ donne sur la pomme de lerre, a I'etuve, en 24 ou 48 heures, des colonies sechos

196nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICR0BIENNES5

blanches; lorsque les colonies sont ;isscz rappro-chees pour arriver ä fusionnor, la pom mo de terre semble recouverte d'unecouchc cremeuse.

EXAMEN UES CULTURES DE CHARBON. MORPHOLO(;iE ET COLORATION DE LA BACTERIDIK CULT1VEE. Dans

rorganismo, la bacteridie n'a que la forme baci.1-lairc; dans les cultures, clle prend deux nouvelles formes : la forme fllamenteuse, et la forme sporulaire.

Les cultures seront examinees saws coloration et avec coloration.

Examen sans coloration Dans une goutte de culture mise sur une lamellc (apres dilution dans le bouillon sterilise, s'il s'agit de culture sur go-lose ou sur pomme de terre), et portee sous le microscope, ou laquo; apercoit des filaments extremo-ment longs, cyliudriques, nou ramifies, oudules, tordus quelquefois les uns sur les autros et enche-vetres comme des paquets de cordes. Ces filaments paraissont homogenes dans toute leur longueur, sans trace do separation transversale, sauf sur les points oü 11 existe des ruptures raquo; (Strauss).

L'apparence fllamenteuse de la bactcridie cst. tres saisissante dejä au bout de 24 houres dans le? cultures en bouillon sejournant a l'etuve. Des cettc epoque parfois les spores apparaissent, mais elles sont plus nettes et plus nombreuses au bout de quelquos jours. A cette epoque laquo; Jjeaucoup de filaments paraissont remplis de noyaux rel'ringents, un pou allonges; quelques-uns sont encore dans des tilaments tres nets, quelquos autres forment deschaines oil on reconnait la forme des filaments qui leur ont donne naissance, mais oü le contour a disparu; d'autros enlin sont tout a fait fibres et flottent dans le liquide. Cos noyaux sont les ger-mes, les spores ou grainos do la bacteridie raquo; (Cham-berland, Charbon ct vaccination charhonneusc).

Examen avec coloration. Los cultures do bac-

GHAKBON BACTER1DIEN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;107

toridiecharbonneuse so colorentbienpar les diffe-rents procedos de coloration simple exposes au chapitre vi; les solutions hydro-alcooliques de violet de gentiane, de fuchsine, de rubine, de bleu de mölhylo donnent de belles colorations des lamelles chargees des produits de culture charbonneuse. Nous recommandons le bleu de Löffler et surtout la solution hydro-alcoolique de bleu de methyleno tres legere qui donne des preparations tres fines.

Les methodcs de Gram et de Weigert reussissont bien, et la methode de Gram grossit moins les elements et a plus de finesse ici que la methode de Weigert.

La constitution des filaments est bien mise en lumiere par les couleurs. laquo; On constate que les filaments sont formes par une gaine hyaline delicate, renfermant une rangoe do masses protoplas-miques cubiques ou allongees; celles-ci sont separees les unes des autres par des cloisons transversales et chaeune d'ellos repriisente une cellule vegetative raquo; (Straus).

Les spores restent incolores dans les filaments, quelle que soit la methode de coloration employee, coloration simple ou methode de Gram et Weigert.

On a propose de faire une double coloration des filaments sporiferes dans lesquels le corps de la baetöridie et la spore prendraient alors une couleur diflerente, de facon ii mettre en evidence sur les preparations colorecs le germe de la bacteridie.

Le procede consiste a trailer les lamelles par la methode d'Ehrlich: la Lamelle passee six ä sept fois dans la flamme est mise pendant vingt-quatre ä quarante-huit heurcs dans la solution rouge d'Ehrlich (J); on decolore par le melange d'alcool et d'aeide nitrique au 1/10deg;; on lave ä l'eau et on co-

(1) II est hon de placer le verre de moutre qui contient le l)ain colorant ou plonge la lamelle ü Tetuve ä 30-35quot;.

M*¹

I'.IS

MALADIES MICBOBIENNES.

lore a nouveau dans une solution hydro-alcoo-liquc de bleu de methylene. Les filaments sent colores en bleu, les spores apparaissent en rouge dans l'inlericur du filament.

Cettc nielhode cst iulidele, et ne reussit que dans un petit noinbre d'essais ; la ineilleure ma-nifere d'observer les spores est la preparation frai-ehe, sans coloration.

VI. R6sum6 des caraetöres de la bacteridie charbonneuse.

La bactoi'idic cliarboiineuse est aerobie; eile est immobile dans les liquides organiques et dans les cultures. Dans forganisme eile ne se presente que sous la forme bacillaire. Dans les cultures eile prend la forme filamenteuse et se sporule. Elle se cultivo sur tons les milieux arlificiels, et la temperature la plus favorable est de 30deg; ä 3ö⁰. Kile fluidilie la gelatine, prend une apparence ca-racteristique dans le bouillon, moins earacteris-tique, mais encore assez speciale, sur la gelatine ct la pomme de terre. Elle se colore par lesmethodes de Gram et Weigert.

11 TUBERCULOSE

I. Historique.

A Villemin revient incontestablement 1'honneur d'avoir demontre la virulence do la tuberculose (186ö).R, Koch a, dans ces derniäres annees (1882), decouvert 1c bacillc de la tuberculose, dont il a pleinement demontre le role pathogt-nc : il nest

TUDERCULOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 199

quo juste de donncr k ce bacillc 1c nom dc bacille de Koch.

Recemraent MM, Nocard et Roux ont fait faire a la technique des cultures du bacille dc Koch, jusque-lii fort imparfaitc, un pas decisif.

II. Tuberculose spontanee.

La tuberculose cst une maladie commune ä riioinme et aux animaux.

L'homme cst extremcment sensible ä la tuberculose spontanee, et la maladie affecte chez lui les allures les plus variees. L'organe prefere de la tuberculose humaine est assurement le poumon, oü I'affection se montrc sous diverses formes : phtisie aigue (granuleusc ou pneumonique) et phlisie chronique. La tuberculose peut aussi se localiser chez l'homme, et souvent pendant un temps fort long, ;i d'autres organes (bouche, pharynx, larynx, intestin, testicule, cerveau, os, articulations, etc.). La tcrminaison habituelle de ces tuberculoses locales est la propagation an pou-inon.

Enlin il existe une forme aigue de tuberculose genendisde qui conduit rapidement ä une terminal-son funeste, et dans laquelle tons les visceres sont couvertsdegranulalionstuberculeuses:ceUe forme (granulie d'Empis) est tantöt primitive, et tantöt secoridaire, terminant revolution d'une tuberculose locale quelconquo.

La tuberculose a chez l'homme pour porte d'entree principale les voies respiratoires, et c'est le crachat du phlisique, charge de hacillcs de. Koch, qui constitue le plus grand danger de contagion tuherculeuse pourrhomrae sain.

Dans quelqnos cas rares la tuberculose peut pro-venir d'une inoculation accidentelle.

200

MALADIES MICROBIENNES.

Elle peut, plus frequemment, etre coiitractee par lavoie digestive : o'est ainsl que l'usage du lait cru provenant d'une vache attointo de mammite tuber-culeuse offre pour des jeunes enfantsun reel danger; theoriquemont on peut admeUre que la viande d'anirrmux lubcrculeux puisse ofl'rirquelqucs dangers, mais seulement dans des circonstances ab.so-luraont cxceptionnellos. Enfin on a quelques rai-sons do penser que rinfection tuberculeusc peut se produire par la voie genilale.

Tuberculose spontanee des animaux. Des especes animalesdomestiques, les unessont sponlanement tuberculisablos, avec un plus ou moins grand degre de frequence, les aulres sent refraclaires ä la tuberculose spontanee.

Parmi les animaux do la premiere categorie il 1'aut citer :

Le bmuf mi premier rang;

Le pore a un degre beaucoup moindre que le boeuf;

Le cheval, dont la tuberculose a eto longtemps niee : la maladie est en cfTet rare chez lui;

Le ehien jouit luiaussi d'une grande immunite ; la tuberculose peut cependant se rencontrer chez cet animal;

La tuberculose spontanee du chat ost de toutlaquo; rarete; une des figures de cet ouvragc atteste cependant que le chat peut dans des circonstances tout a fait exceptionnelles so tuberculiscr;

Les oiseaux de basse-cour deviennent assez frequemment tuberculeux dans les conditions naturelles.

Les animaux refractaires sent 1c mouton et la chevrc : laquo; Je n'ai pas observe un seul cas dc tuberculose naturelle chozces animaux raquo; (Nocard).

Le cheval et surtout le chien et le chat, s'ils ne sont pas absolument refractaires, peuvent ä bon

TUBERCüLOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 201

droit etre consideres, nous l'avons vu, comme relativement tres peu predisposes ä la tuberculoso sponlanee.

Chez le hmif la tuberculose est surtout pulmo-naire, ce qui indiquc que la porte d'entree est principalemmt respirutoire; les poumons, les ple-vres, los ganglions bronchiques sont le siege principal des lesions tuborculeusos, qui, depassanl d'ailleurs le thorax, portent aussi sur les ganglions mesenteriquos, sous-lombaires et du bord convexe de Fintcstin, sur le foic et sur les organes lym-phoides de l'intestin (follicules clos et plaques de I'eyor), sur la rate ä un moindre dogre, et rarement sur lerein.

La tuberculose peut dans quelques cas chez lo bceuf porter exclusivement sur les voies digestives (ganglions mesenteriques, intestins, l'oie, rate, peritoine), les poumons restant absolument sains ; l'infection so fait dans ces cas par les voies digestives.

Pore. Pcut-etrc l'aut-il rapporter a la tuberculose la maladic designee sous le nom de scrofule du pore. En tout cas la tuberculose pulmonaire existo chez le porc, si rare y soit-elle (Nocard).

Cheval. La tuberculose equine so prtseute sous deux types distinets :

laquo; Le premier type de beaueoup le plus frequent se ratlache ä la tuberculose abdominale : hypertro-phie enorme des ganglions mesenteriques et sous-lombaires, de la rate et du foie; ulcerations pro-

fondes et elendues des plaques de l'eyer..... liest

hors de doute que, dans cette forme de la maladie, l'infection s'cst faite par les voies digestives; ce qui le prouve encore, c'est le peu de gravitö et l'äge peu avance des lesions pulmonaires qui sur-

viennent ä la derniere periode de l'afl'ection.....

Dans le deuxierae type, la tuberculose parait avoir

202

MALADIES MICROB1ENNES.

ilebulo d'emblöe par le poumou; au inoins les ganglions bronchiques et le poumon semblent-ils

seuls al teints gt;#9632; (Nocard). La lesion se preseute sous une forme singuliere : laquo; On croirait avoir affaire a une neoplasie, ä un sarcome, par exemplo, qui se serait generalise ä toute In frame du poumon. raquo;

C'est seulement rhez les chiens vivant au contact de tuberculeux, chez les chiens leehant les produits d'expectoration de leurs maitres tuberculeux, que la tuberculose s'observe.

Cost ä ralimentation par un lait suspect que devait etre rapportee la tuberculose du jeune chat dont une tigure de ce livrc inontre les lesions he-pa liqucs.

Chez les oiscaux dc hasse-cour, la regie csl, laquo; que les lesions sont confluentes sur les organes annexes du tube digestif : le foie, la rate, I'intestin sont le plus souvent farcis de lesions tuberculeu-ses enormes et calciliees; il cst exceptionnel que le poumon soil, envahi; quand il Test, c'est a, la dernierc jieriode dc la maladie, et les foyers sont beaucoup moins nombreux que ceux du foie ct de la rate raquo; (Nocard). L'infection se fait par les voies digestives, ranimal picorant des produits tuberculeux d'expectoration humaine, ou des produits d'excretion intestinale tuberculeux rejetes par d'autres oiseaux de la meme basse-cour at-tcints par la maladie; parfois aussi la tuberculose provient do ce que les animaux sont nourris avec des issues venant d'auimaux tuberculeux.

La tuberculose alTecte parfois chez les volailles une forme toute particuliero eminemment dange-reuse pour le consommateur : laquo; L'animal est en bon etat de chair ; le foie, un pen volumineux et pale, semblc en voie d'infiltration graisseuse; on n'v trouve pas trace dc ce piquete blancMtre qui caractorisc le premier stade du devoloppement des

TUBERCÜLOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 203

tubcrcules raquo; et cependant ce foie est rempli de bacilles de Koch.

Produits mrulents de l'organisme lulercultux. Toutos Ins Usions tubcrculeuscs, les crachats et lo je-tage de l'bomme et des animuux tuberculeux sout virulents.

La virulence du sangi est absolument exception-nollo et passagfere. Nous tenons pour parfaite-ment demontre par les experiences de Nocard, experiences relatees au Congrfes de la Tuberculose de 1888, quo les muscles d'un animal tuberculeux ne sout virulents que dans des cas tout aussi ex-ceptionnels que le sang, et d'unc facon tout aussi passagfere. Le Init ne contient le bacille de Koch qu'autant qu'il provient d'une mamelle tubercu-leuse.

III. Tuberculose expferimentale

11 existc bien des maniercs de couferer la tuberculose aux animaux. On peut y reussirpar :

1.nbsp; Inoculation sons-culanee (1).

2.nbsp; Inoculation intrapöritondale.

3.nbsp; Inoculation intravasculaire.

4.nbsp; Inoculation dann la chambre antörieure de l'ceü. ö. Infection pur le* voies digestives (2).

Les matieres d'inoculation sont tres diverses : on peut faire usage de crachats ou de jetago tuberculeux, de pus tuberculeux, de pulpes d'orga-nes tuberculeux (ganglions, rate, foie, moelle os-seuse) ecrasiios et diluees dans de l'eau ou du bouillon sterilises, enfin de cultures pures.

L'inoculation sous-cutanee peut elrc praliquce avec un quelconque de ce-i produits; il en est de

({) h'inoculatioraquo; superficielte, ii la lancette, laquo;'st un nioycn presque inefGcace laquo;it; conferer la tabercnlose.

(2) Nous omettous Ie= inhalations de ni;itiöres tuborcaleuses, qui nn sauraient entrer dans la pratique courante.

204

MALADIES MICROBIENNES.

meme de I'infection par la voie digestive, qui sera realisee en faisant ingerer ä ranimal avec scs aliments le produit virulent choisi, jotage, crachat, pus, pulpe orgauique, etc.

Mais I'inoculation intraperitoneale, I'injection inlravasculaire, I'inoculation dans la chambre antericure de I'oBil, reclament des produits viru-lents d'unepurete absolue : il faudra done rejeter le jctage, les crachats, le pus, et n'utiliser quo les pulpes organiques pures et les cultures; en outre pour les injections inlravasculaircs le virus, s'il s'agit de pulpes organiques, devra etre soigneuse-ment filtre avant, d'etre introduit dans levaisseau.

Les diverses especes animales reagissent de fa-cons dilTerentes vis-a-vis de la tubcrculose experi-mentale et ses divers precedes.

Les equidi's sent entierement refractaires aux inoculations sous-cutanees : e'est ä peine si I'inoculation donne lieu a une legere lesion locale. L'injection intravasculaire donne ä I'dne, ainsi que M. Ghauveau I'a monlre, une tuberculose pul-monalresemblableä la granulie de riiomme, mais ii faut, pour saisir la lesion, sacrilier Fanimal du vingl-cinquieme au trenliemo jour, car cette tuberculose experimentale guerit naturellement.

Le pore, le chien, le chat sont absolument refractaires a I'inoculation sous-cutanee ; I'infection parlesvoies digestives reussit micux, surtout chez le chat.

Le moulon est refractaire a I'inoculation sous-culauee comme a la tuberculose sponlanee. il prend cependant la tuberculose par infection digestive, et l'injection intravasculaire lui donne une belle granulie pulmonaire.

Les oiacaux do basse-cour sont refractaires aux inoculations sous-cutanees et a I'infection experimentale par les voics digestives. L'inoculation in-

TLBERCULOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 205

Iravasculaire leur conffere une tuherculose toute speciale sur laquelle nous reviendrons ci-dcssous.

La pratique dc laboratoire, la pratique courante des recherches d'ötude oude diagnostic, neportora guere sur les animaux que nous Tenons de passer en revue; ces animaux en effet sont refractaires a rinoculation sous-cutanee, et ne sont tuberculi-sables que par le mode tout special, et d'une technique im peu malaisee, de Finjection intravasculaire, ou par I'infection digestive, qui exige trop souvent des doses enormes et prolongees de matieres virulentes et est en somme assez inlidele.

Les verilables animaux de ]iratique courante sont le lapin et le cobaye. Le cohaye est un reactif de la tubcrculose bien superieur au lapin : e'est le veritable reactif pratique de cette affection :

La maladie sera conferee aux lapins et aux co-fa ay es :

1deg; Par inoculation sous-cutanee;

2deg; Par inoculation intraperitonealc.

Symptome* et lesions de la tuberculose inoeulve au lapin et au cobaye. Los symptömes majeurssont ramaigrissement et la cachexie progressive : ce sont les seuls qu'on puisse noter dans les cas d'ino-culation inlraperitoueale. Lorsquo Linoculation a ete sous-cutanee, on note chez le cobaye un abces tuberculeux au point d'inoculation (chez le lapin raccident initial est moindre), et parfois des abces dans les ganglions accessibles ä rexamen.

La duree de la survie est variafalc : eile est de trente ä quarante jours dans les cas d'inoculation intraperitoneale; un peu plus longue ct assez variable dans les cas d'inoculation sous-cutamie.

Autopsie. Les lesions sont sufaordonnees au mode d'inoculation et ä l'espece de l'animal.

Chez le cobaye, le virus suit une marche tou-jours identique. Si Vinoculation est pratiquee d la PR. le miciiobie.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 12

206

MALADIES MICR0B1ENNES.

face intime de la misse, ce sont d'abord les lympha-tiques de cotle region qui s'ontlaiiiiiiont; puis con-secutivemont les ganglions inguinaux s'engorgeat etsuppurent. Le virus franchissant successivemont les differcntos Larrieros que lui oppose chaque masse ganglionnaire envahit bienUH uno grande partie du Systeme lymplialique; les ganglions sous-lombaires ef mesenteriques s'hypeilropliicnl, la rate se inoutre parsemee d'une multitude de points blanc-grisatre ronfermant do la matiero caseeuse, qui parfois triplent, quintuplent ou de-cuplent son volume. 11 en ost de meme pour le foie, quoique les lesions y soient raromeut aussi accusees (pie dans la rate.

Si Vimculalion cst pratiques (i Voreille, ce sont d'abord les ganglions prepharyngiens qui sont pris, puis les ganglions bronchiquos et enlin le poumon. Ce dernier prescnte des myriades de points blancMtres analogues ä ceux quo nous avons signales dans le foie et la rate.

Chez le lapin, inocule dans le tissu sous-cutane, quand roxperience reussit, laquo; revolution do la maladic cst bizarre, et scmble subordonnee ä la susceptibility individuelle. Ainsi on a vu des sujets cliez lesquels Tinoculation a la lancettc d'une petite quantite do matiere tuberculcuse delcrininait une luberculoso offroyable, tamlis qu'ä cote 1'inocu-lalion d'un produit tros virulent produisait une nialadie insidieuse et trös lente raquo; (Nocard).

L/inoculation intraperitoneale donne chez le cobaye et le lapin une tuberculose des organes abdorainaux: foie, rate, ganglions, mesontere.

Tüberculose exigt;krimi:ntalk uu lapin et uks vo-

lailles par injection intra-vascülaire. ---- loi's-

qu'on injecte dans la veinc de rorcille du lapin ou dans la veine du bras dos volailles la pulpe d'un organo tuberculeux finement brovee, diluee

TÜBERCULOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 20quot;

et passee sur le filtre, ou une culture pure du ba-cille de Koch, on obtient une tuberculose toute speciale quc Nocard et Roux ont fait connaitre, et qui rappeile entierement, choz las volailles, cette forme de tuberculose spontanee oü le tu-bercule anatomique faisant en apparence tout a fait defaut, certains organcs, comme le foie, sont farcis de bacilles de Koch.

Les symptömes sont marques par un amaigris-sement rapide et extraordinaire : les animaux perdent pendant revolution de la maladiela moitie ou le tiers de leur poids; chez les coqs et les poulcs la crele pälit, devient anemique, flasquc, fletrie; eile prend, ä Tapproche de la mort, une leinte violacee. Les animaux succombent cn quinze h vinst jours.

A Fautopsie il n'y a pas ordinairement trace de tuhercule macroscopique ;le foie est hyperlrophie, la rate est enorme ; chez les volailles eile acqniert, souvent un volume qui egale dix fois et plus le volume normal; et ces deux organes ainsi que la moelle des os renferment des myriades de bacilles de Koch.

IV. Recherche du bacile de Koch dans les tissus orga-niques et les produits de secretion pathoiogiques.

L'ne seulc et meine technique convient ä l'exa-men de tous les produits qui contiennent le bacille de Koch : jetage, crachats, pus, pulpes tubercu-leuses, coupes d'organes, cultures : nous allons exposer cette technique en tete de cet article.

Depuis que Koch, par l'emploi du bleu de me-Ihylene et de la vesuvine,eut demontre nettement ['existence des bacilles de la tuberculose, les pro-cedes imagines pour colorcr ces bacilles se sont multiplies pour ainsi dire a l'infini. Peu de temps aprfes la decouverte de Koch, Ehrlich fit connaitre

208nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

un procede auquel son nom est rosto attache.

Frankel imagina un precede do coloration rapidtt des crachats; Gibbes, Van Ermcngem, Neelsen, Ziebl, Lubimofl out indiqu6 dc bonnes methodes; onfin les techniques de Weigert et de Kühne con-viennent aussi ä la coloration du bacille de Koch.

De tous ces precedes celui d'Elulich est sans contredit le meillour; eclui de Lubimoff donne aussi de bons resultats. Nous conseilions au lec-teur de s'en tenir ii cos deux niel.hodes.

Gelle d'Ehrlich a otö indiquee au chapitre vi : le lecteur s'y reportera. Voici maintenant la methode de Lubimoff :

laquo; Dans 20 centimetres cubes d'eau on introduit 0B^r,ö de cristaux d'acide borique, dont on hate la solution en versant 15 grammes d'alcool absolu. Lorsqu'ilne restc plus que quelques cristaux non dissous, on ajoute üs^r,ü de fuchsine (rubine) qui so dissout par I'agitation. On oblient ainsi un liquide qui sc conserve et est toujours pret pour I'emploi, sans filtration nouvelle raquo; (Duclaux in Annales Pasteur).

Les lamelles couverles du produit tuberculeux seront plongees dans le bain colorant qui sera chaulle pendant quelques minutes. On decolore dans une solution d'acide sulfuriqne a I/o, on lave ä l'alcool, et on fait la double coloration dans une solution alcoolique saturee de bleu de methyleno; on lave et on monto.

laquo; Pour colorer les tissus, on les chauffe pendant une ou deux minutes dans un bain de matiere colorante qu'on porte prcsqu'a 1'Ebullition; on leur fait passer quelques sccondes dans un bain d'alcool; puis on les immerge pendant une ou deux minutes, suivaut leur epaisseur, dans la dilution (ä 1/8) d'acide sull'urique; on lave ä l'alcool, et on plonge une demi-minute ou une minute dans

TÜBERCULOSE.

#9632;2o;)

uno solution alcoolique satnree de bleu de melhy-lene etendue do ti'ois fois son volume d'eau dis-tillee raquo;(Duclaux,ibid.). On deshydrnte eton monte. Le bacillc de Kocb [icut etrc colore par la me-thode d'Ehrlich en rouge ou en violet; les autres (^löments de la preparation seront colores en brun

, Tuben

A, Crachats dc phthisique. r.oitz, oc. 3. obj. 1/12.

Bj Tuberculose du cheval. Pulpe de ganglion. Meine grossis^L^,-

merit. C, Culture. Möme crossissement.

(vesuvineou brun do Bismark), en bleu, 011 en rouge.

Le procedö do Lubimoff colore le bacille en rouge; les autres elements seront teints en bleu ou en brun.

Avec ces deux procedes il sera toujours aise d'obtenirune belle preparation desbacillesdeKoch.

12'

2(0

MALADIES M1CROBIENNES.

l^a nu'lhodc d'Ehrlichpossfedeencore un precieux avantage:c'estuneraquo;ndlt;ftorfecKag^iosMglaquo;e,etlorsqu'on soupconnc la nature Inborculoiiso d'une lesion donnee, il faut d'abord soumettre les pieces a ce proceile : tout bacille qui se dvcohre, tmite par la mithode d'Ehrlich, n'est pas le bacille tuberculeux; seals jusquici les bacilles de Koch et de la lepre sc colorent par cclte mithode.

Lc bacille de la tuberculose cst d'une extreme linesse; il necessitc pour 6tre vn dans Ions scs details les forts jiTossissements des objeclil's ä immersion homogene et l'eclairage Abbe. Dans les coupes ilsera de toute utilite d'examinerd'abord a un failjle grossissement : les amas bacillaires apparaissent comme des masses informes rouges ou violettes au milieu du lissu : leur topographie sera aiusi parfaitement saisie; l'emploi des foils grossissements renseignera ensuitc sur la forme des bacilles formant les amas.

La longueur des bacilles de Koch cst assez variable suivant les cas; hue apparence dillero egale-ment dans une memo preparation ou d'un cas a un autre;e'est aiusi quo tantötle bacille cst colore uuiformiuncnt, lanlöl, an contraire il cst parsome de zones claires qui allornent avec les zones coln-rees; en d'aulrcs Lcnncs il esl riranahux : e'est un caracteie 4111 le capproche beaucoup du bacille de la morvc, qui lui rcsscmble encore par sa finesse.

V. Culture du bacille de Kocli (1).

Nous ue parlcronsquc pour raemoire du precede de Koch, qui n'a plus aujourd'lmi qu'un iatöret liistorique. Koch cultivait le bacille de la tuberculose sur le serum du sanü de ha'af ou de mou-

1/ V. Nocard ul lloux. Annales deVlnsiitul Pasteur, u⁰ t. l^^T

TÜBERCULOSE.

211

ion. On sait assez quelles difücultös presentait cotte culture, et h iniels resultats peu satistaisants ulU; aboutissait clans les cas heurcux. Koch dtScla-rait lui-menio qu'il n'v avail |ias a cspürer ([iic la culture du bacille ili' la tuberculoso jouät un tres grand röle dans l'etude de la, maladie.

En 1883 Nocard lil Caire un Premier pas a la rßussite des cultures du bacille de Kocli cn indi-(luaul io milieu suivant : laquo; scrum additionuö avani la gclatinisation d'une petite quantitü de peptone (ip. 100), de chlorure de sodium{0,2öp. 100) et de snore de eanne (0,2n p. 100).

Eufln eu ISNT MM. Nocard et liiiii\ miL donne la formule definitive des milieux: sur lesquels lo i)a-cille ile la tuberculose pousse abondamment : ils mil montreque l'addition de glycerine aux milieux ordinaires (serum, gelosc, bouillon) rend ces milieux: aples ;i luuirrir parfaitement lo bacille de Koch.

Lc bacille de la tubei'culose ne vit et no so mul-tiplie qu'eu presence de l'air : c'est un aerobie pur.

11 ne pousse sur les milieux de culture qu'äla tempörature de l'etuvc : laquo; La temperature la plus favorable parail ötre celle de 39deg;; ;i 3ö⁰-37⁰ la croissance est pluslentc.raquo; Toute culture ;i la tempörature ordinaire du laboratoire echoue.

La semence doit elre eboisie avec sein; il faut mie tuberculose jeune ä bacille vigoureux; los anciens produits tuberculeux ne donnent aueun resultat.

Les pnlpos d'organes (rale, ganglions, moolle osscuse, l'oie) de lupins ou de volailles lues par l'injection intravasculaire du virus Luberculeux (voir ci-dessus) donnent d'oxcelleutes seiuences i|iii üchouent rarement. Ccpendaut, mome daus ces cas, il lauiira s'attendre a des echoes : la mise cu train do la culture du bacille de Koch roste tou-juurs uuo uperauon delicate.

212nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

La pulpe qui doit 6tre sem^e sera soigneusement

-m^i

'%c

Fig. 4-j. Foie ilo chat tuberculeux. Verick, oc. 2, oltj. 2

(lube uon lire).

broy^e duns la pipette oü eile aura eto reciieillif

TÜBERCULOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 213

(voir chap, in) : cette operation preliminaire est absolument indispensable pour mettre en liberte lo bacillc ornprisonm'' dans les tissus. Los milieux de culture du bacillc de Koch sent :

1.nbsp; nbsp;Le serum plvcerimi et le serum glycerine poptonise;

2.nbsp; La gelose glycorinee;

3.nbsp; Le bouillon peptonise glycerine;

4.nbsp; Le serum, la gelose, le bouillon peptonists, gly-cirinis, et glycosis.

1.nbsp;Samp;rum glyccrine. Serum glyccrine et peptonise. laquo; L'addition de la glycerine au serum nc com-plique guere la technique : dans un ballon pipette renfcrmanl; un poids connu de serum pur, on aspire une quantity de glycerine sterilisee ä llö⁰ ä l'autoclave, representant 6 ä 8 j). 100 du poids total. On melange en agitant, et l'oii distribue dans des lubes ä essai que l'on porte ensuite dans l'etuve a gelatinisation. Le serum glycerine et peptonise donne encore de meilleurs resultats; pour le pre-paror on dissout la peptone neutre h froid dans la glycerine dans la proportion de 20 p. 100, et la solution stdrilisoe a l'autoclave est melangoe au serum comme nous veuons do le dire. Pour soli-difier le serum glycerine, il faut une temperature plus elevee que pour le serum pur, 7odeg; ä 78deg; environ, suivant la proporlion de glycerine. Le milieu aiusi prepare est d'ailleurs tres beau, aussi transparent que la gelatine de serum ordinaire raquo; (Nocard et Roux).

2.nbsp; Gilosc glycinnäe. laquo; II suffit d'ajouter 6 ä8p. 100 de glycerine ä la gelose nutritive preparee do la facon ordinaire, pour en faire un bon terrain pour le developpenent du microbe de la tubcrcu-lose. raquo;

3.nbsp; Bouillon peptonise glycamp;rind. On ajoute au bouillon peptonise ö p. 100 de glycerine sterile.

i 14

MALADIES M1CR0B1ENNES.

4. On obtlendra les meilleurs räsultats en addi-tionnant le serum, la gulose, le bouillon de :

i p. 100 de peptone. 6 p. 100 de glyreriuc. 2 p. 100 de glycose.

C'est la le meilleur terrain, celul sur lequel le bacille de Koch pousso le plus abondamment (No-card et Roux). Les Allemands emploient la dextrine

de preference ä la glycose; tout en ctant d'ailleurs tres favorables ä la culture, les milieux dextrines ne presentent aucun avantage sur les milieux glvcoscs.

D'une facon gcuerale, la premiere mise en train d'une culture du bacille de Koch est dii'licile, et demande un temps variable, toujours assez long; mais les passages successifs, les series de cultures soil sur le milieu premier, soit sur un quelconque des autres milieux appropries,deviennentaisos, et so font plus vile et plus abondamment: ilsemble qu'il y ait une sorte d'acclimatement du bacille ä la culture artilicielle ; quand le bacille s'est une premiere fois accommode d'un milieu artiticiel, il devient aisement cultivable sur tons les milieux propices.

Culture du bacille de Koeh sur le serum gylccrind-pcptonise-glyeosr. Ce milieu est excellent pour la mise en train de la premiere culture; il est infe-rieur a la gelosc et au bouillon pour les cultures successives. Au bout, de quelques jours, ä la temperature de l'etuve, la culture est laquo; epaisse, saillante, mamelonnee, d'un blauc mat, et jaunit un peu avec le temps; eile n'a rien d'analogue a la couche seche, maigre, ecailleuse, qui caraclerise la culture sur serum ordinaire. Si quelques bacilles lombent dans le liquide rassemblo au fond du tube, ils s'y developpcnt en potits llocons qui augmentent bientot de volume (Nocard et Roux).

Les lubes de serum ensemences avec le bacille de

TÜBERCÜLOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 21S

Koch et places ä l'etuve doivent etre coiffes d'un capuchon de caoutchouc.

Culture du bacille de Koch nur la Qamp;ose glycamp;inie-peptonisde-glycosäe. La culture surgclose glyceri-neepeut so faire enpiqüre, en strie et onfln enplaque.

v Lorsqu'on seme par piqüre un tube de gelose glvcerinee, comme on le fait pour un tube de gelose, la culture se fait le long de la piqüre, seute-ment dans les parties les plus superfidelles, elü ny a pas de damp;oeloppement dans la profondew; ä la surface la culture s'etale sous forme d'une plaque sail-lante, epaissc, blanche d'abord, puis jaundtre, en-suite d'aspect mamelonne, ä bords irreguliere-ment denteles raquo; (N. et 15.).

La culture en strie sur la gelose glvcerinee est infiniment plus favorable que la culture en piqüre. Interieure pout-etre au serum pour la mise en train d'une premiere culture, laquo; la gelose glvcerinee con-vicnt surtout pour les series de cultures successives, qui se font ainsi avec une regularitö parfaite et dans un temps relativement court; en quinze jours le developpement est plus abondaut que sur le serum apres plusieurs semaines. Si la scmence a ete etalee en couche reguliere ä la surface de la gelose glvcerinee, le developpement se fait en une nappe blancluitre, d'egaleepaisseur, quidevient un peu jaunätre ä la longue. Lorsque la semence est irregulierement reparfie, la coucho presente des trainees plus epaisses aux points oü la semence etait plus abondante; si peu de bacilles ont ete seines, its se developpent isolement en donnantde petits amas tuberculeux... L'aspectdes cultures est gras et humide, demi-transpareiil raquo; (N. et Tl.).

Les tubes de gelose glycerinee ensemences,doivent ctre places ä l'etuve munis d'un capuchon de caoutchouc.

laquo; Les avantages de la gelose glvcerinee sonl

i^raquo;

216nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICH0B1ENNES.

lacilcs ä comprendre. Elle cst facile ä preparer; eile peut elre storilisee ä 115deg; en une seule fois, Jans 1'autoclave; en quelques heures on peut en faire une provision aussi grande qu'on veut. Son aspect cst non seulement plus plaisant a I'oeil, mais sa transparence permet la photographie des cultures qui sc delachcnt nettement sur son fond legeremont ambre.De plus clle rend possible I'em-ploi des cultures sur plaques raquo; (N. et R.).

Cette culture sur plaques so fait, suivant la inc-thode de Uoux, laquo; dans des tubes de verre longs de 25 ä 3Ü centimetres et larges de 2 a 3 centimetres (V. chapitre iv). Une petite quantity de gelose glycerinee est introdulle au fond dos tubes que Ton ferme avec un tampon de colon et (pie Ton sterilise ä 1'autoclave ä H;i⁰. Pour les utiliser il suffit de faire foridrc la gelose et de l'ensemencer alors qu'ellcest encore liquide. On agite vivement, et on couche le lube sur un plan horizontal; la gclee nutritive s'etale et se moulo sur la parol in-ferieure du tube. Kile est ainsi repartie sur une grande surface, et si I'ensemencement a ote conve-nablement fait, les colonies qui se developperont scront parfaitement isolees. La couche solide doit elre mince pour que Ton puisse facilement examiner les colonies au microscope a. travers le verre. Le tube est ferme avec un capuchon de caoutchouc, ct il peut roster a, I'etuve aussi long-temps que Ton veut sans qu'il so desseche.

#9632; En deuxou trois semaines on obtient ninsi dans rinterieur du milieu de belles colonies isolees du hacille de la tuberculose en partant do cultures pures, de facon ä efudier lour aspect. Elles se pre-sentent tout d'abord avec une forme arrondie; elles sont transparentes au centre, et a contour net; h. mesure qir elles grandisseni,elles de viennentbrunes et compactes. raquo;

Tl'BERCULOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;217

Culture du badlle de Kuck dam le bouillon pep-tonisi-glycirini-glycosi. G'est un excellent milieu oü laquo; le bacille de la tuberculose venantd'une culture sur terrain solide se developpe aboudam-ment dans l'espace de huit ä dix jours. II apparait d'abord sous forme de pelils flocons tres tenus qui se rassemblent sur le fond du Üacon ä rui-ture. (;(!s flocons se dusa^regent facilement si on les agile. 11s s'accroissent rapidement et, si on les laisse en repos, au bout de quinze jours a Irois semaines, le fond du vase cst convert de tlucons volumineux, rappelant unpeu ceuxdela baetöridie charbonneuse, wais plus consislants et plus diffl-ciles ä desagreger.

lt;c Si 1c bouillon glycerinö est ensemence avec de la matiere tuberculeuse prise sur nn animal, la croissance des bacilles est plus lente que si la semence avail ete prelevee sur une culture dans un milieu glycerine. Dans cos conditions, il faul un mois pour avoir un developpement serieux. Cependanl, en ajoulant au bouillon glycerine un pen de I'albumine de l'oeuf, nous avons eu une cull lire manifeste, en partantde la tuberculose du lapin, au bout de cinq jours; le huitieme jour, eile etait tout ä fait abondante.

laquo; Les cultures successives dans les milieux liquides se font facilement et en consorvant lours caracteres. Le developpemont. Ires appreciable le huiticine ou le dixieme jour, est considerable au bout de deux ou trois semaines. raquo;

Examen den cultures du bacille de Koeh. L'exa-men se fera sur lamelles par la technique indi-quee ci-dessus.

laquo; Les bacilles provenant de cultures sur scram ou fi'Jlose glycerines gardent pari'aiteinent la cou-leur. Ils out le memo aspect que ceux qpii croissent sur le scrum pur, mais ils sent un pen plus

pn. UK hicrobie.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; i'-i

..f.-

218nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

gros. lls sont plus courts que ceux quo l'ou Irouve dans les crachats et dans los produits tu-boi'culeux pris sur l'homme et sur les animaux. Dans les premiers jours de la culture, ils sont homogenes et secolorentdans toutes leurs parties. A mesure que la culture vieillit, les bacillcs les plus anciensprennent moins tortoment la eouleur. Dans une culture vieillc de plusieurs mois, nous avons rencontre des formes plus longues qu'ä 1'ordinaire; quelques-unes d'entre elles presen-laientcomme im bourgeon lal ('rat brauche presqueä angle droit sur le bacille principal, et termine quelquefois par un rentlement a son extremite raquo; (N. et R.).

L'examen des cultures dans le bouillon peptonisi-ijli/cvrinii-glycüsd donne les resultats suivants : ci Les tlocons paraissent formes par des bacillcs enchevetres, bien colores, et un peu plus petits que ceux qui croissent sur les terrains solides. Plus tard, ils semblent grossir unpeu; an vieil-lissant ils se colorent d'une facon moins intense, et Ton apereoit dans leur intericur des grains plus fonces, soit au nombre de deux, unä chaque extremite, soit au nombre de trois, deux aux extremites, un au milieu du bacille. Un bacille n'a quelquefois qu'un grain, soit au bout, soit avant son milieu; parfois aussi on en voit plusieurs repartis dans tonte sa longueur. Cesgrains qui ont tout ä fait l'aspect de spores deviennent plus nombreux et plus nets avec l'äge des cultures raquo; (IN', et R.).

Culture du bacille de Koch sur la pomme de teere. Ou doitau docteur Pawlowsky, de Saint-Petcrs-bourg, la eonnaissance d'un precede de culture du bacille de Koch sur la pomme de terro (Voir .-lt;raquo;-nales Pasteur, 1888).

On prepare des lubes ä pomme do terre de

TÜBERCULOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 219

Roux (V. chapitre iv) et laquo; les surfaces des tranches ainsi prepareos sont ensemeneees soit avec des cultures pures de bacilles de la tuberculose, soit avec dos tissus tuberculeux (1). On fait pene-trer la semence dansla substance de la ponnne de terrepar des frictions avec unespatule deplatine raquo;. Los tissus tuberculeux seront soigneusemeut broyes, tritures comme uous l'avons indique ail-leurs et ensemoncos par friction avec la spatule de platine.

Los tubes ensemencis seront fermis ä la lampe ä leur partic superieure, et places dans l'etuve a - - 39deg;.

La culture commence ä ctre apparente des le douzieme jour; au vingtiöme, eile est caracteris-tique. ilt; La surface ensemeucee est seche, blnn-cluitre, lisse, moins consistaute et so laisse faci-ioment enlever par ie raclagc avec la spatule. Par sa couleur blauchatro et sa sechercsse, eile se distingue nettement des parties non ensemeneees de la pommede terre, qui sont jauncs, jdus fermes, grenues et humides. La multiplication des bacilles se fait dans les couches superlicielles. La culture ne s'eleve que peu au-dessus de la surface de la jiomme de terre.

laquo; Apres un mois, les cultures sont tres abon dantes; clles sont tres manifestes möme dans les tubes ensemoncos avec des aiguilles de platine. Au bout de cinq a six semaines, elles se pre-sentent comme un enduit blanchdtre qui, daus quelques tubes, prend l'aspect de granules blanc-grisätre, de la dimension d'une töte dx'piugle. Cos granules s'observent surtout au tiers inlerieur de la pomme de terre. #9632;gt;

(1) L'auteur n'a pu culüver sur la pommo de terre lt;iuy la moelle des os d'un lapin inocule avec une culture sur gelose glycörim'-e. Les quelques essaistontös avec des tuberculoses d'autresprovenances

n'out pas reussi.

220

MALADIES MICROBIENNES.

Los cultures sur pommes de terre peuvent se faire en series d'uno pomme de terre sur I'autre : le developpement a lieu en deux ou Irois semaines.

VI. Resumö des caracteres du baollle de Koch.

Aerobic, le bacille de Koch ne sc d^veloppe qu'ä la tomperature de l'eluve (35deg; ii 40deg;). Sa culture, toujours difficile, ne reussit bien que sur des milieux solides ou liquides additionnes de 0 ä 8 i). 100 de glycerine. II se colore, entre autres methodes, par un precede d'election, le procede d'Ehrlich, qui jusqu'ici no reussit qu'avec le bacille de Koch et celui do la lepre.

ü'une extrönio finesse, la bacille do la tuber-culose presentc souvent, apres coloration, un aspect granuleux remarquable.

TUBERCULOSE ZOOGLCEIQUE

Le tubercule, en tant quo losion anatomo-patho-logique macroscopique ou microscopique (abstraction faitedansce dernier examen des bacteries pa-thogenes), ost loin d'Otre caraclorisliquo do la tuberculose proprement dile. La morve donne lieu ä dos lesions tuberculeuses, I'actinomycose ega-lement, et nous verrons ailleurs uno bion curiouso pseudo - tuberculose produite chez le cobaye et le moulon par rinoculation intraporiloneale et in-traveineuso du bacille du farcin dn bceuf. La ne

TüBERCULOSE ZOOGLCEIQUE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;221

s'arrelo pas d'ailleurs Ilaquo; cycle des affections u lusious tuberculeuses; les parasites animaux eu provoquent aussi la forraatioa : tömoin la pseudo-tuberculose due aux a;ufs du shuinji/lus jüaiki (Lanlaiüe).

L'exaraen macroscopique ou histologique ordinaire est done impuissant ä döcelcr la natiu'u vraie d'une affection ii losions tubercüliformes : pour trancher la question il faut s'adresser aux prociides de la microbiologie et aux inoculations experimen talcs.

MM. Malassoz et Vignal out deceit en 1883 et 1884 dans les Archives de physiologic uno interessante maladie tuberculitorme, ä laquelle ils ont donue le noin de tuberculose zooylatijiie, affection interessante surtout ä cause du point de depart du travail et des relations, plus apparentes que reelles (nous le demontrerons), de cetto tuberculose zooglceique avec la tuberculose vraie.

Uecherchant dans les diverses pieces de tuberculose qu'ils pouvaient sc procurer le degre de conslance du bacille de Koch, MM. Malassoz et Vignal rencontrerent, un nodule tnberculeux sous-culane que portait ä l'avant-bras un enfant de quatre ans mort de rnrniinjltc luberculeiise. Ce nodule ne contenait, ii Texamen microscöpique, aueuu bacille de Koch ; il futinoculea un premier groupe de cobayes par injection intraperitoneale, et cos cobayes moururent rapidement avec des lesions tubercüliformes generalisees, caracterisöes liar un semis de granulations sur les organcs abdominaux (ganglions mesenteriques, niesentere, epiploon, foie, rate); les lesions tuberculeuses, depassaut la cavite abdominale, avaienl aussi cn-valii la cage tboraciquo : poumons, ganglions bronchiques et retro-slernaux, parfois meine ganglions cervicaux.

i:r

222

MALAIMKS MICROBIENNES.

ii Dans les autres#9632; organes et tissus, disent MM. Malassez et Vignal, les lesions etaient rares; ainsi nous n'avons trouve qu'exceptionnellement dos tubercules dans les os. raquo;

Fig. 4fgt;.

A. Tuberculose zooglceiqnc. Poumori rlc poulc. I.citz, oc. 3, olij. 1/12. ii. Tuberculose. Foie de faisan. l.eilz. oc. 3, obj. 1/12.

Inoculeos enserie äd'autres groupes de cobayes, ccs lesions de premier passoj/e icnr confererenl une tuberculisation absolument identique, amenant la mort rapidement; quand ['inoculation etait sous-Rutanöe, il se produisait nn nodnle tuberculeux au point, d'inoculation, la propagation se faisail

TUBERCL'LOSE ZOOGUEIQUE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;223

aux ganglions voisins et onfin arrivait la gcnora-Usation.

Or ccs h'isions examinees au microscope par les procedes appropries nc renfeimaientpas leliacille do R. Kocli, mais conslamment des zoogiu'es qu'un procede de coloration, decouvert peu npres par les auteurs, mit en pleine evidence.

Co procedc do coloration le voici :

La coupe, apres avoir etc bien lavee, est placee pendant deux ou trois jours au moins dans lo melange suivant ;

Solution de carbonate de somle ä '1 p. 100. 10 vol.

liau distillee, saturoo d'huile d'aniliae...... 5

A kool absol u............................. ;j

Solution dn blou de metliylene taite avec 9 volumes d'eau distillee et un volume de Solution eonceutree do bleu de metltyiene dans l'alcool ä 90deg;...................... 3

Co melange doit ctre lillre pour Fusage.

laquo; Les zooglcees s'y colorent alors en un bleu franc, assez vif, tandis quo le tissu de granulation devient d'un bleu verddtre tres päle, et les noyaux du tissu sain d'un bleu pur, mais peu intense.....

quot; La coupe, apres avoir ete bien lavce ä l'eau distillee, afin de la debarrasser du carbonate de soude et du precipite qui a pu so deposer a sa surface, est desliydratee, non dans l'alcool absolu ordinaire, mais avec do l'alcool absolu legeroment teinte par du bleu de methylene. Elle est ensuite eclaircie, non avec de l'ossence do girofle, mais avec de l'esscnce de bergamote ou de tereben-lliine. i)

Le montage so fait au bäume de Canada ou dans la resine d'Ammar.

Cette methode permit ä MM. Malassez et Vignal de demoutror quo I'agcnt patbogene etait un micro-coquc, dont la morpbologie pouvait se resumer

224nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

ainsi, en allant dos formes les plus simples aux plus composecs :

lt;( 1deg; Microcoques plusou moins allonges, mesu-rant environ de 0,0u a I ;/. de long, sur 0,3 [#9632; do large; tantot isotes, tantut reunis deux a deux on diplncoques;

laquo; 2deg; Courts chapolets rectilignes, ayant ä des grossissements plus faibles an peu I'aspect do luicilies, et constihios par la reun ion de trois, quatre, cinq microcoques semblables aux precedents; cos chapolets sout parfois isolos, 1c plus souvent reunis par petits groupes;

laquo; 3deg; Chapolets plus pu moins longs, formant entre les elements dos sinuosites, desanses, desboucles; on les trouve ögalement isoles ou roninis plusieurs sur le meine point;

laquo; 4deg; Petitos zooglioos formees dc un ou plusieurs chapolets semblables aux precedents, mais l.iche-ment contournes sur oux-inomes, a la facon d'un echevcau mole ou d'un peloton peu sorro.

laquo; ii⁰ Zooglioos proproment ditos, diderant dos pre-cödontes par leur volume plus considerable, et parcc que les chapolets qui les composent forment un polotonnement plus serre et une masse plus homogene. raquo;

Les experiences do MM. Malassez et Vignal so terminorent d'une facon imprevuo : au ciuquioiuo passage les bacilles do Kocli apparaissaient dans les lesions; au sixiomo la tuberculose bacillaire etait plus evidente encore.

