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DIE SPOROGENEN HEFEN

BIBLIOTHEEK UNIVERSITEIT UTRECHT

2973 397 3

DIE HEFESAMMLUNG DES „CENTRAAL-
BUREAU VOOR SCHIMMELCULTURESquot;

BEITRÄGE ZU EINER MONOGRAPHIE DER HEFEARTEN

i. teil

DIE SPOROGENEN HEFEN

proefschrift ter verkrijging van den graad van
doctor in de wis- en natuurkunde aan de
rijks-universiteit te utrecht op gezag van den
rector-magnificus jhr. mr. b. c. de savornin lobman
hoogleeraar in de faculteit der rechtsgeleerd-
heid volgens besluit van den senaat der univer-
siteit tegen de bedenkingen van de faculteit der
wis- en natuurkunde te verdedigen op woensdag
8 juli 1931 des namiddags te 3 uur door

NELLIE MARGARETHA
STELLING-DEKKER

GEBOREN TE KOOG AAN DE ZAAN

DRUKKERIJ HOLLAND, AMSTERDAM
öiBLlOTHEEK DER
RIJKSüNIVEf^SlTEiT
UTRECHT.

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Bij het verschijnen van dit proefschrift is het mij een genoegen, mijn
oprechten dank te betuigen aan allen, die tot het ontstaan hiervan hebben
bijgedragen.

U, Hooggeleerde Westerdijk, Hooggeachte Promotrix, ben ik zeer
erkentelijk voor de groote welwillendheid, waarmee U mij bij het samen-
stellen van dit proefschrift hebt ter zijde gestaan.

U. Hooggeleerde KlUYVER, dank ik ten zeerste voor de opbouwende
critiek en voortdurende medewerking, die ik van U mocht ontvangen. Uw
bezielende leiding en groote belangstelling hebben mij, trots het vele opont-
houd, het werk steeds weer met genoegen doen hervatten.

De groote medewerking, die ik van U. Hooggeleerde Janse, in mijn
laatste studiejaren mocht ondervinden, zal ik voortdurend blijven gedenken.

Aan Uw boeiende colleges. Hooggeleerde van Kampen, denk ik met veel
genoegen terug.

Hooggeleerde VAN NiEL. de wijze, waarop gij mij bij den aanvang van dit
werk hebt bijgestaan, zal een van mijn prettigste herinneringen blijven.

U, Mevr. Elema—Dorrepaal en U, Mej. Verkaik, dank ik ten zeerste
voor Uw medewerking, die mij de voltooiing van dit werk heeft mogelijk
gemaakt. Uw beider onbaatzuchtige hulp heeft mij bijzonder getroffen.

Tenslotte ook aan U, Mej. ArnOLD, en aan het personeel van het Labo-
ratorium voor Microbiologie mijn dank voor de verleende hulp.

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INHALTSVERZEICHNIS.

Seite

einleitung ............................................................................................................1

Kapitel I. die sachlichen Grundlagen einer hefesystematik ............3

§ 1. Einleitende Betrachtungen ....................................................................................3

§ 2. Kritische Betrachtung der üblichen Unterscheidungsmerk-
male und der zur Feststellung derselben benützten Methodiknbsp;4

a.nbsp;Die morphologischen Merkmale ............................................................4

10. Die Form der Zellen..............................................................................4

20. Die vegetative Vermehrungsweise der Zellen ............4

30. Die Art und Weise der Sporenbildung ..............................5

40. Die Form und sonstige Eigenschaften der Ascosporennbsp;8

50. Die Keimung der Ascosporen ............;............................8

60. Das makroskopische Bild der Hefekolonien ...quot;...........8

b.nbsp;Die physiologischen Merkmale ..............................................9

10. Das Gärvermögen....................................................................................9

20. Die Zuckerverarbeitung von nicht-vergärenden

Arten ....................................................................................................16

30. Die Hautbildung ....................................................................................17

40. Die Verwendbarkeit der Nitrate als Stickstoffquellenbsp;18

50. Die Gelatineverflüssigung ............................................................18

60. Die Temperaturkardinalpunkte ................................................19

Kapitel II. kritische Übersicht der bisher vorgeschlagenen-

hefesysteme ............................................................................................................20

Kapitel III. einführung zu den angestellten untersuchungennbsp;29

§ 1. Umgrenzung und Einteilung ..............................................................................29

§ 2. Ausgewählte Merkmale und Methoden ................................................29

a.nbsp;Die morphologischen Merkmale ............................................................30

10. Die Form der Zellen..............................................................................30

20. Die vegetative Vermehrungsweise der Zellen ............30

30. Die Art und Weise der Sporenbildung ..............................30

40. Die Form der Ascosporen ............................................................31

50. Das makroskopische Bild der Hefekolonien ..................31

b.nbsp;Die physiologischen Merkmale ...........................................31

10. Das Gärvermogen ....................................................................................31

20. Hautbildung .....................................................32

30. Die Tauglichkeit von Aethylalkohol als Wachstums-
substrat ............................................................................................................32

Seite.