Cepondant avoc le tubercule cutane do I'enfant meuingitique, point do depart do cos experiences, MM. Malassez et Vignal tenterent des cultures sur senin) ä la muniere de Koch : sur vingt tubes environ, deux soulemout cultiveront, I'uu assoz abon-damment (lube 1), I'autrepluspauvrement (tube 2).

La culture du tube i inoculee ä des groupes de

TÜBERCULOSE ZOOCL^IQUE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;22S

cobayes donna par passages uno serie de tuberculoses zoogloßiques, mais au troisiäme passage il 3' cut apparition des bacilles de Koch.

Le seul cobaye inoculö avec lo tube 2 mourut tris raquo;'apidement/.l'autopsie revela uno tuberciüose baällaire confluente des plus nettes.

Dans lew premier memoire on 1883, MM. M11-lasscz et Vignal paraissaient disposes a croiro quo la tuberculose zoogloeique et la tuberculose bacil-laire de 11. Koch n'etaient quo deux formes dilTe-rentes d'un meine micro-organisme. Dans leur memoire de 1884, ils inclinent a penser 'ju'il y a Id deux infections diffamp;rentes.

11 nous parait quo la v^rite cst tout cntiero dans cotto dorniere opiuion.

L'apparition de la tuberculose bacillaire dans ces series d'experionces pent s'expliquor de deux faeons : on peut admettre quo MM. Malassez et Vignal operaient dans un milieu infecte, et qu'ils ont inocule des produits souillos, ou bien encore quo les animaux so sont contamines spontanemenl; la mort en (juatre jours, avec une tuberculose bacillaire confluente, du seul cobaye inocule avec le tube de culture 2 donne un grand poids a cette hvpothese.

Los zoogloeos de Malassez st Vignal out ete re-trouveos par deux microbiologistes francais : MM. Nocard et Chantemcsse : il semblo aussi que ce soit olios qu'Eborth a obsorvees dans deux cas.

En I88Ö, M. Nocard (1) recut d'un vötöriiiaire do Laval, M. Sinoir, dos poumons do poule farcis d'un nombre considerable de petites tumours, d'apparence tuberculeuse, de la grossour d'un grain do mil a un pois, de consistance forme et

(1) linUetin de la Societ/; centraleih' med. vet. Mui I88j.

226

MALADIES MICROBIENNES.

dense, ä peu prfes homogenes ä la coupe, bien Jeli-mitecs, et non enkystöes.

(x-lte tuhemdote atteignait succcssivcment toutes los ponies que le memo proprietaire enfermait dans un local special en \ ue de rengraissement; eile respectait cellos qui restaient en liberte; c'elait done bien une maladie infoctieuse, maw ce rieUdl pas la tuberculose.

Dejä lo premier examen ä l'oeil nu avail mis en garde M. Nocard contro l'idee de tuberculose : la tuberculose pulmonaire do la poule est rare, ultime, et reste loujours discrete.

L'examen bactöriologique no montra pas un seul bacille de Koch, mais les zooglcres do Malassez et Vignal, en quantity considerable. Les pieces (Uaient trop anciennes pour sepreter aux inoculations et aux cultures.

Ce fait est des plus interessants; il nous montre la tuberculose zooglceique ivoluant d'une faconspontande.

En octobre 1885, M. le doctenr Terrier remettait ä Jf. Chantemesse dos tubes formes a la larnpe, qui contenaient des fragments d'ouate.

laquo; Sur cette ouate M. Terrier avail fait passer une centaine de litres d'air puise dans dos sallcs oü des malades atteints de tuberculose pulmonaire allaient sesoumettreädes inhalations mödicamen-teuses raquo; (Cbantemesse, Annalcs Pasteur, nquot; 3,1887).

M. Chantemesse insera des fragments do cette ouate dans lo peritoine de cobayos, qui moururent avec un semis do granulations tuberculeuses sur les visceres abdominaux, el aussi, mais a un moindre degre, sur los organos tboraciques.

L'examen microscopique ne montra pas un seul bacille do Kocii, mais les zooghres de Malassez et Vignal.

M. Chantemesse no put, malheureusemenl, faire d'inoculations de passage ni do cultures.

jk.

MORVE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 227

Xous resumorons cet article trop long dejä sur la tubcrculose looglaique ou pseudo-tubereulose de Malassez et Vignal, en disant (ju'il existo un agent palhogenc encore inconnu dans sa nature et ses caracleres, mais uettement entrevu par Malassez et Vignal, Nocard, Cliantcmessc, Eberth, quidonne lieu a uno pseudo-tubereulose experimentalo (Malassez et Vignal, Chantemosse), et que M. Nocard a vli (#9632;vuluer spontanemont sur l'organisme de la poule (I).

IV MORVE

I. Historique.

l.'histoirc microbiologique do la morve osl due surtoutä Löffler et Schütz (1883). En merne temps que cos deux auteurs, MM. Bou-

(!) Au rnomeat oil ce Proci? va paraitre, lt;!eu\ etucios nouvelles, que nous pouvons seulemeaf rapidement iadlquer on note, vienuent eurichir l'histoire de ta tubcrculose zoogla'ique tic. Malassez ct Vignal, et lui donner un vif intcret.

En iaoculanf un cobaye dans le [leritoino avec de Venu liltree sur une terre qui avait ete precödeDiment arrosee aver une culture pun- du bacille ile Koch, JIM. Grancheret Ledoux-Lebard out de-teiinine l'apparition de la tubcrculose zoogUeique de Malassez et Vignal, dout ils out fait une etude complete (ArcA. de med. exper. mars 1881'*.

Plus interessante encore est 1'origiaede la tubcrculose zooglccique t|ue M. Nocard et t'un de nous out signalee ä la Societc de biologic. Cette tubcrculose tut detormiuee chez le cobaye par I'inoculation du jetage d'unc vnche suspeetc de tuberculose, jetage envoye par un veterinaire de province desireuv de faire contröler son diagnostic dans ce cas douteux.

Les cultures pures du microcoque de cetto tuberculose zooglceique out tue le lapin et le cobaye : par inoculation sous-cutanee (tub.

I3²

^^^^#9632;i

22S

MALADIES MICROBIENNES.

chard, Capitan et Charrin annnocaient a I'Aca-

domie des sciences qu'ils venaient d'isoler par la cullure le microbe de la morve, et les expöricnces faites alors sous la direction de M. H. Bouley con-linnaient cette assertion. Malheureuscment, leur travail donnait des indications si incompletcs sur la morphologie du microbe et sur los moyens de l'isoler, qu'il n'eut pas le relentissement de celui de MM. Löffler et Schütz.

II. Morve spontanee.

La morve est unc maladie commune a I'homine ct aux animaux.

Chez Vhomme la morve provient, dans rimmonsc majority descas, de source animale, etpresque uni-quoment de contagion iquine.

La contagion vient a I'homme tie I'animal mor-veux vivant, du cadavre, des objets souilles tels que couvertures, harnais, fourrages, lilieres, etc.; eile se fait par inoculation, repiderme presentant une solution de continuity venant au contact de la imitiere virulente.

On admet encore, pour expliquer certaines formes de morve humaine, que la contagion peut se faire par la voie digestive, non pas ä coup sür par Ingestion de produits morveux, mais parce quo les doigts souilles de virus morveux sout portes par inattention aux levrcs, a la bouche.

La morve de rhommo debute par un accident local correspondant au point d'entree du virus [angioleucUe farcineuse), ou par des symptdmes

zoogl. liu foie, de la rate, du poumon) ; par inoculation intra-vei-nc-u?(; (pöritonite, pleur^sie, tub., npparente soulemeut au microscope, lt;lu foie, *ie la rate) : par inoculation intra-p-Vitoneale (piquets blanchütre de tubercules lins sur le loie et la rate). Le pigeon a succombe aussi en quatro jours ä riuoculatiün intia-veineuse (So-cietc ile biolosrie, '.i mars 188(1).

MORVE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;229

genoraux; olio evoluc eiisnile sous lo type aigu (farcin aigu, dont los symptömes so localisent sur la peau et lo tlssu collulairo sous-cutane; et morve aigue, localisee sur la muqueuse respiratoire at pituitaire); ou sous le ti/i^e chronique (morve farci-neuse chronique caractöriseo par dos abcamp;s cutanös ulcorcux inultiples, do l'enchifrfentement et un jotage muqueux et sanguinolent).

La morve est d'ailleurs une maladie rare chez riiorame, et d'un diagnostic obseurdans la grande majority des cas (1).

Morve spontaiu'e des animaux. Dans les conditions naturelles les rquides prenncnt seuls la morve.

La contagion naturelle so fait par des voies multiples : a) par le tube digestif, ranimnl ingorantdos aliments ou dos boissons souillos par le vii'us morveux; b) par le contact direct dos matieres virulentes (jetage ou pus) avec la muqueuse dos premieres voios respiratoires; c) par inoculation au moyon des objets do pansement souilles : cette inoculation pent se faire sur les muqucuses pituitaire, conjonctive, vagin) et sur la peau.

Lo cheval prend ordinairement la morve spon-tanee sous la (ovine chronique: il laut faire except ion pour les animaux do sang, chez lesquels I'affection revet la forme aigue; Fane ot lo mulot prenneut toujours la forme aigue.

La forme chronique do I'affection correspond ä deux types :

1. Le farcin citroniquedonl los lesions principales sont : les abces cutanes ou bouton*: les lymphan-gites spociliqucs ou conies, qui aboutissent, ainsl quo les boutons, ä l'ulcöration, au chancre: les engorgements diffus dos membres; le sarcocele;

(1) Pour leraquo; details cliniques sur cetto maladie chez i'homme, voirle memoit'e magistral de Haver et l'aptxle de Brouanlel daos 1c Dictionnaire encyclopedique.

raquo;30

MALADIES MICROBIENNES.

2. Lumorve chronique caractörisöe par los lesions suivantes : chancres nasaux avec udeiiite de l'auge; chancres laryngo-tracheaux; tubercules pulmonaires souvent aecompagnös de foyers do pneumonia lobulaire, do plenresies cbroniques ; adc'nite dos ganglions bronchhjuos; et parfois tubercules mo'rvoux du foio, do la rate, dos gan-glions mrsenleriqucs, des capsules surrenales, de Tovaire, do I'uterus.

Dans les formes aigues (farcin et morve aigus), les lesions sont somblahlesau fond, quolque, par suite de la rapidite do revolution, elles revetent uno forme differonte, on apparence.

Sur L'animal vivant, la virulence morveuse existo dans [ejetage ou dans le pus qui rcsulto do l'ulcöration des boutons et des cordos.

Los produits virulents du cadavre sont toutos les lesions essentielles de la morvo, c'est-ä-dire le tubercule morveux et ses dörivös, chancres et abeös, dans quelque region qu'ils so rencontrent. Le san^ n'est jamais virulent, memo dans la morve aigue, non plus quo la sueur, la salive pure (c'est-ä-dire celle qu'on recueille par unc listulc du canal de Stenon) et le sue musculaire.

III. Morve experimentale.

11 y a plusieurs moyens dc conferer la morve aux animaux ; on pent y reussir soit par Vinocu-lation qui, id, pent 6tre superfidelle on sous-cutanie; soit par l'ingestion de matieres inorveusos.

Aous ne parlerons que du procede seul pratique de I'inoculation.

Los animaux auxquels rinoculalion confero la morve sont: les dquidis, le cobaye, le lapin, lemulot ou campagnol.

Les animaux ritfractaires sont les bovidrs (aussi

MORVE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;2M

iibsolument rcbelles ä la morve experiinenlalo qu'ä la morvc spontanoe), et les suidils. Le pore pcut cependant contracter la morve, lorsqu'il se lioiive dans un etat de debilitation organiquc {Cadeac et Mallet). Le chien est pour ainsi dire relractaire ä l'inoculation moiveuse, ou du moins il n'y succombe quo tres exceptionnellcmeut : nous reviendrons sur ce sujel tout ä l'heure.

Morce expMmentale de Vdne. L'dnc est le veritable roactif experimental de la morve, qu'il prend toujours sous la forme aigue. La meilleurc manierc d'inoculcr est de pratiquer des scarifl-cations sur le front de l'animal et d'etatcr la ma-tiere virulente par friction sur les plaies linuaires. II se fait rapidement, a cet endroit, un travail ulce-ratif (jui aboutit a un vaste chancre avec engorgement chaud et douloureux ä la peripherie.

La lievre s'allume des le troisiemc jour, et l'a-nimal succombe rapidement.

Les lesions trouvoes a 1'autopsie sont les sui-vantes : laquo; Le plus souvent, la rauqueuse des cavitös nasales, du larynx, de la trachee, est le siege d'unc eruption de petits boulons rougeatres, qui n'ont pas eu le temps d'evoluer. Toujours le poumon est farci d'unc multitude de lesions tres difle-rentes de celles qu'on observe daus la morve chro-nique; ee sont de veritables infaretus, de forme conique ou pyramidale, dont la base correspond ä la surface pleurale du poumon. L'aspect de la coupe en est grenu, homogene, d'un blanc sale ; sa consistance est assez fermo. La pression en fait sourdre de pefites goutlelettes de pus epais, blan-chatre, tres virulent.

laquo; Leur aspect pourrait les faire confondre avec des tumeurs.

(i Lc foie, les reins, larate, la moelle des os,pcu-vent etre parsemes de lesions moins volumineuses,

230nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICBOBIENNES.

V. Culture du bacllle de la morve.

Aerobic, lo liacillu de la morve nc se cullivt-qu'en prusence do I'air.

La culture reussit mal ä la temperature ordinaire, od ello i)oussc ]icu ot Icutomcnt; aussi la gelatine (;st-clle un milieu pcu favorable ; lo ba-cillc morveux sera done eullivö dans lo bouillon, sur la g61ose et la pomme de tcrre a la temperature do l'etuve (3ö⁰ ä 40deg;).

II ne faut pas choisir pour scmence, sauf un cas special dont nous parleronsci-aprös, des produits impurs tels que lo pus on le jetage : e'est dans les lesions visooralos do la morve do l'änc ou du co-baye qu'il taut prendre la somonce: la rate oü pul-Lulcnt los bacilles (^st Ires favorable.

Bouillon. La culture se fait on vingt-quatre ou quarante-huit heures; le Ijouillon se trouble sans apparence spöciale.

Gclose. En vingt-quatre ou quarante-huit heures, la semoncc laquo;pullule sous forme* d'uno mince coucbe blanchdtre, ä demi transparently rcllotant uncteinto logörement bloLiätre, qui va graduolloment en augmentaut d'opaisseur, ct qUi devient hionlot entieromont opaque raquo; (Nocard).

Pomme de tevrc. La culture sur pomme de terre est wie des caractdristiques du baeüle de In morve. Sur la pomme do terre mise ä rel.uvc il so forme aux points inoculos laquo; une sorto d'enduit epais, humide, luisant, visqueux, roflelant aprös quol-ques jours une coulcur fame qui so fonco do plus en phis, et qui arrive bienlot a la teiulo chocolat clair. De tons los badlles actuellement connus, le bacille morveux prend soul cet aspect absolument caraclöristique raquo; (Nocard).

Cot as[ioct, suflisaut a lui seul pour permettre d'affirmer que le produit onsemenco etait morveux,

MORVE.

231

permet de faire servir la pomme de terre au dia-gnostic des cas douteux dc morve, au memo litre que ['inoculation au cobaye, h I'ane.

Etantdoniie un prodnil suspect, delayez-le dans une quantitö d'eau ou de bouillon steriles, et ensemeueez la pomme de terre avec cctte dilution suivant les precedes decrils au chapitre iv, laquo; Apres quelques Jours, il so duveloppera un grand nombre de colonies d'aspect divers (le produit ensemence etant natürellement impur), parmi lesquelles celles de couleur jauno brun quot; si le produit contenait le virus morveux : I'exainen microscopique avec le precede de Loftier comple-tera la demonstration de la nature morveuse du produit, demonstration bien simple, facile, et de plus demandant fort peu de temps.

Les cultures de inorve, quel quo seit le milieu sur lequel elles ontete faites, se conservent peu. Une culture qui n'est pas renouvelee a perdu au bout d'un mois environ, et souvenl plus tot, la faculty de repulluler.

Resume des caracteres du bacille de la morve.

D'une extreme finesse, aerobic, le bacille dc la morve se cultive bien ä une temperature de 3ö⁰-30deg; dans le bouillon, sur la gelose et sur la pomme de terre; il dunne sur celle-ci une reaction chromogamp;ne caractiristique. Le bacille de la morve prend mal les couleurs d'aniline; il ne se colorc ni par la melhode de Gram ni par celle de Weigert; le bleu de Loftier ou celui de Kühne le colorenl, bien; il prend ä la coloration un aspect granuleux Ires special.

2:!s

MALADIES M1CR0BIENNES.

SEPTICEMIE DE PASTEUR

G'est dans unc note luc ä l'Acadömie des sciences on juillet 1870 quo M. Pasteur annonca la de-couvertc du vibrion septique.

La presence de cct organisme dans les cadavres charbonneux avail jele, j usque-la, une grande confusion dans les resultats des inoculations failes avec le sang provenant de ces cadavres. M. Pasteur dissipa tuules les obscurites, remetlant chaquc chose ä sa place, indiquant nettement 1c role de la baetäridie et eclui du vibrion septique,

Les affections que produit le vibrion septique etaient connues depuis longtemps en pathologie humainc et, velerinaire, encore qu'elles n'eussent pu, jusqu'a SI. Pasteur, etre rapportöes a. leur cause veritable; les experimentations sur les maladies conferees aux animaux par rinoculation des substances putrides avaient ete nombreuses depuis les premiers essais do Barthdlemy et l)u-]iiiis d'Alfort jusqu'aux experiences recentes de Coze et Feltz, et Davaine.

Chez Vhomme 1'afifection produite par le vibrion septique est connue depuis Pirougoff sons le noni d'mdeme mulin; e'est aussi le vibrion septique qui provoque cetle terrible complication des plaies accidentelles ou chirurgicales, designee sous les iioms de ijani/rme foudroyante, gangrene yuzi'iise, gangrene traumatique envahissante, cri/aipelr Irauma-tique, complication qui, aujourd'hui, cst devenue

SEPTICEMIE DE PASTEUR.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 239

bion rare, grace aux progres Jc I'antisepsie chi-rurgicale. Cquot;est a MM. Chauveau et Arloing qu'on doit la counaissance de la nature exacte de cctte affection : ils rout etudiee en 1884 sous le nom de septicimie gangrineuse.

En veterinairc, 1'affection causee par le vibrion scptique est la lt;/angriim traumatique do Renault (d'Alfort).

Les Allemands, qui out rclrouvele vibrion scptique de Pasteur, out pris soin de le debaptiser, et Koch lui a donnc le nom de bacille de Vcedamp;me rnulin.

II. Septicemie experimentale.

La septicemie de Pastour pout etre inoculoe au cobaye, au lapin, au moiilim, a la chevre et au che-val : ce sonl la les animaux les plus sensibles ä son action. L'dtie, la poule, le piycon, ont uno sus-ceptibilitonioindro, et au dernier rang vionnent 1c chienetlQ chat, qui exigent des doses de virus plus fortes encore. Le hituf est absohiment rifractaire.

L'inoculation a la. laneetle eclione d'ordinaire; le virus doit etre depose dans le tissu conjonctif sous-cu-tani; laraison de co fait est simple: le vibrion de Pasteur est un anaerobic pur, que la moindrc trace, d'oxygene empöehe de vivre et de so developper.

L'infection par la voie digestive eclioue invaria-blement, ii moins qu'il n'existe une plaic du tube digestif.

L'inoculation intravasculaire ä dose moyenne (une a trois gouttes Chez le lapin, 1 a 3 centimetres cul)cs chez le moulon, 10 ä In centimetres cubes chez Pane) ne donne pas la mort, et 1'animal ino-cule acquiert I'immunito (Chauveau et Arloing). A dose massive les resultats dc l'inoculation intravasculaire sont differents, et la mort surviont avec des lesions generalisecs dans les sorcuses.

!40

MALADIES MICROBIENNES.

Los sources du vibrion septique soul nombrou-ses; outre les c;is naturels tie septicemie, chez l'homme et ranimal, qui peuvent fournir hi ma-tiöre de l'inoculation, le vibrion septiquese Irouve dans le sol, ainsi que les experiences de M. Pus-ieiir I'ont deiuonlre, et dans le tube digestif des animaux, d'oü, en ete surtout, il passe quelques hcures apres la mort dans le sang des veines pro-loiides de ranimal.

Le reactif experimental le plus simple de la sep-licoinie de Pasteur est le cobuye : l/ö de goutle de maliere septique inocul^e souslapeaude la cuisse do ranimal 1c tue surement.

Les symptömes qui suivent l'inoculation sont les suivants : blotli dans un coin, I'animal reste immobile, son poll so licrisse, il pousse des cris quand on le saisit :1a mort survient en douze ou quinze lieures apres rinoculalion,

M. Pasteur a parfaitement decrit les epouvanta-bles desordres que Ton constate a I'autopsie. laquo; Tous les muscles de l'abdomen et des quatre pattessont le siege de la plus vive inflammation; cä et la, parliculieremont aux aisselles, despoches de gaz; foie et poumons decolores, rate normale, mais dif-tlnente. raquo; Ajoutons quo les polls s'arrachent d'eux-memes sur toute la surface abdominale, que le peritoine contient de la serosite en assez grande abondance, ct quo lors de l'ouverture du cadavre, si pres de la mort qu'elle soit pratiquee, il se de-gage une odeur putride un peu speciale. La sep-ticemie esl la putröfaction sur le vivant.

III. Recherche du vibrion septique dans I'organisrae septicfemique.

Lc vibrion septique doit elre etudie sans coloration et avec coloration : il prend bien les diverses coulours d'aniline, le bleu de Löffler particuliere-

ri_te

SEPT1CEM1E DE PASTEUR.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;241

merit, mais se colore mal par la mrthode do Gram ou do Weigert.

Lo vibrion septique sera recherche dans 1c sun;/, la sevositc pMtorUale, et lo sue musculaire.

Sang. Le sang preleve dans le coeur do I'ani-inai seplicemique, aussitüt apres la inorl, contienl jieu de vibrions septiques, et on pout passer en revue plusieurs champs microscopiques sans en trouver un seul.

Vexamen sans coloration est d'un hunt interet: le vibrion septique proud dans le sang n un aspect tout parliculier, une longueur deniosuree, plus long souvent quo le diametre total du champ du microscope, etuno translucidite teile qu'ilöchappe l'acileincnt ä l'observation ; cependant quand on a reussi ä l'apercevoir une premifere lois, on le i'e-trouvo nisement, rampant, flexueux (1), ecartant los globules du sang coninie un serpent öcarto I'herbe dans les buissons raquo; (Pasteur).

La coloration flxera le vibrion sur la lamello; et olle inontrera que le long filament est compose do plusieurs segments ihigaux entre cux : e'est lä un caractero important. Dans la bactoridie les filaments se divisent en segments i^gaux; dans le vibrion rinegalito des diverses fractions qui com-posent le filament est des plus marquees.

Scrositi'¹ peritonäalc. Le moyen le plus simple et lo meilleur d'examiner cotte serosite est de placer une lamelle sur la surface du foie, et de la colorer(de preference au bleu do Loffler) apres dessiccalion. Le vibrion septique se presonte en quantity prodigieuse sur la lamelle : il y afifecte

(I) L'air am'to les mouvemeuU du vibrion septique. II peut dour arriver que, dons une preparation, les vibrions soient immobiles sur les bords oil lls subissent le contact de l'air: au centre de hi preparation au contraire, la ou ils sont ii l'abri de l'air, ieurs mouve-uients persisteront.

I'll. UK MICHOBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; I 4

MALAD] ES MICROBIEN N ES.

jf;

los formes les plus variees au point de vue des di-mensions : courts articles, isoles ou reunis deux ä deux, souvent disposds en lignes paralUles; loni/s jlta-ments composes do segments inegaux, droits ou flrxitfux, traversant parfois tout lo champ du microscope. Ces preparations sont des plus interessantes; elles sout de plus typiques, et caracterisent le vibrion scplique.

Sue museukdre. Si on vient a porter unc goutte de ce li(|uide sans coloration sous le microscope, on voit des vibrions mobiles quelquefois tres allonges, comme ceux de la serosite peritoneale; mais le microbe affecte surtout ici les formes bizarres, en olive ou en battant de cloche, que nous etudierons a propos du charbon symptomatique.

IV. Culture du vibrion septique.

Le vibrion septique i st absolument anaerobic; il se eultive parfaitement dans le vide ou en presence de gaz inertes, dans le bouillon, la gelatine, la geloso et sur la pom me de terre. Les premieres cultures en ontete faites par MM. Pasteur, Chamberland et Joubcrt. M. Roux a consacre a cette culture quelques pages dans les Annalcs de Pasteur: nous reproduirons sa description, ä la-quellc il n'y a rien ä ajouter.

La semence pout elre fournie par le sang ou le liijuidc peritoneal. Le sang contient peu de vibrions septiques au moment de la mort de ranimal, et son ensemenccment a cette periode serait souvent suivi d'unecheo. On reussira en placant lesang, recueilli purcment dans uno pipette, pendant vingl-quatro heures ä l'etuve : on s'assurera que le vibrion s'est developpe dans ce sang en constalant apres ce laps de temps (]ue lacolonne sanguine de reffilure de la pipette est disloquee par de nombreuses

SEPTICEMIE DE PASTEÜR.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;243

bulles de gaz : le sang a ce moment donnera unc excellentc semence.

Le serosile ])eriloneale sera, pour servir de semence, recueillie purement avec une pipetlc pro-menee sur la surface du foio.

laquo; Dans les milieux liquides, la culture se fait rapi-dement a une temperature de 38deg;. Le serum elendu d'eau, le bouillon de poule, eclui de voau legere-nicut alcalin convlonncnt tres bleu. Le döveloppe-ment se fait avec dägagement de gaz acide car-bonique et hvdrogene, et sans changer la reaction du milieu. Au bout de douze ä vingt-quatre heures, le liquide est trouble, et, examine au microscope, ilmontre de nombreux bacilles contournes et par-fois comma ondules ; d'autres sont droits. BienUU la culture devient claire, tons les bacilles etunt tombös sur le fond du tube. La plupart deviennent alors granuleux et se desagregont. Quelqucs-uns (ipaississent, se dilatent en un point, le plus sou-vent a une extremite; e'est dans la partie renflee qu'apparalt la spore. Elle est brillante et refriu-gente; lorsqu'elle se forme dans le corps du ba-tonnet, eclui-ci montre d'abord un cspace clair. Cettc spore se conserve longtemps dans les cultures en gardant sa virulence ; eile resiste ä des temperatures de 75deg; ;i 80deg;. Dans les cultures, le vi-brion septique parait perdre sa propriete de se mouvoir.

laquo; Le vibrion septique se d6veloppedans tog^aiine quand on I'ensemence par piqilrc dans un tube de gelatine on se servant d'un des precedes quo nous avons decrits. Tout le long de la piqüre il se fait une culture qui liquefie la gelatine.

(( Mais e'est surtout dans la r/elosc nutritive, a la temperature de 38deg; que le döveloppement est rapide. En vingt-quatre heures toute la piqüre est bien dessinee comme une trainee blanchatre fes-

Hinbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

tonnec sur les bords. Bientöt les gaz se dugagent ct creusentdes vacuoles dans le milieu solide. La trainee faite par la piqure cst coupee en divers endroits, et le degagcment des gaz seme I'orga-nisnie dans toute la masse de la gelose. Dans les milieux solides les bacilles restenl, j)kis courts quo clans les liquides, ilsne prennent point des formes contournees et donnent des gcrmes beaucoup plus lentoment. raquo;

On pourra faire egalement par les procedes quo nous avons indiques au chapitre iv des cultures de vibrion septique en plaques sur la gelatine oula gelose. ii Dans la gelatine, la colonie apparalt comme une petite tache nuagouse, blanchdtre, a contours mal definis, qui li([uefle 1c milieu autour d'elle. Dans la gelose la colonie s'elend moins, eile garde I'aspectde petites laches blanchatrcs qui,au microscope, paraissent striees au centre, et arbo-rescentes sur les bords raquo; (lioux, Annales Pasteur, 1887, p. 61).

M. Roux a eultive le vibrion septique sur la pomme do terre dans le vide par son procede que nous avons decrit au chapitre iv. Les cultures sur pomme de terre dans le vide ne donnent, on le sail, aucune coloration.

Resum6 des caracteres du vibrion'septique.

Auadrohie pur, le vibrion septique präsente dans les preparations fraiches et surtout dans le sang une mobiliti ct line forme toutes speciales. Sur les preparations colorees, il se caracterise encore par ses dimensions, sa forme etl'inegalite des segments qui composent ses filaments droits ou courbes.

11 so cullivc dans tons les milieux ä l'abri de 1'air.

ACTINOMYCOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;245

ACTINOMYCOSE

ilt; L'actinomycose est unc maladie infectieuse

tlcUorrninee par des champignons du genre acti-nomyces raquo; (Neumann) (1).

L'actinomycose no devrait pas en regie striete ligurer dans un Ihre qui traile des maladies bac-leriennes, car ractinomycosc n'est pas unc maladie bacterienno; mais en raison du grand interel, de cette maladie, de sa nouveaute relative, de sa frequence qui apparait chaque jour plus'grande ä mesure qu'ellc est mieux connue des observateurs, nous croyons que nos lecteurs nous sauront gre de lui avoir consacre quelqucs lignes, que nous ferons aussi courtes que possible.

I. Historique.

L'histoirc de l'actinomycose ne remonte pas a dc longues annces.

Entrevuennl.teinenten ISTäparnivoltaetPerron-cilo, die a ele döerite pour la premiere i'ois d'une facon precise et rapportee ä sa verilable cause par Bollinger (1870), laquo; qui, le premier, a etabli d'une maniero claire ct precise la presence constante de ces productions cryptogamiques dans les In-meurs du maxillaire que Ton avail jusqu'alors de-signees sous le nom d'osMosarcomes, sarcomes maxil-

(l)NousemprantoD8 la substance de cet article h rexcellent resume (jti'a donnede ractinomycoseM. Neumann dans son recent Traitp d maladies parasilaires des animaux. La Revue genirttle de M. Ma-thicn (Rev. des Sc. med. 1886) a cte noire guide pour l'actinomycose de rhomme.

14'

210nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROÜIEN'NES.

laires, farcin ou cancer Jos os, spinn wntosa, etc., ainsi i|ue dans 1c laquo; llollzunge raquo; (langue de bois) et dillV'fenlcs tumeurs lymphosareomateuses qui so devcloppenl autour de la gorge, dans le pharynx et le larynx. 11 insista fortement sur la nature du parasite, qu'il classa parmi los champignons. Co fut alors quo Harz lui assigna le nom d'acfino-myceshovis (araquo;n; rayon) en raison do sa disposition rayonnee, et de sa frequence chez le boeuf. L'affec-tion qu'il determine a rccu le nom d'actinomycose. raquo; (Neumann.)

II. Aotinomyoose spontanee. Lesions. Modes de propagation.

Les especes qui presonlent I'actinomycose sont le haiuf, le cheval, le pore et Vhommr.

L'actinomycose parait beaucoup plus frequento chez les animaux et beaucoup plus variee dans sos localisations on Allemagne, on Angleterre, etc., (ju'en France oü eile n'a guere ote observee jus-(ju'ici qu'a la machoiro du lia3ui'. M. Nocard en a signale 1c premier cas chez nous on 1884.

L'ospece bovinr est outre toutos le terrain d'evolution profere do Faclinomycose. La forme la plus ordinaire est, chez cot animal, Vostdosarcome dc la indchoire, ot surtout de la mdehoire inf'nrieurr.

Apresles maxillaires, sa localisation la plus fre-quente est lamp;pJiarynx [lymphome, lympho-sarcomes, etc.); puis le larynx, L'oesophage, le roseau, I'in-testin.

Dans des cas plus rares la localisation so fait sur los visceres : actinomycose du foie, actinomy-cosc du poumon, dont on no connait quo quatre cas acluellement: nous avons pu personnellement, au laboratoire do M. Nocard, observer un do cescas, rencontre par M. Moulo sur le poumon d'une vache abattue pour la boucherie.

A.CTINOMYCOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 247

L'actinomycose se montre encore dans le Ussu conjonctif sous-cutane, ii la face, autour de la gorge et au cou.

A la langue Faclinomycose affecte une forme speciale, curieuse, coimuo autrefois sous le iiom d'induration chronique do la langue, glossite cliro-nique inlerstitielle, clc. (Wooden tongue des Anglais, Hollzungue des Allemands).

Tres rare chez le cheval, l'actinomycose a ete sigiuilee assez frequemment chez le pore (abces actinomycotiques des mamelles, actinomycose musculaire siegeant surtout aux piliers du dia-pliragme, dans les muscles abdominaux et inter-costaux). Peul-elre cette actinomycose musculaire est-elle de nature un pen speciale.

D'une facon generate I'actinomyces laquo; introduit dans les lissus des animaux tend a provoquer le developpement de tumeurs particulieres de nalurc conjonctive, que Johne a designees sous le nom d'actinomycomes raquo;. Ce sont des laquo; tumeurs arrondies, noueuses, plus ou moins fongueuses, lisses a la surface, et dont la consistance varie entre la mol-lesse d'un sarcomo medullaire, et la durete d'uii flbro-sarcome ou d'un sarcomo. raquo; La coupe laisse voir un stroma conjonctif parseine de depots tuber-culiformes de la grosseur d'une tele d'epingle ii celle d'un pois, isoles ou reunis. Chacun de ces depots renferme un granule jaundtre, gros comnie un grain de sable qui est un glomerule d'actinomyces. Uactinomycose de Vhomme etudiee ä l'etranger par Israel, Johne, etc., ötait absolument inconnue chez nous jusqu'a la publication recemment faite par M. Nocard a l'Academie de medecine (1) au nom deM. Lucet,veterinaireaCour[enay,d'uncasd'abces actinomycotique do la cuisse chez un homnie.

(I) il uoüt tSSS.

248

MALADIES MICROBIENNES.

D'aprösles documents etrangers, raclinomycose chez I'homme peut former des tumeurs semblables a celles que presente I'esfiece bovine, mais, plus souvent, eile tend a la suppuration : ello forme abcfes. Les localisations de 1'actinomycose humaine sont tres variees : c'est la boitche et ton wisinage f[iii, ici comma chez le hoeuf, cst le siege de predilection du champignon. 11 peut se developper ä la machoire des tumeurs, mais plus souvent des abces fistuleux semblables ä ceux qui succedent ä Fosteo-periostite du maxillaire inferieur.

On a Signale dos abces actinoraycotiques paro-lidiens, des noyaux actinoraycotiques dans la lan-gue.Le poumon est parfois le siege d'actinomyces, et la lesion rappelle par les symptömes la tuber-culose pulmonaire : il se forme un abces pulmo-naire, parfois avec listule thoracique.

On a encore signale I'actinomycose tegumentaire iKa.posii, ractinomycose de la cavitö abdominale, etc., etc.

Plus I'affection sera connue et plus eile sera rencontree frequeminent : tout recemment M. Lu-cet, veterinaire du Loiret, signalait un abces acti-nomycotique de la cuisse chez un homnio : la nature do cet abces avait ete longtemps meconnue, et I'affection, persistante, tenaco, passait pour luberculeuse.

Eliologie. L'introduction du parasite dans les tissus parait bion evidemment se faire par le lube digestif avec les aliments, et tout particulierement avec les fourrages.

Cependant on doit admettre une infection possible par les voies respiratoires, et aussi une inoculation directe (abces actinoraycotiques des mamelles chez le pore, inoculation directe acci-dentelle dans le tissu cellulaire d'une plaie chez un cheval, cas signale, par Perroncito).

ACTI.NOMYCOSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 249

III. L'aotinomyces bovis. Caracteres. Coloration. Culture.

laquo; Examiiu-s dans les aäoplasies donf, ils ont provoqui'¹ la formation et qui sont parvenues lt;i un (Hat quelque pen avarice, les actinomycötes se pre-sentcnl, sous l'aspect de petites masses visibles ä l'oeil nu, du volume d'un grain de lycopode a celui d'un grain de millet, arrondies, d'un blanc jau-natre oujauno de soufre, de consistance ordinaire-ment mollc. Lours dimensions sont generalement comprises entreO?^m,l etd millimetre. Dans lo pus on le liquide puriforme qui les renferme, elles don-nent souvcnt l'idee de grains dc sable dissemines. raquo;

L'exainen ä Vetat frais est des plus simples; il suffitd ecraserun grain sur une lame et de l'exami-ner apres avoir fait agir sur lui la potasse ou I'acide acetique. L'acide picrique reussil fort bien aussi.

Les plus petites granulations ne se composent que d'une seule masse müriforme, que nous allons decrire ci-dessous; les grosses granulations sont formees par Fagnigation do plusieurs masses.

La masse, la touffe, le grain d'actinomyces com-prend une zone puripherique et une zone centrale.

laquo; La zone p6riph6rique est constituee par dos corpuscules allonges, dont une des extremites est effilee ot dirigee vers le centre dc la masse, tandis que I'autre est, arrondie, et affleure la surface do la zone corticale. Leur longueur est dc 20 ii 30 (i, leur largcur 8 ä 10 [i. Souvcnt quelques-unes de ces cellules clavifovmes ou pyriformes mesurant jusqu'ä 75 \j. do longueur dopassont rensemble du groupe. Tous ces renflements sout corisideit^s par Harz comme des conidm.

laquo; La zone centrale forme une masse jaunatre representant un loutrage filuiilaire trös complexe, conslitue par l'entre-croisement de lilaments, qui

520nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

mesurent Oij.il a -Iti. do diametre. On los considäre coiiimc dos conidies, quoique li; passage do Tun a I'autre a'ait pu 6tre suivi.

(i Au sein de la masse flbrillaire, on rencontre quelques conidies, ])lus jiclites que cellos de la periph6rie, moins r6guliferes, semecs an milieu dos lilainents cnlre-croises. oü olles n'ont pu se deve-loppor comma los autres. raquo;

11 sera necessaire etfort intorcssanl.de pratiquer des coupes do tumeurs actinomycotiques.

igt; La structure dos petits nodules inclus dans ie stroina ost tout ä fait cello dune granulation tiiber-culcusr. ot rappelle do Ions points le tubercule-type ä cellules geante*. Autour d'une touire centrale et plus ou moins grosse d'aclinomyces on voit pres-que toujours quelques cellules iroantes anombrenx noyaux marginaux. raquo; Autour de cos cellules une zone do cellules opitholioides.

Dans los coupes il faudra colorer I'actinomyces.

La meilleure mothode nous parait cello indiquöo par Weigert.

Plongez une demi-houre la coupe dans la solution suivante :

Orlt;oil!e pure, sjins ammootaque, dissoate jasqu'ä cnlo-rutiou rouge fonce, (l;ms :

Acidlaquo;' .tet'-tique................................ 5

Alcool absolu................................. 20

Eau.......................................... 40

Lavoz ä l'alcool ot colorez lo fond au violet de gentians aqueux, ou au bleu de mellnleno.

Les renflements claviformcs de la zone pöriphe-rique seronl coloros en rouge, le feutrage central en bleu ou en bleu verdätre.

La melliodo de Kühne avec coloration do fond au picro-carmin donne li'excellents resultats pour relude du mycelium.

Les essais do culture tontos avec ractinomycose

A.CTINOMYCOSE,nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;2:ii

u'oiit donne quo des resulUils contradictoires et jusqu'ici pen int^ressants.

Israel aurait pu cultiver 1'actinomyces sur le serum, ct Bostrom aurait parfaitement reussi a faire des cultures sur la gelatine, le serum, I'agar.

Nous savons pourtaut que M. Nocard a reussi ä obtenir des cultures de 1'actinomyces en milieux liquides alors que, loutes ses tentatives de culture sur milieux solides ontechoue.

IV. Aotinomyoose experimentale.

11 y a peu de cliose a dire a ce sujet : les resultats sont des plus contradictoires.

Bollinger, Harz, Perroncito n'ont pu reussir a infecter les lapins et les moutons. Le chien s'est egalement montre re fractal re. Toutesles tentatives d'inoculation faites jusqu'ici au laboratoire do M. Nocard, et olles out ete nombreusos et variees, ont donne des resultats negatifs.

Joline aurait reussi avec les inoculations sous-cutanees sur deux voaux ot avec une injection dans la mamelle d'une vache. Ponflck aurait, transmis 1'actinoraycosedu bceuf au veau par injections intra-veineuses, intra-peritoueales et sous-cutanees.

VII MICRO-ORGANISMES DE LA SUPPURATION

Les microbes pathogenes les plus divers peuvent dans certaines circonslances avoir une action pyogenc et provoquer la formation d'un pus spt'ci-

2Ö2nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

fi([ue : lels lo baeille do la tuberculose, le bacille de la morve; lels encore le bacille du cholera des ponies inocule sous la peau du cobaye, celui du farcin* du bceuf inocnle dans les memes conditions an ini'ine animal, etc., etc.

Les microbes de la suppuration que nous allons passer en revue u'ont rien do commun avec ces organismesaccidentellement pyojjenes. Ce sontles agents pathogfenes de la suppuration commune dont le type ost le phlegmon aign, Vabci'S chuud do I'homme.

En 1880 Pasteur isola dans le pus de provenance furonculeuse un micrococcus dont il inocula les cultures pures ä des lapins : il provoqua cliez cos animaux des suppurations an voisinagc du point d'inoeulation.

L'etude des divers microbes de la suppuration a ete faite ensuite par Ogston, Rosonbach, Passet, etc.

Los microbes de la suppuration provoquent chez I'homme et les animaux dos accidents variables.

Souvont ils so contentent d'evoluer, de so multiplier, dans les environs du point d'inoeulation acci-dcntelle ou experinienlale : il en resulte un abcos chaud. Mais ils peuvent aussi, ce qui est bien plus grave, so repandre dans le Systeme circulatoire, soit par les voies sanguines, soil par les lympha-tiques. Ils detenninont alors les accidents de la pyeinio.

Souvont aussi ils provoquent, dans les visceres qui constituent pour eux un milieu do culture favorable, la formation de petits abces multiples (a. melustatiquesi.

Recherche des microbes dans le pus.

Etalez sur une lamelle une trace de matiero puru-lente recueillie purement dans le sein d'un abces

MICRO-ORGANISMES DE LA SUPPURATION. 2;i3

chaud; colorez par les solutions hydro-alcooliques, Je Löffler, etc.; ensuitc par les precedes de double coloration de Gram.

Sur les preparations ä coloration simple, on

Tig. 48. Septicemie de l'asteur.

A. Culture.

li. Surface du foie (Cobdye).

apercoit d'aiord les globules de pus assez fort'e-menl, colores; puis, dans les espaces qui les isolent les uns des autres et meine dans le contonu celln-laire de quelques-uns d'eutre eux, on voll des mi-erocoecus de deux especes diff^rentes : les uns en forme de staphyloeoccus, les autres prenant l'as-pr. ue MicBoerE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;13

254nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MIGROBIENNES.

pect do streptococcus courls, lögöremcnt incurvos, composes chacun do cinq, six coccus, dix aupius : cc sont la les deux genres bacteriens quo ron rnn-contre 1c plus ordinairement dans le pus.

Dans les preparations coloccus par le procude de Gram, ou su rend facilement compte quo les siaphylococcus prenncntles uns aussi bioraquo; quo les aulres la coloration violette et Iranchoiit aiusi nettement sur lo loud do la preparation. Bleu plus, les differentes especes do staphylococcüs du pus, an nombre do Irois, so colorent cgalcmont toutos par le Gram, do sorte qu'on no pout les differencier les unoä des autres par lo simple examen microscopique : ce u'est quo les cultures, surtout celles sur gelatine, qui permettent une difförenciation sure.

Outre los staphylococcüs et les streptococcus que nous venons dc signaler, on rencontre dans certains cas d'autres inicro-nrifaiiisincs, qiiidquolois memo des bactllcs; mais ces cas sont exceptionnels, aussi ne ferons-nous que signaler ici pai' leurs nomsccs differents micro-organismes; cesont :

Lo Micrococciis cereus albus.

\j(i Micrococcus cereus flavus.

Le Micrococcus pyogenes tenuis.

ho lliicillus pyogenes fxtidus.

IjO Bacillus pyocyaneus.

Nous allous raquo;iliidior rapldomout los especes priu-cipales, celles que I'on rencontre lo plus frequem-ment dans le pus :

1deg; Staphylococcüs j^yoqenes aureus.

C'csl, la resprcc la plus importantc. On la rencontre dans Ions les |)US, dans les I'uroucle.S, dans I'ost^omyelite, clc.

Le pyogenes aureus examine dans le pus y prend 1'aspect d'une sorte de zooglce de cinq, dix indi-vidus, rcHmisles uns pros des autres, de teile facon

M1CH0-OKGANISMES DE LA SUPPURATION. 2bö

qu'ils l'orment une sorto de grappe. On en voit aussi dans l'intörieur des cellules de pus. II se colore dans les solutions liydro-alcooüques, dans le Loffler, lo Malassez et le Gram.

Inoadalion au lapin. Lorsqu'on inocule ä un lapin une assez grande quantity d'une culture virulente de Vaurcus, il se produit au point d'iuo-culation un abces dans le pus duqucl on rencontre le microbe.

Si l'inoculation se fait duns let veines, le la[)in ne niourt pas, mais le plus petit traumatisme que subira ensuitc I'animal itonnera pour ainsi dire un coup de f'ouet ä la maladie et le lapin ne tardera pas a niourir il'infectiun purulente.

Cultures. L'aweus pousse tres bien ä I'air dans tous les bouillons, mais il n'v donne pas une culture bien caractoristique. Expose ä 37deg; le bouillon ensemonce se trouble on moins de quinze heures; puls il devient lögärement dorö, tandis qu'une partie de la culture se depose au fond du ballon sous forme d'une poudre lei,'erement jau-natre.

L'aureus donne sur giilaline une culture trfes ca-ractcristi(|ue; commo il liquelie ce milieu, il est indique de le senior en piqi'ire. Au bout de peu de temps il se forme, autour de la piqüre, une culture blanche sans caracteres spöciaux; puis ä la surface on voit apparaitre une pellicule, blanche d'abord, et de plus on plus jaune : la liquefaction est alors commencee. Quand toutle cylindre göla-tineux est liquelie, la culture forme au fond du (übe un depot abondaut jaune d'or.

Sur la gälose la culture ressemble ä la preco-dente; mais la liquefaction n'a pas lieu.

Seme en strie il forme d'abord une culture blanche, qui prend avec le temps une couleur jaune d'or, caractoristique du microbe.

Hoe

MALADIES MICROBIENNES.

Sur la ponmu; de tcrre Vuureus pousse abondam-ment et forme une pellicule ,/aunß.

2deg; Staphylococcus pynycnus albus.

On le rencontre dansle ]his en memo temps que I'nureits; il se comporto dc la meme facon que ce dernier; il liquefie la gelatine, mais dunnc toujours une coloration blanche.

11 parait moms virulent que le premier.

3deg; Slaphylococcus pyogenes t-itrcus.

On le rencontre dans le pus, plus rarement que les deux autres; il ne sen dilKrencic que par scs cultures, qui prennent unc ieintejaune pdle citron, beaucoup moins foncee que celle que produit en pareil cas Vaureus.

4deg; Streptococcus pyogenes.

On le voit frequemrnent dans le pus oü il forme de courtes chaineltes conleuant chacune cinq ä six grains, dix au plus, legerement incurvees.

11 so colorc trös bien dans les solutions hydro-alcooliques, dans le Lofflcr ct le Malassez. II prend le Gram.

Culture*. 11 pousse dans les bouillons; sa culture adhere aux parois du ballon; eile se. precipite ensuite dans le fond sous forme d'un depot grisätre.

II liquefie la gelatine, et donna une culture blanche, laiteuse.

11 pousse egalement bion sur la gelose.

Son action palhogene n'est pas encore bien de-terminee : aussi ne nous elciulrons-nous pas davan-tage sur ce sujet.

CHAPITRE III

MALADIES MICROBIENNES SPliCIALES A.UX A.NIMAÜX

CHARBON BACTERIEN

(CHAIinON SYMPTOMATlQDE, ESSENI1EL, DE CHABERT).

L'histoire du charbon symptomatique appartient tout entiöre a MM. Arloing, Cornevin, Thomas. Leur lieavi livre, le Cftarbon nymptomatique du hmuf, manque de details precis et suffisants surl'agent pathogeno, le Bacterium Chauvmi: c'ost le soul re-procho qu'ou puisse adresser äcette ceuvrc magis-trale.

I Charbon symptomatique spontane.

L'afl'eotion ne s'obscrvo que sur les bovidis de six mois ä quatre '(n.s; en decä et au-delä do cctte limile d'ägc les bovides sont Ires exceptionnellement attoints.

Le w(OK(o;i eontractc aussi sponlanementle charbon syrnptomalique, mais boaucoup moins fre-qucmment que le boeuf. La chevi-e, qui pent rece-voir la maladie oxperimfintalement, n'est Jamals atteinte dans les conditions ordinaires dc la vie.

238

MA LA Dl ES M1CR0B1EN N ES.

Tous les autres animaux [äquidis, suidds, cumas-sievs,oisc(nix)sont alisohiment refractaires au char-bon symptomatique spontane.

C'cst par inoculation accidentelle (jue les ani-maux contractcnl lecharbon symptomatique; l'iii-fection par la voie digestive est problömatlque et tont au inoins exceptionnelle.

Le chaibon symptomatique se caracterisc cssen-licllement par une ou plusieurs tumeurs ä siege variable. La tumeur, qui forme ainsi le Symptome primordial de l'affection, et qui sccaractcrise pendant la vie par son accroissement rapide, son inscnsibilito et sa sonorite ä la percussion, est ?iO(gt;c a sa partie centrak, inoins coloree a la peri-pherie; eile est entouree, dans les regions riches en tissu conjonctif, d'un engorgement oedemateux ä serositö citrine, legerement roussätre. An centre dc la tumeur, les gaz out disseque les muscles, et forme do vasles poches intermusculaires qui pcu-vent parfois logcr le poing.

Les ganglions correspondant ä la region qui porte la tumeur sont hypertrophies, ecchymoti-qucs, infiUres d'unc serosite Janndtre.

Les organes thoraciques et abdominaux sont a, peu prfes sains; cependant le peritoine contient une serosite abondanle.

Les produits viculenls sont les tissus de hi lumcur, la pulpc ganglionnaire, la sirosite perilaniale et la hile. Lo sang n'est guere virulent; cependant au moment de la mort il contient un tres jietit nombrc de microbes, et on peut les mcttre en evidence en placant un tube de sang pendant vingt-quatre heures a l'ötuve : les bacilles s'y multiplient rapi-dement.

Le liquide amniotique des femelles en gestation, qui succombent au charbon symptomatique, est virulent. L'ume ne Test jamais.

ClIARHOiN BACTERIEiN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;259

II. Charbon symptomatique experimental.

Les animaux qui prennent lo charbon symptomatique experimental sont le hmif, lo mouton, la chetre, lo cobni/c. Tons les autres sont absoluraeut refractaires, et nous rappelons en particulier le fait pour lo Uipin, qui ost au contrairc un asscz bon reaclif lt;ln charbon baclriklien.

II n'existc qu'un seul mode d'inoculation du charbon symptomatique : c'ost Vinoculation sous-cxUaiu'e.

Cost dans le tissu conjonctif sous-cutane que doit etre porto le virus d'inoculation : les piqüres ä la lancette echouent, invariabloment.

La dose de virus doit 6trc assez elevee, et de plus eile varie suivant, les regions : deux on tvois gouttes inoculees sous la pean de la cuisse, de l'6paule, du bras, etc., sufflsent pour donner un charbon symptomatique mortel au boeuf, au mouton; elles sont insufflsantes dans les regions ;i tissu cellulaire dense : extramp;miU de* memhrcs, oreilh, queue.

Le veritable reactif experimental du Charbon symptomatique est le cohaye. L'animal sera inoculö ä la seringue de Pravaz, et l'injection sera poussee dans les muscles de la cuisse.

La matiöre virulente pent etre empruntde ä diverses sources:

(a) La culture du bacille du Charbon symptomatique. Cost lii un moyen inlidelc, la culture per-dant rapidement ses proprietes.

(6) Le sane/ pruleve purement dans le ccrur dun animal mort de Charbon symptomatique et place pendant vingt-quatre hcures ä Fetuve, de facon h obtenir le developpement du bacille qu'il contient en petite quantite lors de la mort de l'animal: cc developpement. so traduit par l'apparition de bul-

260

MALADIES MICROBIENNES.

les de gaz qui disloquent la colonno sanguine recueillio dans une pipette.

Le sang, memo dans ce cas, constitue un virus peu favorable pour rinoculation.

(c) Les tixsus de la lumeur : ces tissus peuvent ötre inocules u l'elat frais ou ä I'etiU sec. e'est-a-dire alors sous forme de poudre.

Pour inoculer ces tissus ä l'etat frais, on prond sur un cobuije, un mouton, un bmtf yenant do suc-comber, des fragments des muscles malades, en choisissant les parties les plus noires; on triture ces fragments dans un mortier avec de l'eau steri-lisue : on liltro ä travers un linge; 1c liquide sangui-nolent qui passe constitue un excellent liquide d'inoculation.

La pulpo des muscles malades dessecliee,c'est-ä-dire la poudre do charbon symptomatiquc, constitue un virus d'inoculation encore superieur : e'est ä MM. Arloing, Cornevin, Thomas, qu'on doit la connaissance de cette preparation. Voici comment ello s'effoctue :

On prend les parties les plus malades des muscles formanl la tumour symptomatique sur un boeuf ou un mouton; on hache en petits morceaux et on pese; ou ajoulc do Loan distilleo on quantite re-pondant a peu pros aux deux tiers du poids des muscles baches; on broie dans un mortier; on filtre sur une toile epaisso, et on etale en couche mince sur un plateau de porcelaine lo liquide rouge qui a passe. Ce plateau est place ä Tetuve ä 3.^:i⁰ : apres evaporation du liquide, il restc sur le plateau une sorto de vernis brillant, de couleur rouge fonco que Ton röduira on poudre pour le conservor au sec dans un tlacon. Getto poudre pent garder sa virulence pendant plus do deux ans.

Pour inoculer la poudre on en prend un demi-centigrammo qu'on broie ä sec dans un mor-

CHARBON BACTER1EN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;261

tier, on ajoute quclques gouttcs tl'eau et on flitre sur la toilc; au liquide qui a passe on ajoute une goutte d'acidc lactique qui, augmentant la virulence par un mecanismo quo MM. Nocard ctRouxont determine, assure le succes de l'inocu-lation.

La poudrc de charbon symptomatique qui cons-tilue une source do virus toujours preto, qui eon-serve son action pendant dos annees, est done des plus prucieuscs : un laboratoire de microbiologie doit toujours en posseder une provision.

Lorsquo l'injecüon virulente a ete poussee dans la cuisse du cobaye, cotto cuisse se gonfle apres quelques houres et deviont douloureusc au toucher ; Fanimal ne marchc jilus que sur trois patles; biontöt la marchc lui devient tout a fait impossible; il se blottit dans un coin de sa cage, ou il rcste immobile, le poil herisse, poussant des cris lorsqu'on vout le saisir; il meurt dans les vingt qualre ou quarante-huit heurcs.

Les deux läsions marquantes sur un cobaye mort de charbon symptomatique iuocule par le precede decrit sent :

a)nbsp; Un oedemc rougeatre du tissu conjonctif de la paroi abdominale, oedeme qui s'etend sur toute la surface do celle-ci et remontc souvent jusqu'au thorax et ;i la naissance dos mombros anterieurs; cet a'deme est d'autant plus marque qu'on se rap-proche du point d'inoculation.

b)nbsp; nbsp;Les lesions de la cuisse inoculee, qui est gontloe, turgide. Les muscles y sent d'une couleur rouge sombre, et sur quelques points (ce sent les parties les plus malades) outline teinto noire. Sur la cuisse malado les polls s'arraclient avec la plus grande faellite, et tombent souvent d'eux-memes. La peau y csl doubleo par un tissu conjonctif oede-matie et d'une teinle rouge tros marquee; une

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MALADIES MICROBIENNES.

les de gaz qui disloquent la colonno sanguine recueillio dans une pipette.

Le sang, memo dans ce cas, constitue un virus peu favorable pour rinoculation.

(c) Les tixsus de la lumeur : ces tissus peuvent ötre inocules u l'elat frais ou ä I'etiU sec. e'est-a-dire alors sous forme de poudre.

Pour inoculer la poudre on en prend un demi-centigrammo qu'on broie ä sec dans un mor-

CHARBON BACTER1EN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;261

Les deux läsions marquantes sur un cobaye mort de charbon symptomatique iuocule par le precede decrit sent :

204

MALADIES MICROBIENNES.

faudra faire usage des forts grossissements des objectifs ä immersion homogene. Las coupes do muscle seront color6es aulileu de

Löffler; cllcs permettront do saisirla topographic

ilu liMcillc. Los faisieaux niusculaires sont casses

CI1ARB0N ÜACTERIEN.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 265

en travers; ils sont pour la plupart vitreux, hya-lins. Les bacilles siegenl dans lo saroolernme, au uiveau dos cassures transversales, entrc les fais-ceaux du tissu conjonctif, et entre les faisceaux rnusculaires.

SfiaosiTE i'KiuTO.NKAi.E. Lc inoyeii le plus simple et le meilleur consiste a disposer une lamelle sur la face supiirieure du foie, aussitot apres I'ouver-ture du cadavre. La lamelle sechee sera coloree au bleu hvdro-alcoolique, au violet, de gentiane hydro-alcooliquc, ou mieux an bleu de Loftier. Le bacille du charbon symptomatique so prescntc en grande quantite sur la lamelle : il a la forme de bi'itonncls droits, courts, egaux en longueur, colores dans toute leur etendue, isoles, ou reunis bout a, bout par deux ou par trois.

IV. Culture du bacille du Charbon symptomatique

Cet organisme est anaOrobic, il ne se cultive que dans le vide ou en presence de gaz inertes.

Cette culture est difficile; eile ne rcussit sou-vent qu'apres plusieurs cssais infructucux.

Nous conseillons de la faire dans du bouillon (idditiimne d'uu pen de gtHatine et de sraquo;ere (au, 1 p. 100]: c'esl le milieu qui paralt le plus favorable; les tubes ensemences seront places ä l'etuve ä 3b⁰-39⁰.

Pour semence, ou pent choisir le smtri prealable-ment place a I'ötuve pendant vingt-quatre heures, ou la särosiU prritoncale pure recueillie dans une pipette ä la surface du foie aussitöt apres la mort, avec toutes les precautions de purete possibles.

Au bout de vingt-quatre a quaranle-huit heures le liquide est trouble et tloconneux; des gaz se degagent a sa surface. La reaction du milieu

IB*

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MALADIES MICROBIENiNES.

nc change pas ou dovieiit parfois leguiumcnt acide.

L'examen do la culture ä l'6tat frais, sans tolo-ration, moutro des bacilles de longueur inegale, refringents, d pcioe raquo;io6i7laquo;; quelques-uns parais-sent sporules ä leur extremite.

Les cultures seront facilement colorecs par les precedes indiques.

Le bacille du charbon symptomatique se döve-loppe blen aussi dans le lait,qa'il ne coagulo pas.

On le cultivera encore aisemenl dans la gclose a 38deg;.

Les cultures se consorvent pcu, et perdent rapi-dement leurs proprietes de virulence.

Rfesume des caracteres du bacille du charbon symp tomatique.

Anairobie, le bacille du charbon symptomatique so montre sous la forme d'un bdtonnet ä peinc mobile dans l'organisme et les cultures. 11 se colore bien par les couleurs d'anlline, ne prend ni le Gram ni le Weigert. Dans les muscles il se sporn le, et prend a cot (Hat des formes singuliercs asscz caracteristiques.

II se cultive ä l'abri de Fair dans le bouillon, le lait, la geloso.

CHOLfiRA DES P0ULE9.;nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;267

II CHOLERA DES POULES

Connue lo plus ordinairemeat sous lo nom de cholera des poulcs, I'affection dont nous aliens traitor a encore recu les noms de : maladie epizoo-tique, typhus contagieux, affection li/phique, scpti-cdmie des volailles. Renault d'Alfort lui avail donne le nom Je typhus charbonnoux, croyant ä l'iden-tite de cettc maladie et du charbon.

I. Historique.

Le cholera les poules lut 6tudi6 d'abord en France par Renault et Delafond : Renault, nous 1'ayons dit, 1'identiilait avec le charbon. Delafond au contralre sut Ten distlnguer aettement.

En 1809 un veterinaire alsacien, Moritz, signala dans le sang des poulcs mortes du cholera des granulations auxquelles il attribua le role essentiol dans la production de la maladie.

Vers 1878, M. Perroncito ligura le microbe du cholera des poulcs, mais d'unc I'acon inexactc : 11 inocula avec succes la maladie aux sujets sains.

Peu apres, en 1879, Toussaint lit dos tcntatives dc culture, mais ces tenlatives restörent incom-pletes.

Cost a M. Pasteur quo revient I'honneur d'avoir donne la demonstration de la nature microbienne du cholera des poules. 11 reeueillit purement le microbe dans lo sang des sujets morts, et reussit a le cultiver artiflciellement dans des bouillons do

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BALADIES MICROB1ENNES.

poules storiliscs. Uno ^outte de ces cultures ino-culee dans le muscle pectoral dc sujets sains lour donnait infailliblement la mort apres avoir pro-duit chez eux Ics syinplömcs inhercnts a la mala-die : c'otait domontrer irrefutablement quo le microbe etait bien la cause essentielle do I'affection. Non content dc- cette decouverte, M. Pasteur reus-sit äattönuer la virulence des cultures parl'actiou de l'oxygene de l'air, et trouva ainsi un veritable vaccin qui, inocule aux animaux susceptibles do contractor naturellemcnt la maladie, leur contero rimmunitc, e'est-a-diro lour donne un cliolera attu-nue en quelque Sorte, dont ils guerissent et qni les met ä l'abri dos atteintes ulterieures du virus le plus virulent.

G'etait la premifere fois qu'on reussissait ainsi ä modifier un virus, toujours mortel, au point do pouvoir I'inoculer sans danger aux animaux les plus susceptibles, ot, chose mervcilleuse, ce virus ainsi attömiö devenait lo meilleur prescrvatif con-trc Faction du virus le plus mcurtrier.

Apres cette decouverte, on pouvait legitirae-ment esperer que la plupart, des maladies conla-gieuses seraient tot on tard attcnuees, et ainsi trausrormces en lour propre vaccin; les vaccinations contre le sang do rate, centre le rougot du pore, contre le charbon symptomatique, qui evitcnt taut de pertes ä Tagriculture, prouvent com-bien etait fecondc la voie ouverte par I'illustre savant.

II. Cholera des poules spontane.

Les animaux qui contractent le cholera des poules spontanement sont les oiseaux, el parti-culiörcment les oiicaux de basse-cour : pigeons, poules, canards, oies, dindom, pintades, faisans, etc.

CHOLERA DES POULES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 269

La lapin, qui offre, nous 1c verrons plus loin, un terrain plus favorable encore que les oiseaux ä revolution Ju cholera des poules, contracte rare-ment la maladie dans les conditions ordinaircs de la vie : ccla resultc de ce que, dans nos regions surtout, les lapins sont eleves ä pari, sequestres et isoles des autres aniinaux de la basse-cour.

Les oiseaux, les lapins sont les seuls auimanx domestiques susceptibles do prendre spontane-meiit le cholera des ponies.

C'est par les voles digestives que les oiseaux contractcnt la maladie. Los matieros excrementi-tiellcs, le jetage des narines et du liec des sujets malades, conliennent en quantite le virus du cholera. Ces matiercs souillont le sol de la basse-cour, ct so melent aux aliments picores par les sujets sains: tel cst le mode d'infection le plus ordinaire.

Les feioraquo;.s principales coustalees a. 1'autopsie sont les suivantes :

Les muqueuses superficieUes presentent uno teinte asphyxiquc tres marquee : le bee du sujot est souille d'une bave visqucusc.

Les poumons sont congestionnes; le pdricarde conlient unc serosilo jaune fonce souvent prise en une masse gelatiniformo, trcmblotanle; les lesions intestinales sont d'autant plus marquees quo la mort a plus tarde : la muqueuse intestinale est congestionneo, hemorrhagique, et le canal intestinal contieut une bouillie grisdtre, mousseuse, striae de sang.

Le sang est noraquo;', asphyxiquc.

Le sang, les pulpes organiques, la bave, le con-tonu intestinal sont virulcnts.

'27(1

MALA DIES MICROBIENN ES.

III. Cholera des poules experimental.

Le cholera des poulos s'inocule facilementaux oiseaux : Finfertion oxpcrimontalc pout so faire par la voie digestive; ullo se fait plus simpleraeiU par inoculation sous-cutimce.

Pour infectcr lo sujct. par les rows digestives, il suflit de müler a ses aliments les matiures virulentes : have, diarrhöe, liquide pericardique, pulpe organiquc d'animaux morts du cholera des ponies, ou liquide de culture.

L'inoculation sous-vutanöe se fera ä la seringue de Pravaz dans la region pectorale; on injocto dans le muscle pectoral, suivant la melhode de Pasteur, quelques gouttes de sang, de liquide peri-cardique, de pulpe do foie ou do rate broyee et diluee, provenant d'un animal mort du cholera des poules; on pourra injecter aussl unc culture virulente.

La mort survieut en moins de vingt-quatre heures apres l'inoculation; eile cst d'autant plus rapide que la dose de virus inoculee a ete plus forte.

Les symptömes de la maladie experimentale re-produisent ceux de la maladie naturelle.

Hors les cas foudroyants, oü les symptdmes sont nuls, laut la rapidite d'evolulion cst grande, la maladie se marque par les phenomenos suivants : tristesse, abattement de l'animal qui resto couche, se met en boulc, les plumes lierissoes, ne repon-dant plus aux excitations, ot tombanl bientöt dans le coma; leinte asphyxique de la crete et des inu-queuses superflcielles; coliques, diarrhöe striee de sang, jetago visqueux par le bee et par les narines.

Les lesions trouvees ä l'autopsie des oiseaux morts du cholera dos poules experimental repro-

CHOLERA. DES POULES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;271

duisent eiitiürement cellos quo nous uvons decritos plus haut en traitant do la maladie spontanoe. Sur ies sujets qui succombent ii I'infection par la voie digestive, infection (jui reproduit le mode do contagion naturel, il n'y a rien que ces lesions; mais, sur les sujets inocules dans le muscle pectoral, vient s'ajouter une lesion des plus interessantes, lesion signalee ot decrite par M. Pasteur : le sequeslre du muscle pectoral qui a recu I'injeotion virulente. Cette lemn cst d'antantplu* pmnonccc que la survie a ctr plus longue.

Au point inocule,le tissu sous-cutane estinfiltre d'un oedeme gelatineux; cet oedeme recouvre une tumeur jaunätre, lanlacee, s'incisant avec diffl-cultö : cette tumeur est produite par la necrose du muscle pectoral.

Le lupin est un animal trfes favorable ä l'expöri-mentation : quolquos gouttes de virus inoculeos sous la peau do la cuisso lo tuent rapidement.

L'inoculation pratiqueesur lo cobaycest des plus interessantes. Inoculö dans le pMtoine, le cobave succombe;inoculä dansle tissu conjonctif, ilrösiste, mais l'inoculation donne lieu ä un phrnomene que M. Pasteur a decrit.

if CAicz les cobayes, dit-il, d'un certain age sur-tout, on n'observe souvent qu'une lesion locale au point d'inoculation, qui so termino par un abcos plus ou moins volumineux. Apres s'etre ouvert spontanement, Tabces so reforme et guf;rit sans que I'animal ait cessö do manger et d'avoir toutesles apparences do la sante. Ces abces so pro-longont quelquefois pendant plusieurs somainos avant de s'abceder; ils sonl entouros d'une membrane pyogenique et remplis do pus cremeux oü le microbe fourmille ä c6tc des globules do pus. Cost la vie du microbe inocule qui fait l'abcös, lequel deviont, pour le petit organisme, comme

MALADIES MICROBIENNES.

un vase forme oü il est facile d'aller le puiser, meme sans sacrifier ranimal. II s'y conserve, mele au pus, dans un grand elat de purete et sans pei'dre sa vitality. La preuve en est que si on ino-cule ä des poules im peu du contenu de i'abces, ces poules meurcnt rapidement, tandis que le coclion d'Inde qui a fourni le virus se guerit sans la moindre souffrance. On assisle done ici ä unc evolution localiseo d'un organisme microscopique, qui provoque la formation du pus et d'un abefes ferme, sans amener des desordres Interieurs, ni la mort de Fanimal sur lequel on le rencontre, et toujours pret, neanmoins, li porter la mort choz d'autres especes auxquellcs on I'lnocule, toujours pret a faire perir I'animal sur lequel il existe a I'etat d'abces, si lelles circonstances plus ou moins fortuites venaient k le faire passer dans le sang ou dans les organes splanchniques. Des poules ou des lapins qui vivraient en compagnie de cobayes porlant do tcls abefes pourraient tout ä coup devenir malades et jierir sans que la sante des cochons d'Inde parüt le moins du rnonde alterce. Pour ccla, il sufflrait quo los abees des cochons d'Inde, vonant a s'ouvrir, repandissenl un peu do leur contenu sur les aliments des poules et des lapins. Un obscrvateur tömoin de cos faits, et ignorant la filiation dent je parle, serait dans 1'etonnement do voir decimer des poules et des lapins sans cause apparente, et croirait a la spon-taneite du mal, car il serait loin de supposer que celui-ci a pris son origine dans les cochons d'Inde, tous en bonne sante, surtout s'il savait que les cochons d'Inde, eux aussi, sont sujets ä la meme affection. Combien de mysteres, dans 1'hisloire rles contagions, recevront un jour des solutions plus simples encore que celles dont je viens de parier! gt;gt;

CHOLERA DES POULES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 273

l'our faire perir le cobaye inocule et porteur dun abcus sous-culane, il sufflt de graller fortc-ment avec un scalpel les parois tie la membrane qui tapisse la cavite de C(^ ahees : le microbe passe dans le sang, et cettc nouvelle inoculation donnc la maladie mortello au sujet.

Le moineau presente une particularile interessante : le microbe du cholera des poules augmente de virulence en passant dans son organisme en series. Inocule-t-on ä un de ces petits animaux un virus vaccinal qui ne Ine pas la poule, I'animal meurt; ilsul'lit de prendre son sang, de rinoculer ä un second moineau, et d'effectuer ainsi cinq on six passages pour que le virus renforce soit inocnle avec succes a la poule.

IV. Le microbe du cholera des poules. Sa recherche dans les liquides et tissus de rorganisme

Le microbe du cholera des ponies so trouve dans le sang, dans le liquide pericardique, dans les matteres excremontitielles etlabave des oiseaux, dans les pulpes organiques; il infiltre le muscle pectoral du pigeon inocule; il pullule dans I'abces sous-cutan6 experimental du cobaye.

L'cxamcn so fera sans coloration et avec coloration : ce microbe prend bien les couleurs d'aniline, et les diverses solutions hydro - alcooliques de violet de gentiane, defuchsine, de rouge diamant, de bleu de methylc ainsi que le bleu de Lnt'fler donnent de bons resullats; mais les metbodes de (Irani et 'Weigert echouent compbHement.

La recherche capitalc, celle qui est indispensable au diagnostic et suffit presque a I'etablir, est la recherche dans lo sang.

I. Examen du sang sans coloration. On recueillcra purement le sang contenn dans le

MALADIES MICROBIENNES.

ccEur; on en placora uno goutte sur une lamelle et on 1'examinora sans coloration (Verick : ocu-laire 1, objcctif 8).

Sous le microscope on distinguera d'abord les globules sanguins, affectant la forme do disqucs ovoides, s'il s'agit du sang de ponlo; puis dans le scrum, onapercevra une quantity de pelits points, rel'ringcnts, mobiles, tournant sur lour axe : c'est le microbe du cholera des poulcs.

Sans coloration, il donne rillusion dun micro-coccus ou d'un diplococcus, suivant qu'il se pre-sente ä Toeil par un de ses poles ou dans le sens de sa longueur: mais en apportant une grande attention, on verra qu'il n'ost refringent que dans sa partie centrale, nettement limitee sur les cötes par deux lignos lines, grisdtres, se confondant et s'^paississant ä leurs exlremites pour former les deux pöles du microbe. On a ainsisous lesyeux uno bacterie courle, aux exlremiles rondos et legore-ment aplaties.

2. Examen du sang avec coloration. Sur les pröparations colorees, examinees ä un fort gros-sissement, ä l'aide de la lenlille ä immersion, on voit, si la coloration a ete faite par exemple au violet de gcutiane en solution hydro-alcoolique legere, les globules ovoides du sang des oiseaux co-lores en violet pale, leurs noyaux en violet fouce; quant aux bacillcs du cholera des poules ils ap-paraissent sous la forme d'un grain fortoment colorö en violet fonce, s'ils se presentont par une de leurs extremites; s'ils so presentont dans leur longueur, on voil leurs deux poles fortement colores, r/'unis par deux lignes colortes legeremmt en violet, tandis que la partie centrale cal compUtemmt inno-lore. C'est cette forme particuliere que nous quali-fions de bacille a espace clair.

On pout aussi employer la melhode de I.öffler,

CHOLERA DES POULES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Z'ä

celle de Malassez. Ou obtient ainsi des preparations bleues d'unc linosse remarquablc.

Les coupes d'organes seronl Iraitees par la me-tbodc de Löffler; cellcs du muscle pectoral qui a recu l'inoculation, et subi par suite la necrose sont particulierement interessantes.

V. Cultures du bacille du cholfera des poules

Le microbe du cholera des poules est aArohie: il ne pousse qu'en presence de l'air.

11 pousse bien dans les bouillons, sur la gelatine et la gelose, mais non sur la pomme de terre.

La meilleure semence est \amp;smg pris puremont dans 1c coBur.

1. Culture bans les bouillons.Lemicrobedu cholera des poules se developpe bien dam les bouillons de poulc cl du rcau, neutres ou un pen alcalins.

Les matras ensemences sont places ä l'etuve, ä une temperature voisine de 37deg;. Du jour aulonde-main, le bouillon est trouble, d'aspect louche, ce qui indique que I'agent s'y est develojipe. Mais peu ä peu, le bouillon redcvient transparent et la culture se depose au fond du ballon.

Les cultures dc cholera des poules perdent leur virulence au contact do Fair : au bout dc 60 jours elles sont absolument inoH'ensives pour les ani-inaux. (quot;est d'ailleurs en exposant ä Fair libre des cultures pendant un temps donno que M. Pasteur est parvenu ä trouver le vaccin du cholera des poules.

Pour conserver des cultures virulentes, il est done necessairo do les soustraire h Faction de Fair.

On arrive aisement ä ce resullat en recueillant ces cultures dans des pipettes que Fon ferme en-suite a la lampo ä leurs deux extreraites. Ces pi-

'.'76

MALADIES MICROBIENNES.

pettes contiennent (oujours une ou deux bulles d'air a la favour desquelles la culture continue a pousser ; mais les microbes ne tardont pas ä s'etre empares de l'oxygene de cos bulles d'air. A ce moment la culture sarrete, et conime alors il ne reste plus d'oxygöne dans les ttdies ainsi ferinus, le microbe y conserve sa virulence pendant tres long-lemps.

2.nbsp; Ccltuhes sur gelatine. Ces cultures se font par piqwe ou en strie. Par ])iqüre, l'ensomence-ment donneau bout de quelques jours une culture blanche s'Malant et s'äpaississant Uijcreme.nt ä la surface de la gelatine, et formant autour du trajet de I'aiguille une multitude de pelilcs colonies, ovales, blanches, nettement separees les unes des autres. La culture ost d'autant moins abondante qu'elle atteint davantage les couches profundes de la gelatine.

En strie la culture donne une tine ligne blan-chdtre, legerement bleue par transparence. Los cultures ne liquelient pas la gelatine.

En 2ou 3 semaines, la culture prend au contact de l'air une teinte grisc, avec un reflet vert sale, qui va se foncaut graduellement.

3.nbsp; Cdltüres sun la c.kuisk. Lo microbe du cholera des poules pousso sur la gelose : on le semera en stries. La culture sera ensuite placee a I'etuvc k 'M⁰. An bout de douze heures environ la culture a pris la meine apparence quo sur la gelatine. Si on seme dans la gelose une goultelclle pro-venant d'une culture dans un bouillon, on obtienl un developpement extrememeiit riche, forme do colonies rondes ovoides ou allongees, opalescentes et bleudtres par transparence.

L'examen des cultures saus coloration monlrera le microbe sous la forme d'un micrococcus ou d'un iliplococcus mobile ; ce microbe sera d'autant

CHOLERA DES POULES.

plus fin que la culture sein plus ancienne. Colo-t6. Je microbe prendra ncltoment la forme iTun microco(jiic ou d'un diplocoque.

Rfesumt des caracteres du baoille du cholera des poules.

Aerobie, mobile, le microbe ducliolera des poules est d'une extröme finesse. 11 apparalt sans colo-

Fig. 51. Choiöra des poules.

A,nbsp; Culture (laus le bouillon. Leitz. oe. 3, obj. 1/12.

B,nbsp; Sang de pigeon. M^me grossissement.

ration sous la forme d'un diplocoque ou d'un mi-crocoque.

Sa veritable forme, revölee par la coloration dansle sang, est celle d'un petitbatonnetqui prcml fortement la coulcur aux deux extremites, mais reste incolore au centre.

PR. DE MICROBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 16

21Hnbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

11 poussebien dansles bouillons, lagölallne,la gclose, mais aon sm* la pomme de terre.

II se colore facilement par les couleurs d'ani-line, muis ne preud p;is le Gram ailc Weigert.

Ill

CHOLERA DU PORC

Lc docteur Salmon, chef du Bureau of Animal Industry du döpartement de l'Agriculture aux Etats-ünis, a d6signcsous lo nom de Hog-cholera, c'est-ä-dire cholera du pore, et ötudiö dans diverses publications, dont la plus rücento cst do i88;i-1880, une maladie porcine qui fait de grands ravages en Amerique (I).

Lc llog-cholera correspond ;i la maladie 6tudiee, il y a longtemps deja, par Klein sous lo nom dc pneumo-enteritis infectious oflhepiy; a lapneumo-entdrite contagieuse ths pores, etudiee a Gentilly et äMarseillepar MM. Cornil etChantemesse;(#9632; Academic des Sciences et Sociele Je Biologie, 1887 ; a ['(#9632;[raquo;ideinie des pores a Marseille de Rietsch et Jobert (1887); enfin a I'^pizootie sevissanl, en Suede ot en Dänemark et designee sous lo nom de diphtherie du pore.

(1) Outre ies Reports of the. Commissioner of Agriculture 1SS5-18S(i. quisetrouvent dirncilcmenten Fnince, onpouri'aconsulter pour les travaux laquo;lo M. Salmon h cc sujrt un article raquo;icrit par hii-meme dans the journal of Comparative A/edecine and Surgery. \.vri\ i 888 (Analyse par E. Leclainclic in Recueil de iiuulrriue reterinaire. ocloitrfi 1^88) ct I'cxccllcnte ro\ue critique do Dudaux in Annales Pa5/et(r, juillct 1888, revue ;') laquello uous avona fait plus d'un emprunt pour cot article. MM. Cornil ot Chantemesse viennonl ilo publicr i-ooonimont duns le Joutnal gt;lc VAnatomie uno bonne etude de ootto maladie.

CHOLERA DU POHC.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;279

I. Choltia du pore spontan^.

Le pore est lo scul animal qui, dans I'etat actuel (Ig nos connaissanccs, prenne s])ontanement la maladie, etil est hors do doute que 1'infection se fait par la voic digestive, I'animal sain absorbant, avec ses aliments les produits virulents rojetes par les animaux malades avec leurs excrements.

Les lesions trouvees ä l'autopsie different sui-vant que I'animal asuccombe ä la forme cbronicpie attenuee, ou ä la forme aiguc virulente de la maladie.

a)nbsp; Dans 1c premier cas ou ne trouve guöre que des ulcerations de la muquouso du gros intostin.

b)nbsp; Dans le second cas les lesions, beaucoup plus marquees, sont, d'une facon sommaire, les sui-vantes :

SufTusionshemoiThagiques de la sereuse du gros intestin, de la surface de la rate, de la surface du rein et des oreillcltes.

L'intestin est le siege principal de raffed ion, et les lesions sebornent dans la regie an gros intestin ne depassant pas la valvule ileo-ca'cale : elles consistent en une injection, une congestion gene-rales ct une necrose de la muqueuse qui determine de larges ulcerations.

La rate est noire, tumeliee. Les ganglions Ivin-phaliques sont hyp(h'eniies.

Les poumoBS sont ordinairement intacts. Ires rarement hepatises.

L'intestin et son contenu, les ganglions, la rate, le foie, le sang sont les prineipaux produits virulents du cadavre.

II. Cholera du pore expSrimental

Le cholera du pore peut etre confer^ experi-

16'

280

MALADIES MICROBIENNES.

mentalement aux animaux, soil paries voics digestives, soil par inoculation sous-cutanee.

On infecto les animaux par le tube digestif en melant a. leurs aliments les produits virulents du cadavre, ou des cultures pures du bacille.

L'inoculation sous-cutanee se fait arec le sang, ia pulpe splenique ou ganglionnaire diluee et broyee des animaux infcctes, ou avec le produit d^!une culture pure.

Les animaux susceptibles de prendre le cholera du pore exporimentalementsont: le pore, la sourts, le lupin, le cohaye et, a un moindre degre, le pigeon.

La poule, le vwnton, lo i;eau sont refractaires.

Le pore n'est pas Ires sensible a, Vinoculation sous-cutanee : il resiste facilement ä de tres hautos doses de culture virulente ; l'inoculation des produits cadaveriques virulents reussit mieux.

Uinfection par la voie digestive est la veritable maniere de confßrer au pore Ic Hog-cholera, et les cultures sont, ici encore, moins actives que les visceres d'animaux morts de ratfection : 'JO p. 100 des animaux infectes par cc mode experimental succombent, an dire de Salmon, avec des symp-tomes et des lesions typiques.

A 1'autopsie les lesions se presontent sous deux formes principales :

a)nbsp; Tantot les lesions sont presque limilees au canal intestinal, et portent sur le colon, 1'estomac, quelqucfoisrileon, tresrarement le jejunum ; cllcs consistent enune necrose plus ou moins complete de la muqiieusc;

b)nbsp; Dans I'autre forme, qui amene la mort en six aquinzo joins, on trouvc les lesions hemorrhagi-ques que nous avons döerites ä propos de la ma-ladie spontanee ; le foie, les reins, la rate, les ganglions lympliatiques sont tumelies, noirs; le

CI10I-EIU DU PORC-nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 281

poumon est attoint aussi. La muquousc intesti-nale et colle do I'cstomac sont congeslionnees; on trouvesous la muqucuse des suffusions sanguines.

Les souris succomhent a I'inoculation sous-cu-tanee et a Tinfcction par la voie digestive ; on trouve constamment l'hypertrophio de la rate et de nombreux foyers de necrose do coagulation dans le foie; au point inocule existe une lugore lesion locale.

Los lapins inocules sous la poau de la cuisso succombent en trois ä huit jours, suivant la dose inoculee, avecune violcntc congestion pulmonairc, I'liypertrophie de la rate, et de nombreux et rn-marquables foyers de necrose do coagulation {laches blanchätres) ä la surface du foie et de la rate; au point inocule il existe une masse blan-chdtre, erömeuse, produit d'une necrose do coagulation.

Les cobayes inocules sous la poau meurent en un delai qui varie de trois ;i huit jours suivant la dose; la lesion locale, les lesions viscerales sont les memes quo chez les lapins.

Le pigeon resiste a toutes les tentatives d'inocu-lation par les voies digestives : inocule dans le muscle pectoral avec une forte dose, qui ne doil pas vtre införieure a quinze gouttes de culture, il succombe en vingt-quatroii quarante-huitheures ; la lesion locale est dans cos cas a peine marquee. II en est tout aulrement si 1'animal inocule avec une dose plus faible survit plus longtemps, ou si on le sacrilie apres quelques jours, avant qu'il ait pu so rötablir. Dans ce cas la lesion du muscle pectoral est des plus interessantes; eile rappollo, en I'accentuant, colle qu'on trouve dans lo cholera despoulos : lamajeure partio du pectoral inocule est blanchätre, exsangue, les fibres en sont, friables et s'ecrasent facilemont sous la pince. Le tissu

282

MALADIES MIGROBIEIWES.

musculaire cutourant la partie ainsi necrosöe esl gorge de sang.

Ajoulons quo chcz le lapin, le cobaye, et lo pigeon, Vinoculation intra-pamp;ritoniale, ä dose sufli-sante, reussit parlailement et tue ces animaux.

III. Le Bacille du cholera du pore. Sa recherche dans les liquides et tissus organiques.

Sur le pore qui vicut de succomber a la mala-die de forme aiguö, sur celui qui succomhe a I'infection par les voies digestives avec lesions he-raorrhagiques generalisües, le bacille se trouve a peu pres partout, ruais surtout dans la rate, oü il est plus abondant que partout ailleurs; le sang en contient assez peu comparativement ä la rate.

Sur les pores qui succombent ä Finicction par les voies digestives, ruais sur lesquels la lesion est horuöe au canal intestinal, le bacille est si rare an coutraire dans la rate et lesautres organesque la culture-seul pent I'y deceler.

C'est encore la rate qui est le siege do predilection du bacille dans le cholera du pore experi-menlal do la souris, du lapin, du cobaye, du pigeon ; mais on le trouvera aussi en assez grande quantite dans le foie, les ganglions, le sang, etc.

L'etude du bacille du Hog-cholera pout se faire sans coloration et avec coloration : I'examen avec coloration est preferable pour les pulpes et les liquides organiques.

Le microbe prend bien les couleurs d'aniline, mais no se colore pas par les methodes de (;ram el de Weigert; nous conseillons surtout la solution liydro-alcoolique faible de violet de gentiane, qui donne d'excellents resultats.

Le bacille du cholera du pore apparait dans les preparations colorees sous forme d'un petit orga-

C110LKKA DU PORG.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 283

nisme ovale, un peu plus lonf; que large,laquo; de 1, 2 ä f,o (i de long sur 0,6 n de large, dit Salmon raquo;. Get auteur a ecrit encore que le centre du bucille etait plus pale que les contours. C'est exact, mais il faut, pour obtenir cette apparence, une solution colorante faible et un lavage complet de la la-melle : I'aspect signale par Salmon apparalt net-tement surtout avec le bleu de melhylene.

Les coupes do tissu seront coloreos suivant la methode de Loftier, les inelhodes de double coloration echouant, comme nous I'avons dit.

IV. Cultures du Bacille du cholöra du poro.

Le bacille de Salmon est aerobic et aussi par-laitement anaerobic : nos essais de culture duns le vide (dans le bouillon) out ete peu nombreux, mais probants : le bacille do Salmon, ainsi cultive, a bien poussö en vingt-quatre houres ä l'etuve, a tuö le cobayc et, transplants sur la gelatine en strie, y a presente ses caractercs typiques. 11 pousse bien dans les bouillons, sur la gelatine, la göloso et la pommc de terre.

La semence sera prise dans le sang ou la rate

a) Culture dans les tiouillons. Les bouillons neutres, peplonises ou non, conviennent bien au bncilledu Hog-cbolera; le bouillon logerementacide memo n'aneto pas son developpement. En vingt-(juatre ou trcnte-six houres le bouillon ensemence,-mis a reluve ä 37⁰-3ö⁰, se trouble sans apparence spcciale.

6) Cdltore de la gelatine. La culture sur gelatine se fera soil en stric, soit par piqi'm.

laquo; Ensemencö en slrie, le bacille de Salmon donne des colonies d'aspect pale, ä bords nettement de-finis, mais irreguliers, avec une legere saillie vcrs le centre. raquo; Tantot les colonies restent espac6es

281

MALADIES MICROBIENNES.

lorsquo la semence etait peu riche en microbes, tantöt elles se röunissent sur toute la longueur de la strie d'ensemencemont.

La culture sur la gelatine en strie presente trois caracteres assez nets, que nous avons toujours retrouves et qui nous semblcnt digncs d'etre men-tionues. Ce sont : la leinte bleue de la colonie examinee par transparence ä ses debuts; le trouble de la gelatine, qui semble comme nuageuse dans toute la prolondeur du milieu recouvert par la couche de culture : cet aspect ne se rencontre que lorsque la culture date de quelques jours; enfin l'ipaississement de la strie de culture, qui devient saillantc, blanche ct cremeuse dans les cultures anciennes.

Parfois encore lesbords de la culture sont don-teles ;cetteapparence ne so rencontre pas toujours.

Jamals le bacille du cholera du pore no liqueüe la gelatine sur laquelle il se devoloppe.

Jinsemence parpigwe le microbe du cholera du pore se developpe, lo long du trajet de l'aiguille, sous forme de colonies blanches, irregulieres, arrondies, hrrissees d'asperites, d'aspect cristal-lin: a la surface de la gelatine, il se forme une couche epaisso, blanche, cremeuse, qui gagne rapi-demenl les bords du tube, ct qui souveut dessine ä la peripherie une sorte de fin reseau en forme de dentelle.

Enfin dans les vieillos cultures sur gelatine on voit souvent se former au voisinage de la culture des cristallisations elegantes do chlorurc de sodium (Nocard).

c)nbsp; Cultdre sur la gülose. Sur la gelose en-semencee en strie et mise ä. reluve, se devoloppe rapidornent uno couche blanchatre.

d)nbsp;La pomme de terre donne une culture tres interessante otassez lypiquedu bacille du Hog-cholera.

ROUGET DU PORC.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;285

Sur tout lo trajet do la strie d'ensemencement il so forme uno culture brun clair d'abord, pre-nant unc teinte brun fence lorsqu'elle vieillit, teinto qui rappclle de loin colic do la culture do la morve ; les bords de la culture sont nets et scdllants.

L'examen microscopique des cultures ost des plus faciles, et doit so faire sans coloration et avec coloration. L'examen a l'etat frais permettra de constater un caractere fort important : la mobility du hacillc.

L'examen avec coloration ne presente rien de particulier.

Les cultures du microbe du liog-chol6ra conser-vent Mslongtemps leur vegetabilitoet lour virulence (plus d'un an;.

En resume, le bacille du cliolora du pore est aerohie et anaerobic; il est mobile; il pousse dans tous les milieux de culture en prenant sur la gelatine, qu'il ne liquifie pun, et sur la pomme de terre, des apparences assoz speciales. II se colore bien par lesdiJKrentes coulours d'aniline, maisne premi pas le Grain ni 1c Weigert.

IV ROUGET DU PORC

C'est aux rechcrches do Pasteur et Thuillier (ju'on doit la decouverte du bacille du roaget.

I. Rouget spontane.

Le rouget est unc maladie speciale au pore ; cllo n'atteint et ne tue que cet animal dans les condi-

286

MA.IADIES MICROBIENNES.

tions naturelles. Lo porcelet präsente une grande resislanco ä la maladie qui tue surtout los pores adultes et les vieux pores.

Cost par les votes digestives que le pore s'inocule le rouget on absorbant avec ses aliments les ma-liörcs diarrheiqucs virulentes rejetees par les pores malades. Les lesions tronvöes a I'autopsie portent sur : o) Lo peuu, qui ost parsemee de taehes rouge-sombre, violacees, noiratres, siegeant principale-ment au pourtour des oreilles, sur le venire, a la face interne des membres, etä la region vulvo-anale;

b)nbsp; Les organes lympho'ides : ganglions inguinaux, pelvions, sous-lombaires, mesenteriques, bron-chiques, ete., qui sout rouges, congestionnos;

c)nbsp; nbsp;La rate, qui est volumineuse et asse/. dif-tlueute;

d)nbsp; Le foie, qui ost augments de volume;

e)nbsp; Le sang, qui est noir, asphyxique.

Les produits virulents du cadavre sont: an jire-mier rang la rate, les ganglions Ivmphatiques, la moelle ossouse; le foie est virulent, raais ä un moindrc degre; il on est de mömedu sang, dont la virulenee, compareo a celle do la rate, des ganglions, de la moello, ost assez faible.

II. Rouget experimental.

Les animaux qui prennent experimentalement lo rouget sont : leporc, le lupin, la souris et le pigeon.

Le cobcu/e est absolument räfraetaire.

Lo pore n'est pas un bon reaetif experimental du rouget : I'inoculation sous-cutanie, meme avec les produits les plus virulents, pout eeliouer; I'infee-tion par le tube digestif (Ingestion dos viseöres d'un pore ayant sueeombe au rouget) est plus cer-taine, mais non absolument sure.

ROUGET DU POnC.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;'287

Lo pi^oou, la souris, lo lapiu sont beaucoup plus sensibles que Jc pore ä l'iiionihüion du rouget.

La imitiere d'iaoculation sera juiisee dans la rate, les ganglions, la moelle osseuse d'un animal morl du runget. L'inoculation sera pratiquöe a la seringue do Pravaz dans le lissu cellulaire sous-cutane du lapin et ile la souris, dans le muscle pectoral dupigeon : l'inoculation intra-peritoueale reussit fort bien aussi sur cc dernier animal.

Le virus du rouget passant en series sur 1c lapin augmeiite de virulence pour cotte cspece animale, mais s'afl'aiblit pour 1c pore : un virus de huitieme uu neuvif'me passage du lapiu n'est plus capable de tucr le pore, et ne lui conlerc qu'une immuuile pou solide.

Le virus du rouget passant en sorics sur lo pigeon augmente de virulence d'une fagon absolue : un virus dc troisieme ou quatrieme passage tue süremont lo pore.

Le lapin succombe ä l'inoculation du rouget en troisäcinq jours ; le pigeon en quatre a sept jours ; la souris en trois a quatre jours.

Les lesions sont viscerates et portent surtout sur la rate qui est hypertropbiee (et souvent d'une lacon considerable die/, le pigeon), lo foie qui est congestionne, les ganglions.

III. Le bacille du Rouget.

Ed pxaminanl, sans coloration le sang des pores succombaut an rouget, Thuillier decouvrit, au milieu des globules sanguiiis, nn petit organisuic ({u'ildecrivit comme nn microbe en liuil do chiffre.

Certains auteurs allemands out införe de cello description (]ue Thuillier n'avait [)as \u le bacille du rouget qui a la forme d'un ties liji batonnet, el uou la forme en liuit dc chiffre. L'obsorvation de

28S

MALADIES MlCROBIENiNES.

Thuillier 6tait cependant rigoureusement exacte,

mais ses examens olaient fails sans coloration el avecdesinslrumcntsbeaucoup moinsperfoctionnos queceux quo nous possedons nujourd'hui, c'est-ä-dire dans des conditions de difliculte telles qu'il

Fig. 52. Rouget du pore.

A,nbsp; Sang He pigeon. Leitz, oc. 3, obj. 1/12.

B,nbsp; Culturt.¹ dans le houiUon (dans le vide). Mcme grossissement.

fauts'etonner, non pas qu'il ti'ait pas saisi la forme reolle du bacille, mais bion qu'il ait ]iu en faire la decouverle.

Toutes les recherches du bacille du rouget doi-vent etre faites aujourd'bui sur des preparations coloroes.

La techniejue des colorations est simple : le bacille du rouget prend parfaitement les teintures

ROÜGET DU PORC.

289

hydro-alcooliques de violet do gentianc, de fucli-sine, de bleu de iiielliylene, et le bleu de Löffler; ce qui lui convient le niieux, c'esl la solution hydro-aleoolique ledere de rouge dianuiut. 11 se colore par-

lu poc

A, Pulpe de rate. Lapin. I.eilz, oc. 3, obj, 1/12. (i. (Culture. Metne grossissement.

faitement par les procedes de Gram et de Weigert.

On devra le rechercher dans le saug, la rate, los ganglions, la moelleosseuse, 1c foie.

Sang. Le sang coutient peu de bacilles du rouget; Irs preparations iven renferment qu'un petit nombro epars, ou parfois rassembles en petits amas; il nous est arrive plus d'une l'ois de trouver ccs amas dans les globules blaues. Les preparations de sang seront faites en simple ou double coloration.

La rate, les gawjlioxs, r..\ moelle ossecse snnf

PR. DE M1CR08IE.

200

MALADIES MICROBIENNES.

Ics organns d'6lection du bacUle; la rate en ren-ferme des quantitös cousidorables. On la pröparera sui' lamelles et en coujjgs avee la Qdloratiou siiii|)le ou double.

Le Fun; domic aussi do bons resullals; sur les cüii])cs It^ bacille se montre en petits amas.

Duns tons cesorganeslebacille durougetapparail commeun fin bdtonnctde dimensions analogues a cellos du bacille dp la tuberculoso, qui rdolamc, pour etre Lien vu, les forts grossisscmeiits de l'im-rnersion homogene (800 a 1 000 diametres) ct I'eclai-ragc Abbe.