40. Die Verwendbarkeit der Nitrate als Stickstoffquelle 32

50. Die Gelatineverflüssigung .............................. 33

60. Die Aeskulin-Spaltung ....................................

5 3. Praktische Bemerkungen bezüglich der Wiedergabe der
Ergebnisse ............................................................

Kapitel IV. systematische behandlung der einzelnen hefe-

gAttungen und arten ....................................... 36

§ 1. Saccharomyces (Meyen) Reess ................................. 36

§ 2. Endomyces Reess ................................................... ^^^

§ 3. Monosporella Keilin ................................................ ^^^

§ 4. Saccharomycodes Hansen .......................................... ^^^

§ 5. Schizosaccharomyces Lindner .................................... 272

§ 6. Nematospora Peglion ................................................ ^^^

5 6a. Ashbua Guiliiermond ................................................ 304

§ 7. Zygosaccharomyces Barker .......................................

§ 8. Saccharomycopsis Schiönning .................................... 369

§ 9. Torulaspora Lindner ................................................ ^^^

5nbsp;10. Previa Hansen ......................................................... ^^^

405

§nbsp;11. Hansenula Sydow ...................................................

§nbsp;12. Debaryomyces Klöcker .............................................

§nbsp;13. Schwanniomyces Klöcker .......................................... ^^^

§nbsp;14. Hanseniaspora Zikes .................................................

§nbsp;15. Nadsonia Sydow...................................................... ^^^

§nbsp;16. Coccidiascus Chatton ................................................ ^^^

§ 17. Gm7/zermonde//a Nadson et Krassilnikov ........................ 504

§ 18. zy^osacc/iaromycodes Nishiwaki ................................. 508

. § 19. Bestimmungsschlüssel der Gattungen der sporogenen Hefen 512

Kapitel V. versuch einer rationellen einteilung der sporo-
genen hefen ...................................................... ^^^

514

§ 1. Einführung ............................................................

§ 2. Uebersicht der in Kap. IV erhaltenen systematischen Ergebe

nisse .................................................................. ^^^

1.nbsp;Saccharomyces (Meyen) Reess .............................. 514

2.nbsp;Endomyces Reess ................................................ ^^^

3.nbsp;Monosporella Keilin ............................................. ^^^

4.nbsp;Saccharomycodes Hansen .................................... 517

5.nbsp;Schizosaccharomyces Lindner ................................. 517

6.nbsp;Nematospora Peglion .......................................... 518

6a. Ashbya Guiliiermond .......................................... 518

7.nbsp;Zygosaccharomyces Barker .................................... 518

8.nbsp;Saccharomycopsis Schiönning ................................. 519

9.nbsp;Torulaspora Lindner............................................. 519

10.nbsp;Pichia Hansen ...............................................................519

11.nbsp;Hansenula Sydow................................................................................................519

12.nbsp;Debaryomyces Klöcker....................................................................................520

13.nbsp;Schwanniomyces Klöcker..............................................................................521

14.nbsp;Hanseniaspora Zikes ....................................................................................521

15.nbsp;Nadsonia Sydow ..........................................................................................521

16.nbsp;Coccidiascus Chatton ....................................................................................521

17.nbsp;Guilliermondella Nadson et Krassilnikov .....-;..........................521

18.nbsp;Zygosaccharomycodes Nishiwaki ......................................................522

§ 3. Die Vereinigung der Gattungen zu höheren systematischen

Einheiten ..............................................................................................................................522

Tabelle : Einteilung der sporogenen Hefearten ...............................................525

Kapitel VI. SYSTEMATISCHE ÜBERSICHT DER AUF GRUND DER ANGE-
STELLTEN UNTERSUCHUNGEN BEIBEHALTENEN ARTEN,
VARIETÄTEN UND RASSEN DER SPOROGENEN HEFEN ...... 526

Autorenregister ............................................................... 533

Systematisches Register ..................................................... 537

. ......

Das „Centraalbureau voor Schimmelcultures te Baarnquot; verfügt über eine
Sammlung Hefereinkulturen, welche wahrscheinhch in wissenschaftlicher
Hinsicht die vollständigste der Welt ist.