IV. Culture du bacille du rouget.

Le bacille du rouget cst aerobie, mais il se plait micux encore ä l'abri de fair : U estplus anaCvobif qu'airobie.

11 pousse a la temperature ordinaire du labora-toire et ä celle de l'etuve.

La aemence ä choisir est, le sang, la pulpe de rate, la pulpe ganglionnairc on la mbellc osseuse.

Cültuhe dans le bouillon. Elle se fait soil en presence de Vair, soit '/ l'abri do I'air. Le bouillon additionne de 1 p. 100 de gelatine et de 1 a -1 p. 100 de peptone convicnt surtout pour cetto culture. Apres 48 heures de sejour ä l'ötuve a la temperature de 35a30^o, le bouillon, soit dans le matras, soit, dans le lube a vide, cst trouble; le developpement de la culture u'a du roste rien de caraetöristique.

Coltcre Hans i.A gelatine. Lo rouget du pore donne dans la gelatine ensemencee parpiqwe nne bc.llo culture, absolumcnC carncterisllque. Cost dans les couches profondes,^)CU acYto, que la culture se doveloppe surtout. An bout dc quclquos jours, la culture se montre sons forme de petites liou-pcltcs rayonuant aulour du trajet de l'aiguillc qui

ROUGET DU PORC.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;291

a fait rensemencetnent en piqüre : I'enscmblG laquo; rappelle asscz bicn la forme d'une petite brosse ä bouteilles raquo;. Get aspect n'est bien net que dans les premiers temps; aprös 20 ;i 25 jours il s'efface, et la culture perdant sa nettelö semble diffuser dans l'ensemble de la gelatine.

La septicemie des souris cultivee en piqüre sur la gelatine donne une culture assez somblable h celle du rouget, mais toutefois plus floue.

Le bacille du rouget du pore ne cultive pas sur la pomme de terre en presence de l'air; ä l'abri de Fair, la culture est peu abondanto, penible et semble creuser les couches suporficiellos de la pomme de terre.

Le microbe cultive a 1c meme aspect a peu pres quo dans rorganisme; cependant il prend dans les milieux artiticiels une forme allongee que ja-mais il n'a sur 1'animal.

lies cultures faites dans le vide, ou en presence d'un gaz inerte, conservont mieux leur virulence quo les cultures faites a Fair. Les cultures dans la gelatine se conservent longtemps. Nous avons pu, avec M. Nocard, nous assuror qu'une culture sur gelatine datant de huit mois avail encore la faculty de repulluler apres transplantation, et pouvait tuer le pigeon. Une culture de neuf mois au con-trairc a pu etre transplantee, mais u'a donne qu'une culture defcctueuse et semblait avoir perdu sa virulence : eprouvee surlepigeon, ellene donna pas la mort, mais 1'animal succomba quelque tem[i5 apres a 1'inoculation d'une culture virulente.

Resume des caracteres du bacille du rouget du pore

Aerobic et anaerobic ä la fois, mais se plaisant mieux h l'abri de l'air, le bacille du rouget est un organisme tres fin qui prend facilement les couleurs

17'

292

MALADIES MICROBIENNES.

d'aniline, et so coloie par les melhodes de Gram et Weigert. II pousse dans le bouillon, la gelatine, et donne dans les lubes de gelatine ensemenuee par piqurc unc culture tout a fait caracteristique .

DU DIAGNOSTIC MICROBIOLOGIQUE

Du rouget du pore, du cholera du pore, et de la peste porcine (i).

A I'heure actuelle il scuible qu'au moins trois affections epizootiques du pore out ete eontondues longtemps sous la deaomiuation de Rouget, 6rysi-pele, mal rouge du pore, etc. Une laquo; gran.de rcs-seniblancc des signes objectifs de ces maladies, et notaminent la coloration rouge intense quo revet la peau des malades a Tapproclie de lamort raquo;, le defaut d'autres methodes diagnostiques que I'exa-men macroscopique des lesions, autorisaient cetle confusion.

L'etude mierobiologique ct les inoculations ex-perimentales permettent do poser un diagnostic plus certain.

1. Le rouget Pasteur-Thuillier.

Pasteur et Thuillier en out, les premiers, nette-ment distingue les caracteres, qni soul des plus lypiqucs.

La baclerie du rouget est immobile, d'une extreme finesse; ellesecolore bienparles methodes de Gram et Weigert, pousse sur la (jelatine en piqiiroavec ies caract6res toutparticuliers,ne i)üussc

(I) Swine-Playue ties Americnins, Sc

lesettche des Aliemaiids.

DIAGNOSTIC DU HOUGET DU POHC, ETC. 293

l)as sur la pomme de terre, est plus anaerobic qu'aerobie.

Inoculee aux auimaux d'expörience, eile tue la souris, le tapin, le pigeon avec unc egale i'acilitö, niais idioue absolument sur le cobaye.

II. Le Cholera du poro.

Decrito par Salmon sous le nom de Üog-Cholera, cello maladie a öle relronvee et decrite chez nous par MM. Cornil et Chautcnicsse ä Gentilly et h Marseille, par MM. Rietsch (1) et Jobert ä Marseille; e'est le sioine fever des Anglais, la pneumo-enteritis infectious de Klein; e'est encore la diphterie du porc, epidernique depuis quelques anntes en Suede et dans le Dänemark.

Le microbe de cette maladie est un bacille moiiile, aamp;robie, imaerobie, qui ne se colore pas par Ics melhodes de Gram et Weigert; il pousse sur la gelatine et la pomme de terre avec los carac-leres propres que nous avons indiques ci-dessus.

Inocule aux animaux d'cxperieuccs, il tue la souris, le lapin, le cobaye, et, mais seulemcnt ä forte dose, lo jägeon, La poule est rofraclaire.

(1) M. Kietscli ji'il- l'idi'utitO du bacille qu'il a decrit avec celui de Salmon (v. the Journal of compar. Mud. and Surf/., avril 1888). M. Salmon pense avec raison que cos deux organismes sont les memes. Nous avons ou, dans le cours de cette annee, l'occasion, au laboi-atoire de M. Nocard, de suivre tontesles experiences faites par iui avec les cultures quit tenait de M. Salmon, de M. Hang de Copenhague, et celles qu'il avait obtenues d'uu porc; rnort de pneu-nm-enterite dans la banlieuc de Paris.

D'autre jiait. dans uu recent voyage ä Marseille, M. Nocard a pu autopsier des porcs morts de la maladie epizootique decrite par Kietsch; des inoculations, des cultures outete faites dans sou la-boratoire d'Alfort; l'idenfite enti-e le bacille de Salmon et le bacille qui causa Tepizoolie de Marseille nous parait absolue. Ajoutonsque MM. Cornii et Chantemesse reconnaissenl que le microbe qn'ils ont etudie dans la meine epidemic quo M. Riestch et avant lui est ideuti.jue ä celui de M. Salmon (Lettre de M. Cornii ä M. Salmon gt; in the Journal of. compar, Med and Surg., avril 1S6SK

201

MALADIES MICROBIENNES.

III. La peste porcine (swine plague des Americains, Schweine Seuche de Löffler et Schütz).

Nous n'avons pas jusqu'ici eu Toceasion d'etu-ilier lo microbe do cctte affection. Voici ses carac-teresd'apres les auteurs: bacille court, ovale, immo-bik, qui so colore d'uno facon sjiecialc, les deux exlromites prcnant la couleur, le centre rcstant incolore.

Ce bacille tue la souris, le lapm, le pigeon, res-pectant davantage le cohwje. [noculc ä largo dose, il tue la paulc.

Enliu Tinfection par la vole digestive, qui reussit si bien cliez le pore avec le llog-Cholera, eclnnie absolument quand il s'agit dc la peste porcine.

FARCIN DU BOEUF

Les anciens auteurs Hurtrcl d'Arboval, (lelle, Cruzel, out decril lt;gt; sous le nom de farcin da h(BUf une maladie chronique caracterisee par I'inflam-ination suppurative des vaisseaux et des ganglions lymphatiques superflciels, entrainant rarement la morl, mais se traduisant ä la longue par 1'amai-grissement et des symptömes de jihtisie tubercu-leuse raquo; (Nocard .

Getto maladie, assez rare en France ä l'heure actiiolle, existo ä la (uiadeloupe, oü eile ost fre-quente et ordinairement mortolle ä plus oumoins longue öchuanco (Cuuzin).

FARCIN DU B(EUF.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;295

Sur quelqucs pieces anatomiqucs (pus ct fragments de tissus malades) quo M. Couzin lui adressa dc la (iiiadeloupe, Xf. Nocard a, dans cos derniers temps, fait unc ötude microbiologique de cette curieuse affection : les rcsultats en out öle publies par lui dans lo Recucil de medecine vcln-inaire du 15 fevrier 1888 et dans les Annales Pasteur (juin 1888) : e'est ä ces deux sources quo nous emprun-torons presque texluellcment le court expose sui-vant.

I. Farcin du bceuf spontanfe.

La maladie n'atteint quclesbovides. A la Guadeloupe eile se caracterise par les lesions suivantes :

Adonites et Ivmphangitcs superficiellcs portant surtout sur les ganglions brachiaux prescapulaircs, prepectoraux ; le ganglion atteint se tumelie, s'ab-cede ; il contient, un pus cremcux, parfois caseeux et grumeleux.

Lesions viscerales du poumon, du foic, de la rate, des ganglions profonds. Ces organes sont far-cisde psoiido-lul)erculcsä partie centrale casecuse nu purulente.

Le pus des ganglions suiierliciols et profonds, 1c pus collcctc dans les visceres sont le siege du virus.

II. Farcin da boeuf experimental.

Le farcin du bceuf pout etrc inocule au cobai/c, an boeuf, au mouton, Lc veritable riactif e.cperimental eat le cobaye.

Les animaux refractaires sont: le lupin, le chlen, lc cheval et Vane.

Les inoculations se feront avec le pus pris sur l'animal malade, on avec le liquide de culture.

II y a plusieurs modes d'inocnlation experimen-tale du farcin, et cos divers modes donnent des rcsultats differents.

296

MALADIES MICROBIENNES.

lt;/ Inoculation hypodeiinique. Chez lo cobaye, au point d'inoculation, il se forme un abces volunii-neux; en qiieli[ues jours les vaisseaux et las ganglions lymphatiques de la region s'indurent et deviennent 1c siege d'un önorme phlegmon, donl rulceration verso au dehors plusieurs centimetres culjes de pus ; ä ce moment Fanimal, tres amaigri, semblc devoir bientöt succomber; mais au con-trairo il reviont peu ä peu a son elat normal, il cngraisso etne conserve plus de la lesion si grave qu'il avail presentee (ju'une induration des lymphatiques et des ganglions atteints.

Chez lo mouton et la rache Finooulation donno un abces peu volumineux qui s'ulcere de temps a autre, s'indure et semble disparaitre, mais plusieurs semainos, plusieurs mois apres, un nouvel abces se montrc au voislnage. Uue longue observation, qui n'a pu encore ctre faite, montrerait seulo Favonir de l'affectlon inoculee.

Chez les animaux refractaires (lapin, chien, cheval, anc, un abces se forme, peu volumineux, au point inocule, s'ouvre, so vide et so cicatrice promptement.

b) Inondation intra-pamp;Uontiale. Ce 7nodc d'ino-culation provoqueconstammentchezle co6((.'/e, dans un delai variable de nout a vingtjours, des lesions quisimulenta.s'ymeprendrecelles delaluberculose miliaire. A l'ouverture des cobayes inocules par le peritoine, la sereusc se montre litteralement farcie de nodules tuberculiformes ; ces nodules sontsur-tout confluents dansFepiploon, qui cst transforinc en une sorte do boudin volumineux, mamelonne : la pression en fail sourdre quelques gouttclettos de matiere puriforme, epaisso, diflicilo a dissocier.

Les visceres do la cavite abdominale (foic, rate, reins, inteslins) paraissent egalemcnt farcis do pseudo-tubercules; mais un examenattentif permet

FAHCIN LIC BCEUF.

291

de s'assurer quo leurenveloppepöritontoleestseule atteinte; leur parenchyme osl tout a fait intact.

Les organes do la cavite thoracique no sont jamais envahis.

c) Injection intraveineuse. Los injections intra-veineuses donnent clioz le cobaye ot chez le moulon des lesions simulant encore mioux la tubercülose

Karcin laquo;in lircuf. Poumon d^ mouton. Vrrick, or. ^,obj.'i.

miliaire genöi'alisöe; a l'autopsie du sujet d'expe-i'iences on trouve tons les visceres, rnais surtoutle poumon, le foie et, la ruin, Lnfiltres d'un aombre considerable do petits nodules tuberculiformes.

Chez La vachc I'injection intraveineuse provoque des lesions analogues, egaleinent generalisees ä tons les parenchymes; mais les anitnaux resistent si longtemps qu'ils out dn etre sacrides, et qu'il n'est pas encore possible de savoir si cos lesions auraient naturelleinent provoquö la niorl.

298

MALADIES MlCaOBIENNES.

#9632;:#9632;.

III. Le bacille du farcin du bceuf. Sa recherche dans rorganisme.

Uno sculi¹ nnHhodc conviont bien pour la recherche du bacille du forciii dc bccuf, qu'il s'agisse de produit^ pathologiques examines sur lamellcs, dc coupes de lissu, de produits de culture : e'est la melhode de Weigert.

Daus lc pus examiue par cctte metiiodo, au milieu des globules colores en rose par I'^osine ou le canniu, apparalt en quaatite coasldörable un microbe special different cle liuis ceux decrits jusqxi'ici. C'est un iin et long bacille, se presentant sous forme de petits ainas enchevetres d'une facon inextricable, la partie centrale figurant un noyau opaque, d'oü rayonnen't a la partie periplienque une mjTiade de iius prolongements, dont la plnparl somblent ramifies; on dirait une lete de chou-tlcur, un fagot cpineux on encore une semence do bardano. Sons lc rapport des dimensions, ce bacille pent otre compare ä eclui du rouget de pore.

Les uodales tubcrculiformes des visceros pre-sontent dans lour partie centrale une graude quanlito do cos memes amas bacillaires on forme de broussaillcs.

IV. Culture du bacille du farcin du bceuf.

La culture de ce microbe so fait aisement dans Ions los milieux liquides on solides, maintenus au contact de l'air, ä une temperature variant entro HO et 40deg;. Los tubes de gelatine-peptone ensemences no donuent pas (race dc culture ä la temperature do la chambre ; si on los met ä l'etuve, la semence y pullule on quelques jours.

I.o pus recueilli purement au centre d'un nbces on dun pseudo-tuberculc convient ä mervoille

FARCIN DU BCEUF.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 299

pourrcnsenicncemcnt; il no renfürnie pas d'autre microbe que le bacille decrit plus haul.

Sur la ijclote, lo microbe so dcvoloppe en potits amas irroguliercment arrondis, saillanls, opaques, plus epais sur les bords, d'une leinte blanc jau-nätro, ;i surface mamelonnee, torne et comme poussiereuse; a la longue, ces plaques, d'aspect licheuoide, so reunissent et se conloudent, en don-nant ä l'ensemble do la culture 1'apparence d'une membrane epaisse et grossiöromont plissee.

Sur la poinme de terrc, la culture so fait rapi-demont sous forme de plaques ecaillcusos, tres saillantcs, tres seches, do couleurjaune pale, donl les bords comme failles ;i pic semblent se soulever au-dessus du uivoau du subslralum.

Sur lo sdmm r/etntinisi la culture ost moins rapide; mais olio a le meine aspect quo sur la go-lose, ä cela pres qu'elle ost plus humide.

Dans los differents bouillons, c'ost encore sous forme d'amasirregulicrs quose multiplie lebacille, amas blanchatres, dont la plupart tombent au fond du linllon, dont quelques-uns restent flotlants ä la surface, oü ils s'etalent on une sorte de pelli-cule arrondie, lonticulaire, do couleiar gris sale, avec un reflet verdätre, d'aspect jioussiereux, qui no so laissc pas mouillcr par le liquide. Cost sür-tout dans les bouillons additionnös de glycerine ot do peptone quo la culture rovet col aspect; on dirait alors dos feuilles do neuuphar s'etalant ä la surface d'un clang, ou mieux encore du bouillon gras dont les yeux se seraient tiges par le re-froidissoment.

La culture reussit encore, moins abondante et moins rapide, dans les milieux dont la reaction ost legeremont acide; eile no parait pas modifier la reaction dos bouillons neutres ou alcalins, alors memo qu'on y a ajoute du sucro.

300

MALADIES MICR0B1ENNES.

Ensemence dans ilu lait, 1c microbe s'y developpc avec les memes caracteres sans en provoquer la coagulation, sans en modifier la reaction.

L'organisme est exdusivement aerobic; toutcs les tontatives de culture dans le vide ou en presence de l'acide carbonique out echoue.

Quel que soil le milieu de culture, 1'examen microscopique montre que le microbe s'y est re-produit en affectant la memo disposition qu'il prc-sente dans les tissus vivants ; ce sont toujours les memes amas lilamentcux, enchevetres d'une facon inextricable, dout la nature bacillaire n'est appreciable que sur les bords, oil les irradiations out encore 1'aspect rameux Signale plus haut.

Les colonies anciennes paraissent riches en spores, ceiles surtout qui se sont developpees a la surface des liquides glycerines; les spores, exlre-mement petiles, resislent a rimpregnalion par les malieros colorantes : ellos apparaisscnt sous forme de lacunes ovoides incolores, ä Fcxtreinite des segments bacillaires.

Les cultures conservent longtemps leur virulence et leur vegetabilite; apres quatre mois de sejour ä l'Ötuve ä 40deg;, elles poussent avec la memo vigueur dans les dilTerents milieux, ctles cobayes qu'ellcs servent a inoculer meurenl aussi rapi-demcntqu'au deluil.

MAMMITE CONTAGIEUSE DES VACHES LAITIERES

I. Historique.

in 1884 MM. Nocard el Mollereau faisaient con-

MAMM1TE DES VAC11ES LAITIERES. 301

naitre äla Sociotö centraletle imklecinp veterinahe unc mummile chronique s'observant assez frequem-ment chez les vaches en lactation, et qui, laquo; par la profonde alteration du lait qu'ello ontraine, et surtout par la l'aculte qu'ello possede de se trans-mettre des vaches malades aux vaches saines, devient une veritable calamite pour les efablisso-ments oü Ton entretient un grand nombre de lemelles pour la production industrielle du lait dostine ä la consommation. raquo;

En 1887 MM, Nocard et Mollereau donnaient dans les Anna/es de Pctsteur (n⁰ 3, mars 1887) une description complete de l'affectlon et de son mi-crobe pathog^ne. Nous empmntons presque tex-luellemeiit la substance de notre article au mc-moire de cos auteurs.

II. Contagion de la mamnute de Nocard et Mollereau. Lfesions de la mamelle. Alterations du lait.

Ainsi que l'indique son noni, cotle mammite s'observe chez les vaches en lactation; eile est tres contagieuse; une vache malade, iutroduite dans une etable jusquo-la indemne, contamine bientöt un grand nombre d'autres vaches.

La contagion se fait par contact mödiat, et l'agent virulent ost le lait, qui contiont toujours une grande quantitc de microbes pathogenes.

laquo; Cost la main de la personne chargee de la traite qui transports les germes du eontage du trayon malade au trayon sain. Non seulement le trayeur neglige de se laver les mains lorsqu'il passe d'une vache ä la suivanto, mais encore c'est 1 habitude genorale dans toutes les vacheries de malaxer le trayon, avant de commencer la traite, en rimprognant a diverses reprises du lait qu'on vient de recuoillir; il est facile de comprendre qne, si ce lait ronfenne les microbes de la mammite, la

302

.MALADIES MICROIilKNNKS.

petite couche qui, apres la traite, roste adheronto au tegument peut devenir le point de depart de l'infection de la mamelle. raquo;

La mammitc contagieuse des vaches luitiercs presontc deux symptöinos cardinaux :

1deg; La lc*ion de In mamelle;

2deg; Valtiration du hat.

Iquot; Uo la lesion de la mamelle nous no dirons qu'un mot: e'est une induration, un noyau indurd qui, paraissant d'abord a la partie införioure do l'un des quartiers, au-dessus de la base du trayon, s'ötond lentement, mais d'une facon continue, et finit, par envahir plusieurs quartiors.

2deg; L'alteration du lait est des plus importantcs. Pour la bien öludier, il convient de recueillir purement le Lait dos glandes malades dans dos tubes äessai steriles, suivant le proeüde de Duclaux quo nous avons indique deja ailleurs(V. chap. in).

laquo; Los tubes ainsi recueiÜis sont inaintenus do-bout pendant vinf.'1-quatro hourcs ä la temperature de la chambro. Apres ce temps, il s'ost depose dans la moitie ou le tiers do la hauteur do la colonno liquide une substance opaque, de couleur blanc sale, homogene on grumeleuse suivant quo la ma-ladie est recente ou plus anciennc; au-dessus, le liquide s'est eclairci, prenant I'aspcct d'un serum opalescent, d'une teinto blanc jauniltro, on jaune sale, ou legerement rougeälre, suivant Tage do la lesion. Enfin, ä la surface, s'est amassee la mauere grasse plus ou moins iliminueo do quautite. La reaction du lait, meme au moment do la traite, est ordinairemont acide, et l'acidite augmonte do jour en jour, tros rapidement, si lo lait recueilli est conserve a I'eluvc. Plus le lait parait modilie dans sos caraetöres physiques, plus l'acidite est, prononcee. raquo;

laquo; Lorsque la lesion est recente, il est possible

MAMMITE DES VACIIES LAlTIEltES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 303

que le lait prösente au moment de la traite tous les caractöres du lait normal; mais il tourne, c'est-ä-dire so coagule nt devieat acide, avec une grande rapiditö et, si Ton commet rimprudence do le melanger au lait fourni par les vachessaines, la masse tout eutifere s'altöre au point de no pou-voir ötre utilisee. raquo;

III. Le microbe de la mamrnite de Nocard et Mollereau -Caractöres dans le lait, dans les tissus malades. Coloration.

Si Von porte sous le microscope et qu'on exa-mine saus coloration une goulte du lait alterö recueilli purement, on constate qu'il renferme un nombre consid6rable de leucocytes, parfois agglu-tines par un reseau tros scrro do filaments mu-qucux et fibriueux; on prolongeant I'examen, on pent distinguer, an centre do res masses cellu-laires, un enchevötrement de vöritables chapelels ou do cbainettes cxU-öinonieut linos, dont chaque grain arrondi on ovoide mosure ä poine un y. do diamfetre.

laquo; L'emploi des coulcursderiviSesde I'aniline rend plus nette la constatation de cet 616mont anormal.

laquo; Lo lait i'.uU\ en couelie sur une lamelle socboe a I'air libre, puis fixe par l'action rapide de la flamme de la lampe a alcool, la lamelle ost doposoo ä la surface d'uno solution aqueuse do bleu do motliylene, do violet do gentiane ou do fuchsinc (rubine ou rouge dlamant); puis, apres mi temps variable, eile ost lavee ä l'eau dis-tillce, söchöe a une douce temperature, eclaircie ä l'essence do girofle, puis au xvlol, montoo ciifin dans le baume ou laresine d'Arnmar.

laquo; Examinee it ungrossissement d'au nioins trois cents diametres, la preparation montre un nombre considorabJo dc chapelels on do chalnettes (strep-

:i04

MALADIES MICR0B1ENNES.

tococcus), parfois extrömement longues, enche-

vetröes en lous sens, et formant un reseau dont les iiuiilles enferment un grand nombre de leucocytes, reuiiis d'autre part par des iilaments plus ou moins abondants de matifere muqueuse ou Qbrineuse, laquo; En regie geueralc, les chainettes soul d'autant

lu¹^ hntitTt's

A, Culture. Leitz, oc. .t, obj. 1/12.

11. iiliit. Mi''ine lt;:r(ississcnioiit.

plus longues, et les grains qui les composent paraisseut fixer la matifere colorante avec d'autant plus de rapidile et, dV-uergie, que la lesion de la immielle est plus receule. (Juand la lesion esl dejü ancienne, les chainettes soul moins longues, re-

MAMMITE DES VACHES LAlTltRES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 303

duitesä mi assemblage de six, huit ou dix grains, et on ne trouve plus trace do matiere muco-fibri-nense, on sorto quo les elements anatomiques sem-blent libres dans 1c serum, et. so repartissont i)lus uniformemont sur la lamelle.

laquo; La methodo d'Ehrlich echoue absolument. La möthode de Gram donne egalement dos resultats peu satisfaisants; pour peu quo Faction de Falcool soit prolongec, le microbe so decolore pour prendre rapidement la coulour complementaire. raquo;

L'examen des coupes dos tissus malades so fera paries procedes de Malassez ou de Löffler. Le pro-cede do Gram ne donne aucun bon resultat; le pro-cede do Weigert reussit boaucoup mieux.

laquo; On pout aussi obtenir do bonnes preparations on employant le violet OB en solution aqueuse, ou le violet do gentiano en solution alcaline, et en substi-tuant ä la solution iodo-ioduree de Gram Faction de la liqueur de van Swieten avant la decoloration par Falcool. raquo;

IV. Cultures du microbe de la mammite contagieuse.

Le microbe de Nocard ct Mollcrcau est aerobic, et aussi parfaitement anaerobic; il so cultive bien on presence ou ä Fabri de Fair, et la tomperaturü la plus favorable est cello do ;)7ⁿ.

1deg; Cultches dans les milieux liquides. laquo; II est facile d'obtenir une culture artiflcielle du streptococcus que renferme le lait malade; il suftit (Fen somer une trace dans le lait pur, ou, ce qui est plus demonstralif, dans du bouillon de poulo, do veau, de pore, etc.

laquo; Si le bouillon est noutro ou legerement alcalin, deja, apres vingt-quatre heures do sejoura Fetuve, 1c ballon renferme une quantitö prodigicuse de chainettes semblables ä cellos qui existent dans le lait, mais beaucoup plus longues.

3(10

MALADIES MICROBIENNES.

(( L'aspect tie la culture est un pcu different sui-vant que la mamelle Jont provient ce lait ense-nipiicc; est malade depuisplus ou moins longtemps.

lt;i Ordinairement, lo microbe forme au fond du ballon de culture un leger depot blancluUre, uniquement forme do chainettes; si 1c ballon est rcste immobile, 1c bouillon conserve sa limpidile ; la moindre agitation soulevc ce depot et le disse-mino dans la masse du liquide, qui devient louche et perd sa transparence.

n Parfois le microbe forme de legers flocons d'apparence soyeuse, tres analogues ä ceux que donne la culture de la bacteridie cbarbonncuse: mais ces tlocons sont plus fragiles; ils se disso-ciont facilement par l'agitation, et leurs debris troublent uniformemenl la transparence du bouillon jusque-la limpide.

laquo; Cos milieux liquides semblcnt plus favorables ä la culture du microbe lorsqu'on leur ajoute une petite quantite, 2äö %, de sucre (glycose, laclose, sucrc de canne, mannite) ou surtout dc glycerine. Au contraire, les bouillons additionucs de chlo-rurc de sodium ou de peptone, excellents pour la culture de beaucoup d'autres microbes, constituent de mauvais milieux pour la culture du streptococcus de la mammite.

laquo; Le bouillon, neutre ou legerement alcalin lorsqu'on 1'ensemence, est d6ja nettement acide ajires 2i ou 48 heures, et raeiditö augmente a mesure que la culture s'accroit : eile est toujours plus intense lorsque la culture a etc faite dans le lait ou des milieux sucres; cllo est beaucoup plus lente aapparailro et toujours moins intense lorsque le milieu nutritif a etc additionne d'une quantity notable do serum pur.

laquo; Pendant plusieurs jours, la culture continue avec la meme intensite, et Ton voil graduellement

MAMMITE DES VACI1E3 LAITIERES. 307

lo depot augmentcr depaissour; puis eile se ra-lentit pour cosser bientut completcmcnt; lo depot sc lasse et constitue, a la longue, une pelüculo asscz solide formee d'une myriade de chapelets cnchevetres en tous sens et comme foutres.

laquo; Si Ton a sein d'ensemencer chaque jour un nouveau ballon de culture avec la culture de la veille, on peut l'cutretenir indamp;miment avec tous les caracteres qu'cllo olfrait au dubut; mais si Ton attend quelques semainos pour faire une nouvelle culture, il peut so faire que le liquide ensemencö demeure sterile : l'organisme a perdu la faculte .de se reproduire; toutos choses egales d'aillcurs, il roste vivant beaueoup plus longtemps dans les ballons qui sont conserves a l'abri de la luniiere. raquo;

Tout ce que nous venons de dire des cultures a l'air s'applique aux cultures dans le vide.

(( En ajoutant au liquide de culture une petite quantite de carbonate do chaux pulverise, on lui conserve sa reaction alcaline, et Ton obtient une culture beaueoup plus abondante. De plus, meme alors quo la pullulation du microbe a depuis longtemps cesse, ce microbe est roste vivant avec toutos ses proprietes, et lorsqu'on le seme dans un milieu favorable, il pousse aussi vigoureusement que tout d'abord.

laquo; J\^Tous avons pu obtenir de belles cultures en puisant la semence dans des cultures vieilles de 4, ü et 8 mois, lorsqu'au liquide do culture nous avions en le soiu d'ajouter nn pen do carbonate de chaux. raquo;

2deg; CüLTCBES DANS I.KS MILIEUX SOLIDES. laquo;) Gclu-

tiite. clt; Inocule par piqdre dans la gelatine-peptone, des le troisiemo jour rorganisme accuse son developpemeut par une mince pellicule arron-dic, pen etendue ä la surface, et par un leger trouble tout lo long du trajot de l'aiguille; bienlöt

308

MALADIES MICROBIENNES.

on y voit apparaitre un grand nombre du petits

[luiiits blanchaties, opacjues, granuluux, dont I'entassement forme au centre de la gelatine unc ligne epaisse a bords dcnteles. Unc seule fois nous avons vu s'irradier dc ectte ligue centrale dans l'6paisseur de la gelatine unc multitude d'arbori-sations delicatos, ramiliees en tons sens.

laquo; Inocule par stries a la surface de la geialine-peptone, il apparait, le long de la strie, tie cbaque cute, sur une petite etendue en surface, une inli-nite de petites colonies arrondies, translucides, relletant une leinte blanehatrc, qui se confondent parfoif en une mince jiellicule dont les bords, netteraent delimites, paraissent plus epais et plus opaques.

laquo; Los cultures sur plaques dans la gelatine-peptone donnent, a la temperature de lü a 18 de-iires, des colonies que I'on commence ä percevoir des le troisienu; ou lo (jiialrieme jour; elles se döveloppent indiCföremment dans les couches su-pcrlicielles ou duns les couches profondes de la gelatine, sous forme de petites masses rondos, legerement granulcuscs,trfes ncttement delimitees sur leur contour. D'abord transparentes, elles prennent bientöt,lorsqu'on les examine aumicros-cope (Verick : obj. 2; ocul. 2. , une leinte jaune clair quibrunitpeu a peu,a mesure qu'elles gran-dissent et qu'elles vieillissent. Leur d^veloppement u'est jamais tres considerable; au bout de cinq ä six semaines, cellos cjui ont poussö a la surface de la gelatine forment une saillie Ires appreciable; elles ont alors a I'ceil nu une couleur blancluUro : au microscope elles semblent brunes et opaques ; mais elles restent loujours bien delimitees et lour contour est accuse par une ligne tres netle. raquo;

Le streptococcus de lamammite contagieuse ne lii/ueficpas la gilatine.

MAMMITE DES VACHES LAITIERES. 309

b) Gilose. On peut encore seiner lo microbe en stries sur la geloso et menie sur le serum gelatinise, mais la culture, quiprend sur ces milieux les memes caracteres physiques qu'elle a sur la gelatine, est beaucoup moins abondante.

c)PoiHiue dvtcfre, etc. Les cultures sur milieux opaques ne donnent, pas de bons resultats.

Le streptococcus do la mammite contugieuse en culture affecte la meme forme (si ce n'est toute-fois que le cliapelet est beaucouj) plus long dans les milieux liquides arlificiels que dans le lait de la mamelle), et a les memes reactions de coloration que le streptococcus examine dans le lait altere provenant de la mamelle malade.

V. Mammite experimentale.

L'injection de la culture pure du streptococcus de la mammite contagieuse dans la mamelle saine des vaches et des chivres a reproduit la maladie de la vac/w.

La culture injoctee doit elre de fraiche date, aussi peu acido que possible : la preference doit doncetre donnce,pour rexperimentation, aux cultures faites en presence du carbonate de cbaux.

Tons les essais experimentaux d'infection par les voies digestives avec le lait altere, tentes sur des cliieas, des lapins en bus age, n'ont donne aucun resultat.

Les injections intra-peritoneales et intra-vei-neuses de culture pratiquees sur de jeunes chiens, de petits chats, des chevreaux, des cobayes, des lapins n'ont donne aucun resullat.

Resume.

Le microbe de la mammite contagieuse des vaches Laitiöres affecte dans le lait et dans les cul-

Ü10

MALADIES MICROBIENNES.

turcs la forme d'un streptococcus. II est aero-anach'obie. II pousse surtout duns les bouillons stieres depourvus de sei et de peptone; 11 pousse ägalement, mais moins abondamment, dans la gelatine qu'il ne liquöfle pas, et sur la geloso etle serum; par inoculation expürimentale 11 repro-duit la maladic clicz la vache et la clievre; les autres animaux sout rel'ractairos. II se colorc dans les solutions aqueuses ou hydro-alcooliques de fuchsine, de diamant, elc...;dans le bleu de I.öfller, dans celui de Malassez. II prend mal le Gram, mais se colore facilement par le precede de Weigert.

VII

MAMMITE GANGRENEUSE DES BREBIS LAITIERES

(ABAIGN'fiE. UAL DE l'IS.)

laquo; II existe chez les brebis unc variete de mam-mite qui affecte le caractere gangr^neux, et qui marche avec unc teile rapidite que la inort sur-vient le plus souvent en vingt-quatre, trente-six ou quarante-huit houres.

laquo; Cette maladie, peuconnue des veterinairos, est designee par les bergers sous le nom de mal de pis, ou d'araignee, parce que, dit Hurtrol d'Arbo-val. on s'itaii faussement imagind que la piqtlre d'un insecte de ce nom en MuH lacatise raquo; (Ed. Nocard. Annales Pastcw; 1887, n⁰ 9).

C'est a M. Nocard que reviont lo merite d'avoir

MAMM1TE DES DflEBIS LAITIÜIRES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 3li

elabli la nature röelle do l'affection, ct d'ea avoir decrit le microbe patliogenc.

II. Mammite gangrencuse spontanec. Lesions. Mode do contagion.

L'araign6e peut frapper d'une fnoon gcn6ralc toutes los brebis luitiercs, mais attaint tout parti-culiürement los brebis exploitöes ihdustriellement on vue de la lalirication dos fromages.

laquo; (J'est alnsiquola plupartdcs troupeaux debro-liis laitic'M'os, oulrotouuos daik; lo Larzac pour la production du Roquefort, öprouventchaque annee, durant 1'epoquo do la traitc, dos pertes cousido-rablos du Tail, de raraignee raquo; (E. N.).

La maladie, mortelle pour los sujets atteints a do tros raros oxooplious pros, uiarcho avec une grande rapidite; eile duro lo plus generalcment de viugt-quatre a quarante-liuit houros. Dans certains cas, cetteperiodo moyenne ostabregee do quelques houros on au contraire augmentöcde un, deux,trois ol möme quatre jours : mais ce no sont la.quo des cas exceptionnels.

A i'autopsie dos animaux, on constate laquo; une in-Qltration considerable du lissu cellulaire sous-cu-tane, do touto la region inferieure du tronc, du perinee, ol dc la face inKrieure des cuisses; le liquide oedemateux a \ine tointe rouge accuseo; il est inodore. Los deux nuunclles, triplees dc volume, out sur la coupe uno leinte violacee due ä rinfillralion par la sorosihide tons lours elements conjonctifs : los lobules de la glande sont isolös comme par une veritable dissection hydrotomique. La cavite porilouoalo renferme une polite quan-tite do serosite roussdtre. Tout le reseau sanguin de l'intestin et du mesenterc apparait sous forme d'une riche arborisation uoiratro, (iui soluble due

312

MALADIES M1CR0BIENNES.

.i une congestion intonse. La muquousc intestinale est normale. La rate est petite, ratutinee, noirätre; son tissu est friable.

quot; Les poumons soul, volumineux, gorges de sang; mais ils ne prösenlent aucune lesion appreciable. Les eavites du coeur et tons les gros vais-


A,	Caltni-e. I,e	itz,	oc. 3
B,	l.aif. Mime	K''	raquo;ssiss

seaux renferment des eaillots noii-s, Ires fermes raquo; (Nocard).

Le lait et la sorosite do rcedeme sent les pro-duits virulents.

Le mode dc contagion de la maladio n'est pas encore eulieremenl connu, bien quo Ton sache aujourd'hui que les eanaiix excreteurs de laglande maininaire sont la porte d'entree du contage.

quot; Mais comment se fait cette penetration? Est-

MAMM1TE DES BKEBIS LAITIERES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 313

ce par la main do la personne chargee Je la traito ? C'est probable, mais il est difficile d'en donner la preuve. J'aiplusiours I'ois badigconue lepis de bre-bis laitieres, ä l'aide d'un pinceau impregne do culture virulente, sans quo la maladie apparut. Au contraire, l'injection de quolques gouttes do la meine culture dans le travon des meines fcinelles, injection pratiquee a Taide d'une fine canule mousse, incapable do produire la moindre erail-lure do lamuqueuso, provoquait le doveloppement d'uno mammite rapidoment mortelle raquo; (Nocard).

III. Mammite gangreneuse experimentale.

laquo; Vavaignee est une maladie emiuemment ino-culable.

laquo; Si Ton injecte dans los conduits galactophorcs d'une brebis saino quelques gouttes do la sirositi do l'üedeme, ou du lau fourni par la mamelle at-teinte, ou une culture pure virulente, on provoquo a coup sür la reproduction exacte do la mammite spontanee. raquo;

Mais Fespece ovine semble seule apte a contrac-ter la maladie experimentale, comme eile est seule it presenter la maladie spontanee.

laquo; L'injection d'un centimetre cube do culture virulente dans les tissusgalactophorcs d'une chevre laitifere no produit absolument aucun trouble dans la sante do la bete; le lait u'eu subitaucune alteration; quarante-huit heures apies Finjection, il no renfermo plus trace do microbe; son ensemon-cement ne donne pas do culture.

laquo; L'injection dans le parenchvmede la glande, ä l'aide do l'aiguille de la seringne do Pravaz, donne lieu ä une tumour chaude, douloureuse, un peu cedemateuso, qui roste localisce et linit par dispa-raitro, en douzo a quinze jours, sans laisser d'au-

l'H. HE M1CHOBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;jg

314

MALADIES MICROBIENNES.

lie trace f[u'une legere induration; a aucun nio-iiieut, le lait secrete par la mamelle iuoculee ne scmble altere; les bouillons Jans losquels on I'en-scmence restent steriles raquo; (Nocard).

quot; L'injection de cinq gouttos de culture virulente sous la peau d'un clievreau de six semaines ne donnc lieu qu'ä une lumefaction irdeinateuso, chaude et doulourouse, qui se rösorbe rapidement sans laisser de trace. raquo;

quot; Lo cheval, le veau, 1c poiu', le chien, le chat, Ic cobaye, jeunes ou adultes, ne semblent guere souffrir de l'injection sous-cutanee de fortes doses de cultures virulentes: 11 se produit au niveau de l'injection un pou d'ccdeme et de sensiliilite, par-fois une petite tumcur inflammatoire ; mais le tout disparalt tres vite.

quot; Le lapin Supporte molns bien l'action du mi-crobe. En general, il sc forme au point do 1'inocu-lalion une tuniefaclion chaude, douloureuse, ijui graduellement augmentc, genant le fonctionne-nient de la region, et qui, apres cinq ä six jours, se resout enunabcös chaud, dent le pus de bonne apparence I'ourmillelitteralomont du micrococcus de raraignee ; mais ranimal no paralt pas beau-coup souffrir; il continue a manger comine prece-domment. n

quot; Le microbe de l'araignee semblo done sc corn-porter, ä l'egard du lapin, corame celui du cholera des poules a l'egard du cobaye. raquo;

laquo; Une fois seulement un lapin a succoiube, qua-tre jours apres rinoculationde cinq gouttes de cul-ture virulente; son autopsie a montre des lesions analogues acelles quo prescntcnl les moutons qui meurent de Faraignee raquo; (Nocard).

Ü.

MAMMITE DES BREBI8 LA1TIKRKS.

3iS

IV. Le microbe pathogene de 1 Araignee Caraotöres morphologiques. Coloration.

Le microbe pathogene ne se rencontre qua duns d: hat, et dam la sirositi de I'mdime.

laquo; Lc lait le charrie Ahs le premier jour en quan-tites consitlernbles. raquo;

La si'Tosite de Luedeme le rcnferme egalement, mais en petite quantite. II est plus rare encore dans la serosite pöritoneale.

L'examen a Tötat frais n'est |)as aise, a cause des dimensions si petites de l'organisme.

La coloration tlonne de meillours ivsultals; eile est tres simple; les solutions hydro-alcooliques des couleurs d'aniline (rouges, bleues, violettes), le bleu de Lölller reussissent bien; les procedes de Gram et Weigert donnent de bons resultats.

Le microcoque de l'araignöe est an des plus petits qui se puissont voir, laquo; plus petit quo chaeun des deux grains qui semblent former le microbe du cholera des ponies. raquo;

laquo; Dans le lait des brebis malades, comme dans la serosito do I'oedeme, comme dans les differents milieux de cultures solides ou liquides, il roste ä Fetat do microcoqucs, isoles ou associes quatro a quatre, ou agglomeres en zooglecs peu volumi-ncuses : il no prond pas volontiers la forme en chainettes ou en chapelot. raquo;

V. Cultures du microbe de l'Araignfee.

Lo microcoque de raraigneo est aerobio et aussi anaerobio.

laquo; Sa culture est des plus faciles : tons les milieux connus semblont lui convenirpourvu qu'ils soient neutres ou alcalins. raquo;

L'ensemencement sera fait avec du lait, de la se-

quot;

tie

MALADIES MICROBIENNES.

rosito do l'oßdöme, on lo pus de l'abci.'s du lapin, recueillis purement.

1deg; Culture bans i.f.s milieux liquides a l'air et iians le vide.#9632;laquo; Dans lc* diffirents bouillonsle microbe se mulliplie avee unc prodigieuse rapiditc ; en moins do vingt-quatre heures le liquide est trouble, presque lactescent; apres quarante-huit licuros, le fond du vase est couvert d'une epaisse poucho blauchatro, pulverulente, resultant de l'ac-cumulation d'un nombre inflni de micrococous. Des 1c premier jour aussi, le bouillon, neutre ou alcalin au moment de renscmencement, est de-venu franchement acide, moins aeide cependaut que s'il avait ete ensemonce avec le streptococcus de la mammite des vaches raquo; (Nocard).

clt; Si Ton a soiu de faire cliaque jour une nou-velle culture, en prenant comme semenco une gouttelette de la culture de la vcille, lo microbe conserve ä peu pres Intacta sa puissance depullu-lation comme sa virulence; mais si on laisso la culture a 1'etuve sans la renouveler, le micrococcus perd rapidement la propriete do se reproduire. Pour lui, comme pour le streptococcus de la mammite des vaches, il semble bien que I'acidite qu'il provoque dans le bouillon soit la cause do la mort, car si Ton s'oppose k cotte acidification, en ajou-tant au liquide im peu de carbonate do chaux sterilise, la culture se prolonge, et le microbe conserve longtemps la propriete do se reproduire raquo; (Nocard).

La culture evolue plus abondammeut ot plus rapidement encore dans les bouillons Sucres, mais I'acidite du liquide apparait plus vite et plus intense que dans les bouillons non Sucres. Tres ra-pidement aussi la culture s'arreto et Forganismo meurt, a moins quo Fon n'ait soin d'ajouter au liquide une petite quantite de carbonate de chaux slorilisc.

MAMMITE DES BREBIS LAITIERES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 317

Les cultures dans le bouillon a l'abri de l'air, c'est-ä-dire dans le vide ou en presence de t;az inertes, presentent les mßmes caractöres.

laquo; Enscmcnce dans du lau de vache ou de chevrc, le microbe s'y multiplie avec une gründe vigueur; en moins de vingt-quatre heureslelait cslcoagule en masse, et le coagulum a une fermete extreme. La retraction du coagulum en exprime peu ä peu le pelit lait,sous forme dun liquide incolnre et transparent. Coagulum et petit lait sont tres acides et renfcrment en abondance le microbe ensemence raquo; (Nocard).

Dans le vide le coagulum du lait ensemence avec le microbe de l'araignee s'opere aussi vigoureuse-ment que dans les cultures faites en presence de l'air.

2deg; Cdltuhe sun milieux solides Transparents et uemi-transparents. Inocule en |iiqüre sur \age-latine-peptone, le microbe se developpe rapide-raent 1c long de la piqüre; puis des le deuxieme jour, a 20deg;, il commence a liquefier. La culture change alors d'aspect : laquo; Kapidement la liquefaction augmentc eu profondeur et en surface, en sortc qu'au cinquieme jourelloa envahi unegrande hauteur de la gelatine, dessinant dans Taxe de la piqüre une sorte de cöne renverse ou de bonnet de coton, au sommet duquel s'accumule la plus grande partie des microbes formes. Dans tonte la partie liquide, la gelatine a perdu sa transparence; eile est (rouble, un peu acide et fourmille de microbes. raquo;

lt;c Apres huit ou dix jours, loute la partie supc-rieure de la gelatine est liquefuie, et la liquefaction continue lentement en dessinant un cöne a large base raquo; (Nocard).

Si riuoculation est faite en stria, il se forme ra-pidement un large sillon blanchatre autour duquel liquefie la gelatine.

18'

318

MALADIES MICR0B1ENNES.

On peut egalemcnt faire des cultures en piqiue sur gilatine, dann le vide, ou en presence (Tun gaz inerte.

laquo; La culture s'effectae 1c long ilu trajet de 1'ai-guille, mais reste maigre ct discrete; la liquefaction du milieu solide ne commence guere avant huit ou dix jours, ot ne progrcssc que trös lente-mont raquo; (Nocard).

La culture sur plaques, d'apres la mötliode de Koch, donno aussi d'excellents resultats. laquo; Des le deuxieme jour, la gelatine est farcie de colonies reguliereincnt arroiulies, blancluitrcs, qui se dovc-loppent aussi bien ä la surface que dans la pro-fondeur; seulement celles de la surface grandis-sent plus vite et provoquent rapidement auluur d'elles la liquefaction du milieu; la surface en ac-quiert un aspect chagrinä tout special. Au microscope, la colonie suportlciello apparait comma une tache regulierement arrondie, lirundtre, homogene, entouree d'uno sorte d'aureole ä demi transparente. raquo;

h Cette action liqu^fiante, si puissante, du mi-crocoquo de raraignee s'exerce egalement, mais ä un moindre degre, sur le serum du sang gelatinise raquo; (Nocard).

Sur la ijelose en piquro, le microbe produit le long du trajet de l'aiguille une culture dense, blan-chatre, ä bords I'eslonnes. En strie sur la gelosc, mode de culture preferable au precedent, le microbe forme une pcliiculeepaisse, d'abord blanche, puis legerement jaunatre : cette pellicule setale de plus en plus sur la surface de la gelose.

3deg; Cultuhk sub milieus opaques. -La pomme dc terre constilue pour le micrococcus de 1'araignee un milieu de culture moins favorable que les milieux liquides ou solides transparents: la culture en ctfet n'y est jamais tres abondante. laquo; Elle y

SEPTICEMIE SPONTANfiE DU LAP1N. 319

affecte la forme d'une mince couche grisätre, vis-queusc, qui s'etale lentement en surface, dont les bords, largement festonnös, paraissent plus epais que la parlic contralojla aussi,la culture prend peu ä pen une leinte jauno, plus accusee que sur la gelose, niais il est ä noter que la zone periphe-rique de la culture, celle qui est de date ricente, a toujours cette telute grisätre on blanc sale qu'on observait au debut, raquo; (Nocard).

Resume.

Le microbe del'araign^eest unmicrococcusaero-anaerobie ne tuant que les brcbis soit spontanc-rnent, soit expörimeutalenient, et produisant mi abces clos chez le lapin inocule. II sc colore par les solutions hydro-alcooliques connucs, le bleu Löffler, le bleu Malassez; il prend les doubles colorations de Gram et de Weigert. 11 se cultive dans tons les bouillons; surtout dans les bouillons Sucres; il v perd vite sa virulence a cause de l'acidile qu'il produit. II liquelie la gelatine, il se devcloppe sur la gelose et la pomme de tcrro.

VIII

SEPTICEMIE SPONTANEE DU LAPIN

(inddit.)

Cost au niois de mars 1888 que nous avons eu pour la preniiörc fois I'occasion d'observcr et d'e-tudier cette maladie.

Elle sevissait alors a I'ecole d'Alfort sur les lapins eleves \iour les experiences. Plus de ein-

320

MALADIES MICROB1ENNES.

quante sujots furent infocles ot moururent dans un delai relativement court.

Koch (1878) a deteriuiiiü sur le lapin, par ino-culation dc maccTG de viande putrefiee, uno scpli-ccmie expcriincnlale, qui semble etre celle que Davaine avail dejä produite sur le memo animal par l'inoculaüon du sang de ba'uf putrcfle; aussi, des le debut, pensions-nous avoir affaire a. la meine maladie. Mais tandis que les cobayes resü-knt d Vinoculation dn virus de la seplkemie des lapins tie Koch, tout uu contraire Vaffeclion que nous etu-'lions iei est contraetie tres facilemenl par le eobaye, qui en meurt toujours dans un delai plus court que lo lapin. Cos deux maladies nous semblent done distinctes Tune de 1'autre.

D'ailleurs la scpticemie des lapins de Koch est purement experirnentale. Au contraire, la maladie quo nous etudions ici a ete observee sur des ani-mnux infeetös naturellement, fait qui lui donne, au point de vue pratique, une certaino importance.

I Animaux attaints par la oontagion naturelle. Mode d'introduotion du virus. Principaux symptomes. Lesions. Produits virulents du cadavre.

Le lapin prend la maladie par contagion naturelle, suivant le mode medial. Les sujets malades rendent des excrements qui souillenl le planchcr des niches, qui se melcnt ä la nounilure des animaux sains, et ces derniers absorbent ainsi la ma-tiere virulente : I'infection naturelle a done lieu par les voios digestives.

Le lapin infecte devient d'abord nonchalant: il mange peu; il reste dans un repos presque continual. Bientöt il s'isole des autres. II se tapitalors dans un coin de sa niche, ct reste ainsi pelolonne, ramasse sur lui-meme, le cou rotracte, le poll heiisse, les yeux fixes, a demi fermes, les oreillos

L'..

SEPTICEM1E Sl'ONTANEE DU LAP1N. 321

tombantes. A celtc pih'iocio, Fappetit a completo-ment disparu; la respiration est fortcment acce-lertie; 1c llanc bat trös vito. Les excrements de-viennent quelquefois liquides, et sontrondus sous forme de diarrliee. L'aniinal ost plonge dans la torpeur et ne so deplace que par la force. Eniin, dans les derniers moments de la vie, il proud la position decuhitalo et meurt le plus generalcmonl sans convulsion aucune.

La maladie, dont la duröe moyenne cst de vingt-quatre heures environ, marclio quelquefois avec une rapidite veritablement foudroyante. Dans ([uclques cas, au conlraire, eile durc un pen plus longtemps et se prolonge un, deux ou trois jours, suivant la resistance des sujets. Mais son issue, quelle que seit sa duree, est toujours fatale.

A I'autopsie, on constate les lesions particu-lieres aux sopticemics; il n'existe aucune formation de pus.

La face interne de la peau ost fortcment injec-tee et parait rougeatrc; les vaisseaux qui la sil-lonnent sent gorges d'un sang boueux, noir, de teinto asphyxique.

Les muscles qui rccouvrent lo thorax, ainsi quo ceux do I'aljdomen, sout couleur lie de vin et comme impregncs d'un liquide particulier qui lour donne au toucher une sensation de friabilitö visqueuse.

Si on incise I'abdomen sur la ligne blanche, et qu'en ecartant los deux bords do 1'incision on rogarde dans la cavitö abdominale, on voit que l'intestin uagc, pour ainsi dire, dans une serositö abondante, louche, rosoe, sanguinolente, albu-mineuse. Dans d'aulros cas, s'il y a pen de liquide, Fopaiiclicment ost jaunc citron, albumi-neux, souvent purulent.

Les intestins sont toujours rongedtres, conges-

322

MALADIES MICROBIENNES.

tionuos sur unc grande partie do leur etcndue ; lour muqueuse cst liyperhemiöe, cpaissie on certains endroits, et enduite d'un liquide rouge-brun, niüLisseux, quelquefois sanieux.

Lcs vaisseaux du mesonlero et de l'epiploon sont distendus par la grande quantitö de sang qu'ils contiennent.

La rate etle l'oie no presentontpas de lesions ma-croscopiques Jjien sensibles, si ce n'est une legere augmentation de volume et unc teinle gt'meralo plus foncee qu'elle ne l'est normalement.

Dans la cavile thoracique, on voit de la jileu-resie plus ou moins accusee ; le poumon, souvent tres congcstionne, ecchymosö, semble nagerdans un epanchcment rougeätre, alhumincux. Le peri-carde est loujours reni|ili d'un liquide, rarement sanguinolent, le plus souvent au contrairo inco-lore, legerementlouche, mais tonjoursalhuinineux.

Dans la vessie, l'urinc, s'il y en a, est tres forte-ment albumineuse.

Tolles sent les principales lesions macrosco-piquos que Ton constate snr les sujots succombanl ä l'infection naturelle.

Les produits virulents du cadavro sont: le con-tenu de rintostin,les differenls epauchements quo nous avons signales ci-dessus : serosite perito-neale, liquide pericardique, epanchementpleural. Le sang, les pulpes de rate et de l'oie sont aussi virulents, maisaun plus faiblo degre; ils contiennent peu do microbes : il laut, avant de les ino-culer, les exposer ä l'etuve (37deg;).

II. Animaux d'experimentation; choix des sujets ä ino euler. Mat.ieres d'inoculation. Symptömes et duree de la maladie experimentale. - Lesions.

La maladie est. transmissible par inoculation au lapin, ou cobaijo, et ä tous les oiseaux : poule, pin-

SEPTICfiMIE SPONTANEE DU LAPIN.

323

tade, faisan, dimlon, ok, canard, pigeon el moineau.

Les inoculations so font suit avcc les produits virulents des cadavres recueillis purement, soil. avec les cultures.

Nous conseillons surtout d'ittoculer le san^ ou les pulpes de rato et de foie recueillis purement; mais lorsque ces matieres proviennent de lapins ou de cobayes, il faut, avam do les inoculer, adopter la technique suivante, car, fieneralemeut, et surtout quand les animaux sont morts rapidement, elles contiennent pcu do microbes :

Le sang (ou les pulpes) est recueilli purement dans unc pipette Pasteur dent on ferine I'extre-inite eiTili-e ä la lampe ; cette pipette est, placee a 1'etuve Pasteur (37quot;) pendant quinze heures on moyenne. (irdce a la temperature do l'ötuve, les quelques microbes contenus dans le sang evoluent duns celui-ci, qui devient pour eux un veritable milieu de culture liquide. Au bout de douze heures. iis accusentlcur multiplication par un fort dega-gement de gaz aeide carbonique, formant de petites bulles gazeuses, tres visibles a havers les minces parois de la pipette, dans le sein du liquide.

A. [nocolation ad lapin. L'inoculation se fait ä l'aide de la seringue do I'ravaz dans le pöri-toine, dans les veines ou bien, simplement, dans letissu conjonctif sous-cntano du plat do la cuisse.

L'infection pout so faire par les voies digestives en melant la matiero virulente aux aliments de l'animal.

LaduriH! della maladie exporimeutale, qui est eu moyenne de vingl. heures, depend iloii seulement de la quantite et de la qualitö du virus emplove, mais aussi du mode d'iuoculation. Cost ainsi qu'inocules dans le peritoine, les lapins meurent plus vitc que si la inatiore virulente a ete intilaquo;-duite dans le tissu conjonctif sous-cutanö.

324

MALADIES MICROBIENNES.

Los sjmptömes et los lesions de la maladie sont identiques a coux que nous avons clecrits plus haut.

li. Inoculation au cobaye. Lecochon d'Inde jii-end bicn la maladie expi^!i'i)iientale, et en mcurl aussi vite quo 1c lapin.

Cost la un fait important, et qui styare la maladie qui nous occupe de la septicemie experimentalc du lupin ile Koch, et du cholera des ponies de Pasteur.

La matiero virulente sera inoculoe dans 1c pori-toine on bien dans le tissu conjonetif sous-culane : la region du plat de la cuisse, dans ce dernier cas, sera choisie de preference.

Deux gouttes do sant; traite comme nous I'avons dit plus haul, ou deux gouttes de culture sufflront ä tuer le sujet en moins de vingt heures.

Nous recommandons, pour I'etude, d'inoculer deux cobayes, Tun dans le peritoine, 1'autre dans le tissuconjonctif sous-cutanö. Le premier mourra plus vite quo le second et, a I'autopsie, on cons-tatera toutes les lesions soptiques que Ton rencontre choz le lapin; mais, comme nous le verrons plus lard, los preparations no niontreront dans ce cas que peu de microbes, car le cobaye inocule dans le peritoine racurt plutöt des suites de l'intoxi-cation due aux produits secretös par les microbes qu'il ne succombe aux lesions anatomiques causies pur eux.

Sur le cobaye tue par I'inoculation inlra-perito-neale, les lesions sont les memes lt;iue celles quo nous avons decrites choz le lapin mort par suite d'infection naturelle.

Voici les lesions que Ton reraarque clicz le sujel tue par L'iuoculation sous-cutanee.

Le point d'inoculation, la region de la cuisso et do I'aino corrospondant a ['introduction do la raatiere virulente, sont tumefies, u'domateux ; le memljre enlier est retracte.

SEPTICEMIE SPONTANßE DU LAP1N.

32:;

La face interne de la peau est rouge ; les vais-seaux qui la sillonnent sonf, gorges de sang.

Le tissu conjonclif sous-cutane ost envahi par un cedemegelatineux, comparable a celui que Ton voit sur le cobaye mort du charbon baetcridien. Cet oedöme est souvent generalise, mais toujours plus abondant au point d'inoculation que partout

Fig. .^:i7. Septicemie ppontanöe du lapin.

A,nbsp; Moineau. Pulpraquo;; dp rate. Leitz. oc. 3, o!gt;j. 1/12.

B.nbsp; Surface lt;lu foie. Cobaye. Meine grossissement.

ailleurs. Dans cette nigion, correspondant au plaf de la cuisse et ä l'aine, il est toujours sangui-nolent.

Tons les muscles superficiels ou profonds sonf de teinte lie de vin. Au lonelier, ils donnent une Sensation molle et visqueuse.

T.a cavite abdominale contient toujours un i^panchement plus ou moins abondant, dont les

I'll. rgt;K MIGROBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; to

326

MALADIES MICROBIENNES.

qualites physicxues varient : quelquefois il est jaunc orange, i)eu abondant, albumineux; dans certains cas il est abondant, et sanguinolent. Los vaisseaux dos sörouses sont remplis d'un sang noir et coagnlo.

Les inlestins, dilates par los gaz, prösentent en certains points do veritables ecchymoses ä contours irreguliers.

Lc poumon, ton jours quelquc pou congostionne, nage dans un öpancheincnt pleiiral, souvont sanguinolent.

Lo pericarde est distendu par un liquide se-reux, albumineux, incolore ct legerement louche.

La vessic renferme souvont do I'urine, qui lou-jours est albumineuse.

C. Inoculation au pigeon, a la poüiiiä ou a tout ai^-tiif. oiseau. Lc virus pent ici etl'C inocuhj dans les veines, dans lc peritoine; mais nous 1'inoculons do preference dans un des muscles pectbraux. On pout aussi infecter 1'animal par les voles digestives on melangeant la maliero virulente aux aliments.

Los symptömes que Ton observe choz les pigeons, les ponies inoculös,sont en tout semblables aceux du cholera des poules.

Quelques hcures apres 1'inoculation, I'oisoau devient triste, nonchalant, ses deplacements sont moins frequents; 11 s'isole des autres, so ramasse en boule, les plumes lierissces, los ailes trainantes, lc ecu retracte, les yeux presque entierement formes.

A cette periodc, I'appolil, d'abord irrogulier, a disparu completement. Des symptömes asphy-xiques apparaissent alors : les muqucuses appa-rentes, de roses qu'cllesetaieut, deviennent ternes, puls bleues. Lc sujet loinlje ensuitc dans un coma profond; il est souvont pris decoliqucs. Bientöt il

SEPTICEMIE SPONTANEIi DU LAPIN. 327

cst completi;menl, iacapable de se tonir sur ses pattes, et finit par mourir Jans un coma pro-fond, le plus souvent saus convulsions.

La maladie marche avec une grande rapidity. Nous avons vu des sujels mourir en moins do quinze heures : les lesions sont alors peu accusoes. Mais si, au contraire, I'aniinal resiste un jour ou deux, ce qui arrive lorsqu'on inocule le virus altonue, il so produit au point d'inoculation un veritable sequestre comparable a celui qui se forme dans le cas de cholera des ponies experimental, et dans le hog-cholera experimental des oiseaux.

Le muscle pectoral dans lequol a ete faite Tino-culation est tumelie ; a son niveau, le lissu con-jonctif sous-cutane est inliltre d'unc serosite sou-vent sanguinolente; la face interne de la peauest rouge et los vaisscaux qui la sillonnent sont dis-tendus par le sang.

Le point inocule est le siege d'une tumeur, de volume variable, comparable le plus souvent a celui d'une noix. Elle estdure, jauno a sa surface; eile crie sous 1'instrument tranchant; sur la coupe, on voit qu'elle se continue dans le muscle, en for-mant des prolongcmenls jaunes, flbreux, irregu-liers, ä bords linement denteles.

La cavite peritoneale contient souvent un epan-chement sereux, rarement sanguinolent.

La rate est hypertropliiee; sa forme, modiliee par la tumefaction, rappelle cello d'un haricot; quelquel'ois meine eile est comparable a une olive. Son tissu cst toujours Ires friable.

Lo foie no presento rien de particulier, si ce n'est une legere augmentation de volume, une extreme friabilite et une teinte cuito particuliero.

Le poumon, congestionne nage dans un epan-chemenl pleural pou abondant, jaune citron ou sanguinolent.

19'

328

MALADIES MICROBIENNES.

Lo pöricarde contient toujours un liquide ordi-nairement incolore, transparent, toujours albumi-ncux.

Teiles sont les principales lesions quo Ton rencontre et qui, corame on le voit, sont en tous points identiques ä cclles du cholera des poules.

Lo sang et les pulpes des organes parenchy-matcux constituent par excellence les matieres virulentes du cadavre. Mais en somuie, tout dans le cadavre est virulent, le microbe evoluant partout oil il y a du sang : la moelle osseuse elle-meme est virulente. Los epanchements pleural, pericardique et peritoneal le sont egalement.

lÜ \

III. Le microbe pathogene; sa recherche dans les liquides, les secretions pathologiques et les tissus organiques. Examen microbioiogique avec et sans coloration.

La forme et l'habitat prelere du microbe pathogene semblent changer, suivant 1'espece snr la-quclle il evolue : e'est aiusi que chez le lapin et le cobaye il proud presque exclusivement la forme d'un micrococcus on d'un diplococcus, tandis que chez les oiseaux on le voit de preference affecter La forme (Fun bacille a espace clair, semblable a folui du cholera des poules, quo I'on rencontre particnlieremout dansle sang et les organes pareu-chymatcux de la cavitc abdominale. Nous allons done, pour la clartö du sujet, l'ötudier d'abord sur 1c lapin et 1c cobaye, ensuite sur le pigeon.

I. Etude du siicrobe sur le lapin ou süb le cobaye. Danscesdeux especes, le microbe evolue de la memo facon, produit ä peu de chose pres les raemos lesions septiques; ce que nous dirons du lapin s'appliquera done egalement au cobaye.

On recueillera purement sur le cadavre de la sörositc peritoneale, plcurale ou pericardique, que

SliPTICEMIE SPONTANEE DU LAl'lN. 329

Ton examinera sans coloration (Verick: oculaire 1, obj. 8). On verra dans la preparation une quantite infinie de polits points isoles ou reunis doux ä doux, mobiles, so mouvant autour de leur axe dans 1c liquide söreux, rempli de deliris do cellules, et souvent do globules du san^. Ces polits points no sont autre chose quo los microbes do la sopticemie du lapin.

Apres cot oxarnen sommaire, ou colorera sur lamellos cos dilTöronts liquides, ouniieux, onappli-quera simplement des lamelles sur la surface du foie. On colorera onsuito dans les iliflörontes solutions hydro-alcooliques connues, violettes, rouges ou bleues; cinq minutes de contact sul'tisent pour obtenir la coloration. Ou examinera alors au microscope, ä Fedairago Abbe (;t avec I'objectif a imniersion. On se rendra ainsi compte de la forme en diplococcus dos microbes et de leur grande abondance.

On examinera ensuite le sang, dans lequel, si I'autopsie a ete faite aussitol apres la mort, on verra pou de microbes.

La quantite do micro-organisiuos rencontres dans les preparations dependra de la duree do la maladie et du moment plus ou nioins tardif auquel ou a fait I'autopsie.

Dans les cas foudroyants, on verra pou de microbes, car ils out ä peinc eu le temps d'£voluer et le sujet a succombc ä rinloxication par lours produits Jo secretion. II en est tout autremonl quand la maladie a dure plus longtomps et quo I'autopsie n'est pas faite aussitot apres la mort.

Los procedes do double coloration do Gram ou de Weigert no donnent ici aucun resoltal.

II cst avantageux d'employer le bleu do Loftier ou la liqueur colorante de Malassez : on obtient ainsi do tres fines preparations.

330

MALADIES M1CR0BIENNES.

2. Etdde jjl' microbe sub le pigeon, Qiu.'lles quo soient les especes volatiles inoculoes, le microbe evolue de la meine facon dans les unes comme dans les autres : il y prend la meme forme; aussi eo quo nous allons dire ici pour le pigeon s'appli-quera ;i tons les autres oiscaux.

A 1'examon du sani; sans coloration, on vcrra les globules ovoides,ä noyau,nagerdansle söium, puis uric multitude de points ref'ringcnts, unis deux a deux et mobiles, donnaut l'illusion de diplococcus, semblables ä coux du cholera des poules.

On leva ensuile des preparations de sang sur lamelles quo Ton colorera dans les solutions hydro-aleooliqiies diverses. Nous couseillons de preference une solution faible de violet de gentianc qui donne de belles preparations, dans lesquelles les globules seront, colores en violet pdle, leurs noyaux en tcinte plus foncee; entre les globules, on apercoit une grande quantitö de bacilles ä espace rlaif identiques laquo; ceux du cholera des poules, dont les deux poles seront fortement colores en violet, et relies entre eux par deux lignes tines, legerement teintes, eirconscrivant I'espace clair. Les bacilles apparaissont ainsi lorsque lenr grand axe est parallele au diametre du champ microscopique; si au coutraire il lui est perpendiculaire, le microbe vu seulement par un pole apparalt comme un point rond, fortement colore.

Dans le sang, les bacilles sont le plus souvent isolös, quelquefois reunis deux par deux. Dans les pulpes do rate ou de foie, on les verra souvent former de veritablesrubansconU;nantlrois,quatre, cinq ou six bacilles places les uns au bout des autres.

On retrouvera les bacilles non seulement dans les epanehements pathologiques contenus dans la cavite abdominale, pleurale, ou dans le pericarde,

SEPTICEMIE SPONTANEE DU LAPIN. 331

mais aussi dans l'uedeme superflciel avoisinant le point d'inoculatiou, ainsiqucdans lamoelle des 05.

Onexaminera eusuite la tumeur qui s'est formee au point d'iiiüculation. Dans ce but, on I'incisera d'un seul cou|) avec un bistouri bien propre passe plnsieurs fois au travers de la flamme de la lampe ä alcool ou d'un bee 15unsen. On grattera alors l'une des surfaces de section et Ton obtiendra une pulpe jaunätrc que Ton ecrasera entre deux la-melles, placoes ensuite dans les solutions colo-rantes. On y verra une grande quantitö de ba-cilles.

On colorera ensuite des coupes de rate, de foie et de la tumeur. Dans ce but, on se servira de la methode de Löffler. On sera trappe do la quantite prodigieuse do bacilles contenus dans le foie ou la rate : ils y torment do veritables amasäbordsirre-guliers occupantquelquefois tout le champ micros-copique.

Les coupes de la tumeur sont egalement tres interessantes ä studier. On les traitera par la methode de Löffler ou celle de Malassez. Les faisceaux stries, toinlos en bleu pale, sont casses en certains endroits, en voie de dogenorescenco : les stries sont par places ä peine visibles, tandis quo lesar-colemme, rempli de cellules embryonnaires, con-tient une grande quantite de microbes pathogenes. 11 se produit ici, exactcment, ce qui se passe dans le cas do cholera des ponies. Nous ne nous eten-drons pas davantagc sur l'ötude histologique de ce scquestre; nous tenons simplement ä faire remarquer son analogic avec celui du cholera des poules.

IV. Cultures.

Le microbe pathogenc de la scpticemic spontanee du lapin est aero-anaerobie. Quels que soient les

332

MALADIES MICROBIENNES.

differents milieux de culture dans lesquels on le place, 11 y prend toujours la forme d'un diplo-coccus Ires lin, mobile, morphologiquement sem-blable ä celui du cholera des poules.

A. Cultures dans les bouillons. Ce micro-organisme pousse rapidement et abondamment dans tous les bouillons simples, peptonises ou sucres, (/ Fair on dans le vide.

Pour ensomencer, onchoisit 1c sang do lapinou de cobaye, recueilli puremeut, qu'on expose a I'tHuve pendant quinze heures environ avant de l'ensemencer. Le sanj; de pigeon pent etre seme aussitöt qu'il est recueilli. On pent egalement se servir dos pnlpes de i'oie on de rate.

Les ballons ensemences sont places ii reluve (37deg;). Ddiize heures apres, 1c bouillon est trouble et contient uno grandtraquo; quantity de diplococcus tres mobiles. Si cm abandonne la cullnre ä elle-meme, les microbes se deposent au fond du ballon sous forme d'une sorte de poudre blanche ; le bouillon reprcnd alors sa transparence.

Les cultures ainsi exposees ;i fair perdent petit a petit leurs qualites virulentes. C'est ainsi qu'une culture de vingt jours est incapable de tuer.

Aussi, pour conserver des cultures virulentes, faut-il les recueillir dans des pipettes que Ton fer-mera ensuite aux deux extremites : grace a la ]ietite quantili'' d'air contenu dans ces jiiiic-ttes, les microbes continuerontä pousser, jusqu'äco (|uquot;ils aient absorbe Foxygene entier contenu dans le petit volume d'air emprisonne dans la pipette : alors la cull nre s'arretera, mais conservera sa virulence pendant plusieurs mois, car eile ne sera plus en contact avec I'air.

Les cultures dans le vide poussent un peu moius rapidement; le bouillon n'est sensiblement trouble qu'apivs deux ou trois jours d'eluve. La culture

SEPTICEMIE SPONTANEE DU LAP1N. 333

tombc ensuite au fond du tube et le bouillon rodo-vient limpide.

H. Culture sub gelatine. Lo microbe pousse trcs bien dum la gelatine. En stiie, il donne en quatre ou cinq jours unc trainee blanclio, lui-santc, denteleo sur les bords ct epaisse. En pi-qüre, (jn voit apparaitrn unc (ache blanche, vis-qucusc sur la surface de la gelatine, tandis quo tout autour de la piqürese forment de petitcs colonies blanches, rondes, qui, isolces au debut, no tardent pas ii se reunir.

La gelatine ne liquelie Jamals.

C. Culture sur gklosh. La gälose est aussi un milieu favorable ä I'lholution du bacille. L'as-pect de la culture est semblable a celui qu'elle prend sur gelatine.

I). Culture scr milieux opaques. Le microbe no parait pas pousser sur la pomme de terre.Nousen avons fait plusieurs essais qui n'ont iamais donnä do resnltat.

Resumfe.

Le micro-organismc de la septicumie sponlan^e du lapin est, un aerobio facultatif qui prend choz le lapin, le cobaye et dans les milieux de culture, I'aspect d'un diplococcus mobile, tandis que chez les oiseaux il prend loujours la forme d'un bacille ä espace clalr. II pousse abondamment ä Fair et dans le vide, dans tous les bouillons, sur la gelatine qu'il ne liquelie pas, sur la gclose simple on glycörinöe; il ne pousse pas sur lapomme de terrc.

Ii tue le lapin, le cobaye et tous les oiseau.r.

II se colore dans les solid ions hydro-alcooliques faibles, par la methode de l-ol'llcr, ou celle de Malassez, mais ne se colore pas par les doubles colorations de Gram ou do Weigert.

MALADIES MIGROBIENNES.

DEUX MALADIES MICROBIENNES EXPERIMENTALES

A. SEPTICEMIE EXPERIMENTALE DES SOURIS DE R. KOCH

Gelte maladiea ijtuötudiee par Koch (1878);c'est en inoculant du sang pulrelie sous la peau des souris qu'il decouvrit cctte affection. II tua ainsi toulc unc serie d'animaux. 11 montra qu'il sufli-sait de la simple piqüre d'une 6pingle souillee par le sang d'une souris morte do I'affection pour repro-duire la maladie choz une autre ct lui donner infailliblemeot la morl.

II. Experimentation sur les animaux. La maladie chez la Souris. Symptömes et 16sions.

La souris lt;h's maisons e.st 1'acilement infecloe, tandis qu'au coutrairo la souris des champs est refractairc. Los pigeons et les moineanx prennent aiseincnt la maladie.

Lo lupin no prend qu'exceptionnellement I'affection et a condition do lui inoculer le virus le plus virulent a liaulcs doses, (jrneralement, il cst sou-lement indispose legörement, puis ne tardc pas a recouvrer la sante : il est alors vaccine et resisti; k 1'action do toutc inoculation posterieure.

De preference on choisira pour les experiences la souris blanche,plus maniable et moins farouche que les aulrcs.

On inoculora soil du sang recucilli purement

SEPTICfiMIE EXPßRIMENTALE DES SOÜRIS. 33ü

sur im aaimal mort de la maladie, soil une culture. La quantitd de liquide iuoculee, dans cc dernier cas, sera superieure ä eoile iuoculee si l'ou emploie 1c saiilt;,': les cultures paraissent en cfCet un peu moins actives que le sang.

L'inoculation se fait dans le tissu conjonetif sous-cutanij de la region dn dos ou du plat de la cuisse. La duree moyenne de la maladie est d'en-viron de quaranto ä cinquante heures, eile pent quelquefois durer davantage.

On constate chez les souris des maisons ainsi infoctecs des svmplömes speciaux ties accuses et, qui permettonl ä cux seuls de porter un diagnostic ä peu pres certain.

La souris est abattue, ne se deplane quo iare-ment, ne mange plus. Les yenx d'nhord lar-moyants, se ferment a denii et ne tardent pas h. fitre atteints d'une eonjonclivitc qui provoque la secretion d'un pus blanchätro, collant souvent les deuxpäupiöres l'une a l'autre. Les poils sont alors fortement herisses; la souris est ramassee surcllo-meino, le dos fortement voussö et ne tarde pas a mourir.

On la trouve alors couchee sur le cötö, jamais sur le dos, la töte repliee vers le sternum, la colonne vertebrale fortement voussee; le cadavre, tres rigide, est ainsi recoqueville sur lui-meme.

A l'autopsie on trouve peu de lesions macrosco-piqnes, si cc n'est un leger gonflement de la rate et un pen de congestion de Ions les organes cn general. Quelquefois, on rencontre un leger cedfetne, tres virulent d'ailleurs, envabissant la region d'inoculation.

III. Le microbe de la Septicemie des Souris.

Cost dans le sang, dans la pulpo de rate et de foie quo le microbe de la septicemie des souris

336

MALADIES MICROBIENNES.

est le plus abondant ot s'etudie le plus aisemeiit.

Dans 1c sang exaniine sans coloration on aper-cevra tris difficilement do petits liaf.onnels rel'rin-gents dans la serositc comprise entre los globules rouges.

L'examen avec coloration est i)lus aisi'' : les so-

Fig. iiS. Septicfiinie de la souris.

A.nbsp; nbsp;Pulpe de rate. Souris. Leitz. or. 3, obj. i/12.

B,nbsp; Culture. Meine grossissement (Grant).

lutions hydro-alcooliques des diverses cowleurs d'aniline, le bleu de l.ölTler,la meUiode de double coloration de Gram, röussissent egalement et don-neront d'excellentes preparations, qui montreron) le tres fin bdtonnet pathogene de la septiconiio des souris, bdtonnet dont les dimensions sont analogues ä celles du barille de la tuberculose. On reconnaltra sur les preparations colnrees \n

SEPTICßMIE EXI'EKIMENTALE DES SOURIS. 337

presence frequeute du b;icille Jans les globules blancs.

Los coupe's d'organes(foie, rate, poumons, etc.) seront traitees par la rnelhode de Gram, c'est-ä-dire en double coloration.

IV. Cultures du bacille de la septiofemie des souris.

Lc microbe pst aero-anaerobie, mais parait pousser de preference dans le vide.

Pour semence, on prendra depreleronccdu sang, recueilli purement dans le eceur d'une souris recemment morte.

1deg; Culture dans les bouillons, Elle reussit dans tons les bouillons, en presence de l'air et dans le vide, a 37deg;; la culture est rapide; eile n'a aucun aspect special.

2deg; Culture dans la gjSlatink par piqure. Elle est fort importante, car eile donne un aspect caracteristique. La culture se fait le long du trajet de 1'aiguille dans toute la hauteur du cylindre gelatineux, puis eile irradie en formant des prb-longcments nuagcux dans la masse gelatincuse. Elle rappelle ainsi la culture en piqClre du rouget de Pasteur, avec cette difleronco quo, dans ce dernier cas, les prolongoments sont distiuctement isoles les uns des autres, ce qui donne a la culture I'aspect d'une petite brosso a bouteilles, tandis quo dans la septicemie les prolongements sont flous et nuageux.

La gelatine no liquetir ]jas. #9632; 3deg; Culture sür gelose kn strie. Inoculee en strie sur la gelose et placiie ä l'etuve (37deg;), la culture s'accuse en vingt-quatre heures par ses colonies rondes et blanchdtres.

4deg; Culture sur milieux opaques. Le bacillede la septicemie dos souris ne pousse pas surpommo do terre, tout au moins ii la surface.

10*

338

MALADIES MICROBIENNES.

Morphologie du baciUe de la sepliccmie des souris provenant des i-nllures. Dans ccs differonts mi-lionx de cultures, et surtout dans le bouillon, lo bucillo est plus long quo dans le sang des sujets morts. 11 prend quelquefois meine la forme d'un long ßlament ondule. Les preparations ou cultures seronl coloröes par les procedes connus.

Resume.

Le microbe de la seplicemie des souris est un hacille aero-anaerobie, et plus anaerobic qu'aero-liie. 11 tue la souris des maisons, non celle des champs ; il tue egalement les pigeons et les moi-neaux, et ä haute dose les lapins.

11 pousse dans les bouillons, dans la gelatine, sans la liquidier et en y prenant un aspect carac-terislique, sur la gelose. Les cultures sur poranie de terre restcnt sans rcsultat. II so colore dans les solutions hydro-alcooliques connues ainsi que par le precede Loffleret eclui de Malassez. 11 prend bien le Gram.

MICROCOCCUS TETRAGENUS

Lc micrococcus tetragenus, encore appele telra-gonus, a etc Signale et decrit pour la premiere fois par Gaffky. Celui-ci inoculait des souris sous la peau avec le produit du raclage dc la surface des eavernes tuberculeuses. Les animaux ainsi infec-tes no tardaient pas a succomber, et leur sang contenait une grande quantitö de microbes ronds, reunis quatrc par quatre.

La souris contractc la maladie en seric avec une

MIGROCOCCUS TETRA.GENUS.

339

grande facilite. Unc goutte dc sang d'une souris contaminee et morte, inoouleea unc seconde souris dansle tissn coitjonctif de la region dorsale ou de la cuisse, sufflt ä tuer ceile-ci en un temps relative-ment court, variant enlre quinze et vingt heures. A I'autopsie on ne Irouve aucune lesion inacros-

A,nbsp; Micrococcus tetrageaus. Culture. Leitz. oc. .'{, olij. 1/12.

B,nbsp;Staphylococcus pyogenesaureus. Culture. Leitz,oc. 3. olij. 1,1-.

copique speciale, sauf peut-6tre la congestion des visceres, rnaisa Uexamen microbiologique du sang il enesl tout autrcment.

L'examen sans coloration du sang, stir lamelles el a un grossisscmcnt moyeu Verick :oc. t: obj. 8 montre dansle plasma, et plus difflcilement dans les globules blancs, une quantity dc petits points refringents immobiles, reunis quatre par qualre en

lvt^M

340

MALADIES MICROBIENNES.

forme de losange, c'ost-;quot;i-ilirc o]iposL'S deux a deux.

La coloration domic de meilleurs resullats.

Elle se fait aisement dans les solutions hydro-alcooliques des couleurs d'aniline, mais il est preferable d'employer les methodes do double coloration : cello de Gram et celle do Weigert. On obtientainsi des preparations dans lesquolles appa-rait, nettement la disposition en tetrades des nii-crococcus. On peutegalement faire des preparations de pulpe do la rale ou du foie.

Les coupes d'organes seeolorent par les met bodes de Gram et de Weigert. La raethode de Weigert est, memo preferable ä cello de Gram.

En faisant des coupes lines dans l'epaisseur de la jgt;aroi d'une caverne provenant d'un poumon bn-main tuberculeux, on igt;eut parfois meltrc en evidence le bacille do la tuberculose en memo quo le micrococcus tötragonus. Voici le procede (juc nous conseillons pour cötte preparation :

Los coupes lines uno fois desbvdratecs dans l'al-cool absolu sont; placöes pendant vingt-quatre beurcs dans la liqueur rouge d'Ehrlich; olles sont ensuite decolorees dans l'alcooi et I'acide azotiquo a 1/10, etrincees ä l'eau. On colore ensuite legere-mentlo tissu an brun de Bismarck puis on emploie la inelbode do Gram ou celle de Weigert. Si les manipulations out i'ti? bien faites, on a ainsi une preparation typique dans laquelle on voit le tissu en jaunc clair, les bacilles do Koch en rouge et los micrococcus tetragonus eu violet.

Cultures du micrococcus tetragenus.

Le tetragenus est aerobie, mais nussi parfaite-ment anaerobic, ainsi quo nous Font nionlre les ilivers essais do culture dans le vide on en presence fie gaz inertes que nous en avons tenles.

MICROCOCCUS TETRAGENUS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;341

1deg; Culture dans leb milieux liquides. Le mi-crococcus Ißtragenus poussc abondammcnt en presence de 1'air dans tons les bouillons simples on peptonises. On ensemcnce une goutte de sang recueilli purement. Lcs liallons une fois semes sont places dans I'etuvG ä 37deg;. Au boul de quel-ques heures lo liouillon se trouble; puis la culture so depose au fond du matras on eile prend 1'aspect d'une poudre blanche, trös fine. En agitant legere-ment, cette poudre se melange do nouvoau au liquide en formant d'abord des tlocons que I'agita-tiondisperse. Gelte culture en bouillon a done un aspect assez caractcristique.

La culture dans les bouillons a l'abri de l'air ou en presence de gaz inertes est facile, et plus abon-dante que la culture en presence de Fair.

2quot; Culture sur gelatine. En piqih-e, on ob-tienl. en quatre ou cinq jours, a. la temperature de la chambre, une culture blanche, nacree, s'eta-länt sur la surface superieure de la gelatine et simulant les contours d'une feuille de nenupliar. Le long de la piqnre il se forme de petitos colonies blanches, ovoides, serrees d'abord lcs unes centre les autres, puis isolöes, et, cela d'autant plus qu'elles evoluont plus profondement dans I'epais-seur de la gelatine.

En strie, la culture forme une ligne blanche, nacree, luisante et granuleuse. Les cultures ne li-quetient pas la gelatine.

3deg; Culture sen gelose. Elle offre les memos canicteres que celle faito sur gelatine.

4deg; Culture sur pomme ue terre. Le micrococ-cus tetragenus pousse tres bien sur ce milieu opaque : il donne une culture blanche et d'aspect vorni.

Examen des cultures, Dans ces cultures liquides, examinees sans coloration, on voit le mi-

342

MALADIES MICROBIENNES.

crococcus dispose en tctradcs. Cellos-ci peuvent so r6unir et former des series de zooglees, mais on distingue nellcinent la disposition en tetrades dos microbes dans cos zoogMes. Cost surtout ce dernier aspect qua proud I'agont dans les milieux solides. Lc microbe sans coloration parait immobile. On emploie pour eolorer les cultures la merae technique que celle que nous avons indiquee ä pro-pos du sang.

Pour les cultures nous conscillons surtout d'em-ploycrla methode de Cram.

Lo micrococcus tetragenus est un micrococcus

on lolrados, aero-anaerobic, immobile, qui tue la souris et pousse dans les cultures liquides ä Fair -ou dans le vide, sur gelatine, sur golose et sur la pomme do torre. 11 so colore dans les solutions hydro-alcooliques legeres de tuebsine, etc .., et prend lc Gram et le Weigert.

OH A PURE IV

MALADIES MICROB1ENSES SPECIALES A L HOMME.

I CHOLERA ASIATIQUE

I. Definition historique.

Lc Cholera asiatique cst uno affection eruU'mo-^pidemique de l'Indoustan, qui,partant de son foyer original, a parcouru 6pid6miquenient a maintes reprises l'Orient ct I'Occident.

C'est uno affection exclusive a 1'homme; il n'existc chcz les animaux aucune affection iden-tique, et les denoniinations imposeos a plusieurs maladies infectieuses animales, telles que Cholera (te foules, Cholera ilu pore, iinpliqucut, non pas une identite de nature, mais une analogic phis ou moins lointaine dans les symptdmes et les lesions intestinalcs.

L'histoire bactäriologique du Cholera asiatique a etc tracce magistralement par H. Koch, dont lea travaux out. mis hors do doute la nature micro-biennedo ['affection (1).

(1) Tout röccniniont M. Garaaleia a anoonc? ä l'Acadämio ilea sciences la döcouverte d'un vaccin du cholera asiatique. Son im-

344

MALADIES MICROBIENNES.

II. Lesions et modes de propagation du Cholera asiatique.

Le Cholera asiatique evolue sur I'homuic avec une rapidity ires variable.

Quelques malades succombent en peu d'heures a une attaque foudroyante; d'autres sont tues moins vitc, et succombent, ä un moment variable dc la premiere periode (pöriode algide); d'autres enlin succombent plus tard encore, dans la deuxiöme periode iperiode de reaction).

Les lesions du Cholera asiatique sont surtout, sontpresque exclusivement intestinales, mats elles diffferent beaucoup suivaut. I'epoquc a laquelle a succombe le malade, et e'est la, an point de vue bacteriologique, un point capital.

Dans le Cholera I'oudroyant, il oxistc a peine quelquealteration de l'intestin, marquee par de la t umel'action et une col oration rosee de la muqueusc;,, mais lo canal intestinal est rempli d'un liquide blaucliatre, louche, inodore, tenant en suspension de petits flocons muqueux, ou grains riziformes.

Si le malade succombe plus tard, a un moment quelconque de la piSriode algide, la muqueuse intestinale est plus alteree : eile est congestionnee surtout au niveau de Fileon, et prend en ce point une coloration intense (hortensia) tout ä fait spe-ciale; les follicules dos de l'intestin grelc, surtout dans la dernierc portion, prösentent raspeclconuu sous le nom de psorentcrie; le liquide ä flocons

portante not'¹ indtque en outre la transmissibilUä du cholera au Pigeon aprös un passage .sur lo cobaye, et l'augmentation de virulence dubacille cholerique par passages sur le pigeon. Le iletermi-nisme do ces experiences n'a pas ete expose sui'fisainment par M. Gamaleia dans sa note : nous ne pouvons done que mention-ner ici son he;iu travail, dont il doit, ;( lire!quot; delai, faire la preuve devant une commission de rAcademie des sciences.

CllOI.Kll.V ASIATIQÜE.

345

muqueux, a grains riziformos, dont nous parlions phis haut, emplit rintestin.

Le sang nst poisseux, ct prend un aspect tout a fait caracteristique.

Si le malade nieurt ä La periodo de reaction, apres une evolution dejä longue do 1'affection, on nc trouvc plus dans l'intestin de liquide riziforme ; le sang a repris ses caractferes normaux, mais do nombreuses congestions et inflammations visce-rales sc sont developpecs (congestion pulmonaire, brouchite, pleuresie, etc., etc.).

C'est par les scllcs des malades que Ic germc cholerique est rejetö au dehors : ces selles sonil-lent les linges, les ell'ets des malades etc.; clles peuvent soil, directcment, soit indircctement, elrc projetees dans les rivieres ct cours d'eau.

Cquot;ost en portant a sabonciic sesmains souillces au contact des linges et des ell'ets impregues par les selles cholöriques, c'est en buvant I'eau qui a recn les dejections cholöriques, que I'individu sain conlractc le cholera.

L'air nc joue qu'un ;röl(! lout a fait efface, ou memo iml, dans la propagation de 1'affection.

III. Le bacille du Cholera asiatique. Sa coloration. Sa culture.

Le bacille decouvert par Koch est connu sous le nom dc komma bacille, bacille. viri/ule, ce qui point une do ses apparences morphologiquos, el, aussi sons celui de spirille du Cholera asiatique, co qui rappelle une autre apparence du meine organisme.

L'examen est facile avec et sans coloration.

Kxamine sans coloration, le bacille du Cholera asiatique so montre Ire* mobile, quelle (jtie soit sa provenance.

laquo; Los iiulividus adultes dans les preparations fralches, incolores, soul nettoment rccourbes;

24ü

MA.LAÜIES MICR0B1ENNES.

(antöt ils sont en arc de rayon tres graad, tantöt ils conslituont un demi-cercle tres neltemeut ties-sine raquo; (Flügge). Les individus Jeimes sunl pen recourbes, ou limits.

La coloration du bacillc virgule est des plus simples; Imiles les solutions hydro-alcooliques des

A, Gouococcus, l'us bleimort'hagique. Leitz, oc. 3, olij. 1/i^. It, Cholera asiatique. Culture. Leitz, oc. #9632;'{. n\(\. 1/12

couleurs d'aniline et lo bleu de Löffler reussissenl bien, mais la melhode Gram echone.

Colore, le bacille du cholera so montre sous divers aspecls; long de I u. ö a 2 ;/. ii, large de 0 u. i, tantöt il apparaitra sous forme d'un batonnei droit, tantöt il prendra im aspect recourbö figurant nneparcnMse, un demi-cercle; parfois deux bätoimets ainsi reenurbes se juxtaposent bouf ä bout, et le bacille prend alors la forme d'une S;

CHOLERA ASIAT1QUE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;347

si plusieurs bacilles courbes se ])liicent ainsi les uns au bout des autres, l'S s'allongo et l'on a la spi-rille cholirique.

La forme reelle du micro-organisme puralt done etre la forme courhe, et l'aspect rectiliinie (aussi vl plus frequent dnns les preparations colorees que la funne courhe) resultc sans doutc d'une disposition speeiale sous le microscope, la partie raoyenne du bacille etanl seule ä la vue, les deux exlremiles echappant ä l'ceil de l'observateur.

Daus les vidlures meiennes des formes nouvelles apparaissent, formes d'inüölulion, dont une des plus frequenles est la dilatation enorme d'une des extremites du bacille (corps mürlfunne de Ferran); d'autres formes bizarres telles ({ue la forme sphe-rique, etc., peuvent encore se montrer dans ce cas.

Le bacille-virgule est surtout aerobie, mais il est aussi, dit-on, anaerobic; il pousse dans les milieux artiflciels en presence de l'air, et aussi dans le vide ou en presence de gaz inertes (1); la temperature qui lui convient le mieux est comprise entre 30 et 40deg;;au-dessous de 10deg; il ne se developpe pas, mais garde touto sa vilalile ; il est tue de üö ä lö⁰; il est bien probable qu'il u'a pas de spores.

La culture du bacille du cbolera reussit sur tous les milieux artiflciels: bouillons, lait, gelatine, gelose, serum, ponune de lerre, etc. La i/c'laline donne des cultures caracteristiques du plus haut interet.

La condition essenlielle de reussite est la neu-(raKW parfaite des milieux, ou mieux une legere alcaliuite.

(o) BouiUo)is. La bacille cholerique so developpe parfaitement en 24 heures dans le bouillon

{!) Nous ü'avons pu jusqu'ici faire aueuue tentative de culture pour coutroler cette assertion d'auteur? alleniands.

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MALADIES MICROBIENNES.

mis a rotuvo. La culture n'a aucuae apparence

spüciale.

L'ne culture fort intöressante est la culture en lame creme dans une goulfe de bouillon, h la temperature de l'etuve. Cost dans cette culture que le bacille se döveloppe le mieux en longues spirilles qui peuvent avoir jusqu'ä 20 et 30 circonvolutions (Flügge).

(6) Ldil. Le bacille du cholera pousse bien dans le lait, dont il ne change ni la couleur iii la reaction.

Le bacille-virgule sera ensemence dans la gelatine pur piqrire, et aussi cultive sur la gelatine en pkiqucs.

I. Ensemencement par pii/drr. Le döveloppe-ment est relatlvement lent et l'aspect caracteris-tique u'apparait qu'au bout de 3 ou 4 jours. A ce moment on constate que la surface do la gelatine s'est creusee, s'est deprimee ä la partie supericure du trajctde lapiqüre, ce qui donne Tillusion d'une bulle d'air emprisonnee; autour de cette partie deprimee, la culture d'aspect blanchätre tlocon-neux a pris rasped d'un entonnoir : la gelatine est liqueliee dans toute cette partie; sur le reste du trajet de la piqilre, au-dessous de cette sorte deutonnoir, la liquefaction commence ä se pro-noncer; eile se fait de haut en bas sur tout ce tra-jct dans les jours suivauts ; puis la liquefaction progresse, et l'aspect caracteristique se perdjau bout de 7 ä 8 jours la gelatine est liqueliee dans les 2/3 supcrieurs, eile contient un grand nombre de llocons blanchätres ; la liquefaction nedevient complete qu'au bout d'un temps plus long.

II n'existe actuellement aucun microbe lique-

CHOLERA A.SIATIQÜE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;349

fiant la gölatiue sous cet aspect tout spöcial.

2. Culture sur plaques. La colonie du baciilo-virgule prend sur la plaque de gelatine un aspect egalemont caractöristiqne. Tout d'ahord la colünit^ se developpe sous la forme d'un petit disque blanc jaunätre, ä contours irröguliers, oudules. Mais des le 3deg; uu 4deg; jour la colonie s'est elargie, et, lique-fiant la gelatine, olle a pris une ligurc loute parti-culiere.

Kxamineeä un fälble grossissement, eile montre un centre gvanuleux, au tour de ce centre un cercle gra-nuleu.r, ondule, siniieux; entin au dela un deii.riemc cercle clairnon granuleux; la gelatine est liifiietiee dans toutl'espace iuclus dans le premier cercle.

La liquöfaction augmentant, la colonie perd bientot son aspect caractßristique.

{d] Gelose. Le bacille du cholera asiatique se developpe bien sur lagelose; en 24 heures a retuvo, la culture est abondante; eile est blanche, sans caractere spöcial.

(e) Pomme de terre. Sur la pomme de terre en-semencec, et placee a t'etuvc, apparall en 24 heures une culture epaisse, de couleur brun clalr, cafe au lait.

En resume, le bacille du cholera asiatique pos-sede un aspect morphologique assez spöcial, niais qui ne lui est pas exclusif, ainsi que nous le ver-rons tout ä Theure; il a des reactions de culture sur gelatine qui lui sont, a l'heure actuelle, abso-lumentparticulieres et lecaracterisenl pleinement.

Tirai-tlon chimique des cultures du bacille-virgule {Cholera-Uoth).