Aus den verschiedensten Ländern werden denn auch regelmässig
Anfragen an das Bureau gerichtet um besondere Arten für wissenschaft-
liche Untersuchungen abzugeben. Dies bringt mit sich, dass eine scharfe
Kontrolle der weitergezüchteten und der neu einkommenden Kulturen
durchaus notwendig ist. Die schwache Personalbesatzung des Bureaus war
Ursache, dass eine derartige Kontrolle bis vor wenigen Jahren nur sehr
unvollkommen durchgeführt werden konnte. Sobald die finanzielle Lage
des Bureaus dies zuliess, wurde daher der Entschluss gefasst eine besondere
Assistentin mit der Kontrolle und der Bearbeitung der Hefesammlung
zu beauftragen. Verfasserin dieser Abhandlung wurde August 1927 in
genannter Quahtät an das ,,Centraalbureauquot; verbunden. Die Untersu-
chungen wurden im Laboratorium für Mikrobiologie der Technischen
Hochschule zu Delft, wo die Hefesammlung in den letzten Jahren versorgt
wird, angestellt.

Die gestellte Aufgabe war zweigliedrig. Erstens hiess es festzustellen in
wieweit die schon vorhandenen und später noch einkommenden Hefekul-
turen tatsächlich den Beschreibungen der Autoren, welche die Arten
aufstellten, entsprachen. Zweitens war es angesichts der unvollkommenen
Lage der heutigen Hefesystematik angebracht sorgfältig zu prüfen in
wieweit die von den Autoren vorgeschlagene systematische Stellung ge-
nügend begründet sei.

Hierzu gab es umsomehr Veranlassung, weil die Hefesystematik noch in
einem durchaus chaotischen Zustande verkehrt. Ohne diese Aussage an
dieser Stelle näher zu begründen, darf wohl festgestellt werden, dass eine
Identifikation einer willkürlichen Hefekultur unbekannter Herkunft mit
einer der vielen bis jetzt in der Literatur beschriebenen Arten nur in seltenen
Fällen durchzuführen ist. Dieses bringt mit sich, dass fast jeder Forscher,
der eine Hefeart unter einigermassen abweichenden Verhältnissen isoHert,
sich gerufen achtet dieselbe als eine neue Art zu beschreiben. Dabei wird
dann meistens gar nicht versucht kritisch zu prüfen, in wieweit eine Abtren-
nung von den schon beschriebenen Arten wirkhch gerechtfertigt ist. Dies
hat zur Folge, dass eine kritische Bearbeitung der schon beschriebenen
Arten notwendig zum Schlüsse führen muss, dass mehreren Arten die

Existenzberechtigung abgeht.

Die Ursache dieser unglücklichen Lage, welche den Fortschritt der Hefe-
kunde in hohem Masse hemmt, ist wohl vor allem darin zu suchen, dass die

Verhandel. Afd. Natuurkunde (2e Sectie) Dl. XXVIII.nbsp;AI

meisten Hefearten nicht von systematisch geschulten Botanikern sondern
von Gärungstechnikern und von Medizinern beschrieben worden sind.
Dazu kommt dann noch, dass der heutzutage vorherrschenden Eintei-
lung der Hefearten, wie diese namenthch von Hansen, KlÖCKER und
GuilliermOND entwickelt worden ist, noch viele Unvollkommenheiten
anhaften.

Für eine kritische Bearbeitung der Hefesammlung war es also durchaus
notwendig etwas näher auf die bisher vorgeschlagenen Hefesystemen einzu-
gehen und zu versuchen einen Beitrag zu liefern für eine mehr rationelle
Begründung der Hefesystematik. Der Umstand, dass eine so ungemein
reiche Sammlung der verschiedensten Hefearten zur Verfügung stand,
erscheint als eine genügende Rechtfertigung für dieses an und für sich
durchaus heikles Unternehmen.

In der vorliegenden Abhandlung ist ausschliesslich von den sporogenen
Hefearten die Rede. Das grosse Heer der asporogenen Hefearten, deren
Bearbeitung in systematischer Hinsicht noch viel grössere Schwierigkeiten
bietet, wird in einem zweiten nachher erscheinenden Teile dieser PubH-
kation besprochen werden.

KAPITEL 1.

Die sachlichen Grundlagen einer Hefesystematik.

§ 1. EINLEITENDE BETRACHTUNGEN.

Das Ideal der meisten Systematiker, die Einteilung einer natürhchen
Organismengruppe ausschliesslich auf Grund- morphologischer Merkmale
vorzunehmen, lässt sich bei den Mikroorganismen im Allgemeinen und
insbesondere auch bei den Hefearten nicht durchführen.

Die geringen Dimensionen der Zellen, die grosse Variabilität, das heisst
an erster Stelle die starke Abhängigkeit der Zellformen von oft schwierig
aufzudecken äusseren Umständen und schliesslich das Fehlen oder der
wenig ausgeprägte Charakter des Entwicklungszyklus sind ebensoviele
Ursachen für die Unzulässigkeit einer nur auf morphologischen Merkmalen
begründeten Systematik. Es ist daher begreiflich, dass von altersher physio-
logische Merkmale bei der Hefe-einteilung Anwendung gefunden haben
und dies umsomehr weil die meisten Forscher den Fragen der Hefesyste-
matik vom physiologischen Standpunkte aus herangetreten sind.

Es ist daher unumgänglich neben den morphologischen Merkmalen wie
die Zellform, die Art der vegetativen Vermehrung, die Vorgänge bei der
Sporulation u.s.w. auch den physiologischen Merkmalen wie z.B. das
Vorherrschen von Atmung oder Gärung, Fähigkeit zum Angreifen kom-
plexer Kohlenhydraten u.s.w. Rechnung zu tragen.

Im Übrigen muss hier betont werden, dass die Systematik der Hefen
sich auf andere Grundlagen aufgebaut hat als die der übrigen Pilzen und
der Pflanzen im allgemeinen.

Ein einziges physiologisches Merkmal ist bei den Hefen häufig Grund
zu einer Artabtrennung gewesen. Dieses Vorgehen ist bei anderen Orga-
nismen (mit Ausnahme vielleicht der Bakterien) nicht üblich; da würde
höchstens von einer Varietät die Rede sein.

Die Merkmale durch die die Gattungen sich trennen, sind in die Hefe-
kunde meistens sehr gering an der Zahl, jedenfalls stehen sie der Spezies-
abtrennung der übrigen Organismen näher.

Aus praktischen Gründen haben wir uns jedoch den früheren Hefe-
forschern angeschlossen.

Bevor wir dazu übergehen näher auseinanderzusetzen wie sich auf der
angegebenen Basis eine rationelle Hefesystematik gründen lässt, scheint
es erwünscht eine kritische Übersicht zu geben der wichtigsten bis auf
jetzt üblichen Unterscheidungsmerkmale und der Methoden wonach diese
gewöhnlich festgestellt werden.

§ 2. kritische betrachtung der üblichen unterscheidungsmerkmale
und der zur feststellung derselben benützten methodik.

Wenn man eine Analyse der wichtigsten hefesystematischen Arbeiten
macht, ergibt es sich, dass ganz allgemein die folgenden Merkmale
Anwendung finden.

a. Die morphologischen Merkmale.
10. Die Form der Zellen.

Es wurde oben schon bemerkt, dass die Zellgestalt der Hefen den
äusseren Umständen gemäss überaus grossen Schwankungen unterliegt.
Andererseits ist es jedoch nicht zu verneinen, dass in mehreren Fällen die
äussere Zellform sehr nützhche Anhaltspunkte für die Systematik bietet.
Auf Grund des zuerst Bemerkten ist es jedoch notwendig dié Zellform
unter möglichst genau festgestellten Bedingungen zu untersuchen. Das
Studium der Literatur lehrt nun leider, dass diese Überlegung von den
älteren Autoren öfters nicht berücksichtigt worden ist. So fehlen oft
Angaben bezüglich der Zusammensetzung des Mediums, worin die Zellen
gewachsen sind, des Alters der untersuchten Kultur und der Temperatur.

wobei die Kultur gezüchtet worden ist.

Es werden für das Studium der Zellform ganz allgemein nur zucker-
haltige Nährflüssigkeiten angewendet ; es ist jedoch zu bedauern, dass diese
Flüssigkeiten öfters ungenügend umschrieben werden.

Die meisten Autoren benützen zwar gewöhnlich Würze („wortquot;, „mout
de bièrequot;), aber es ist dabei zu beachten, dass z.B. Hansen bei seinen
grundlegenden Arbeiten immer mit gehopfter Würze gearbeitet hat Andere
Forscher dagegen benützen zweifellos ungehopfte Würze, während jedoch
öfters-Angaben bezüglich dieses Punktes fehlen. Doch kann als feststehend
angenommen werden, dass das Vorhandensein oder das Fehlen von Hopf-
extrakt in der Nährflüssigkeit von ausschlaggebender Bedeutung fur die
Entwicklungsweise der-Kultur (Hautbildung!) und damit für die Gestalt

der einzelnen Zellen ist.nbsp;. i£ i.

Hierzu ist noch zu bemerken, dass die japanischen Autoren vielfach

Angaben über die Gestalt der Zellen in Kojiabsudkulturen machen, was

wenig empfehlenswert erscheint, weil dieser Nährboden den europaischen

Forschern wohl nur selten zur Verfügung stehen wird.