Si on ajoule, meine des les premieres heures qui suivrnt Vensemencement, a une culture pure de bacille du cholera dans du bouillon ö ä 10 p. 100 d'aeide chlorhydrique pur, on observe au bout de quelques minutes une coZoraMonrose-wo/ef, dont l'in-

PR. DE SlICnOBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 20

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tensile croit rapidement pendant une deini-hcure. Seul de tons les Imcilles connus acluellenient, en dehors du bacille-virgule, celui de Finkler, apres Ijoura de culture a. 37deg;, donne cotlc meine coloration, mais moins promptement.

Getto (('action colorante connue sous le nein de Cholera-Uoth est done un signc do premier ordre, caracteristiquo du bacille-virgule (0. Bujvid, An-nales Pasteur, 1887 et 1888).

#9632;ir

IV. Localisations du bacille-virgule dans lorganisme des choleriques. Diagnostic microbiologique d'un cas de cholera.

Lo bacille-virgule n'existe ([lie duns I'intestin den choleriques; il a etc vainement cherchi dans les autres jMfties dc I'organisme. Les cas les iiius favorables ä sa recherche sont les cas foudroyants dont nous parlions ci-dessus : le liquide a grains riziformes qui remplit l'intestin gröle est souvent, duns ces cas, une culture ä pen pies pure du bacllle.

Lorsque la survic a ete plus longue,par exempli; lorsque le malade succombo dans le cours de la periode algide, le liquide intestinal contient tou-jours le bacille-virgule, mais associe ä des germes etrangers qui augmentent avee la duree de la ma--ladie, et qui peuvent arriver ä dominer et masquer le bacille virgule; ä cette periode eclui-ci a penetre dans la mnqueuse intestinalo, ä la faveur de la desquamation epitheliale, ainsi que le montrent les coupes do cette muqueuse.

Dans la periode de reaction, l'intestin ne contient plus que des microbes etrangers : le bacille virgule a disparu.

La diarrhde des choleriques, qui n'est que le resultat de l'expulsion, pendant la vie, du liquide intestinal que nous venons de decrire sur le cadavre, contiendra done ou dvlnit presißic exclusivenmit le

CHOLERA ASIATIQÜE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;3ol

bacille-virgule; plus revolution sera longue et plus les microbes strangers apparaltront, et aug-menteront jusqu'ä masquer le bacille pathogene dans la diarrhre (1); onfin ä la periode de reaction lo bacille-virgule aura completement disparu.

La preuve de l'existence du bacille cholerique sera done fort aisee ä faire tant sur le cadavre que

(I) Voici un moyen ingSnieux dont nous empruntons la description ii M. Van Brmengem (in Bizzozero et Firkett, p. 320), moyen (jui parait donner da bons r^sultats dans cette recherche delicate.

11nbsp; ;i pour but de faire developper le bacille-virgule en si petite quiuilite qu'il sott (i;ins les selles, de faeon ä ceque la recherche en soil ensuiie rendueaisee.

laquo; On place dans une des cloches disposees eo chambre humide servant ä la culliire sur pomme de terre, etc., et au besoin dans une soucoupe ou une assiotte plate recouverte d'une cloche, un morceau de toile replid en hnit doubles, ou uns ieuille de papier ä filtrer qu'on imbibe d'eau. On y etend quelques centimetres cubes de la matiere intestinale, et on laisse le tout expose pendant quelques heurea ä une temperature assez elevee. S'il exists dans le liquide intestinal des microbes choleriques, meme en quantite infininiont petite pro-portionnellernent aux autres micro-or^anismes, il ne tarderont pas, grace ä leur multiplication exti-emement rapide, ä s'accumuler i la surface du lingo et ä le recouvrir entt^rement. Leur norabre eu

12nbsp; heures sera assez grand pour quo les autres bacteries soient pour ainsi dire perdues dans lour masse.

m On peut aussi melanger les liquides diarrh^iquos avec de la gelatine nutritive diluee h l/10^e. ou du bouillon sterilise, de facon ä obtenir un milieu de culture liquide qui iavorisora davantage encore raccumulation des virgutes k leur surface. Grace h leurs mouvenients propres, et ä leur avidite pour l'oxvgcne libre_; elles ne tarderont pas ä y former une abondante vegetation. J'ai employe ce [irucede avec les meilleurs lesultats dans les conditions suivantes : je delaye une centaiue do centimetres cubes de la matÜM-e intestmale dans une quantite double ou triple de bouillon do bceuf sale et legerement alcaiinisö; le melange est verse dans un vase h fond plat, de mauiere ü ce que le liquide soit en couche peu epaisse de 3 ä 4 centimetres de haut, et largement expose ä l'air. On a sein, en outre, de placer le recipient dans un incubateur ti 37quot; pendant 12 ä 24 heures, ou :'i defant do cet appareil. au voisinage dquot;un foyer. gt;laquo;

f.c bacille-virgule ainsi rendu abondant et predominant sur tons le? autres organismes concomitants sera plus aisement decele par Texamen microscopiqne et la serie des epreuves de culture.

#9632;VM

MALADIES MICR0B1ENNES.

Sli

dans la diarrhee du sujet malade au debut, mais devicndra de plus en plus difficile a mesure que revolution s'avancera.

L'examen microscopiquo du liquide intestinal et dos grains riziformes qui sufflrait presque, dans les cas typos du debut,, serait impuissant a etablir le diagnostic baetöriologique dans les cas plus anciens.

On a propose, dans los cas oil lo bacille-virgule so trouve associe a un plus ou moins grand nombrc lt;le germes etrangers, de mettre a profit la pro-priete que possedo le bacille-virgule do so deco-lorer par le precede de (Tram pour en rendre la recherche plus aiseo : la lamelle chargee du pro duit intestinal sera traitee par la mehodede Gram (violet de (Irani, liqueur iodo-ioduree, alcool), puis, apres decoloralion, passee dans une solution hydro-alcooliquedel'uclisine,ou de rouge diamant. Les microbes intcstinaux vulgaircs gardoront pour la plu-part la coloration premiere, c'est-ii-dirc le violet; los bacillos du Cholera, decolores par I'alcool, pren-dront la douxiemo coloration, c'ost-a-dire lo rouge. Cotte methode ost interessante et pout ä Foccasion rendre quelques services, mais ello ne vaut pas, et de beaucoup, la methode d'isolemont du bacille par les cultures sur plaques de gelatine.

Lo procedc le plus stir, en effet, pour mettre en evidence le bacille-virgule dans le contenu de fintestin ä toutes les periodes oil il s'y trouve, es^ In culture sur plaques de gelatine.

Nous avons decrit ailleurs la technique de cette culture; nous avons decrit ci-dessus I'apparonce des colonies du bacille-virgule; nous n'avons plus ;i y rovenir.

Le liacille isole par cette methode, on comple-tcra la demonstration par des ensomencements en piqiire sur la gelatine, des ensemenccments

Uj.

CHOLERA. AS1ATIQUE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;383

sur pommc de tcrrc, sur gelosc, dans 1c bouillon, en memo temps qu'on vcriliera par I'examen microscopique loscaraeteres iuorphologiques,bio-logiques et de coloration du bacillc cultive.

Les caracteres divers du bätoille-virgule, et en partieulicr la culture sur gelatine, soul a ce point typiques qu'il ne pourraexister aucun doute apres la serie des operations que nous venous do passer en revue.

Lorsque Koch publia ses premiers travaux, il lui fut fait de nombreuses objections, el la forme en virgule fut retro uvoe et decritc par divers auteurs sur d'autros bacilles de diverses provenances.

De plus, parmi ces bacilles en virgule d'origines vari('es, ceux que Finkler et Prior avaient trouves dans les nialiercs diarrlieiquos de soi-disant eas de cholera nostras, ceux que Deneke avait rencontres sur de vieux fromages, liqnefiaient la gelatine, et prenaient sur les plaques et dans les ensemen-cements en piqüre une apparence un pcu analogue ä celle du bacille-virgule.

En realite il n'v a entre les bacilles-virgules de Finkler et Prior et Deneke et le bacille du Cholera asiatique aucune identity : Koch a parfaitement montre que la culture sur gelatine en piqüre etablit une dinV'rence radicale entre les premiers orga-nismes et celui qu'il a decouvert.

Dans celle culture les bacilles de Finkler et Prior se coinportent d'une facon toute differente de ceux de Koch.

laquo; Cullives dans les memes conditions que les bacilles de Koch, ils out pour resultat de former, dejä apres 48 houres, un canal assez gros ressem-hlant a un sac rempli parun liquide trouble.

laquo; Apres 24heures, encore la liquefaction atteint les parois du tube; la partio superieure de la gelatine est presque cntierement liqneliee, et la

-2(i i

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MALADIES MICROBIENNES.

partio profonde tin canal s'est elargie en proportion (Flügge). raquo;

Quant au bacille de Uenelce {Spirillum tyro-genum), voici les caraetöres de son ensemencement dans la gelatine en piqüre :

laquo; La lii[iiefa('tion de la gelatine esl beaucoup plus energique que par le bacille du Cholera, mais pas aussi forte quo par le bacille de Finkler...

(i 11 se produit a eel endroit (sur le trajet tie la piqarei un canal en forme de sac occupe par la gelatine liqneliee. Do ce point la liquefaction s'eteml alors, iiltörieuronient, a toute la gelatine raquo; (Flügge).

V. Recherche du bacille de Koch dans les linges souilles par les dejections choleriques. dans I'eau. etc.

On prut avoir ä recherchor dans quelques cir-constances le bacille du Cholera dans les linges souilles par les dejections des malades. Getto recherche sc fora sur les raatiferes qui contaminent lo Huge comme eile se fait dans la diarrliee dos sujets. Nous avons ci-dessus insiste sufflsamment sur ce point.

Recherche amis I'eau. Kocb a, pendant son sejour dans 1'Inde, retrouvc le bacille-virgule dans uno mare oil los Indous du voisinage, cholerises ä ee moment, venaient chercher leur eau potable en meine temps qu'ils y faisaient leurs ablutions, et y deposaient leurs matieres lecales.

Lo meilleur inoyen de deceler lo bacille-virgule dans une can suspecte serait, le cas öcheant, la metliode des cultures sur plaques, suivio do toutes la sörie des cultures el di^s examens appropries.

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VI. Cholera experimental.

La serie des experiences que Ton pout tenter sur les animaux avec 1c bacille-virgule est, des plus

ILj

CIlOLlBA ASIA.TIQUE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;3b;i

restreintes; soul lo cobaye peut filrt; tue par I'in-gestion de cultures pures, et sculement encore grace a un disposilif expörimental tout particulier. II i'aut d'abord alcaliniser le gontenu stomacal de L'animal, en lui iujectaut ii la sonde uno .laquo;olulion de carbonate do soude a .^ri p. 100; apres 20 minutes on injecte dans I'estomac la culture du bacille-vir-gule, ct iinmodiatcniont on fait punctrer dans la cavite peritoneale, a la seringue de Pravaz, une quantite de tcinlure d'opium qu'il taut porter ä 1 centimetre cube par 200 grainiiu's du poids de ranimal.

laquo;Apres que 1'onaadniiiustrc cetle dose d'opiuiu, il survient une somnolence qui dure une demi-heure a uno hcure; ensuite l'animal rcdevient tout a fait bien portant. Le soir du jour iiienie, on 1c jour suivant, les animaux perdent l'appötit, its out un aspect maladif; pen ii peu on voit apparaltre une faiblesse des extremites posterieures ressom-blant a do la paralysie. La respiration devient rare et se ralentit. Ensuite les phenomencs graves d(^ collapsus apparaissont; il seproduitun refroi-dissement sensible, notamment a la töte et aux extremites; enlin la mort survient.

laquo; A I'autopsie on trouvo I'intestin gröle forte-men! liiniclie, et rempli par un liquide incolore, aqueüx, floconneux. L'estomac et le cojcuni no con-tiennentpas, comma d'ordinaire, des masses solides, mais une grande quantity de liquide.

laquo; Le contenu de I'intestin grrle est compose presque exclusivement par une culture pure de bacilles-virgules raquo; (Flügge),

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MALADIES MICROBIENNES,

FIEVRE TYPHOIDE

m¹ ?sect;#9632;

La flevre typhoide rst une affection qui n'atteint que I'hommo et dontles deux principaux elements sont, ainsi que rindiquo In nom, la fievre a typo continu, et Vuhtilti:mcnl.

On connait en veterinaire une affection equine qu'on dcsigne sous le nom de /ietre typhoide, ma-ladic laquo; iafecticuse et contagieuse, caractorisee cli-niquement par la slupefaction des Sujets, et la coloration acajou des nmqueute^ dös Inperiodc d'invasion. raquo;

Dans ccs derniers temps M. Servoles a chcrclie ä deraoiitrer l'identite parfaite des deux affections typhoides de l'homme et du eheval. Gelte these cst radicalement fausse; il n'y a enlre I'affection Im-maineet I'affection equine qu'une identite do nom et nullement de nature (f).

C'est ä Eberth qu'on doit les premieres notions precises sur le bacille pathogene de la (ievre ty-phoide (1880-1881), dont il dömontra d'abord la presence sur des coiqies non colorecs de rate et de ganglion mosenterique : il n'est done quo juste de donner ä ce micro-organisme le nom de bacille d'Eberth.

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il ^;:

i\] M. .Nocarii. claus ttao de ses chroniques du Hecueil de medt-rine ve/i^:rinaire (iquot;gt; \\na 1888), a resume los difTerences radicales qui s^parent lt;:es lieux alTections : le Imrillo d'Eberth, constant dans la rate do riiommo typhique, fait constamment döfaut dans la rate du cheval typhique; rinoculation ou L'ingestion do cultures i'raiches ilu bacille d'Eberth ne provoque chez lo cheval aueun Symptome qui puisse rappeler I'afVection humaino ou equine.

KIEVRE TYPHOIDE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;libT

Koch conflrma, peu lt;le temps apres, la döcou-verto d'Ebcrth.

Gaffky consacra au bacille d'Eberth un travail fort com[)lct: c'est a lui quo nous devons les premiores cultures de ce bacille.

En France, nos amis Cbantemesse et Widal out public en 1887, dans los Archives dc physiologie, un excellent article sur lo bacille tvphogene et son role etiologiiiue : nous foronsa leur travail de larges emprunts.

II. Anatomie pathologique et modes de propagation de la fifevre typhoide.

Les lesions primordiales lt;le la (ievre tj'phoiide affectent I'intestin, la rate et les ganglions misentc-ngiMes; infiltration et necrose ulcerative des plaques de Peyer et des follicules clos de I'intestin ; Hypertrophie et congestion de la rate et des ganglions mesentöriques : telles sent cos lesions capitales.

Mais les lesions la (ievre typhoide, maladie generate, dopasseiil ordinairement ce cercle etroit : I'appareil rcspiraloire (iilcerations larvngees, congestion pulmonaire, pneumonic lobulaire) ;l'appa-reil circulatoire (myocardite, arterite, phlebite); I'appareil urinairc (nephrite); les systemes nerveux (congestions meningees) el locomoteur (degenöres-cence vitrcuse des muscles), sont gmeralement at-teints ä un plus ou moins hunt ilegre.

Ce sont les matteres lecales des typhiques qui joucnt leröle d'agents de propagation de la maladie, et nous voyons ici La iilus grande analogic etiolo-giquc cntre le cholera et la fievre tvphoide. C'est I'cau potable souillee par les malieres fecales typhiques qui donne lo plus ordinairement la fievre typhoide aux individus sains ; c'est. en portant a la bouche leurs doigls souilles au contact des linges sails par les dejections des malades, c'est, en souil-

3;;s

MALADIES MICROBIENNES.

hint avec ces doigts los matiercs alimentairos quß los individus qui approchent et soignent un ty-phique contractent la maladie : en un mot, c'esl, par le tuho digestif que so fait 1'infcction.

L'air, ici comme pour 1c choldra, ne jouo qu'un role tout a fait etl'ace dans la propagation de la maladie.

III Le bacille d'Eberth. Coloration et culture de oe bacille.

D'une facon gem'rale 1c bacille d'Eberth peut etro decrit comme un laquo; petit bdtonnet, arrondi aux ex-tremites, d'unc longueur de 2 ä :i u. et trois fois plus long que large (Chantemesse ct Widal).

Kxamiuii sans coloration, ce bacille so montre extrcmement inoliibi. laquo;Le bacille d'Eberth cat non seulement mobile dans le champ du microscope, mais encore il prüsente un mouvement d'oscilla-lion sur lui-memo tout particulier. Cost unc se-coussc de Vibration pour les petits bacilles, do rep-tation pour les formes allongccs (Ch. et W.).

Le bacille d'Eberth so colors assez bien par les eouleurs d'aniline en solution hydro-alcoolique tres legere, mais la methode de Gram ne reussit pas ä le coloror : c'esl la un caractfere diagnosti-que fort important.

(lolore, le bacille de la lievre typholde se montre sous plusieurs aspects :

Cost tantöt un bdtonnet pleinement colore dont I'aspect reproduit celui que donne I'cxamen a l'etat frais; tantöt, et e'est lä un aspect qu'il ne prend guamp;re que dans les cultures anciennes, e'est un filament allonge: tantöt enfln la couleur est localisöe aux deux extr^mitös du batonnet, le milieu restant incolore : le bacille typhique a dans cc cas la forme, si frequente chez tant de micro-organismes colores, d'un bacille ä espace clair.

KlfiVHE TYPI10IDE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;309

Cette forme, rare dans los cultures sur gelatine, apparalt parfois dans les cultures sur pomme de tcrre, et sur le bacilie en provenance dirccte de l'orgaaisme.

Sur les preparations coloreos du bacilie, et tout specialeraent sur des bacilles en provenance de ponirnesde terre laissees plusieurs jours ä Fetuvo, on coustate l'existence de spores, apparaissant a Tune des exlreinites du Mtounot sous forme d'une petite sphere, claire, refringente (Gaffky) (1).

Culture du bacille de i.a pievre typhoide. Le bacilie de la tievre typho'ide est indifferemment aerobic et anaerobic; il pousse en ell'et tres vive-ment ä l'abri de l'air (Roux).

La temperature qui convient le micux a son de-veloppement varle entre 2;i et 30deg;. A 40deg; il cesse de se developper. Savitality paraitpersister longtemps dans les milieux de cultures.

Les milieux de culture artiflciels les plus divers conviennent egalcment pour les cultures en presence de l'air : bouillon, lait, gelatine, serum, go-lose, pomme de terre.

(a) Culture dans le bouillon, En 24 heures 1c bouillon ensemencc avec le bacilie typhique et mis ä l'etuve devieut trouble. laquo;Abandonne pendant un certain temps ä cette temperature (20 ä 3ö⁰), le bouillon laisse deposer au fond du vase un preci-pile blaue, et, au bout, de quelques semaines, le

(i) Daus uu travail tout recent M. Buchner nie eutierement i'exia-tence de la spore typhique teile quo 1'avait decrite Gatfky. Les granulations brillantes de Tune des extremites du bacilie typhique ue sont pour lui que des concretions protoplasmiques, se produisant anlquemeof parce que la culture sur pomme de terre devient pen ä pen acide. 11 sufflt do rendre cetti; pomme de terre alcaline en la laissant sejoumer, avant sterilisatiou, pendant quelques minutes dans uue solution de soude, pour que cet aspect special ne se pro-duise plus jamais {Analyse Duclaux, in Annah's Pasteur, octo-bre 186?).

300

MALADIES MICR0B1ENNES.

liquide perd son aspect louche pour prendre une coloration rouge fouce raquo; (Ch. et W.).

(Ö) Culture dam; /lt;#9632; hiil ct Vurinr. Le bacille typhique poüsse bien dans le lait, en y prenant laquo; des formes volumineuses gt;gt;; il se developpc ega-lement dans Vwine sterilisce, alcalinisee (Seitz .

(c) CiiUtue dans la gälatine. La culture du bacille typhique dans la gelatine presente des carac-teres tout speciaux lt;|ui font de cette culture im des bons reactifs de cc micro-organisme.

Le bacille typhique sera ensemeuce dans la gelatine soil par piqure, soit en strie. 11 sera cultive aussi sur la gelatine en plaques.

1.nbsp;Culture duns ht gelatine par piqüre. laquo; De peti-tes colonies leuticnlaires, jaundtres, naissent dans la prol'ondeur suivanl la pointe d'enfoncoment, tandis qu'a la surface se döveloppe tantot un dis-que mince, polliculaire, transparent, a hords irises s'etendant vers les parois du verre, tantot, au con-traire, une culture epaissc, opaque, tres peu eten-due, dont la dimension ne depassepas celle dune lenlille (Ch. et W.). raquo;

La cull Lire en strie et la culture sur plaques sent beaucoup plus caraetöristiques que la culture par piqüre.

2.nbsp;Culture en slrie. -lt; Apres inoculation en strie sur tubes inclines, la culture, dans les cas les plus caracteristiques, apparait sous forme d'un voile mince, translucide, ü reflet!: uacrra et bleudtres, a surface granuleuse, et a bords irreguliers parfois serpigincux. L'accroissement commence apres 2 jours, marche tres vite pour s'arreter vers le neu-viemejour, el la culture n'atteint jamais lesparois du verre (Ch. et W.). raquo;

3.nbsp; Culture sur plaques de gilatine. laquo; Les formes prises par les colonies sur les plaques de gelatine eusemencecs, suivant le precede do Koch, meri-

FIEVRE TYPHOIDE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;361

lent une Joscription Jetaillee. Co sont elles qui permettent d'isok'r le germe typhique des autres microbes, et de le reconnaitre dans I'eau, les ma-tiferes fecales, les urines. II leur faut deux ou trois jours pour apparaltre; dans les cas types, elles se presentenl larges comme une forte tete d'epingle, minces, pelliculaires, nacrees, transparentes, et les jours suivants, malgre I'accroissement de volume, la transparence et la teinte blauchatrc persistent. Au bout de cinq ä six jours, elles out atteint la dimension d'une lentille; leur contour est devenu irregulier, decoupe comme les cotes cfune ile, plus mince en general que leur centre, et leur surface est devenue granuleuse. Examinees ä un faible gros-sissement (obj. 0 ou 1 de Verick) elles paraissent parcourues dans toute leur etendue par des sillons plus ou moins marques, parfois disposes d'une fa-con rectiligne comme les nervures d'une feuille. Souvent leur surface est plus tourmentee encore, etlouto la colonie semble formee de circonvolu-tions d'intestin gröle enroulees sur elles-memes. La combinaison de ces deux aspects, jointe ä la coloration brillante de rensemblo, donne quel-quefois ä la colonie I'aspect d'une montagnc de glaceraquo; (Ch. etW.).

Malheureusenient eel aspect si caracteristique, jjour frequent qu'il soit, n'esl pus constant, et la colonie dubacille d'Eberlh prend parfois un aspect tout different, et qui nc se Signale par aucune particularity.

'/) Culture sur gf.lose. Elle se fait vite et ne prosentc aucune particularity. Sur la gelosc gly-cerinee de Nocard et Houx le developpement est encore plus rapide et plus abomlant.

e) Culture nur pomme de terre. laquo; La pomrne de terre est le terrain de culture le plus precieux, celui qui donne la reaction la plus caraetörislique :

PH. DE MICROBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 2i

302

MALADIES MICROBIENNES.

#9632; :

c'est le eriterium 1c plus sur pour le döveloppe-iTient du bacille. 11 y prospere et sc multiplie, mais saus culture apparente ii l'ueil nu; ä peiue apercoit-on auboul ilc quelques jours, sur la slrio d'iaoculation, une trainee humide et souvent la tranche do pomme de terra doit etre examinee sous un certain angle d'incidence pour que Ton puisso decelcr la presence d'une culture.

laquo; Lorsque la pomme de terre est tres humide, on distingue sur sa tranche, au point d'ensemence-ment, une legere boursoutlure dont l'aspect rappelte assez bien la surface glucee do certains gateaux. Cette apparence cst parfois si legere qu'ello pent passer inapercue pour un oeil inexpe-rimente : eile est d'ailleurs beaucoup plus rare que la premiere raquo; (Ch. et W.).

IV. Localisation du bacille d'Eberth dans I'organisme. Sa recherche dans les pulpes. les liquides, les excretions.

En regie generale le bacille typhique, recherche sur le cadavre, est d'autant plus abondant dans les tissus que la mort cst survenue ä une epoque plus rapprochöe du debut de la maladie.

La recherche reussit bien, dausles cas favorables, meme dans les autopsies faites apres les 24 heurcs de delai legal.

11 y a deux manieres dc deceler la presence du micro-organisme dans les tissus, liquides, etc. : 1deg; rexamen microscopique sur lamelles et les coupes histologiques; 2quot; les cultures.

Le precede des cultures est infiniment plus delicat et plus sür; il permet do decouvrir le bacille la oü rexamen microscopique echoue en raison du petit nombre des organismes patho-genos, ou de l'impurete des produits sur lesquels porte rexamen.

F1EVKE TYPHOIDE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 303

La culture peut se faire directemem sur les milieux reaclil's (gelatine ensemenoöe parpiqüre et par strie, et poimne de terre) lorsqu'il s'agit de pulpes pures; lorsqu'au contraire il s'agit de pro-duits impurs tels queles matieres tecales,elc., c'est i\ la culture sur gelatine en plaques qu'il faudra s'adiesser : les colonies de bacilles typhiques iso-lees purement par cctte methode seront ensuite cultivöes dans la serie des autres milieux.

Les lamellos chargecs des produits typhiques seront traitecs par les coulcnrs d'aniline en solution hydro-aleoolique; les coupes do tissu seront, les metliodes de double coloration ecliouant, Irai-leos par les procedes de Löffler, de Kühne ou de Zieh!.

La lecteur connait les procedes de Löffler et de Kühne. Voici le procede de Zieh! qui donne dobons rösultats.

La coupe est plongee pendant une demi-houre dans le liquide ci-dessous :

Eau ilistiiliH-................................. 100

Fuchsiuc................................... 1

Acide pheaique.............................. .*;

Elle est ensuile lavee dans de l'eau distillee con-tenanl 1 p. 100 d'acidc acetique, puis on decolore, et on deshydrale par l'alcool et on montc.

II arrive quelquefois, dans les coupes de tissu, quo des masses bacillaires sont prises pour des colonies de bacilles typhiques, alors que ce sont des amas de bacilles de la putrefaction. 11 existe un moyen tres simple de faire la difference, c'est de soumettre les coupes au procede de Gram qui decolore les bacilles de la lievre typhoide, et colore les bacilles de la putrefaction.

Ceci pose, voici les principales localisations du bacille d'Eberth dans les tissus du cadavre :

304nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;MALADIES MICROBIENNES.

11 existe constamment dans la rate, le foie, les ganglions mescnlcriqucs et les plaques de Peyer; il se trouve accessoirement, mais non tonjours, dans le muscle cardiaque, le poumon, les meninges, le testicule.

11 n'existe jamuis dans le sang.

La presence constante du baeille d'Eberlh dans la rate des Sujets morts pendant revolution de la maladie a inspire a quelques microbiologistes l'idee de le rechercher sur le vivant : le succes est assure des le dixiemo jour.

La peau du sujet sera desinfectee avec soin par un savounage minutieux, un lavage au sublime, puis a I'alcool. On enfonceraen pleine matite sple-ui(|iie un petit trocart ä fin canal, bien desinfecle. et on eusemencera immedialement le produit re-tiro de la rate par la ponction.

Cette recherche tenlöe dejä avec succes par Phi-lippowicz et Lucatello a ete faite maintes l'ois et toujours avec succes par MM. Chantemesse et Widal; c'est unc operation simple, qui, pratiquee avec toutes les precautions antiscptiquosvouluos, n'offre aucun danger et pent ä l'occasion dcvenir un moyen de diagnostic efticace.

La recherche du baeille d'Eberth, pendant la vie des typhiques, pent encore sc faire dans le sang, I'urine ct les malieres feeules.

Jamals le baeille n'existe dans le sang du sujet vivant pas plus quo dans le sang du cadavrc.

II apparalt dans I'urine, mais seulement dans l'urine albuminurique, e'est-a-dire (jue la lesion du rein est necessaire pour lui frayer une voie au debors.

II sc trouve dans les inatieres fecales, non pas ä toute epocjue, mais quand les ulcerations des plaques de Peyer I'ont verse dans le canal intestinal.

La recherche dans les inatieres fecales est deli-

FIEVRE TYPI10IDE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;368

cate, a cause du grand nombrc de microbes strangers qui pullulent dans les selles et liquefient les plaques do gelatine enseinonceeavant tout cxameu utile.

MM. Chantemosse et Widal ont indique un pro-cede qui pcrmet d'eliminer une partie de cos mi-cro-organismes, et en lout cas ceux qui liquellent la gelatine.

II sufflt d'ajouter 4 a Figouttes d'acide jilieuique ä 1/20deg; aux tubes de gelatine qui out recraquo; I'ense-niencement direct de selles typhiques. 11 est inutile de pheniquer la gelatine des tubes qui rece-vrout la dilution dos premiers.

L'acide phenique a cette dose n'entrave nulle-inent le developpemcnt du bacille typhique.

V. Recherche du bacille typhique dans les eaux.

Avant la decouverte du bacille typhique le role etiologique de l'eau potable avait ete mis hors do doute par des observations incontestables. 11 ötait desirable devoir les microbiologistes faire la preuve reolle de ce röle on demontrant la presence du bacille d'Eberth dans les eaux incriminees en temps d'epidemie.

Gelte demonstration a ete faito d'abord en AUe-magne par Michael etMers; olio a ete faite chez nous pour la premiere fois par MM. Chantemosse et Widal a propos dune epidemic de maison ä Paris, d'une epidemic a Pierrefonds, et onlin ä Clermont-Ferrand.

L'un de nous a trouve lo bacille typhique dans l'eau do Seine a Ivrv,eu amont de Paris, ä l'endroit memo on la machine elovalrice municipalo puiso l'eau pour lo service do la villo. M. Loir a depuis fait paroille constatation dans l'eau de la Seine a Paris. Los recherches de cot ordro so sonl multi-

lifiO

MALADIES MICROBIENNES.

]iliees depuis lors tant en France qu'ä l'ötranger.

La base Je cetle recherche esl la culture sur pla-que* de gelatine de 1'eau suspecte, avec addition d'acide phänique (4 a ö gouttes d'acide ä 1/20deg;) dans les tubes de gelatine ensemences directement avec I'eau.

On conceit combicn cotte recherche cst delicate pour peu que le bacille suit rare dans I'eau examinee, et ä quel degre il faut souvent multiplier les examens avant d'arriver au resultat voulu.

M. Loir nous soluble avoir introduit un perfec-iionneinent Ires sensible dans cette technique, en faisant passer I'eau suspecte en grande quautito dans un filtre Chamberland, qui nc laisse point passer les micro-organisincs, et en faisant ensuite porter son exameu sur 1c residu oü s'accumulent les microbes.

VI. Experimentation sur les animaux,

Gaffky fit le premier des tentatives d'infection des animaux par le mi(;robe tvphique : il echoua constamment sur le singe, le lapin, le cobaye, le rat blanc, la souris, le pigeon, la poule et le veau : il cxperimentait par Ingestion, injection inlra-veineuse et inoculation intra-peritoneale.

En I88(i li. Franke! et Sinimouds, ojierant par injection intra-veiueuse ou intra-peritouale, reus-sirent ä infecter quelques lapins et souris et im cobaye, qui moururent avec l'hypertrophic de la rale, des ganglions mesenteriques, des plaques do Peyer. Le bacille d'Eberth fut toujours relrouvo dans la rate.

MM. Ghantemesso et Widal out a. leur tour fait une serie d'expöriences avec le bacille typhique, i'raichement retire du corps huniaiu soil sur le vivant, soit sur le cadavre.

FlfiVRE TYPIIOIDE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 361

Voici 1c rösumä somnuiire Je cos oxpörienccs que nous empruntons h leurs auteurs.

k L'inoculation dans lo püritoino des souris, de 1 centimetre cube de bacilles typhiques cultives a la temperature ordinaire, determine chez ces ani-maux une sepUcernic qui les tue le plus souvenl, en 24 heures.

quot; Lcs inoculations 1'aites dans lo tissu cellulaire, avec des cultures prises ä la surface de la gelatine, dtiterminent une seplicemie qui evolue beaucoup plus lenlcment, qui tue le plus souvent en 10 ou 12 jours. Les microbes trouves ä Fautopsie sent alors moins nombreux.

ilt; Les inoculations faites dans le peritoine des cobayes reussissent a, peu pres dans la moitie des cas, et la inort survient en general apres un on deux jours.

(i A l'autopsie de tons les animaux mentionnes, on retrouve des cultures de bacille typhique dans les ganglions niesonteriques, dans lo foie, la rate, souvent dans les poumons, quelquefois duns le cerveau.

lt;i Les inoculations faites chez les lapins, dans le peritoine ou les veines de l'oreille, deternuuent dos svmptömes tels que lievre, diarrhee, amaigris-sement rapide survenant apres une periode d'in-culiation de quelques jours ;souventraiiimalresiste et guerit; la niort, du moins immediate, est excep-tionnolle.

laquo; Qualorze jours apres l'inoculation, nous avons trouve des lesions rappelant celles de la lievre typlioide, et le bacille pcrsistait vivant dans les organes. raquo;

De ces experiences on pent conclure que le bacille d'Eberth pout sur quelques animaux, et tout particulierement la souris, provoquer une sopticemie mortelle.

368

MALADIES MICROBIENNES.

Ill LEPRE

:#9632;' gt;

C'est a A. Hansen que Ton doit, la demonstration de la nature luictcrienno do la lepre.

La lepre (i) qui n'existe plus gu^re en Europe, sice n'cst dans los contröes du littoral de l'Espagne, de la Grece et do la Norvego, est une affection caractörisee par le doveloppoment de nioplasies bacillaires au niveau des teguments cutanös et muqueux, des norfs, dans les ganglions lyinphati-ques et dans quelques visceres.

Localisoe ä la jgt;cau, aux muqueuses ainsi qu'aux vaisseaux ganglionnaires lymphatiques correspon-dants, I'affection proud une forme speciale : c'est bilepre /i(6em(telt;se, caracterisoe par le developpo-ment sur lo tegument externe (et surtout la face et les mains) et sur les muqueuses bucco-pharyn-gienne et laryngee, de tubercules saillants qui s'ulcorenl, (;t mutiient 1c malade, detruisant les narines, amputant les phalanges, etc.

Localisce aux nerfs I'affection est connue sous le nom de lepre anesthäsique;eile se caraetörise par l'apparition de plaques cutanees plus ou moins

(l) Nous n avons eu que rarement l'occasion de faire Texanien dc fis^us iepreax : nos connaissnnces persounclles sur lo bacille tie la lepre sont done tres luirnees. Nous avons surtout emprimte la substance ilc cet article au livre de MM. Cornii et Babes, et ä la tres interessante comnuinication tie M. Besnier a rAcatlcmie cle Metle-cine (li octobre 1887} ä laquelle nous renvoyons uos iecteurs pour tons les details sur la contagion de cette affection, etc.. etc.

h^ki

ilaquo;

LEPRE.

369

larges, rappelant collo du vitiligo : ces plaques soiiUmesÜiesiqucs.A leurniveaulapeaus'atrophie, se retracte, et la lepre aneslliesique mutile ainsi les extremitrs des doigts el orteils, dont une ou plu-sieurs phalanges se trouvent spontaa^ment amputees.

Les deux formes de la lepre (tuberculeuse et anesthesique) sout le plus souvcnt associees : la laleprc est alors inixk'.

La lepre est uno maladie exclusive a riiommc; il n'existe chez I'animal aucune affection analogue, et tons les essais exporimenlaux tenths sur I'animal (einen, pore, lapin, etc.! pour lui trausmeltre la lepre outabsolument echoue.

Les quelques essais d'inoculation pratiques d'hoiume a homine n'ont pas non plus donne de resullats.

La lepre est cependant transmissible, ainsi qu'en temuiguent quelques faits positifs, irrecusables, contrelesquels ne saurait prevaloirlaseriedes fails nögatifs invoques par les anticontagionnistes.

L'lieredo-coutagion de la lepre est certaine.

La lepre pout etre transmise par la vaccination, si le vacciniföre auquel on emprunte le liquide vaceinal est lepreux.

III. Le baciile de Hansen. Sa localisation dans l'orga-nisme lepreux.

Le baciile de la lepre, ou bncilte de Hunsen. est un fin baciile, de 4 a 6 u. de long el de moins de I u.delarge, Ires voisin comme forme,dimension, aspect et reactions de coloration, du baciile de la tuberculose. .

11 so trouve par myriades dans les lesions

21.

370

MALADIES MICROBIENNES.

Lepreoscs, et. c'est lä un caracterc important qui dc'jä 1c difförencie du bacille de Koch, dans laplu-part des cas.

Sa forme cst plus reguliere, il cst aussi plus droit que le bacille de la tuberculose.

11 se colore bienparla metliodc d'Ehrlich et präsente ainsi Iraile, comme 1c bacille do Koch, un aspect granuleux tout special resultant de la succession de zones claires et de zones colorees ; mais il sc colore beaucoup plus rapidement que le bacille de lu tuberculose dans la liqueur d'Ehrlich, et resiste plus longtemps ä la decoloration par I'acide azotique.

Baumgarten a propose d'utiliser cette propriöte du bacille do Hansen pour le dillerencier du bacille de Koch dans les ens douteux : un sejour de cinq minutes danslaliquour d'Ehrlich, aveedecoloration consecutive par I'acide azotique ä un dixiemc, sufflt pour colorer le bacille de Hansen, tandis quo le bacille do Koch restc incolore, traite par ce precede rapide.

Le bacille de la leprc pout encore 6tre colore par les couleurs d'aniline simples, avec decoloration par un acide ou I'alcool, iirocode qui no convient pas au bacille de la tuberculose, mais la inethode par excellence pour les lamelles chargees do produits lepreux ou pour les coupes est la me-lliode d'Ehrlich, teile qu'elle se pratique pour colorer le bacille do Koch.

Los diverses localisations du bacille do Hanson dans les lesions lopreuscs out ete parfaitement resumoes par M. Bosnier, ä qui nous emprunterons la substance dos quelques lignes suivantos.

1deg; Liquides ue l'organisue. A. Lv sang. laquo; A aucune epoque do la lepre le sang no conticnt le bacille en permanence. raquo; Pout-etro, dans la periodo des eruptions intermittentes et t'eliriles, lo

LEPRE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 371

baeillo apparait-il dans lo sang, mais des obser-vateurs de la valeur d'Arning n'ont jamais pu 1'y deceler : la regie cst done Vabsence du tiacille dans le simy. raquo;

B.nbsp; La lymphe. C'est ecrtaineincnt laquo; dans les points oil clle pcut etre stagnantc roseau etoilo du derme, lacunes de la trame lamineuse, gainos lymphatiques dos nerfs et des ganglions le liquide de culture par excellence des microphytes de la lepre. raquo;

C.nbsp; Les samp;ci'ctionn normales et pathologiques et les excretions.

L'urinc ne conticnt jamais de bacilles.

laquo; Los lärmen, le mucus nasal, la salice pullulent de bacteries lepreuses dans tons les cas oil les surfaces oculaire, nasale, bucco-pharyngienne sont lopro-mateuses.

Dans les cas de lepre du colon et du rectum les matures intestinales contiennent le bacille.

Le mucus utdrin et les secretions vaginales ne contiennent jamais le bacille leprcux.

laquo; Les liquides pathologiques exsudes au niveau des leprides bulleuses directes ou bacillaires (pemphigus leprcux des auteurs), ou ceux qui s'ecoulent de la surface des leprides ulcereuses, gangreneuses, contiennent des bacilles en plus ou moins grande abundance.

La li/mphe et les croutes vaccinales chez les sujets lepreux ne contiennent jamais le bacille.

2deg; Tissus, oruanes et APPARKiLs. A. Tegument.

laquo; Sur le tegument, on trouve le bacille partout, mais particulierement dans la partie succulente du chorion, le reseau lympliatique cloisonne, les espa-ces lymphatiques etoiles, ratmosphöre conjonclivo des capillaires dermiques et hypodermiques et des dernieres ramilications norveuscs. Sauf violation mecanique, I'epidcrme proprement dit resle

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MALADIES MICROBIENNES.

indemne. raquo; II en est tie menie des glandes sudori-pares, des follicules pileux et sebaces pilaircs.

B.nbsp; Muqueuses. laquo; Les rauqueuses de rapport, oculaire, nasale, buccopharyngienne, laryngöe, loisonnent de bacilles dans les cas do leprc tegumenUiire, ou do lepre mixto. raquo; A I'exception des muqueuses du rectum et du colon, les muqueuses viscerates ne soul, guere atteintes, et les muqueuses uterine, vaginale et vesicate restent iudemnes.

C.nbsp; nbsp;Vaisseaux sanguins. lt;#9632; Les capillaires des regions envahies sent entourös ou encombrcs do bacilles emboliques. raquo;

[). Vaisseaux lymphatiques. Vaisseaux et ganglions sont le siege constant et cssentiel du bacille.

E.nbsp; Sytleme nerveux. Le sysUme nerveux central est generalement indemne; c'esl dans les cordons nerveux au delä des plexus ou dans les ramifications terminales do deuxienio rang quo siege le bacille.

F.nbsp; nbsp;Viscdres. Los lesions leprousos viscera!os sont moins connues, mais tout aussi reelles quo les autres lesions : le loie, le poumon, le testi-cule, lo rectum, le colon sont les priucipaux or-ganes attaints par le bacille lepreux. Mais e'est surtout dans la moolle osseuse et dans la rate quo le microbe trouve lo milieu le plus favorable a son devcloppoment. U y existc, a l'etat do culture pure, en quantile prodigicuse (Nocard et Houx).

L'appareil genito-urinaire de la I'emnio reste toujours indemne.

IV. Culture du bacille de la lepre.

Un seul microbiologisto, M. Bordoni Uffreduzzi, aurait jusqu'ici reussi a cultivor lo bacille de Hanson : il aurait obtenu les cultures, avoc do la

PNEUMONIE FIBHINEUSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;373

semence prise dans la moolle osseuse, sur du serum additiüiuic do glycerine et de peptone, place ä la teinperalure de 33⁰-3nquot;. La gelose glycerinee lui aurait aussi donne de bons resultats, niais la gelatine, la pomnie de terre et le bouillon echouenl. A noire connaissance tous ceux qui out essaye de reproduire les rcsultats de M. liordoni 1'ITre-duzzi out echoue; des experiences de contröle seraient necessaires pour mettre hors de toute contestation la possibility de culture du bacille de Hansen.

PNEUMONIE FIBRINEUSE I. Historique.

Lapneumonie fibrinouso de riiommc quia, jus-qu'ä ces dernieres annees, passe pourlc type des maladies inflammatoires simples, non speciflques, lt;les maladies a frigwe, est une maladie infec-tieuse, ä contagion limitee, mais certaine, ainsi qu'en temoigncnt les epidomies de niaison, de families, de villages, de prisons, etc.; I'agent pa-lliogene de la pneumonie habite normalemcnt la salive de certains individus.

laquo; G'est au laboratoire de M. Pasteur qu'a ete lt;lecouverl en 1881 le microbe qui s'est trouve etre celui de la pneumonie librineuse. M. Pasteur et ses collaborateurs I'ont rencontre dans la salive d'un enfant mort de rage, I'ont isole, cullive dans I'excellent milieu nutritif que domic le melange de bouillon de veau et de sang do lapin; ils ont

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MALADIES MICROBIENNES.

decrit sa forme caractcristiquc de diplococcus eiitouru par unc aureole claire. 11s ont montrö aussi quo ce raicrobo csl inoffensif pour les oiseaux, ct provoque chez le lapin une septieomie suraigug, au cours de laquelle on 1c voit appa-raitrc dans 1c sang des animaux malades, en mume temps que la flevre, dejii 9 heures apres l'inoculaüon sous-cutanee. La mort survient en moins de liO heures. A I'autopsie, on ne trouve presque rien ii l'endroit de I'moculation, mais il y a de Fffideme des poumons, de Fhypereniie de la trachee, et une masse de microbes dans le sang.

lt;lt; On a conslale aussi que ce microbe est tres facilement arrcte dans son developpement, et peril dans les cultures sous l'inflaence de l'oxy-gene do Fair; qu'avant de mourir 11 s'attönue; que les lapins inocules par le microbe attenue ne meurcnt pas et deviennent refraclaires vis-ä-vis du virus virulent...

quot; M. Pasteur avait trouve, pour la premiere fois, ce microbe dans la saliva d'enfants morts de rage, puis dans celle d'enfants morts de broncho-pnen-monie, et enfln dans la salive de personnes bien jiortantes raquo; (Gamaleia, Annales Pasteur, 1888).

En 1881, Friedländer decrivit comme agent pa-thogene de la pneumonio librineuse chez I'homme un coccus ellipsoide, capsule, poussant ä la temperature ordinaire sur la gelatine, et dounant une culture en forme de clöu; le microbe de Friedlander inoculo aux cobmjes et aux souris leur confe-rait une scpticemie speciale avec pleuresie et noyaux d'hepatisation pulmonaire; le lapin ('tail refjactnire.

En 1881, Sternberg retrouvait le microbe do Pasteur dans la salive et le rencontrant, d'autre part, dans les crachats et l'exsudat pneumonique, I'ldenllfiait au pneumocoque de Friedländer.

PNEÜMONIE F1BRINEÜSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;370

En realilij 1c microcoque docouvert par Pasteur dans la salive, retrouve par Sternberg, ost bien I'agent do la pncumonie, mais il n'a ricn de com-inun avec le microcoque de Friedländer, qui n'est probablement qu'un saprophyte sans aucune in-lluenco sur la genese de la pneumonic.

A I'liisloire bactoriologiquc do la pneumonic s'attacbent principalement les noms do Talamon et Fränkel.

En 1883, Talamon signalait dans Vexsudat pneu-inoniquo un microbe lanceole, lo plus souvent en diplocoque, qu'il cultivait dans lo bouillon Pasteur, et qui inoculö dans lepoumon du lapin provoquait le döveloppement do pneumonic, de pleuresie, et de pöricardito librineuses. Le sang des sujets ino-culös fourmillait do coccus lancooles semblablcs a ceux do I'exsudat pneumonique.

En 188ö, Franke! montrait le röle du microbe de la scpticömie salivaire dans la pneumonic, et dans uno serie de reclierches etablissait nettemont I'in-lluenco pathogene exclusive de ce microbe.

On doit ä M. Netter de beaux travaux sur le pneu-inocoque de Talamon et Fränkel, sur sa presence dans la salive normale, son röle dans la genese de la pncumonie et sur la contagion de cotto affection.

Enfin dans les Annales Pasteur de 1888, M. Ga-maleia a donne la relation de bien remarquables experiences faites sur les animaux avec le pneu-mocoque, pour lequel il propose la denomination do Streptococcus lanceolatus Pasteuri.

II. Le pneumocoque. Caracteres morphologiques et coloration. Localisation chez le pneumonique. Le pneumocoque dans la salive.

Le pneumocoque so presente sous la forme ar-rondie ou ovalaire; lögörement effile ä ses extre-mites, lanceole ou en forme do grain d'orge, il

376

MALADIES MICROBIENNES.

eil

affecte ordinairement la disposition en diplocoque ct parfois en chaineltcs de 3 ou 4 diplocoques. Sa longueur esl de 0 y. ;i0 ä 0 u. 75, il est moins large que long; il est entoure d'une aureole claire oneapsule, que la coloration met bien en evidence.

La coloration du pneumocoque est facile avec toutes les couleurs d'aniline; le violet de gentiane reussit particulieremcnt bien; le pneumacoque prend la coloration par le procede de Gram, ce qui en facilite singulierement I'etucle dans les coupes.

Chez le pneumonique, au cours de raffeclion, on pouira facilement se procurer le pneumocoque; une ponction capillaire du pouinou faite avec les precautions antiseptiques voulues fournira I'exsu-dat pathologique qui, colore sur lamelles, se mon-trera rempli de streptocoques lanceoles.

Los crachats rouilles, qui ne sont que la manifestation exterieure de l'exsudat pneumonique, mon-treront eux aussi le pneumocoque.

Sur le cadavre pneumonique, et pourvu que la mort seit assez precoce, il sera facile de deinon-trer le pneumocoque dans l'exsudat inflammatoire et dans les coupes de poumou. Mais co n'est pas tout encore : lorsque la pneumonie s'est compliquäe soil de pleuresie, soil d'endocardite vegetaute, soit de pericardite, soit de möningite, le pneumocoque est present dans le liquide pleura!, dans les vegetations endocardiquos, dans le liquide pericar-dique et dans les meninges.

Le sang ne contient le pneumocoque que tres exceptionnellement.