20. Die vegetative Vermehrungsweise d erZellen.

Mit Recht wird von den verschiedensten Forschern auf die Art und
Weise der vegetativen Zellvermehrung grossen Wert gelegt. Es sei hierzu
daran erinnert, dass bei bestimmten Hefearten die Vermehrung durch
Sprossung (Knospung), bei anderen durch Querteilung stattfindet.

Überdies ist von ZiKESi) darauf hingewiesen, dass bei einzelnen Gat-

1) H. Zikes, Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 61, p. 275 (1924).

tungen (z.B. bei Saccharomycodes) die Vermehrungsweise intermediär ist
zwischen den beiden genannten Typen.

30. Die Art und Weise der Sporenbildung.

Bekanntlich gehört die Mehrzahl der Hefearten zu der grossen Gruppe
der Ascomycetes. Mit Hinsicht hierauf ist es verständlich, dass der Art und
Weise der Ascosporenbildung grosse Bedeutung für die Systematik zuge-
schrieben wird.

Es ist nun sehr zu bedauern, dass es keine allgemein gültige Methode gibt
um eine Antwort auf die Frage zu bekommen, in wieweit eine bestimmte
Hefeart im Stande ist Ascosporen zu bilden.

Bekanntlich besteht die am meisten angewandte Methode 1) darin, dass
man die Zellen einer jungen kräftigen Kultur auf ein mit Wasser durch-
feuchtetes Gipsblöckchen oder Thonwürfelchen 2) bringt. Wenn man das
Blöckchen bei einer geeigneten Temperatur (meistens 25° C.) aufbewahrt,
tritt unter diesen Umstanden in vielen Fällen Bildung von Ascosporen ein.
In speziellen Fällen hat es sich vorteilhaft erwiesen das Gipsblöckchen
anstatt mit Wasser, mit Würze (KlÖCKER 3)) oder mit Mannit-Dikalium-
phosphatlösung (Saito^)) zu durchfeuchten.

Eine andere Methode, welche ebenfalls oft gute Resultate liefert, ist von
GorodkowaS) angegeben worden und besteht darin, dass man die Hefe-
arten auf einen Agarnährboden bringt, der reich an Stickstoffnährung ist,
jedoch nur wenig Kohlenhydrate enthält.

Auch eine Kultur auf Mohrrüben oder auf Kartoffeln führt in vielen
Fällen zum Ziel 6).

Beijerinck^) empfiehlt die Kultur auf ausgewaschenem Agar als bestes
Mittel zur Erhaltung von Sporen.

Eine kritische Zusammenstellung der Arbeiten, welche sich auf die den
Eintritt der Sporenbildung fördernden Bedingungen beziehen, ist neulich
von Wagner 8) publiziert worden. Insbesondere wurde der Einfluss der
Zuckerarten bei der Vorzüchtung und der Wasserstoffionenkonzentration
bei dem eigentlichen Sporenbildungsprozesse studiert. Obgleich in speziel-
len Fällen die Zusammensetzung des Vorzüchtungsmediums einen unzwei-
deutigen Einfluss auf das Resultat ausübt, liessen sich leider aus diesen
Versuchen keine allgemeingültige Gesetzmässigkeiten ableiten. Bezüglich
der Ergebnisse hinsichtlich der Wasserstoffionenkonzentration äussert

\') L. Engel, Les ferments alcooliques. Thèse Paris, 1872, p. 16. Man vergleiche auch :
E. Chr. Hansen, Compt. Rend. Trav. Lab. Carlsberg, T. 2, p. 13 (1883); diese
Abhandlung auch in: Ges. theor. Abhandl. ü. Gärungsorganismen 1911, p. 125.
2) H. Elion, Centr. f. Bakt. Bd. 13, p. 749 (1893).

A. Klöcker, Die Gärungsorgan. 3te Aufl. Berlin-Wien, 1924. p. 107.
K. Saito, Bot. Magaz. Tokyo Vol. 37, p. 63, (1923).
5) A. A. Gorodkowa, Bull. Jard. Imp. Bot. St. Pctersbourg, T. 8, p. 165 (1908).
A.GuiLLIERMOND.CIef dichotomique pour la détermination des levures, Paris, 1928. p.35.
M. W. Beijerinck, Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 4, p. 657 (1898).
8) F. Wagner, Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 75, p. 4 (1928).

Wagner sich wie folgt : „Meine Beobachtungen stimmen mit den Angaben
Oehlkers über die Beeinflussung des Sporulationsvermögens durch geringe
Änderungen der Wasserstoîiionenkonzentration nkU übeiein. Vielmehr
wurde gefunden, dass die Sporenausbeuten sowohl im sauren als auch im
alkalischen Gebiete ziemlich unentwegt und unbeeinflusst bis zu einer
gewissen Grenze die gleichen sind und dort ziemlich plötzlich abbrechen.
Schwankungen der Prozente sind wohl zu bemerken, nahe den Grenzen
auch Abnahme der Prozentigkeit ; ein unmittelbarer Zusammenhang mit
dem PA, eine stetig ansteigende und wieder abfallende Linie konnte aber
nicht festgestellt werden.quot;

Hierzu sei noch bemerkt, dass wenn keine besonderen Massnahmen
getroffen werden, die Wasserstoffionenkonzentration des die Hefezellen
auf dem Gipsblöckchen umgebenden Mediums immer im günstigen Gebiete
gelegen ist.

Jedenfalls geht aus dem Studium WagneRs deutlich hervor, dass es keine
universelle Methode gibt durch welche die Frage nach dem Sporenbildungs-
vermögen einer Hefeart endgültig beantwortet werden kann.

Dieser Standpunkt wird jedoch von kufferath i) bestritten, indem er
für seine „gélose farhydrequot; eine allgemeine Anwendbarkeit beansprucht.
Das „gélose farhydrequot;-Medium wird nach Kufferath durch Hydrolyse
von Malzmehl mittels Schwefelsäure dargestellt, indem die Flüssigkeit zuerst
mit Kreide neutralisiert und nach der Agar-Zufügung mittels Natronlauge
auf eine bestimmte Alkalität gebracht wird. Entgegen den obenerwähnteii
Erfahrungen WagneRs schreibt kufferath gerade dieser Alkalität eine
durchschlaggebende Bedeutung bei der Sporenbildung zu. Inzwischen
betont Kufferath, dass er den erhaltenen Erfolg besonders auch daran
verdankt, dass er sich bei seiner Untersuchung nicht auf die direkte
Beobachtung des lebendigen Hefematerials beschränkt hat, sondern dass
er immer fixierte und gefärbte Präparate hergestellt hat.

Die angewandte Färbmethode ist mit kleinen Variationen die gewöhn-
liche Doppelfärbung, wie diese für die Färbung der Bakteriensporen allge-
mein übhch ist. Nach dieser Methode werden nach Kufferath die Sporen
rot, die vegetativen Zellen blau gefärbt. Die Auffindung der Sporen in
einer gegebenen Hefekultur wird nach Kufferath durch diesen Umstand
dermassen erleichtert, dass es ohne viel Mühe gehngt Sporenbildung bei
der HANSENschen Apiculatushefe [Pseudosaccharomi/ces apiculatus (Reess,

Hansen) Klöcker] nachzuweisen. Kufferath geht sogar so weit, dass er
— zwar ohne viel Belegmaterial — behauptet, dass bei allen bis jetzt als
asporogen geltenden Hefearten nach seiner Methode Sporenbildung nach-
zuweisen ist. In diesem Zusammenhange werden Mycoderma vini und
Mycoderma cerevisiae besonders erwähnt.

Vor kurzem erschien jedoch eine neue Publikation von Kufferaths)

1)nbsp;H. Kufferath, Ann. Soc. de Zymologie. Vol. 1. p- 2H (1928).

2)nbsp;H. Kufferath, Ann. Soc. de Zymologie, Vol. 2, p. 33 (1930).

über den Einduss von einigen besonderen Faktoren auf die Sporenbildung.
Deutlich geht aus dieser Abhandlung hervor, dass inmittels auch er die
Gedanke einer allgemeinen Anwendbarkeit eines bestimmten Sporenbil-
dungsverfahrens aufgegeben hat. Zugleich kann man aus dieser Arbeit
beobachten, dass die in vorhergehenden Publikationen empfohlene Doppel-
färbung nicht immer gelingt.

Zuerst bespricht kufferath die Änderungen, welchen die Hefe unter-
liegt bei Züchtung auf einem hochprozentigen Gelatine-Nährboden. Er
kommt zu einigen interessanten Schlüssen über den Einfluss der Gelatine-
konzentration auf die Zellform, welche unsere oben angeführten Bemer-
kungen über den relativen Wert der morphologischen Merkmale bestätigen.
Was die Sporenbildung anbelangt, so ist aus seinen Beobachtungen nicht
zu schliessen, dass die übliche Konzentration (15 % Gelatine) erheblich bei
den höheren Konzentrationen zurücksteht.

Hierneben untersucht er das Verhalten mehrerer Hefearten einem basi-
schen Nährsubstrate gegenüber, indem er Natriumhydroxyd in verschie-
denen Konzentrationen dem Nährboden zufügt. Der Erfolg an Sporenbil-
dung ist auf diesen alkalischen Medien nur in seltenen Fällen schlechter,
bisweilen aber besser als auf dem sauren Vergleichsboden. Auch bei dieser
Methode muss man also schliessen, dass dieselbe zwar prüfungswert
erscheint in den Fällen, in welchen die anderen versagen, aber dass sie
bisweilen auch versagt, wo andere Methoden gelingen.