Le pneumocoque se trouve a l'etat de saute normale dans la salive de certains individus; nous avons enonce le fait plus haut on disant que le microbe de la sopticemie salivaire de Pasteur n'est aulre quo l'agent de la pneumonie. Cost la un fait de la plus haute importance au point de vue pa-

PNEÜMONIE FIBRINEUSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;377

thogenique. Inoffensif pendant unc longue periode de temps, souvent pendant la vie entiöre, le pneuniocoque peut,a. un moment donne, sous une iutliience deprimante, tolle que 1c coup de froid, entrer, en action, et provoquer la pnoumonie. Le meilleur moyen de decelcr le pneumocoque dans la salive est l'inocalation aux animaux : nous aliens revenir surce sujet.

III. Culture du pneumocoque.

La culture du pneumocoque est malaisee, tont au moins ä l'air, car il semble que cet organisme sott assez faiblement aerobic; les cultures dans le vide reussiraient sans aueun deute beaucoupmienx, mais nous n'avons lu nulle part qu'ellos eussent etc tentees, et le temps nous a manque a nous-memes pour entreprendre cet essai.

Le pneumocoque no secultive qu'aux tomporatu-res de l'etuve, de 30quot; a 3:i⁰ de prelcronce. Les cultures perdent rapidement leur virulence : au cin-(jiiieme jour celle-ci a disparu.

Le pneumocoque vegete et pousse mal sur les milieux solides (göloseet serum:; les milieux liquides lui conviennent beaucoup mieux. Dans les bouillons 11 se cultive döjä au-dessous de 30deg; et pousse a 42deg;. A iS⁰ sa croissance s'arrete ou ue se produit pas.

Le lait est egalemeut un milieu favorable; il se coagule des le douxieme jour.

IV. Experimentation sur les animaux.

Le veritable reactif experimental du pneumocoque e'est la souris, animal des plus sensibles a l'inoculation des matieres qui contiennent ce microbe : exsudat pneumonique, crachats ronilles.

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MALADIES MICROBIENNES.

salive, cultures virulentes. M. Gamalöia conseille fort j ustoment de faire la preuve de chaque cas de pneumonie par I'inoculation aux souris : läoüles cultures (moyen fort defectucuxen 1'espece, surtout les cultures sur milieux solides; ont echoue, lä oü I'examen sur lamelles n'a rien rcivelo, I'inocula-tion ä la souris, verilable pierre dc louche, fera la preuve.

La sowris inoculee sous la pcau meurt en 24heures environ; la lesion la plus frappante est I'hyper-trophie de la rate. Le sang et tons les organes I'our-millent de pneumocoques.

Le lapin est tres favorable a ['experimentation, i|uoiqu'a un degre inferiour a la souris; il n'est pas capable, comme eile, de döceler de faibles quanti-tes de virus pneumonique. Le lapin inocule sous la peau avec la matiäre virulente meurt en 40 heures environ de septicemie; ses organes sont remplis de pneumocoques et lalesionla plus reinar-quable est l'hypertrophie de laralc.

Le lapin, inocule avec un virus affaibli (culture perdant sa virulence), suecombe avec uno pneumo-ine lobaire et des lesions pleurätiques et pericar-diques; il est du reste, de toutes facons, facile de provoquer ces phenomenes localises chez le lapin : il sufflt de faire l'injection du virus directement dans le poumon.

Le lapin inocule avec un virus plus attenue encore nc meurt pas et a acquis Vimmunitij.

M. Gamalöia a donne dans les Armales Pasteur la relation d'experiences des plus interessantes, qui Jettont un jour nouveau sur Faction du pneu-mocoque inocule aux differentes ospeces animales. M. Gamnleia se procure d'abordune matiere d'ino-culation Ires virulente qu'il obtient en inoculant par fiassages des lapins dans les veines : la mala-die experimentale se montre ainsi de plus en plus

PNEUMONIE FIBRINEUSE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;379

courte; les Inpinä ßnissentpar mouriren quelques

lieurcs. Lesangducüeurest rempli destreptocoques [iiioumoniqucs ct c'cst ce sany qui va devenir la matierc d'inoculatioii.

Los cspeccs animalcs considerecs sous le rapport de leur resistance an virus pneumonique peuvent elre rangecs duns I'ordrc suivant : souris, Inpin, rut, mouton, chien, pigeon. La souris est le reactif le plus sensible; le pigeon est, entiercment refractaire.

On commit les resultats de l'expamp;rimentation sur la souris : les voicibrlevenicnt resumes et sous unc autre forme : reaction peu considerable au point d'inoculation; pas de lesions visccralcs localisees appreciablcs, ä l'exception de l'hypertrophie de la rate; sangetorganes remplisde pneumocoques. Les passages accroissent la virulence.

Chez le levpin les resultats sont semblables: peu do reaction au point d'inoculation; pas de lesions viscerales localisees sauf l'hypertrophie de la rate; passages renforcant la virulence. Avec le virus affaibli apparaissent : Iquot; la reaction locale, inlil-tration Qbro-granuleuseäl'endroit de l'inoculation; 2deg; les lesions localisees : pneumonie et pleuresie scro-ribrinouse.

Chez le rat la dose neccssaire pour donner la mort doit elre di'ja augmentee; il y a une reaction locale intense, laquo; un ocdeme librineux qui s'elend parfois sous la peau du venire et de la poitrine raquo;. Les passages sont faciles, mais n'augmentent pas la virulence; le sang renferme peu de microbes. L'inoculation dans le poumon amene la mort en vingt ä vingt-quatro heures, avec pleuresie et he-patisation pulmouaire.

Le mouton est plus refractaire encore; la dose mortelle do virus doit etre portce a ö centigrammes; les phenomenes locaux sont intenses : iuliltration occupant parfois tout 1'abdomen; peu

380

MALADIES MICROBIENNES.

de microbes dans le sang; les passages succcssifs sont impossibles. L'inoculation intra-pulmonaire donne la morl avec hepatisation du poumon; le microbe inflltre le tissu pulmonaire ct I'exsudat.

Le c/iiVraquo; est plus difficile encore ä tuer; il laut pour arriver ä ce resullat des doses considerables; ranimal succombe alors avec un u'deme sous-cu-lane enorme et tres etendu; le sang conlient pen de microbes et les passages successifs echouenl. L'injection intra-pulmonaire donne unc pneu-monie qui ordinairement u'c^t pas mortelle.

La pnenmonie laquo; n'est done pas une infection generate se localisant ilans le poumon comme dans son lieu de predUection, mais la reaction locale a l'endroit de l'inoculation virulente raquo;. Les animaux trop sensibles comme le lapin et la souris n'ont pas de pneumonie parce qu'ils n'offrent pas de reaction locale, et le virus se generalise chez eux on les tuant par une septicemie aigue. laquo; L'homme apparticnt done par rapport au virus pnenmonique ä la categoric des animaux resistants. Cela resulte de la mortality pneumonique fälble, de la reaction locale etendue iju'il presentc dans la forme de 1'inflammation du poumon, de la rareto des microbes dans le sang. raquo; (Gamaleia.)

DIPHTHERIE

La dipht^rie buraaine so caracterise anatomi-quement et cliniquement par unc fausse membrane qui siege le plus souvent sur les amygdales et la 1 netto idiphtherie pharyngie, aitgine diphthe-

DIPHTHERIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;381

rique). La fausse membrane poul occuper encore les diverses sections des voies respiratoires : larynx. (croup on diphtheric laryngie]; fosses nasales (conjza diphtherique); trachee, bronches et bronchioles [tra-chriie, bronchite et broncho-pnevmonie diphtiriques); on la rencontre encore sur les muqueuses de la bouche, du vagin, sur la conjunctive, et sur les surfaces demuleos de la peau (diphthrrie culanee). Affection des plus graves, la diphtherie pent tuer nwcimiquement (c'est le cas dans la diphtherie laryn-g6e ou croup), mais eile tue plus souvent par intoxication : le malade est comma empoisonne par l'affeclion. Enfin une des caracteristiques ma-jeurcs de la diphtheric, c'est, quelle qu'ait ete sa forme cliniquc, grave ou bonigue, quelle qu'ait ete sa localisation, d'etre souvent suivie de pheno-menes pariilytiqucs dont 1'ensemble estbienconnu sous le nom de paralysie diphthamp;nque. Cette para-lysie, parfois localisee au voile du palais, pent s'etcndre, se diffuser, atteindre les membres infe-rieurs, superieurs, les muscles respirateurs, le coeur, tuant alors par asphyxie et syncope.

Klebs en 1883 laquo; a le premier Signale un bacillc special ä la diphtherie; il a decrit sa disposition dans les fausses membranes, a la surface dos muqueuses malades raquo;. Plus tard, en 1884, M. Loftier, retrouvant le bacille de Klebs, I'isolait, le culti-vait, et par inoculation des cultures pures repro-duisait la fausse membrane sur les pigeons, les poulcs, leslapinsetles cobayes. Pourtant M.Loftier doutait encore lui-meme de la speciücite du bacille qu'il avait etudie.

C'est a MM. Roux et Yersin qu'il ctait reserve de donncr une demonstration nette et saisissante du role du bacille de Klebs, et d'eclaircr vivementpar leur beau memoire [Annales Pasteur, 1888) la pa-thogenie jusqu'ä eux si obscure de la diphterie.

38-^:

MALADIES MICrtOmKNNES.

Comnie M. Löffler ils out trouvö lo bacille duns la fausse membrane, Font isolo en cultures pures, et comme lui ont reproduit la fausse membrane chez los animaux; niais, plus habiles experinieu-tateurs, ils mil donue aux sujets d'experience les paralysies caractdristiqites; cnlin ils ont mis en evidence le poison diphtheriquo, at ontmontre quece poison iiijecte aux animaux, scul et sans ['intervention de microbes vivants, ou les tue rapidement par intoxication, ou leur contere des paralysies.

Les quelques lignes qui vont suivre nc sont qu'un resume du travail do MM, Roux et Yersin.

I. Le bacille de la diphtherie. Ses caracteres dans la fausse membrane. Le bacille n'existe que dans la fausse membrane.

Ce sont les cas de diphtheric a marche rapide qui sc prctent le mioux ä la recherche histologique du bacille. Dans ces cas, laquo; aprcs coloration des coupes au bleu de melhylene, on voit que les parties supertlcielles de la fausse membrane sont for-mees par une couche de petits bacilles, presque a Fetat de pnretö ; ce sont les bacilles de Klebs... Souvent aussi, la zone la plus superflcielle de la fausse membrane contient des microbes divers, batonnets, microcoques et chalnettes, melanges aux amas de bacilles de Klebs, ijni sont au contraire predominants immediatement au-dessous. d Ces petits bacilles ainsi disposes sont seals caracteris-tiques de la diphtherie, et ainsi que nous Tavons dit, e'est surtout dans les cas rapides, les diphthe-ries infectiouscs, qu'ils sont le plus nombreux.

On ne trouve Forganisme pathogene que dans les fausses membranes; il n'existe pas dans les organes et le sang des personncs qui ont succombe ;i la diphtherie.

i-^K

DIPHTIlfiHlE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;383

U. Culture et morphologie du bacille de la diphtheria.

Voici comment MM. Houx ct Yorsin, suivant d'aiUeursä peu pros loproceJo doLöfller, ont isolc le bacille Jc la diphth6rie, et en ont oblenu des colonies pures qu'ils ont pu cultiver ensuite.

L'isolcinent se fait sur serum on gelose. laquo; Avec un lil de platine, on elale k la surface d'un lube de serum coagule une petite parcelle de la fausse membrane. Avec le meme lil, sans le recharger de semence, on faitplusieurs stries surdilTerents tubes de serum. Dans les tubes ensemencesles premiers, il so döveloppe ä la temperature do - - 33deg;, le long des stries, un grand nombrc de colonies varieos trop rapprochees pour elre reconnues ; mais dans les tubes semes en dernier lieu, les colonies sont assez nettement separues pourque I'on puisse dis-linguer parmi elles celles du bacille specifique. Klles se presentent sous la forme de petitcs taches arrondies, blanc grisatre, dont, le centre est plus opaque que la poripherie; elles i^oussent energi-quement sur le serum, et forment bientöt de petites plaques rondes et saillanles. La rapidite du dove-loppemcntsur le serum fait que les colonies de ce bacille sont dejä tres apparentes avant que les organismes d'impurete aient pullule. n

La separation sur tubes de gelose se fait de la meine i'ueon ; le developpement plus lent, mais tres caracteristique, se fail bien a 4-33deg;.

Les colonies pures ainsi isolees serout semees dans les milieux appropries, e'est-a-dire les bouillons, le serum et la gMose.

Le bacille de la diphtheric est aerobic et aussi anaerobic, toutefois ilpousse plus vigoureusement ä l'air: de toute facon son developpement necessite la temperature de Tetuve.

Dans les bouillons (le bouillon de veau alcalin

384

MALADIES MICaOBIENNES.

paralt lo plus convenable) le bacille pousso abon-damment laquo; I'air; 1c milieu devicnt bientöt acide, et l'aciditö disparalt a son lour api-es un temps assez long : le milieu redevient alcalin. laquo; Le deve-loppement so fait sous forme de petils grumeau.v (jui se tlxent sur les parois du vase. raquo; Cultive dans les bouillons ä l'abri de I'air, le bacille de la diphtheiie donneau milieu unc reaction acide, qui persiste.

De tons les milieux solides, celui qui parait le plus convenable est le serum peptonisö de boeuf, de mouton ou de chcval.

Le bacille de la diphllierie est immobile.

II se colore facilement par le bleu alcalin de Löffler el apparaltsous forme d'un petit bätonnet, de la longueur du bacille de Koch, mais plus epais, a extremites arrondies se colorant mieux que la partie moyenne. 11 parait dans les cultures plus petit que dans les fausses membranes. Dans les cultures un peu anciennes k les bätonnets nc se colorent plus uniformemoiU: on volt dans l'inle-rieur des grains Ires fonces qui donnent ['Illusion de spores raquo;. Dans les cultures plus agees encore, laquo; les bacilles out presque tons perdu la propritito de prendre les matieres colorantes. Quelques-uns qui presentent des formes rentlees, arrondies, ou en poires se teignent encore fortement raquo;.

Les cultures se conservent longtcmps sur serum, et dans le bouillon, soit a l'etuve, soit a la temperature ordinaire.

III. Diphtherie experimentale.

MM. lioux et Yersin ont montre (jue : A. Les cultures pures porlees au contact des muqueuses exeoriees chez certains animaux don-naient naissance ä la l'ausse membrane diphte-ii([ue.

DIPHTHERIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;38ö

B)nbsp; L'inoculalion sous-culanee, Finjection intra-veineuse, l'injection iiitra-peritoneale de cultures pures tuaient les sujots d'expörience.

C)nbsp; Les inoculations experimeulales de cultures pures pouvaienl reproduire la paralysie diphth6-rique.

A.nbsp;En exeoriant, avecun (il de platine charge de la culture, soit la muquouse du pharynx, soit la cou-jonctive chez les lapins, les cobaycs, les pigeons, las poulcs, on rcproduit la fausse membrane dijditherique.

üne curieuse experience consiste h tracheoto-miserun lapin, et a porter un lil de platine, charge de la culture, surla niuqueuse trachealc. La fausse membrane se developpe en cette region, et Tissue fatale est la regle avec des symptömes mecaniques (jui rappellent le croup chez l'homme.

B.nbsp; lt;( L'introduction dans le muscle pectoral et le tissu sous-cutane de pigeons de un centimetre cube d'une culture raquo; tue l'aiiimal cn moins de soixante heurcs. luocule avec un cinquierae de centimetre cube et avec des doses infericures le pigeon rösiste ordinairement.

A l'aulopsie des pigeons qui ont suecombe on trouve laquo; au point d'inoculatioii, sous la peau et dans le muscle, un pelit enduit grisutre et un (edeme gelatineux. Le muscle qui a recu une partie du liquide est gonfle et ses fibres ont une feinte jaune. On ne rencontre aueune lesion apparente des organes internes, si ee n'est de la congestion. Les vaisseaux sent dilates et contiennent un sang noir coagule. raquo;

Los lapins inocules sous la peau avec une dose süffisante de virus (plus de un centimetre cube de culture) meurent d'autant plus vite que la dose a ete plus forte. laquo; Apres l'introduction du bacillc de la diphtherle sous la peau d'un lapin, on observe rn. de michobie.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 22

386

MALADIES MICROBIENNES,

bientöt un o'deme considerable; I'animal devieut triste, no mango plus ct meurt sans convulsions dans I'attitude oil il so trouve. L'autopsie montro mi point d'inoculation un oedfeme etondu, inlil-trant un tissu indure, avec i)iquetö hemorrliagi-(juo ; un gonflement des ganglions de Faine et de l'aisselle; une congestion de Fepiploon et du me-sentöre avec petitos ecchymosos le long des vais-seaux. Le foio friable presonte une teiule jaune, el il ost lo siege d'une degonerescenco graisseuse. L'epanchement pleuretique cst oxceptionnoi et les poumons sont prosquo toujours sains. raquo;

Le cobaye est, do tons los sujets de laboratoire, lo meilleur reactif experimental do la diphtherie ; il succombe ä rinoculation sous-cutande de petites doses, et presonte ä l'autopsie les lesions sui-vantes : enduit mombraiicux grisatro limitc au point d'inoculation, oedeme gelatineux plus ou moins etondu, congestion des ganglions et des or-ganes internes, surtout des capsules surreuales, (#9632;paiichoment sereux dans les plevros, splenisa-tion pulmonairo.

Chez rhonime succombant a la diphtherie le bacille no pout elre retrouve ijuo dans les fausses membranes, qui seules peuvont donner des cultures : le sang et los organos no contiennont Jamals 1'agent pathogens ;le meme fait, si interessant et si important, so retrouve dans la diphtberie expe-rimentale.

Chez les cobayes inocules sous la peau, lo bacille no pullule (ju'au point d'inoculation, dans I'ondeme gelatineux qui so developpe en cot en-droit. laquo; Apres quatre hcures Ta-deme ost manifeste au point (rinoculation; les bacilles augmentcnt dans cet u'deme local jusqu'a la sixierno ou hui-tieiuo houro; un certain nombre sont enf'ermes dans les cellules; raais bientöt leur nombre va eu

DlPllTllliRIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;387

döcroissant, et au moment de la mort de l'ani-mal, il y a moins de microbes au lieu de l'injcc-lion qu'il n'v en avait six ou liuit heures apres cju'elle venait d'etre faite. Le sang et les pulpes organiques nc contiennent pas le bacille, ou 1c contiennent exceptionnellement, et restent abso-lument steriles ä l'eiisemencement.

Ainsi done developpement du bacille au point seul d'inoculation, et encore meme somble-t-il qu'en ce point son developpement soit bientöt entrave. Aussi les passages de cobaye ä cobaye sont-ils tres difficiles, et ne pcuvent aller au delä du douxieme passage.

Inoculations intra-veineuses. Chez les lapins, inocules dans les veines avec le virus de culture pure, la mort est la regle en moins de soixante heures.

clt; Les lesions que Ton trouve ä l'autopsio sont une congestion generate des organcs abdominaux, une dilatation des vaisseaux, le goullement des ganglions, une nephrite aigue, et U'es souvent une degenerescence graisseuse du feie qui prescnle cette leinte jaune dont nous avons deja parle. raquo;

A l'examen microscopique du sang ou des organcs des lapins qui suecombent a l'injection intra-veineuse on ne trouve pas de microbes. laquo; 11 laut semer de grandes quantites de sang ou de puipe do rate pour oblcnir de temps en temps une culture. A aucun moments avant la mort de l'ani-mal, on ne pent surprendre une culture notable dans le sang ou les organes. raquo;

Inoculations dan* le peiitoine. EUes tuent le cobaye, mais moins rapidement que 1'inoculatiou sous-culanee. Le liquide peritoneal des animaux qui suecombent, et lui seul, contient le bacille.

C. L'i. reproduction expärimentale de la paralysie di/ththirique est un des points les plus intdrcs-

388

MALADIES MICR0B1ENNES.

sants du beau travail de MM. Roux et Yersin.

M. Loftier n'avait pu conslater ces paralysies t-hez les sujets auxquels il inoculait le bacilli; qu'il avail ciillive. MM. Houx ct Yersin ont ete plus heureux. lt;lt; Des paralysies, ecrivont-ils, s'observent chez les animaux inocules de la diphtherie, soil dans la trachte, soit sous la peau. Cost memo un plienomene tres Irequont lorsque les animaux no succombent pas ä une intoxication trop rapide. raquo;

Le premier cas do paralysie diplitlierique cxpe-rimentale fut observe par eux sur un pigeon qui, inocule dans le pharynx, avait eu de belles fausses membranes et paraissait gueri.

Les lapins quiresisli'iit aux accidents immediats lt;le la diplilberie inoculee dans la trachee presen-tent lo plus souvcnt ces symptdmes paralvtiqucs, auxtiuels ils finisscnt par succomber.

La terminaison ordinaire chez lo lapin inocule dans les veines avoc un centimetre cube de culture pure est la mort dans un delai de quatre jours, ainsi que nous 1'avons dit plus haut, et l'acciclent terminal cst une paralysie generalisee.

laquo; Lorsque la mort no survient pas dans un delai aussi court, la paralysie cst plus facile ä observer.

Elle debute d'ordinaire par le train postörieur, et parfois eile est si rapidement progressive qu'en un ou deux jours clle a envahi tout le corps, et que I'animal meurt par arret de la rospiration et du cu'ur. laquo; D'autres fois la paralysie roste limitee pendant un certain temps aux patles posterieures: ellc commence par une faiblesse des muscles qui donne a la demarche une allure particuliere, puis eile deviont plus complete, el les mouvements du train antorieur sent souls conserves. La maladie est presque loujours envahissante; la paralysie easmc lo cou et les mombros anterieurs. II n'est

DIPHTHERIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 389

pas rare de voir la morl survenir subitoment sans convulsions, surprenant 1'animal dans I'attitude oil on venait de le voir quelqnes instants aupara-vant. Un groupe de muscles pent ctrc frappe tout d'abord; ainsi, on volt des lapins dont les pattos de derriöre sont ecartees du corps, comma si Faction des adducteurs clait supprimec. Quand ils marclient, leurs membros poslörieurs no se detondeiitplus, ils avancent Tun apres I'autro sans se detacher du sol. Lorsque les paltos du devant sont atteintes a lour tour. Failure devient comine rampante. Bien que la paraplegie soit le debut le plus frequent, la paralysie pout aussi porter sur les muscles du cou, de facon que la tete ne peut so soulever du sol, et aussi sur les muscles du larynx, ce qui don ue la raucite ä la voix. raquo;

IV. Le poison diphtherique.

Chez I'homme succombant a la diphtherie spon-tanee, chez l'animal tue par la diphtherie experi-mcntale, 11 n'v a pullulation du bacille qu'en un soul point : la fausse membrane chez I'liomme, le lieu de Tinoculation chez l'animal. Bien mieux encore, chez ranimal inocule dans les veines, le bacille a completement disparu du sang apres quelques heures, et cependantla maladie continue son cours; eile tue avec on sans paralysie. Quel cst done le facteur do la mort dans ccttc maladio oil la terminaison fatale et les accidents caracte-ristiquos de paralysie ne peuvent ötre attribues comine dans le charbon, etc., ä la pullulation du bacille? Ce facteur, e'est lo poison diphthdrique. MM. Houx el, Yersin ont rendu ce poison tangible, pour ainsi dire, et avec lui ils ont tue et paralyse les animaux.

laquo; Filtrons sur porcelaine, disent ces auteurs,

390

MALADIES MICROBIENNES.

une culture dans du bouillon de veau apresqu'cllc est rcslce 7 jours ä l'etuve ; tons les microbes sont retcnus par le iiltrc, et le liquide obteuu est parfaitement limpide et legercment acide. 11 ne contient aucun organisme vivant; laissc ä Tetuvo il ne se trouble point; ajoute ä du bouillon alcalin il nc donne pas de culture; introduit aux doses de 2 ä -i centigrammes sous la peau dos animaux, il nc les rend pas malades. 11 n'en est plus ainsi si on emploie des doses plus fortes, si on iujccte par exemple 33 centigrammes dans la cavite peri-toneale d'un eobaye ou dans les veines d'un lapin. raquo;

Le eobaye devient malade apres deux ou trois jours, et meurt vers le cinquierae ou sixieme jour, avec gontlement gauglionnaire, dilatation des vaisseaux, congestions viscerales, surtout des reins et des capsules surrenales, etc., etc.

Chez le lapin qui a recu dans les veines 3li centigrammes de liquide filtre, il survient vers le quatriemo on cinquiemo jour une paralysie du I rain posterieur, qui se generalise rapidement, et tue l'animal.

Los cultures ancieniies contiennont un poison plus abondant quo les cultures recentes, et les effets toxiques en sont rapides et, terribles. ün lapin qui recoil 33 centigrammes du liquide filtrö d'une culture de 42 jours est malade au bout de deux boures et succombe en cinq ou six heures avec de la diarrbee profuse et une vivo anxioto rospiratoire; un eobaye qui rocoit memo quautilo du meme poison dans le peritoino meurt en dix heures avec une dyspueo intense. Les lesions sont cellos quo nous avons signalees plus haut.

laquo; Quand les cultures du bacillc do la diphtherie sont aussi chargöes de produits toxiques, il n'est pas besoin, pour observer les effets sur los animaux, d'employer de si fortes doses, et de recourir

DIPHTIIKRIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;391

aux injeclions Jans los vcines ou dans le peritoinr. Introduisons sous la peau d'une serie de cobayes des quantites de liquide toxique deliarrassö de microbes variant de un cinqui^me de centimetre cube ä 2 centimetres cubes, et comparons les effets do cos injections a ceux de l'inoculation d'une culture fraichc de bacilles de ICIobs, prati-quee sur dos cobayes temoins. Tons les animaux qui out recu le liquide liltre presentent bientöt un a'deme au point d'injection, tout comme les temoins en ont un au point d'inoculation; ils sout bientöt herisses et ont la respiration haletante, comme ceux qui ont recu la culture vivante. Ils meurent comme eux, sans que pendant lout le temps do I'experience on puisse saisir une difierence dans 1'attitude des uns et des autres. Les cobayes auxquels ou a donue le plus de liquide toxique meurent en moins de vingt-quatre heures, les autres en quarante-huit heures ou trois jours, solon los doses reeuos. Les losions sont identiques, qu'ils aient sueeoinbo ä l'injection du poison (iiphllioritique ou ä l'inoculation du bacille de la diphthörie. La maladie, symptömes el lesions, est donnee aussi süremont par l'injoction du poison que par l'inoculation du bacille. raquo;

Les lapim suecombent comme los cobayes ä l'injection sous la peau de ccs produits toxiques, et les lesions sont les memes que colles qui suivent Tinjection do la culture vivante.

Los pigeons suecombent apres rintroduetion de moins de un centimetre cube dans It¹ muscle pectoral, et trois a qualre gouttos sous la peau tuent on quelques heures les petils oisoaux.

Les animaux (souris et rats) refractaires ä l'inoculation de la culture vivante sont refractaires an poison diphthorique.

quot; L'injoction aux animaux do doses variables

302

MALADIES MICROBIENNES.

du poison soluble de la dipiilherie nous a montre les diverses formes de 1'intoxication diplitheri-liiHie, dopuis cellos quiamenent la morten quelques heures, jusqu'ä celles qui, au bout d'un temps plus ou moins lony, se traduisent par des paralysies mortelles ou susceptibles de guerison. raquo;

Getto (totion tardive du poison diphtheriquo esl des plus interessantes : eile esl bien connue en clinique, oü d'ailleurs eile 6taitrest6einexpliqu6e.

Uesuinoiis en quelques mots les donuecs etiolo-giques et pathogeniques que nous fournit le mo-moire de MM. Roux et Yersin.

La diphlliörie semble ne pouvoirprendre que sur line muqucuse depouilh'e de son epithelium, sur unc muqucuse malade. Cc n'esl pas par pullula-lion qu'agit sur rorpanisme le bacille qui reste exclusivement localise duns la fausse membrane, mais e'est par action a distance, par secretion loxique, par son poison, en unmol. C'estace poison qu'il faul rapporter la morl, rapide des cas infec-lioux, e'est Ini qui est le facteur des paralysies (lijihlheriqnes immidiaies ou tardives; e'est lui enfln qui, imprignant I'Drganisme, marque sa presence par ces congestions visceralos, cet etat du sang, elc, que Ton constate a. I'autopsie, aussi bien dans la iliphlherie spontanee que dans la diphtheric expe-rimentale.

Le memoire de MM. Roux et Versin ronverse (h'finitivement la theorie de l'origine aviaire de la iliplitherir.

Les oiseaux de basse-cour sont souvent decimes par une maiadie encore mal connue dans sa nature, que les vetorinaires designent sous le nom de ilip'it/it'ric ou tuberculo-diphthamp;rie.

A diverses reprises, on a renianpie ['apparition

----L.i-----------IJ.----11-

DIPHTHERIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 393

de la diphdierie humaine dans dos exploitations, dos hameaux, des villages oü regnait la diphtherie des volailles, et plusieurs medecins out etabli entre ces deux fails unc relation de cause a ell'el. 11 ne s'agissait en realit(; ([lie de simples coincidences. La diphthörie des volailles csl. si fr^quente ({u'il n'csl pas etonnant d'en rencontrer dans les loca-lites on se montre la diphllierie de I'lioinme. Mais fort heureusement la concomitance des deux atfee-lionsesl except ionnelle, el c'esl par in ill iersque Ton pourrait citer les basses-cours ruinecs par la diphtherie, sans qu'aucun des enfants do la maison, qui jtasscnt la plus grande partie de la journee a se rouler sur le fumierau milieu des poules ma-lades, ait pris la diphtherie.

L'observation clinique u eile seule permettait deja de differencier les deux affections. La diphllierie des oiseaux, en ell'el, a une evolution trös lente el Jamals eile ne provoque de paralysies compa-rables ä celles c|ni sonl la caraelöristique de la diphtherie de I'liomnie.

A cet argument grave, on pouvail objecter que la difference des especes altcintes expliquait peut-elie la dillerence des effels observes; les experiences de MM. lioux el Yersin monlrent que les oiseaux, qui ne succombent pas dans les quelques jours qui suivent l'inoculation du bacille de Klebs, succombent tardiveinenl a la paralysie diphtheritique.

On pent en conclure que la diphtherie de I'liomme el celle des oiseaux sont deux affections de nature differcnte. (Nocard.)

FIN.

TABLE ALPHABETIQUE DES MATIERES

Pages.

Acido ac6tiquc.................................nbsp; nbsp; nbsp;138

nbsp; nbsp; nbsp;azotique.................................nbsp; nbsp; nbsp;138

nbsp; nbsp; nbsp;chlorhydriquo.............................nbsp; nbsp; nbsp;Kis

nbsp; nbsp; nbsp;sulfurique.................................nbsp; nbsp; nbsp; 138

Actinoinycose.................................nbsp; nbsp; nbsp;2i.quot;i

spontunoc.........................nbsp; nbsp; nbsp;24G

expcrimontale.....................nbsp; nbsp; nbsp;251

Actinomyces bovis...............................nbsp; nbsp; nbsp;)4!l

Aerobics........................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;la

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;facultatifs..............................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;lcgt;

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; stricts.................................nbsp; nbsp; nbsp; Id

A6ro-anacrobies................................nbsp; nbsp; nbsp; n;

Alcool absolu...................................nbsp; nbsp; nbsp;1:17

Anaerobies.....................................nbsp; nbsp; nbsp; 15

Appareil pour la culture des anaerobies...........nbsp; nbsp; nbsp; 28

Asrococcus.....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; (i

Autoclave.....................................nbsp; nbsp; nbsp; 56

Autopsie des siijcts................'.............nbsp; nbsp; nbsp; 69

Bacilles...;.. droits

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;on t'nseaii.....

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;;i ospacc clair.

quot;^^quot;

Vf: V 11

to'i

;i96 TABLE ALPHABETIQÜE DES MATIERES.

Pages.

Bacilles en battant dc cloclio....................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;7

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;virgule................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;7

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;du lait bleu.............................nbsp; nbsp; nbsp;ITS

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;tic la pommo do terro...................nbsp; nbsp; nbsp;178

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;du loin (B. subtilis)......................nbsp; nbsp; nbsp;171)

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;do la morve.............................nbsp; nbsp; nbsp;234

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;du charbon symptömatique...............nbsp; nbsp; nbsp;'i(iquot;i

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;du cholera des ponies...................nbsp; nbsp; nbsp;27:t

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;du cholera du pore.....................nbsp; nbsp; nbsp;'2b''l

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;du rouget du pore.......................nbsp; nbsp; nbsp;290

du farcin du boeuf......................nbsp; nbsp; nbsp;2'.).S

do la fievre fyphoide.....................nbsp; nbsp; nbsp;:i.'iH

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;de la diphterie.........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;:iS2

do la lepro............................nbsp; nbsp; nbsp;369

Bacterium termo................................nbsp; nbsp; nbsp;17il

Bacioridio cliarbonneuse.........................nbsp; nbsp; nbsp;ISO

Ballons.......................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;2:i

Ballons-pipettes Chamberland....................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;24

Baume du Canada..............................nbsp; nbsp; nbsp;1:!'.)

du Perou...............................nbsp; nbsp; nbsp;];!!)

Bleu Löffler...................................nbsp; nbsp; nbsp;13J

#9632; - Malasscz...................................nbsp; nbsp; nbsp;135

de Kühne................................nbsp; nbsp; nbsp;135

Bouillons.....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;:i.'i

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; purs...................................nbsp; nbsp; nbsp; ;i(;

pcpionises............................nbsp; nbsp; nbsp; 3C

concentres...........................nbsp; nbsp; nbsp; 39

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;non concentres.........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;39

Capsule (membrane d'envcloppe¹.................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;9

Carbonate de sonde..................... ......nbsp; nbsp; nbsp;138

C.armin.......................................nbsp; nbsp; nbsp;139

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;boraciquo....... .......................nbsp; nbsp; nbsp;139

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;(picro) de Ranvier...................,nbsp; nbsp; nbsp;139

Charbon bacteridicn.............................nbsp; nbsp; nbsp;18.'gt;

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; spontane....................nbsp; nbsp; nbsp;18.^:'i

des .iniiiiaii\.........nbsp; nbsp; nbsp;ISO

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; dc riiomine.........nbsp; nbsp; nbsp;180

pi¹J

TAÜLE ALPIIABETIQUE DES MAT1ERES.nbsp; nbsp; nbsp; 397

Pages.

Cliarbon expärimental...........................nbsp; nbsp; nbsp;ist

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; symptomatique spontane................nbsp; nbsp; i.^-,;

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; experimental............nbsp; nbsp; 35lt;j

Cholera des poules spontane.....................nbsp; nbsp; 208

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; experimontall................nbsp; nbsp; 27(1

nbsp; nbsp; nbsp; du pore spontane.......................nbsp; nbsp; 279

experimental...................nbsp; nbsp; 279

nbsp; nbsp; nbsp; asiatique spontane.......................nbsp; nbsp; 3/, j

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; experimental...................nbsp; nbsp; 354

Cbromogönea..................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 1 (_;

Cils et llagollnins.............................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; II

Cladotlirix....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;_(;

Classification morplinlugiqne dos microbes.........nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; s

Coccus........................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;c

Coloration simple dos lamolles dans les solutions

liydro-aleooliqnos................. .........nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 1 j-j

Coloration simple des lamolles par la mctliode de

Löffler..........,............................nbsp; nbsp; nbsp;_l47

Coloration simple des lamolles par la mctliode de

Malassez..................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;iz-

Coloration double des lamellcs : mctliode de Gram...nbsp; nbsp; nbsp;148

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; d'Elirlieli...nbsp; nbsp; nbsp;149 de Weigert.nbsp; nbsp; 149

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; simple des coupes ; motliode de Liinier..nbsp; nbsp; nbsp;105

de Malassez.nbsp; nbsp; nbsp;155

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;double des coupes : mctliode de Gram...nbsp; nbsp; nbsp;156

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; d'EhrUch...nbsp; nbsp; nbsp;156 . ~ de Weigert.nbsp; nbsp; nbsp;I5(;

Conservation de pieces pathologiques.........nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;7laquo;

Couleurs d'anilinc.....................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; .,,

Crcsyl 011 creolino...................... ftnbsp; nbsp; |-gt;-

Ciilturo sur pomme de terre en cristallisoir cloV. 54nbsp; nbsp;ns

procede lloux..... 55nbsp; nbsp;;|f)

nbsp; nbsp; nbsp; des microbes aerobics................. '-'^

- dans les milieux li(|uidcs...........nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;_s!)

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; solides transparents et demi transparents...................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;,.,.

Culture sur gelatine.................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;L,

nbsp; nbsp; nbsp; sur gclose....................... [ quot;quot;nbsp; nbsp; nbsp; '^Z

nbsp; nbsp; nbsp; sin-serum........nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; '

#9632;............................nbsp; nbsp; nbsp; 97

nbsp; nbsp; nbsp; sur pomme de terre................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 9-

PB. HF. MICROBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; o;)

398 TABLE ALIMlAHin'IQUE DES MATIEKKS.

[ages.

Culture sm- plaques : motliodc do kocli...........nbsp; nbsp; nbsp;100

_ d'Esmarch.........nbsp; nbsp; nbsp;107

_ deRoux...........nbsp; nbsp; 109

nbsp; nbsp; nbsp; dos microbes auaorobies.................nbsp; nbsp; nbsp;110

nbsp; nbsp; nbsp; des anaörobies'dans les bouillons.........nbsp; nbsp; nbsp;120

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; dans la solalino...........nbsp; nbsp; nbsp; I#9632;.'#9632;''

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;sur gelatine en plaques #9632;#9632;.nbsp; nbsp; nbsp;128

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; snr pomme de terre.......nbsp; nbsp; nbsp;131

en collide...............................nbsp; nbsp; nbsp;'i'

do la baetäridie.........................nbsp; nbsp; nbsp;19''

nbsp; nbsp; nbsp; du bacillo do Koch.......................nbsp; nbsp; 210

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; la mono..................nbsp; nbsp; nbsp;230

nbsp; nbsp; nbsp; du vibrion septique......................nbsp; nbsp; S-'r.'

nbsp; nbsp; nbsp; du bacillo du charbon symptomatique.....nbsp; nbsp; W-gt;

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; cholera dos ponies.........nbsp; nbsp; 275

dn pure............nbsp; nbsp; nbsp;283

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; rouget du pore.............nbsp; nbsp; 290

nbsp; nbsp; nbsp; du cladothrix du farcin du Ixruf..........nbsp; nbsp; 298

du streptococcus de la manimite contagieuse

dos vaches laitieres..........................nbsp; nbsp; 305

Culture du microbe do raraigueo.................nbsp; nbsp; 315

nbsp; nbsp; nbsp; du bacillo do la sopticemio spoiitaiiöo du hipiu........................................nbsp; nbsp; nbsp;^:i^:'l

Culture du bacillo do la sopticömic dos souris.....nbsp; nbsp; nbsp;331

du micrococcus totragonus..............nbsp; nbsp; ^:'gt;ld

nbsp; nbsp; nbsp; du komma-bacille cliolcra asialiquo......nbsp; nbsp; :iiquot;

nbsp; nbsp; nbsp; du bacillo typliique.....................nbsp; nbsp; 350

_ do la lepre...................nbsp; nbsp; 372

nbsp; nbsp; nbsp; du pneumococcus.......................nbsp; nbsp; ^:i77

nbsp; nbsp; nbsp; du bacillo do la dipbtboi-ie...............nbsp; nbsp; ^:isrt

Dosiufection dos cadavres.........................nbsp; nbsp; nbsp; li*

Diagnostic microblologique du rouget do Pasteur.. .nbsp; nbsp; T.n

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; du cholera du pore.....nbsp; nbsp; W-)

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; do la pesto porcine....nbsp; nbsp; nbsp;'2',)'t Diphterie.......................................nbsp; nbsp; 380

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; expörimontale..........................nbsp; nbsp; 384

Diplococcus.....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; #9632;'

TABLE ALPHABfiTIQUE DES MATlfiRES. 399

Pages.

Kau distilloo....................................nbsp; nbsp; nbsp;];37

d'aniline...................................nbsp; nbsp; nbsp;1:35

Essence do girolles..............................nbsp; nbsp; nbsp;139

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;de bergamote...........................nbsp; nbsp; nbsp;139

Ktlicr sulfuriqiie.................................nbsp; nbsp; nbsp;13g

fituve Pasteur...................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;SO

do d'Arsonval..............................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;88

Examen des cultures liquides sans coloration......nbsp; nbsp; nbsp;143

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; avec coloration......nbsp; nbsp; 1 i4

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; en provenance de milieux soli-

des sans coloration........nbsp; nbsp; nbsp;145

en provenance de milieux solides avec coloration........nbsp; nbsp; nbsp;150

Examen des liquides organlques sans coloration....nbsp; nbsp; 150

du sang avec coloration.................nbsp; nbsp; 151

nbsp; nbsp; nbsp; des scrosiles pcritonoalo, pleurale ot pcri-cardlque avec coloration.......................nbsp; nbsp; nbsp;151

Examen des pulpes d'organos, de la moello ossense

avec coloration................................nbsp; nbsp; nbsp;152

Examen de la pulpe nuisculairc avec coloration...nbsp; nbsp; 152

nbsp; nbsp; nbsp; du pus avec coloration...................nbsp; nbsp; nbsp;152

Farcin du bceuf spontane........................nbsp; nbsp; 295

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; experimental...................nbsp; nbsp; nbsp;295

Eiovre typhoide..................................nbsp; nbsp; nbsp;.35G

spontan ee........................nbsp; nbsp; nbsp;357

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; esperimentale....................nbsp; nbsp; nbsp;3CG

Forme dos microbes.............................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; i

Gazometres.....................................nbsp; nbsp; nbsp;113

Celatine.......................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;43

G close..........................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;45

Glycerine.......................................nbsp; nbsp; nbsp;138

2.1'

1; #9632;,

400 TABLE ALPHABfiTIQUE DES MAXIERES.

Pages.

Huilc d'aiiilino...................................nbsp; nbsp; 1^:38

nbsp; nbsp; do ccdi'c..................................nbsp; nbsp; 13!raquo;

Bumcur aqueusc................................nbsp; nbsp; nbsp; 42

Inociilatioas.....................................nbsp; nbsp; nbsp; Cl

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; superficielles, cndermiques............nbsp; nbsp; nbsp; G3

sous-cutanees........................nbsp; nbsp; nbsp; GS

intva-peritonealos.....................nbsp; nbsp; nbsp; Gi

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; intra-vcinenscs.......................nbsp; nbsp; nbsp; 61

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; dans la chambre anterieure do I'cBil....nbsp; nbsp; nbsp; G7

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; dans los voies digestives..............nbsp; nbsp; nbsp; 68

Komma-bacilles..................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 1

Lait............................................nbsp; nbsp; nbsp; 31)

Lames..........................................nbsp; nbsp; nbsp;142

nbsp; nbsp; crenses...................................nbsp; nbsp; nbsp;142

Lamelles........................................nbsp; nbsp; nbsp;1 iv

Lcptothrix......................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;flt;

Liqueur do Gram................................nbsp; nbsp; 13G

nbsp; nbsp; nbsp; d'Ehrlicb...............................nbsp; nbsp; nbsp;136

nbsp; nbsp; nbsp; do Weigert............................nbsp; nbsp; nbsp;13quot;

Liquide alUmtoidien........... .................nbsp; nbsp; nbsp; -i.i

nbsp; nbsp; nbsp; do I'hydroccle...........................nbsp; nbsp; nbsp; 43

Machine pneumatiquo a nicrcure d'Alvergniat......nbsp; nbsp; nbsp;113

Macrococcus....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; .'gt;

Mammile contagiouse, spnntaneo, des vaclies lai-

tieros...............................nbsp; nbsp; 301

TAULE ALPHAliETIQUK DES MATIKRES.nbsp; nbsp; nbsp; 401

Mamnüto contagieuse, cxpei-imontalo. des vaclics

laitieros............................nbsp; nbsp; nbsp;jqj)

gaiigrcnouso spontanoo des brobis......nbsp; nbsp; nbsp;;ill

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; expei'imentale des brobis..nbsp; nbsp; nbsp;313 Matieres colorantes basiqnes....................nbsp; nbsp; nbsp;igjj

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; acides.......................nbsp; nbsp; nbsp;13;{

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; d'inoculation..........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; gl

Matras Pasteur..............................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;2j

Microbes a Ibraio arrondie.....................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;5

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; allongeo.....................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;q

Spiralen......................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;7

de l'air. de l'ean.

181 1S4

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;do la suppuration.....................nbsp; nbsp; nbsp;251

do Taraignoe..........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;315

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;de la septicemio spontanoo du lapin.....nbsp; nbsp; nbsp;:j-gt;,s

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; des souris (Koch).......nbsp; nbsp; nbsp;.'!.:!;i

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;du cliolora asiatitjuc....................nbsp; nbsp; nbsp;3.5;,

Micrococcus...................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;c

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; prodigiosus..........................nbsp; nbsp; jgj

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; UlteilS..............................nbsp; nbsp; nbsp;|gg

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;aiirantiacns..........................nbsp; nbsp; nbsp;133

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; tetragenns..........................nbsp; nbsp; nbsp; 33jj

Microscopes..................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; I^q

Milieux do culture .........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;33 34

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; liquides......................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;35

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; solides......................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;43

opaques.......................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;53

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;prgauiques naturcls......................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;3;)

Modes do reproduction des microbes..............nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;!#9632;gt;

Morvc.......................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; ^'i

nbsp; nbsp; nbsp;spontanoo............................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 25,s

nbsp; nbsp; nbsp;experimentale...........................nbsp; nbsp; nbsp;230

Mouvements des microbes......................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; ' gt;)

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; brownien...........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;.,

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; amiboido..........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;g

Pathogcnes (microbes;........................... I ^

Pbospbate de potasso...........................quot; y^g

iOi TABLE ALPHABfiTIQUE ÜKS MATH-RES.

Pages.

Pipettes Pasteur.................................nbsp; nbsp; nbsp; 20

Plaques de vei're..... ..........................nbsp; nbsp; nbsp; -^

Pnenmonie flbrineuse...........................nbsp; nbsp; 3''%

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; exporhnontale..............nbsp; nbsp; 877

Pneumococcus.................................nbsp; nbsp; #9632;'quot;^J

Poison tliplitlioiique.............................nbsp; nbsp; nbsp;^:gt;89

Potasse...................................... #9632;nbsp; nbsp; nbsp;^l38

Preparation, coloration et montage des coupes I'aites

an microtome a congelation.........nbsp; nbsp; nbsp;15i

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; coloration et montage dos coupes I'aites

au microtome a la parafflne........nbsp; nbsp; nbsp;151

Recherche ties microbes dans les coupes de tissus.nbsp; nbsp; nbsp;15-3 _ par la me-

tbodc de kühne....................nbsp; nbsp; 'd

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; du bacille de Koch dans rorganismo. .nbsp; nbsp; nbsp;207 des microbes dans 1c pus.............nbsp; nbsp; nbsp;2.quot;i2

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; du bacille typhique dans Toan........nbsp; nbsp; 365

__ dans rorganisino..nbsp; nbsp; WJ

llecolto des produits pathologiques sur le sujet vi-

vant.........................................nbsp; nbsp; nbsp; ^G8

Resins d'Ammar.................................nbsp; nbsp; nbsp;139

Houget dw pore spontane.......................nbsp; nbsp; 285

experimental....................nbsp; nbsp; 286

Saprogencs (microbes)...........................nbsp; nbsp; nbsp; 16

Sarcincs........................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 5

Sarcina lutca....................................nbsp; nbsp; nbsp;183

Scissiparitc......................................nbsp; nbsp; nbsp; '2

Sei marin......................................nbsp; nbsp; nbsp;138

Septiccmie de Pasteur.........................nbsp; nbsp; 2:i8

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; experimentaio ............nbsp; nbsp; 2:!9

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; spontanee du lapin...................nbsp; nbsp; 320

__ experimentale......nbsp; nbsp; 322

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; oxperimeniale des souris (Koch).......nbsp; nbsp; 3;!4

TABLE ALPIlAliETIQUE DES MAXIERES.nbsp; nbsp; nbsp; 403

Pages. Serum......................................... 'raquo;;! 47

Solutions alcooliqaes sauirces....................nbsp; nbsp; 1-34

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; hydro-alcooliques....................nbsp; nbsp; nbsp; 134

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; iodo-ioduroe do Gram...................nbsp; nbsp; I3C

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; acidc docolorantc d'Elirlicli..............nbsp; nbsp; nbsp;130

Spirilles.........................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;7

Sporulation.....................................nbsp; nbsp; nbsp; 13

Staphylococcns..................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; U

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; pyogenes aureus.................nbsp; nbsp; 2.'gt;4

all)iis..................nbsp; nbsp; 255

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; citrons.................nbsp; nbsp; 200

Sterilisation do la verrcric........................nbsp; nbsp; nbsp; :il

Streptococcus...................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; ß

Structure des microbes...........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 8

Sublime...................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;]:57

T etrades....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 5

Trotnpe a eau d'AIvergniat..................... 113,117

Taberculose..................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 138

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; spontanee...........................nbsp; nbsp; 199

experimentale.......................nbsp; nbsp; 20;!

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; zooglceique..........................nbsp; nbsp; 220

Tubes a cssai.................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 2,^rgt;

nbsp; nbsp; nbsp; double do Pasteur........................nbsp; nbsp; nbsp; 28

nbsp; nbsp; nbsp; simple do Pasteur........................nbsp; nbsp; nbsp; 21)

nbsp; nbsp; nbsp; pour culture des anaorobics dans la gela-

tine....................................nbsp; nbsp; nbsp; 23

nbsp; nbsp; nbsp; pour culture en plaques des anaerobies... ,nbsp; nbsp; nbsp; 30

Urine

Vase ü serum.................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;27

Vibrion septique................................. 210

404 TABLE ALPHAMTIQüE DES MATIERES.

Xylol.

Pages. . ISO

Zooi'loc.s

l!;.^;!

TABLE DES FIGURES

Pages.

Ageacement do la trompe ä oau..................nbsp; nbsp; nbsp;11laquo;)

Aiguille creuse, a extremitc mousse.............nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;(;;,

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; pointuo.............nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;65

mousse et pointue, montöcs sur la

seringue do Pravaz............nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;05

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;de platine.............................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;81

Appareil de kocli, pour cultures en plaques.......nbsp; nbsp; nbsp;10:gt;

Araignoo........................................nbsp; nbsp; nbsp;312

Autoclave.........................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;-

Ballons.....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; -tj

Ballons-pipettes Chamberland..................nbsp; nbsp; nbsp; 2i

Boite en tulo (sterilisation dos plaques de verrej,..nbsp; nbsp; nbsp; 20

Canule pour recolte du sang sur I'animal vivant...nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;47 pour lo möme usage : sa disposition avaut et

apres la sterilisation....................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;.',$

Charbon.................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;I;)-)

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;symptoaiatiqup.........................nbsp; nbsp; nbsp;264

Cliolöra dospoulos.............................nbsp; nbsp; nbsp;-177

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;du pore................................nbsp; nbsp; nbsp;289

lit

406nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;TABLE DES FIGURES.

Pages.

Cholera-asiatiqiie...............................nbsp; nbsp; :i-iG

Cloclio formant chambre luimidc..................nbsp; nbsp; nbsp;102

Cristallisoir clos.................................nbsp; nbsp; nbsp; li'-i

clos ä Ouvertüre laterale.............nbsp; nbsp; nbsp; 54

Culture du baciile do koch......................nbsp; nbsp; 209

do la morve...................nbsp; nbsp; T-te

fituve Pasteur...................................nbsp; nbsp; nbsp; 87

nbsp; nbsp; do d'Arsonval.............................nbsp; nbsp; nbsp; S9

Four a llamber do Pasteur.......................nbsp; nbsp; nbsp; :!2

Farcin du bceuf dans le pus......................nbsp; nbsp; 235

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; dans un tubercule...............nbsp; nbsp; 207

Gonococcus.....................................nbsp; nbsp; :iitj

Lame creuse....................................nbsp; nbsp; nbsp;145

Machine pneumatique a mercuro d'AIvergniat.....nbsp; nbsp; nbsp;115

Mammite contagieuse des vaclies laitiores.........nbsp; nbsp; 304

Matras Pasteur..................................nbsp; nbsp; nbsp; 22

Jlicrococcus tetragenus..........................nbsp; nbsp; WO

Palette do platine...............................nbsp; nbsp; nbsp; 81

Petit banc en verre..............................nbsp; nbsp; nbsp;101

TABLE DES FIGURES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;407

Pages.

Pipette Pasteur..................................nbsp; nbsp; nbsp; #9632;gt;!

a etii-emont superienr.............nbsp; nbsp; nbsp; :gt;i

l¹la(|iic do verre.................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; #9632;,gt;()

I'latine chauSante...............................nbsp; nbsp; nbsp;1 Id

Rouget (In pore................................nbsp; nbsp; -,'88

Sarcina lutea....................................nbsp; nbsp; nbsp;18 i

Sopticcmie spontancc du lapin...................nbsp; nbsp; nbsp;:!#9632;,'.quot;gt;

cxpcrimontalc de la souris............nbsp; nbsp; :i:i(i

Staphylococcus pyogenes aurcus..................nbsp; nbsp; 339

Sterilisatonr a scrum.............................nbsp; nbsp; nbsp; :,#9632;gt;

Triangle eu bois, a vis calantes...................nbsp; nbsp; nbsp;10)

Trompe a eau..................................nbsp; nbsp; nbsp;11:

Tube double de Pasteur.........................nbsp; nbsp; nbsp; 59

nbsp; nbsp; simplo de Pasteur.........................nbsp; nbsp; nbsp; 29

nbsp; nbsp; nbsp;a essai.....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;25

nbsp; nbsp; nbsp;a gelatine pour culture dans le vide.........nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;:!0

nbsp; nbsp; pour culture en plaques des ana6robies.....nbsp; nbsp; nbsp; :S0

nbsp; nbsp; ä pomme do terre de liou\ pour culture en

presence do I'air.........................nbsp; nbsp; nbsp; .-,5

nbsp; nbsp; de Roux pour culture sur plaques dans la g6-

latiue....................................nbsp; nbsp; nbsp;lOO

nbsp; nbsp; double do Pasteur, ensemouce. mouto siu-

le tube en T do la trompe au monieiit oil

Ton va fairo le vide ......................nbsp; nbsp; nbsp;118

nbsp; nbsp; double do Pasteur prepare pour rensemence-

meut..................................nbsp; nbsp; nbsp;J2|

nbsp; nbsp; simple do Pasteur prepare pour I'ensemencc-

ment....................................nbsp; nbsp; nbsp;122

nbsp; nbsp; nbsp;a gelatine prepare pour le vide et 1'ensemon-

comont..................................nbsp; nbsp; nbsp; |20

408nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;TABLE DES FIGURES.

Pages. Tube 4 gölatine pour culture dans lo vide: sa dis-

position aprcs rciisemciicoment............ \'i8

nbsp; nbsp; do lioux pour culture des anaerobies stir gela-

tine en plaques : sa disposition au moment oil le tube va etro mis en communication avee la machine a vide.................... 129

nbsp; nbsp; do Uotix pour culture des anaerobies sur ge-

latine en plaques......................... I quot;JO

nbsp; nbsp; de lioux pour culture des anaerobies sur gela-

tine par remplacemcnt de l'air par nn gaz inerte.................................... 130

nbsp; nbsp; a pomrae de terre de lioux pour culture dans

lo vide................................... 131

nbsp; nbsp; a pomme de terre do Roux pour culture dans

le vide : disposition du tube lorsque le vide

y cat fait................................. 132

Tubci'culosc du cheval........................... 209

du chat............................. quot;M-2

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; du faisan........................... 222

nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; zoogbciquc.......................... 222

Vase a sörum................................... 21

Vert d'eau non Uqueflant.... .................... ISl

Vibrion septilt;)ue................................. 253

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CHAMBERLAND, chef de 8er\'ice ä I'lnstitut Pasteur, D'' GRANCHER. professeur ;'i la Faculte de mfidecine,

NOCARD,directeur de l'ficole vfitÄriuaire dAlfort, D¹' ROUX, chef de serviceä I'lnstitut Pasteur, D¹' STRAUS, professeur ,'i la Faculty do m6decine.

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			_
__	__^__	. - ______



	TABLE DES MAXIERES

	l'liKMIERK l'ARTll-:

	CHAPITRE PREMIER Pages. A.nbsp; Historique sommaire : Pasteur et sos cloves. li. Kncli.....................................nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;1 B.nbsp; nbsp; Gencralucs sin- les microbes. 1. Lours formes, leur classification morphologique. 2. Structure des microbes. 3. .Mouvements des microbes. 4. Modes de reproduction des microbes. ,'gt;. Nutrition des microbes, les aerobics et los anaeroblcs. Leur diffusion dans la nature : microbes de l'air, de l'eau, du sol. Les microbes saprogeues, chromogencs ct patho-genes....................................... i CHAPITRE DEUXIßME A. Instruments do verrorio : Pipettes Pasteur. Matras Pasteur. Ballons. Ballons-pi-peites Ghamberland, Tubes a essai. Plaques de vcrre. Vases a serum. Appareils pour la culture des microbes anaorobies............ 19 15. Sterilisation de la verrerie : Four a flamber do Pasteur.................................... .31



	XIV	TABI.K DES MAT IHK ES.

	CHAPITRE 'IT.OlSlftME Pages. Milieux de cii.tcre : leurs modes de preparation, LEURS MODES DE STEiaLISATD)N. L'aVTOCLAVE. . . . 35 A.nbsp; nbsp;Jlilipux de culture lilt;[iudes : Lcs boiullons. Le lait. L'urine. L'humeur aqueuse. Le serum liquide. Liquide allantoidien et liquide de l'liydrocele........................ 3.'gt; B.nbsp; nbsp;Milieux de culture solides : A. Milieux trans-parents : gelatine, gclose. B. Milieux demi-transparents : serum. C. milieux opaques : Pommes de terre, etc........................ 43 L'autoclave : son modo de fonctionnoment......... SU CHAPITRE QLATRIHME Experiences sen lf.s ammaux..................... 00 A.nbsp; nbsp;Dos inoculations. Matii'res d'inoculation. Procodes divers d'inoculation : inoculations sous-cutanees; inoculations intra-peritonoales; inoculations dans les veinos; inoculations dans la cliambre anterieurc de l'oeil; inoculations patios voies digestives ....................... Cl B.nbsp; Hccoltc des produits pathologiques sur I'animal vivant...................................... OS C.nbsp; Autopsie des sujets : nianiere do lixer les divers sujets; ouvorture des cadavres; recolto des produits organiques (luunours ot tissus ... 69 D.nbsp; Conservation dos pieces pathologiques........ quot;(j E.nbsp; Disinfection des cadavres.................... quot;S CHAPITRE CINQIIEME Technique genärale des cultures................. 79 A. Culture des microbes aerobics............... 79 I, Culture dans les milieux liquides : culture dans les bouillons, le lait etc............. 82



	\ I	XVInbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;TA15LE DES MAT1EUES. Pages. V.nbsp; Scpticemic de Pasteur...................nbsp; nbsp; 238 VI.nbsp; Actinomycose...........................nbsp; nbsp; 345 VII.nbsp; Micro-orgaaismes de la suppuration.......nbsp; nbsp; 351 GHAPITRE TliOISIKME Maladies microbiensbs sigt;eciai.es ai:x animaux.....nbsp; nbsp; 357 I. Cbarbon bactei-ieu......................nbsp; nbsp; 257 11. Cliolera des poules....................nbsp; nbsp; 3G7 III.nbsp; Cholera du pore........................nbsp; nbsp; 278 IV.nbsp; Rouget du pore.......................nbsp; nbsp; 285 Du diagnostic microbiologique du rouget du pore, du cholera du pore, et de la posto porcine......nbsp; nbsp; 3!)2 V. Farcin du boeuf........................nbsp; nbsp; 29i VI.nbsp; Mammito contagieuse des vaches laitieres.nbsp; nbsp; 300 VII. Jlammite gangreneuse des brobis laitieres.nbsp; nbsp; 310 VIII.nbsp; Septicemic spoatanee du lapin (Inidit)...nbsp; nbsp; 31!) IX. Deux maladies inicrohiennes e\perimon- tales : A.nbsp;Septieeiuie expörimentale dos souris de R. Koch.nbsp; nbsp; 334 B.nbsp; Microeoccus totragenus......................nbsp; nbsp; 338 CHAPlTRE QUATRIEME Maladies micdobiennIbs speciai.es a l'hom.me........nbsp; nbsp; 343 I. Cholera asiatique........................nbsp; nbsp; 343 II. Ficvro typhoide..........................nbsp; nbsp; 350 III.nbsp; Lcpre...quot;.............................nbsp; nbsp; 308 IV.nbsp; Pnoumonie Bbriaeuse....................nbsp; nbsp; 373 V.nbsp; Diphtorie...............................nbsp; nbsp; 380 Table alphabetique des matieres. ..............nbsp; nbsp; 305 Table dos figures.............................nbsp; nbsp; 405
	\ I
	*i'.\*



	CI1APITRE II

	, IsSTRnlENTS HE VERHER1E : PipcttOS PftStOUr. --- Mutl'it^ PastCUl'. nbsp; Ballons. Ballons-pipettes Cliumlierluiui. Tubes ;\ cssai. nbsp; nbsp;Plaques tin verpe. Vases ä laquo;örutn. Appareils pour la culture dos microbes anaerobies. !. STtaiLiSATiON ue la vEimEniE : Four ü Ilamber tie Pasteur.

	A. INSTRUMENTS DE VERRERIE Nous nc mcnlionnerons dans cct article que les instruments d'un usage courant et general. Xous rejetons absolument une fonle d'appareils d'uno utilitö ou contestable on trop restreinte, qui ne servent qu'ä encombrer les laboratoires et ä sur-charger les descriptions techniques. Xous omettons, pour I'instant aussi, certains appareils dontilsera parle plus ntilement ailleurs, par exemplc aux articles : milieux de culture, technique den matures. Xous allons decrire successivement : I.nbsp; La pipette Pasteur. II.nbsp; Les matras Pasteur. III.nbsp; Les balbns.



	20nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; INSTRUMENTS DE VERRERIE. IV.nbsp; Les ballons-pipettes Chamberland. V.nbsp; Lcs lubes a cssu't. VI.nbsp; nbsp; Lcs phvitii's Jc verve pour cultures en plaques. VII.nbsp; Les vases ä serum. VIII.nbsp; Les appareils pour la culture des microbes anaerohies. D'une facon geiK'rale tons cos appareils doivent etre prepares a I'avance, laves, sterilises, ot conserves dans lo laboratoire, en attendant cpi'il en soil fait usage, a l'abri de la poussiere.

	I. Pipettes Pasteur. La fifirnre ci-contre (flg. I) donne la representation do oe petit instrument, qui est d'un usage journalier dans la pratique de la bacteriologie. La preparation des pipettes Pasteur est d'une exlreme simplicity; un court apprentissage donnera I'habi-lote manuelle necossaire. Prenez un tube de verre dc cinrj h. six millimetres de diametrc, d'epaisseur moyenne, long de I^m, 20 centimetres environ ; essuyez-en soigneusoment la surface; coupcz-le par des traits do lime enquatre fragments dc treiite centimetres environ ; vous aurez ainsi quatre pctits tubes droits. I'renoz un do cos tubes, chauffez-le ä la flamme du chalumeau ä gaz ä sa partie moyenne en lui imprimant enlre los doigts un mouvement de rotation rapide : quand lo verre cntre on fusion oeartoz de la flamme etetirez lentement de facon ä obtenir unc longue eflilure ; separoz alors la partie effiloe on son milieu. Vous aurez ainsi deux pipotles ter-minees par uno extrßmitö capillaire que vous scellerez immediatement a la flamme.



	TUBES A ESSAI.

	pörieur, doublemont rocourbe qui sc termine en s'amincissant. Cc tube ost dosigrio sous le nom d'ct'lilurc latä'rale, Onlave soigneusement le ballon-pipette; on garnit le tube supericur d'un tampon d'ouate qu'on pousse en fornmt jusqu'ä l'ötrangle-ment; on scelle ä la lampe Üextrömitö de l'effilure laterale, et on porte le ballon ainsi prepare dans le four a flamber. Cos ballons-pipettes sont destines, ainsi que nous I'expliquerons plus longuement ailleurs, ä eonserver les bouillons sterilises jus-qu'au moment dc leur transvasement Jans les malras Pasteur.

	V. Tubes ä essai. Ccs tubes (fie;. 6) scrvent aux cultures sur milieux solides (gelatine, gelose, serum, etc.). Leur diametre cst ordinaire-ment denn centimetre 1/2 ädeux centimetres. Ils doivent se termiuer ä la par-lie superieure par des bords droits; il faut rejetcr les lubes dont les bords circonscrivant 1'ouverture se renversent en dehors : eel evasemont conslitue une dil'ficultc dans l'application des capu-chons en papier-filtre dont nous par-lerons plus loin. Les tubes ä essai seront laves, seches Fig. ü. et bouches iirouate. Nous avons,cnpar- , ¹quot;^lquot;^!. lanl ci-dessus dos ballons, decril un procede commode pour confectionner les tampons d'ouate: ce procede trouveson application ici. Les tubesa essai laves, seches, bouches, seront sterilises dans le four a flamber.

	I'll. DE niCROBIG.



	STERILISATION DE LA VERRERIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; :31 metres environ, d'un diametre de 3 centimetres, portant ä cliacune de ses extrömites un tube H, B' de pcüt diamelrc. Cos tubes BB' so recourbent ä an^lc droit, et sont fernies ä leur exlremite par un tampon d'ouate (flg. 12 bis), L'appareil alnsi prepare et lave scra portö dans le four ä ilamher (lig. 13).

	B. STERILISATION DE LA VERRERIE L'appareil le plus pratique pour la sterilisation des instruments de verrerie cst incoutestable-mcnt le four Pasteur (voyez fig. 13). C'est un ap-pareil en föle, ä double paroi, ä retour de llammes, avec briileur a gaz a la partie inferieurc, et clie-minee laterale. Los dimensions en sont tres variables. Ce four est forme ä sa partie superieuro par un couvercle pcrcc d'un trou dans lequel on fera penetrer un bouclion traverse par un thermoraetre. Dans Finterieur du four on disposorales instruments ä llambor; cos instruments seront ii cot etl'et places, rextrömite qui piorte I'ouate tournee en haut, dans un panier en tolle melalliquo, ot ce panier sera porte dans la chambre du four. Lors-quo le panier cbarge des objets ä flambcr cst en place, mettcz le couvercle, placez le bouchon portant un thormometre, allumoz le gaz, et laissez monier la temperature ä 170 ou 180quot;. A ce moment reglez la temperature par tdton-ncmont en fermant etouvrant le robinet d'amenee du gaz, dc facon ii obtenir uno temperature moyenne de 170deg; quo vous maintiendrez pendant



	GHAPITRE III MILIEUX DE CULTURE : LEURS MODES DE PREPARATION, LEURS MODES DE STERILISATION. LAUTOCLAVE.

	A. Mll.lFXXDE CLLTL-RK I.IIJtJlDES '. I,0gt; llOuil lOIlS. Lu !;iit. ---- L'tirillP. L'faumeur aqueuse. Le serum liquide. LiquideallaQtoidieo et liquide de l'hydrocele. I!. Miliel'x de cültliie solides : A. Milieux tiMiiFpitreuU ; Gelatine, gelose. B. Milieux serai-transparents : Serum. C. Milieux ü[gt;:iqucs : Pommes de terre. hetteraves^ etc. L'Autoci.avk : Sou mode de fonctionnenient.

	Los microbes qui tivolucnt aaturellcraont Jans reconoinie de l'homme et des animaux, dans les matteres liquides putroscibles, etc., sont suscep-tibles de vivre et de pulluler dans de veritables terrains artiticiels que los microbiologistes out composes, et auxquels on donne le nom do milieux de mltwe. Cos milieux de culture doivent, pour so preler ä la vie des microbes, remplir les deux conditions suivantes : 1deg; Ils doivent contonir les prindpes nicessaires ä la nutrition de ces organismcs. 2deg; Ils doivent etre absolument steriles, c'est-ä-


	T I

	42	MILIEUX DE CULTURE LIQUIDES.

	la bacturidie charbonneuse. Cost un milieu qui peut ii l'occasion rendre des services. Prcparatiun. On recueille Jo riirino; on la filtre sur un papier Laurent; on 1'alcaliaise, puis on la sterilise comme un bouillon. On la laisse reposer, et on la distribue dans des mal ras Pasteur qua Ton place ä I'eluve; eeux qui se troublent dans les vingt-quatre heures sent rejetes. On pout ajouter ä Furine tonte espoce de pro-duils, Sucre, glycerine, etc., etc.

	C. HUMEUR AQOEUSE. On emploie avantageusement I'humeur aqueuse dans les cultures speciales connuos sous le nom do cultures en cellules. Koch s'ost servi de cetle culture en cellules avec I'humeur aqueuse pour otudier revolution do la bacteridio charbonneuse. Preparation. On extirpe I'ceil d'un sujet sa-crilie tout recemment; Fospece do Fanimal est indidoroute. On recueille alorspiwementI'humeur aqueuse contenue dans la chatnbre anterieure de cet ceil de la facon suivante : On saisitl'cBlI dans la main gauche; on cauterise la surface externe do la cornoe avec rexlremito d'une baguette dc verre chauflee dans la flamme d'une lampe ä alcool. On prend unc pipette Pas-tour preparöe et slorilisoe comme il est dit au chapitrell, on on brise lapointe offilee, et on passe I'effllure plusieurs foisdans la flamme do la lampe a alcool pour en steriliser la surface cxlorieurc. Avec cette pipette on ponctionne la cornee au point cauterise ; I'humeur aqueuse sVleve dans la pipette; uns legere pression du globe oculaire permet d'obtenir la quantitö de liquide voulue. On retire la pipette et Ton forme son extremitö ä la lampe.




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	DES INOCULATIONS.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 61 aux animaux de grande taille, ils sont beaucoup plus coüteux, par consequent plus impropres encore aux expediences simples de laboratoire : nous n'en parlerons done pas ici.

	A. DES mOCULATIONS Nous allons exposer rapidement la conduite genorale ä lenir dans la pratique des inoculations; nous reviendrons en temps et lieu sur les cas spe-ciaux. Nous conseillons do se servir exclusivement pour les inoculations (les inoculations super-licielles, dermiques excepteos) de la seringue de l'ravaz. Elle pennet tin dosage exact de la matierc inoculee, eile cst d'un maniement facile, ä la difTe-rence de la seringue ä ballon imagiuee par Koch, seringue dont les pieces s'ajustent mal et laissent trop souvent fuir le liquide pendant les manoeuvres opöratoires; enfin eile se sterilise facile-ment si Ton veut bien choisir un liquide (jui, comme le cresi/l ou crioline, est un bon desinfec-tant et ne deteriore aucune des pieces de l'appa-reil. Dans 1'Intervalle des inoculations, la seringue de Pravaz sera remplie du liquide disinfectant; au moment oil Ton devra en faire usage, on chassera le disinfectant et Ton rincera plusiours fois le corps de pompe ;i I'eau distillee. 1. Matieres d'inoculation. Les matieres d'inoculation sont de deux sortes : 1deg; Produits dcndtaic; 2deg; Produits pathologiques. iquot; Produits de culture. Les cultures proviennent lantöt de milieux liquides, tantot de milieux solides. PH. DE MICROBIE.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; 4



	GHAPITRE V TECHNIQUE GENERALE DES CULTURES.

	A. CCLTDBE DES MICRÜUBS AEROIllKä. I.nbsp; Culliiro duns les milieax liquides ; culture dans les liouillons, le lait, etc. II.nbsp; nbsp;Culture clans les milieux solides tronsparentset demi-tpanspa- routs : gelatine, gelose, serum. HI. Culture sur milieux opaques : pommes de terre. IV. Culture en plaques, li. Cultliie nES MicnonEs ASAEtioniKS ; Culture dans les bouillons, 1c tail etc., sur gelatine, sur gelose. sur pommes dc terrc, en plaques.

	Les cultures se font tantöt en presence de l'air, tantöt ä l'aljri de l'air, soit dans le vide, suit en presence d'un gaz inerte. Le premier procede convieut aux microbes aerobics, 1c dcuxiemc aux microbes absolument on fa-cultativement anaerobies. Nous decrirons done successivemont : A.nbsp; La culture dca microbes aerobics; B.nbsp; La culture des microbes anaerobies. A. CULTURE DES MICROBES AEROBIES Les milieux dc culture employes sont, ainsi que nous l'avons dit ailleurs, liquides on solides, et les




	CULTURE DES MICROBES AEROlilES. fes sur lo iiclit appareil connu en histologic sous le nom tic porte-aiguille, appareil dont la garniture en cuivrepermetde variera volonto la longueur du fil qu'elle cngaine, et assure la fixite parfaite de celui-ci. Les Allemands montent ordinai-remout les fils dc plaline sur unc baguette de verre plein, et cette monture se fait cxtemporanerncut. Nous ne la conscillons pas, car il cst impossible avec clle do varier la longueur du fil; la fixite est uioius grande; et la pratique du llainbago fait a, tout instant eclater rextremilö du verre dans laquelle s'enchdsse 1c lil dc platine. Lorsqu'on doit se servir du lil de platine, on commence par 1c steriliser, ce qui se fait en le por-tant au rouge dans toute son etendue sur la flamme de la lampe ä alcool, d'un bee Bunsen, etc., el on attend qu'il soil refroidi, ce qui n'exige, on le salt, que quelques sccondes; I'appareil est alors pre t pour I'usage voulu, mais il laut s'en servir des qu'il est froid, sam dilai, sous peine de perdre tout le benefice de la sterilisation. En regle ahsolue, des quo le lil de platine a etc mis en usage, il iloit itre soigneuscmeiU stärüisi, de facon ä ce qu'il no reste ä la surface aucune parcelle de substance virulente.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; Fig. 2	8)



	CULTURE DES MICROBES AEROBIES.nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; HI (fig. 23) remplit partaitement le but, et se prole



	Fi;;. 2:1. Etuve Pasteur. aux temperatures jusqu'ä 4.^:i⁰. C'est une etuve en hois, avec double paroi, double porte vitrec,



	CULTURE UES MICROBES AEIIOB1ES. 101 4deg; Des petits bancs en verre (flg. -20); ;i⁰ Ucs plaques do verre stirilisies et contenues jusqu'au moment oü elles devront etre mises en



	Fig. 25. Triangle en ljui.s ä iis cslantes. usage ilnns une bolte on töle störilisöe; nous avons decrit ailleurs cetteparlie do I'appareilet sasteri-lisalion (voyez chap. If);



	Fig.	- Petit banc en vlaquo;

	6deg; lino cloche on verre composöe do deux parties : a) un cristallisoir reconvert par, b) un cou-verck de memo forme, plus grand ot portant sursa face suporieure un boulon do verre (flg. 21 j. G-



	CULTURE DES MICROBES AEROlilES. 103 qui la composcnt nvant cto cral)ordsolgneusciTioii(, ncttoyöcs, on place dans 1ü cristallisoir inferiour une feuille de papier ültre tailloe en rond, el d'un diametrounpeu moindre que le diametre interieur dc ce cristallisoir. On verse duns chacune des deux parties de la cloche une solution dc sublime a 1 p. 1000; on la promene sur toute la surface in-terieure du cristallisoir; on vide completemeut 1c cristallisoir superieur, mais on ne fait ecouler qu'en partic la solution desinfectante du cristallisoir inlerieiir; on y laisse la quautite neccssaire pour lenir 1c papier liltre humide. On ferine la cloche, et on la place sur la plaque de verrc. On disposealors äportee, dansunrecipientrem-plide sublimeau millieme, trois bancs de verre, el aussi dans ce meme recipient trois bandes de papier liltre de la largeur et de la longueur des bancs de verre; on numero te I. II. III. ces ban des de papier. On place encore a portee la holte on teile conte-nant les plaques de verre störilisecs, uns lampe ä alcool, un 111 de platine fort, et des pipettes. On prend alors trois lubes de gelatine I'aiblement remplis; en hiver onscservira de gelatine pure ; en etc on prondrade la gelatineaddilionnee de gölose. On porte ces tubes ä I'etuve ou dans un bain-marie pour les liquefier. Le contenu du tube 0 qui renferme la culture dont les germes doivenl itre Isolds sera lui-momo rendu liquide de la möme facon, s'il no 1'est de.ja. On saisil alors le tube 0; on le place entre le pouce et l'index de la main gauche cöle ä cöle avec un des tubes de gelalinc fondue ä I'etuve ou au bain-marie. Ondebouche Fun et l'autre lube; avec une pipette slerilisee (1), el dont I'effilure vient (1) La pipette nous paniit rcmplacer avantageusement le fit tip, platine fin, termine en anneau, que les Allemaixls ernploient dans ie meme but.



	CULTURE DES MICROBES AEROR1ES. 10b cloche au-dessus, et ä aussi petite distance que la manoeuvre 1c permet, ducristallisoir inferieur. ün debouchc le tube 1; on en verse le contenu, ou une partie du contenu, suivant la dimension de la plaque de verre, sur celle-ci; alors avec un lil de



	Fig. 28. Appareil do Koch pour cultures on plaques. (Lacloche demi-ouverte laisse voir ii 1'lnterieur la disposition des plaques sur les petits bancs de verre.)

	platine forl, rccourbo a angle droit vers sa termi-naison, llambe sur la flamme de la lampe h al-cool, etrefroidi, on etale la gelatine sur la plaque de verre. L'aide maintenant toujours le couvercle en bonne position, ou fcrmant et ouvraul la cloche suivant le besoin, on dispose au-dessus de cette plaque do verre un banc de verre reconvert de son papier-filtre TI; les pieds de ce banc de verre repo-scront sur le banc sous-jacent. Sur ce banc de verre on place perpendiculairemcnt asa direction



	CULTUBE DES MICROBES AEROBIES. 107 Si la colonic a cueillir est bion isolee, bien en vue sous I'objectif, allez directement la cueillir avec le fil de plat!no on la pipctlc en dirigeant la manoeuvre do roeil. Si la colonie est entoureo d'autres colonies ä proximite, et par consequent mal isolce, main-tenez I'oeil sur le microscope; dirigezpar tatonne-ment l'extreniite de votre lil de plaline ou do votre pipette jusqu'a ce que vous I'aperceviez sous Tob-jectif au milieu de la colonio choisie. Piquez alors celle-ci, et chargez-en i'extremile de rinstrumont. Dans Tun et Tautre cas on verra que I'operation a reussi lorsque la colonie aura disparu du champ du microscope et qu'il ne rcstera plus a sa place qu'une surface de gelatine dissociee. La colonie enlevce sera immedialement ou examinee sur lamelle, ou onsemencce dans un tube do gelatine, geloso, etc., etc. Nous avons dit en commencant cet article quo la culture sur plaques permettait d'eludier la forme quoprond la colonie d'une bacterio donnee. Lorsque possedant une culture pure do tel ou tel microbe on desire connaitre la forme des colonies de co microbe sur la gelatine, on procedo do la 1'acon que nous avons indiquee, mais il n'cst pas necessaire alors de faire un aussi grand nombrc de plaques : une ou deux suffisent, la premiere contenant une goutte de la culture originale, la deuxiome contenant une goutte du tube d'ense-mencement de la premiere plaque : on aura do cotte facon sur Tune et I'autre plaque des colonies suflisamment isolees. B. Cultures sub plaques par la uethode ü'ksmarch. Esmarch a propose do modifier la methodo do Koch do la facon suivante :



	CULTURE DES MICROBES ANAEROBIES. ill l'oxygene, et les anaerobies peuvcnt s'y dove-lopper. Mais ootte metUode sc prüte mal laquo; ix roxamon, a L'etude,et äla reiiioculationdes colonies formecs, qu'il taut, aller peuibleincnt chercher, apres avoir casse le lube, au milieu de la masse gelatincuse qui les contient raquo; (Duclaux, locu citato). Unc aulre mcthode allemande consiste a laquo; faire rouler sur la paroi Interieure du tube la gelatine ensemencee jusqu'ä ce qu'elle y fasse prise, lais-sant ainsi un vide central qu'on remplit de gelatine sterile raquo; (Duclaux). Ccttc methodo n'a pas donne ä ses auteurs le resultat attendu. Liborins et Prsenkel ont imagine un procede base sur le remplacement de Fair par un gaz inerte. Liborius faisait laquo; barboter de Fhydrogene dans le milieu nutritif contenu dans un tube muni dune cftilure laterale, et ccla jusqu'ä elimination des dernieres traces d'air. raquo; Cot auteur tcntait aussi, mais avec asscz peu de succes, de cultiver les anaerobics sur plaques dans une atmosphere de gaz hydrogenc. La methode de Fraenkel cst assez simple. laquo; II se seit d'un simple tube a cssai, ferme par un bouchon de caoutchouc par lequel passent deux tubes coudes, un lube d'arrivoe, qui s'enfonce Jus-qu'au fond du tube, et un tube de sortie, qui commence au-dessous du bouchon. Cos deux lubes quot;sont au prealable efflles dans lour partie extc-rioure et fermes avec des tampons d'ouate. Le lube ä essai et le milieu nutritif ayant ete sterilises convenaldement, on fait passer un courant d'hyilrogene obtenu avec du zinc pur et de l'acide sulfurique pur, el lave, de facon ä le debarrasser des produits sulfures arsenicaux et de la petite quantile d'oxygene qu'il pourrait encore contenir.



	CULTURE DES MICROBES ANAEROB1ES. m un pen compliquee ne le laisserait croire, et dont hi pratique donnerait rapidement I'habitude, s'ap-pliquent a quatre procures de culture : I.nbsp; Culture dans les bouillons(ou toutautre liquide); II.nbsp; Culture duns la gdalinc ensemencde par piqüre; III.nbsp; Culture sut la yelatine en plaques; IV.nbsp; Culture sur pommes dc terre. Ces cultures se font dans lo vide ou dans un gaz inerte, qui pent etrc I'acide carbonique, I'hvdro-gene, I'azote. L'acide carbonique est le plus ordi-nairement employe. Les instruments neccssairos ä la culture des anat'robics sent il'unc parties instruments ä faire le vide, d'autre part des ijtizometrcs remplis du gaz inerte clioisi. Gazomethbs. Nous n'avons pas ä insistcr sur la disposition etla construction de ces appareils, tion jilus que sur la preparation du gaz inerte H ou CO². La ligure 'M montre un gazometre tres simple qui consiste en deux tlacons tubules a leur partio inle-rieure, et cominuniquant par un gros tube de caoutchouc. Ces flacons 1'ermes par des bouclions decaoulchonc munis de robinets, contiennent I'un le gaz, I'autre do I'eau, a laquelle, suivant le con-seil de M. Roux, on fera bien d'ajouter une trace d'hydrosulflte do chaux pour ahsorber les dernieres traces d'oxygene. LOS INSTRUMENTS A FAIRE LE VIDE SONT : A.nbsp; nbsp;La machine pneumatique ä mercure (d'Alver-gniat); B.nbsp; La trompe dean d'Alvergniat. La trompe ä eau est d'un prix infiniment moins eleveque la machine pneumatique a mercure, mais eile exigo une forte prcssion d'eau, qui nc se rencontre pas partout, et eile est un extracteur de Fair moins puissant que la pompe ä mercure. C'est ä la machine pneumatique ämercure qu'on doit donner



	CULTURE DES M1CK0BES ANAEROB1ES. 117 [iliice, vousy terez levide comma nous I'avons (lit. B. Troupe a eaü. La figure (3f) ci-contre

	Jonnela repvesentation raquo;le ce pelil appareil si coni-inode et d'un prix si mo-dique. On I'installe a de-meure au moyen dun tube de caoutchouc bien serre, mi d'uno monture metal-lique, sur un robinet d'oii I'emi s'dchappe a forlc pres-sion : e'est lä une condition essentielle. II sul'lira d'ouvrir co robinet jiour mettre I'appareil en mar-che, et produirc lo vide dans un recipient en com-munication avec la tubu-lurc T de la trorupe. Mais le vide avec la trompc, pour etro pousse aussi loin quo le vide avec la machine pmsumatique a mercure, demande un temps fort long : pour abreger 1'operation il cst neccssaire de rempiir et vider plusieurs I'ois le re
		mpe u euu.

	cipient de gaz inerte afin d'en chasser les dernieres traces d'air. En outre, le vide fait, on peutdesirer rempiir detinitivement le recipient de CO² ou doII. Le recipient doit done etre mis en communication d'unc part avec la tubulure de la trompc, d'autre part avec lo gazometre; Tun des deux dis-positifs suivaats, egalcment simple, reunira toutos les conditions voulues : 1.



CULTURE DES MICROBES ANAEROBIES. 121 surmonlc le tampon tleouate; coupozle tulje droil

en II au-dessus de cetle efülure, el rodez lt;i la flamme l'extre- mite coupuc en lui donnant la forme rcprescn- tee ci-eontre. Donnez alors sur la flamme de la lampe a al-eool ä cliacun des pelits tubes lateraux la direction DEF, D'E'F' (la direction premiere MEG, D'E'G' est marquee en pointille sur la (igure), ct etirez alaflammeassez iinementrexlre-mite F, F'. Ainsi prepare, Ic tube double prend la forme ci-contre. La preparation d'un tube siinplc est exac-tcment lameme,

et ce tube (flg. 11) prend alors la figure represon-		-'!i. Tube double de Pasteur pro-pare pour I'ensemencemeut.

tee dans la li	urc 3;) a la page suivante.



	CULTURE DES MICROBES ANAEROB1ES. 123 mcace, il faut y faire los operations de vide simple, ou de vide suivi de substitution dun gaz inerte. Ces operations se resument de la faoon suivante : d. Culture duns le vide ä l'aidc de la machine pneumatique a mercure; 1. Culture dans GO³ ou H avoc la machine pneu-matique ä mercure ; :j. Culture dansle vide ä l'aide de la trompeacau. 4. Culture dans CO- ou H avec la trompe a eau. 1.nbsp; Culture dans le vide ä l'aide dc la machine pneumatique a mercure. Suspendez ä rextremite du caoutchouc S de la pompe ä mercure l'extrömitö 11 du lube double ou I'extremiti'! corrcspondante du tube simple, apres en avoir enduit la surface ex-lericurc de vaseline : la vaseline rend plus complete Tadherence du verre au caoutchouc. Faites alors le vide dans le tube double ou simple par les manoeuvres decrites jusqu'a ce quo le manometre vous indique quo le resullal cherche e.st atteint. Pendant les manoeuvres do vide laquo; au moyen d'une petite flamme a, gaz, appliquoe avec precaution, on determine I'eliullition ä basso temperature dans les deux branches (oulabranche unique) pour bien chasser tout I'air. Les bulles produitos viennent crever sur les parois du tube legerement chauffe dans sa partie suporioure raquo; (lioux). Lorsque le vide ost realise, on pent, pour plus de sürete, faire passer une fois de l'acide carbo-nique ou do I'hydrogene dans le tube. .Nous avons decrit ailleurs cette manoeuvre. On extrait ensuite CO² ou 11, et on fenne le tube en fondant a la flamme du gaz le verre en 1! dans sa partie 6trangl6o au-dessus do I'ouate. Lc tube ainsi parfaitoment vide sera place ä l'etuve u la temperature vouluo. 2.nbsp; Culture dans CO- ou H avec la machine jinewna-



	CULTURE DES MICROBES ANAfiROBlES. 127 gelaline en liquefaction jus((u^,ä co que tout 1'air en soit chassc, et on commence k faire lo viilc : la gölatine entre bienlüt en ebullition, el de grosses bulles sont projotees vers l'extremite supörieure du tube : on evite ces projections en ebauffanl Tex-tremitö superieure du lube avec un jot de gaz; au cas oü rlt;'bullilion serait trop forte on I'arretorail en laissant entrcr du gaz inerte. Le vide elant fait, on pourra remplir le tube a. deux on trois reprises avec lo gaz inerte qu'on en-levera ensuite. :!⁰ On forme la communication avec la machine a vide; on fail passer CO² ou II dans 1c tube, eu mome temps qu'on plonge rexlremile inferieure du tube dans I'eau froide : la solidification de la gelatine sc fait sous le courant du gaz inerte. 4deg; Lorsque la gelatine est prise on dispose un 111 de plaline d'une longueur teile qu'il puisse alleindre la surface de la gelatine, elant introduit par c el penetrcr dans son epaisseur. On sterilise ce 111 ct on le charge de la semence. On souleve alors le llacou a eau du gazomelre de facon ä pro-duire une legere pression dans le tube; on fait un trait de lime sur c, on tlambe le verre en cet en-droit el on casse la pointe avec une pince flambee : le gaz s'echappe par I'oritlcect einpeche renlreede Fair. On introduit le iil deplatine avec precaution dans le tube et on pique la semence dans le cylindre de gelatine. On retire le 111, et on ferine c (fig. 36 bis). ygt;ⁿ On peul alors ou vider complelement le lube du gaz inerte et 1c fermer ensuite eu fondaul lt;/, ou le fermer inimediateiuent en J eu le laissant plein dn gaz CO² ou II. 6) L'operation avec la trompe a eau est absolu-menl la meme. Fermez d'abord c et liqu6flez la gelatine ; disposez alors le lube on commuuicalion avec la trompe ot le gazometre par la lubnlure A



	CULTURE DES MICROBES ANAEROUIES. 120 temps pcrmct la separation des colonies et la re-colte do la semence dans les colonies isolees. 11 se

	composed'un tubedeverre fermö,large dc :.t centimetres environ, long de 25 a		n
	30 centimetres, et tcrmine par un tube

	plus ctroit obture par un tampon de cofon. Ce tube (tig. 37) contient, un peu de gelatine sterilisee : on fond la gelatine, et on introduit avec les precautions ordinaires une quan-tite de semence convenablc pour avoir des colonies separees. En eusemencanl plusieurs tubes avec des quantites de semence dc plus en plus pctites, on arrive toujours ä une-separation parfaite des colonies. On etrangle le tube ä la lampe (lig. 37 bis) un peu au-dessus de la partie ren-tlee en c. On pousse 1c colon o b t u r a t e u r j u s q u' a c e t etranglcment, et on elire le tube en A. L'appareil ainsi dispose est mis en communication avec la machine ä vide, et il est purge d'air comme nous l'avons dejä i'xplique. On le separe en le fondant au chalu-meau en A, et on le cou-

	che sur un plan horizontal. La gelatine s'elale sur la paroi inferieure. Elle fait prise, et comme la couche est, tres mince, on pourra examiner a travers la paroi du verre la



	CULTURE DES MICROBES ANAEKOBIES. 131 line sterile qu'on ensemence et qu'on maiatient liquide. On Strangle B et B' en d d', on pousse 1c colon jusqu'a, res eli'HUgloments, et au-dessus du colon on el'lile en m m'. Le lube Best alors rclie au llacon ii acide carbonique du gazometrc, on fait barbotter le gaz inerte dans la gelatine, il ressort par B'. Lorsque 1'appareil cst bien purge d'air, on laisse la gelatine faire prise sous le courant du gaz et selaler sur la paroi inferieure de A, et on ferine m' puis m. (flg37 (er). IV. Cultures des anaerobies sur la pomme da terre. Cette melhodc est encore due ä Koux : laquo; On soude an lulie, que nous a v o n s decrit ailleurs pour la culture sur pomme de terre en presence de Fair, au-des-sousdel'elran-glcment, un tube lateral, etire en a (voyez lig. 38), et muni d'un tampon de colon. laquo;Aprös avoir intro d u i t la tranche de jiommc de terre dans le tube, on sterilise le tout ä l'auto-nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp;Fig. 38.



	134nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; MAXIERES COLORANTES. donnent les meillcurs resullats, et que nous re-commandons tout specialement. Puchsine. Diamant. Rubiue. I Violet de mcthyle (IB, SB, 6B). I Violet de gentiane. / A. Couleurs basiques. . Violet dahlia, ki-ystall-vi jlet. Inbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; I Bleu do metliyle.

	COÜLEUBS Inbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; f y	Brun de Bismarck. Eosine.

	B. Couleurs aeides... #9632; Tropaeoline.

	' Kluoresceme.

	Toutes ces couleurs se trouvent dans 1c commerce sous forme do jioudros oa de cristaux. Elle? sont toutes solubles dans l'alcool. 1deg; Solutions alcooliques saturees. Pour so servir de ces couleurs on en fait des soluiiom alcooliques sursaiwecs que Ton conserve dans des fla-cons a large ouverture, bouches ä remeri. On met dans un flacon uno assez grande quantite de la coulcur en poudre, puls on verse de l'alcool absein: celui-ci dissout une partie de la poudre; la Saturation est indiqueo par le depot que forme au fond du tlacon l'exces de mauere colorante. 2deg; Solutions hydro-alcooliques. On les emploie, comme cela sera dit longuement au chapitre sui-vant, dans le but d'oblenir des colorations instau-lamvs. Preparation. On prend un verrc de montre bien propre dans lequel on verse de l'eau distillee. On colore cette eau au moyen de deux ou trois goutlcs d'une solution alcoolique saturee d'une coulcur d'anilinc quelconquo; rouge, violette, bleue ou brune. Cos solutions doivont etre preparees au moment precis de l'usage et doivcnt donncr un liquide plutöt pale que fence en couleur. Pour puiser la solution



	DEUXIEME PARTIE

	INTRODUCTION La deuxiöme parlic de ce livre sera consacreu h passer sommairement en revue quelques maladies infoclieuses de l'homme et des animaux, et a enexposer les caraetferes microbiologiques. Depas-sanl cependant le cadre strict d'une etude bacte-riologique pure, nous entrerons dans les quelques details de pathologie experimentale que comporte chaeune des affections dont nous traiterons. Le cercle des maladies infectieuses est vasle, et il s'en taut de beaueoup que 1'agent pathogene soil aujourd'hui connu et demontre pour chaeune d'elles : la ruriole, la rougeole, la scarlalinc, parmi les maladies humaines, sont incontcstablement des maladies infectieuses, et nous ne savons rien de leur cause reelle, cquot;est-ä-dire de leur agent pathogene; il en est de meine de la clavelie, de la päripmumonie, etc., parmi les maladies animales. L'exemple le plus frappant, ä ce point de vue, n'est-il pas la rage, dont le virus est attenue par M. Pasteur, alors que l'agent de la virulence est entierement inconnu? A l'hcure actuelle, on peut poser de la faeon sui-



	184nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; nbsp; MICROBES NON PATHOGENES. Enfin, sur la poninie de terre, elles produisent une couche epaissc, luisante, qui prend avec le temps la leinte caractßristlque.

	VI. Microbes de l'eau. Un mot seulement a ce sujel. L'eau de source prise au point d'dmergence est pure, ello ne ren-ferme aueun micro-organisme, ainsi que Tont demontrö les premiers travaux de Pasteur. Los autres caux contienncnt des micro-organismes en nombre plus ou moins grand suivant lour degre de souillurc. De ces micro-organismes la plupart ne sent pas pathogenes; nous savons cependant que l'eau peut servir de vehicule aux bacilles de la tievre tvphoule et, du cholera. Les divers microbes que contientune cau seronl facilement isoles par la metliode de Koch (cultures sur plaques). Nous ne voulons entrer dans aucun detail a ce sujel, ni mentionner les divers perfec-tionnements que cette technique a recus, nou plus que les procedes de numeration des colonies usi-tos dans nos laboratoires. ludiquons rapidement un certain nombre d'es-peces chromogeni's banales que conlienncnt äpeu pres toutes les eaux. A et li : deux bacilles a reaction chromogene verle sur la gelatine et la gelose : I'un d'eux lique-fiela gelatine, I'autre nou. (',. I'n bacille a reaction violette (liquefie la gelatine). I). Un bacille a reaction chromogene rouge dans la gelatine qu'il liquelie, etc., etc.





	Oil APITUE

	MALADIES MICROBIENNES COMMUNES A t BOMME ET AUX ANlMAliX.

	1 CHARBON BACTERIDIEN FIEVRE CHARBONNEÜSE. SANG DE RATE, ETC.

	I. Historique. La decouverte de la bactdridie charbonneuse cst due ä Davaine et Rayer. Les points principaux de l'histoire de cetle affection out ete etablis par Davaine, Koch, Pasteur, Chamberland et Uoux. Le lecteur trouvera dans le livre de Straus : laquo; Le charbon des animaux et do riiomnic, raquo; un expose magistral de toute la question. II. Charbon baotferidien spontane (1). Le charbon bacteridien esl une maladie commune aux animaux et ä l'homme. (1) 11 est bien enteodn quece terme spontanä apfiiquamp; ii unc maladie tmcrobieone quelconque indique I'afloction contraclee par contagion nalurolle et non artilicielle. Le terme #9632; spontane gt; s'op-pose ainsi au terme a experimental ou inocnle raquo;.