Wir sehen auf Grund des Vorhergehenden, dass alle Autoren auf dem
Standpunkte stehen, dass es durchaus notwendig ist bei der Untersuchung
auf das Sporenbildungsvermögen verschiedene Methoden neben einander
anzuwenden. Ein negativer Erfolg der einen Methode besagt nichts über

das Ergebnis der anderen.

Schliesslich sei hier noch folgendes erwähnt. Rezente Beobachtungen
von Nadson und Philippovi) und von Stevens 2) lehren, dass sehr ver-
schiedene Pilzkulturen, wenn diese der Bestrahlung mit ultraviolettem
Lichte ausgesetzt werden, erhöhte Fruktifikationserscheinungen zeigen. So
fanden die russischen Autore z.B., dass Mucor genevensis unter den ge-
nannten Bedingungen eine sehr viel stärkere Zygosporenbildung aufwies,
während Stevens das nämliche für die Ascosporenbildung bei Glomerella
cingulata feststellte. Angesichts der Tatsache, dass oft ursprünglich zweifel-
los sporogene Hefearten später nach keiner der beschriebenen Methoden
zur Sporenbildung zu bringen sind, war es nun verführerisch auch den
Einfluss der ultravioletten Strahlen auf das Sporenbildungsprozess derar-
tiger Hefen zu untersuchen.

In den Fällen, worin Sporenbildung auftritt, ist es nun übUch Unterschei-
dungen zu treffen je nachdem die Sporenbildung wohl oder nicht nach vor-
hergehender Kopulation zweier Zellen stattfindet, ob diese Kopulation

\') G. Nadson et G. Philippov, Compt. rend. Soc. Biol., T, 98, p. 66 (1928): Ibid.
T. 98, p. 366 (1928).
2) F. L. Stevens, Science, Vol. 67, p. 514. . (1928).

auf isogamer oder heterogamer Weise stattfindet, oder dass die eigentliche
Kopulation zwar unterbleibt, jedoch deutliche Kopulationsversuche der
Sporenbildung vorangehen.

BarkerI), Guilliermond.2), u.a. haben diese Merkmale eingehend
studiert und die Ergebnisse der diesbezüghchen Untersuchungen sind sogar
für die Unterscheidungen verschiedener Gattungen benützt.

Wie sich später herausstellen wird, sind diese Merkmale jedoch nur mit
grosser Vorsicht zu verwenden, weil es keinem Zweifel unterhegt, dass
auch bei den kopulierenden Arten öfters parthenogenetische Sporenbildung
auftritt und diese sogar bei längerer Zeit im Laboratorium weitergezüchteten
Kulturen ganz vorherrschen kann.

40. Die Form und sonstige Eigenschaften derAsco-
Sporen.

Es ist kaum zu bezweifeln, dass die Form und die Dimensionen der
Ascosporen zu den konstantesten Merkmalen der Hefen zu rechnen sind.
Leider weisen jedoch die Dimensionen meistens nur wenig bedeutende
Unterschiede auf. Die Form der Sporen gibt jedoch in vielen Fällen wich-
tige Anhaltspunkte für die Systematik. Neben der äusseren Form sind dabei
die Natur der Sporenwand (glatt, warzig, u.s.w.) und besondere Inhalts-
stoffe zu beachten. So wird häufig erwähnt, ob kleine Öltropfen in den
Sporen vorhanden sind, während auch die Blaufärbung der Zellwände mit
Jodium für bestimmte Arten charakteristisch ist.

50. Die Keimung der Ascosporen.

Bei der Keimung der Ascosporen sind wiederum verschiedene Vorgänge
zu unterscheiden je nachdem z.B. die Keimung durch ein- oder mehrstellige
Sprossung, durch Querteilung, unter Bildung eines Keimschlauches, oder
nur nach vorhergehender Kopulation zweier Sporen vor sich geht.

Die erstgenannten Merkmale hangen eng mit der vegetativen Vermeh-
rungsweise zusammen, die beiden letzteren sind nur ausnahmsweise für die
systematische Einteilung benützt worden. Erwähnt sei jedoch, dass
Nishiwaki3) das Merkmal der Sporenkopulation für die Umgrenzung
einer neuen Gattung, Zygosacchatomycodes Nishiwaki, verwendet.

60. Das makroskopische Bild der Hefekolonien.

In vielen Fällen wird von-den Autoren auch das makroskopische Bild der
Hefekolonien für die Systematik in Betracht gezogen. Meistens sind die
auf Gelatinenährboden ausgebildeten Kolonien mehr charakteristisch als
solche welche auf Agarnährboden entstanden sind. Bei vielen Forschern
gemessen die Riesenkolonien auf Würzegelatine eine besondere Beliebt-
heit. Hiergegenüber steht, dass eine Beschreibung des Bildes der gewöhn-
lichen Agarstrichkulturen unseres Erachtens Vorteile hat, weil die ge-

») B. T. P. Barker, Phil. Transactions Royal Soc. Ser. B. Vol. 194, p. 467 (1901).

2)nbsp;Zusammenfassung in: A. Guilliermond, Les Levurcs, Paris 1912.

3)nbsp;Y. Nishiwaki, Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 78, p. 403 (1929).nbsp;^

nannten Riesenkolonien immer absichtlich hergestellt werden müssen,
während die Agarstrichkultur das übliche Mittel zur Erhaltung der Orga-
nismen darstellt. Jeder Forscher ist also mit dem Aussehen dieser Kulturen
vertraut und obgleich das Bild gewissen Schwankungen unterhegt, lehrt
die Erfahrung, dass der makroskopischen Charakteristik der Strichkulturen
zweifellos Bedeutung zukommt.

b. Die physiologischen Merkmale.

10. Das Gärvermögen.

Von altersher hat man das Vermögen der verschiedenen Hefearten ver-
schiedene Zuckerarten unter Bildung von Alkohol und Kohlensäure zu
vergären für die systematische Einteilung herangezogen. Dabei gilt das
Vermögen um in einer bestimmten zuckerhaltigen Lösung Kohlensäure zu
entwicklen meistens als Kriterium für das Vermögen die betreffende
Zuckcrart zu vergären.

Eine einfache Überlegung lehrt nun jedoch sofort, dass dieses Merkmal
an und für sich als durchaus ungenügend gekennzeichnet werden muss.
Denn der Energiewechsel eines jeden pilzartigen Organismus und somit
auch einer jeden Hefeart lässt sich immer auf zwei Grundtypen zurück-
führen, d.h. entweder auf den Vorgang, welchen wir als Atmung oder auf
den Vorgang, welchen wir als Gärung bezeichnen. Bei den Hefearten ist
nun das Atmungssubstrat immer eine organische Verbindung und der
Atmungsprozess resultiert hier dann auch immer in die Bildung von Kohlen-
säure. Es ist daher in theorelisehec Hinsicht unsulRssig aus damp;m Aullteteii
von Kohlensäure während des Wachstums einer Hefeart auf das Gärver-
mögen des Organismus dem zugefügten Zucker gegenüber zu schJiessen.

Weil nun aber das energetische Effekt einer vollständigen Verbrennung
des Zuckers dasjenige der Gärung einer selben Zuckermenge weitgehend
übertrifft, werden in einer Hefekultur falls der Zucker veratmet wird viel
geringere Quantitäten Kohlensäure gebildet wie im Falle der Zuckerver-
gärung. Und zwar sind diese Quantitäten im ersten Falle so gering, dass
die Kohlensäure glatt im wässerigen Nährmedium auflöst, sodass es nicht
zu einer sichtbaren Gasentwicklung kommt. Im Falle, worin der Zucker
vergoren wird, ist dagegen unter günstigen Entwicklungsbedingungen die
Geschwindigkeit der Kohlensäureproduktion meistens so gross, dass ein Teil
der Kohlensäure in gasförmigem Zustande entweicht und dadurch den
Schluss auf das Vorhandensein des Gärvermögens des betreffenden Orga-
nismus berechtigt.

Der Umstand jedoch, dass der Geschwindigkeit der Kohlensäurebildung
und zugleicherzeit auch der Geschwindigkeit des Kohlensäure-entweichens
aus dem Nährmedium grosse Bedeutung zugeschrieben werden muss, zeigt
klar, dass dem Ergebnis eines willkürlichen Versuches kein absoluter Wert
zukommt.

Es kann dann auch nicht wundern, dass über das Gärvermögen einer
bestimmten Hefeart von verschiedenen Forschern in vielen Fällen strittige

Angaben gemacht worden sind, wobei die Verschiedenheit der bei der
Untersuchung gefolgten Methoden und kleine Variationen in der Ausfüh-
rungsweise der Versuche zweifellos für dieses Resultat verantwortlich sind.

Diese Sachlage wird nun noch schlimmer durch den Umstand, dass das
Verhältnis von Atmungs- und Gärungsstoffwechsel bei einer bestimmten
Hefeart sehr stark abhängig ist von den äusseren Bedingungen, insbeson-
dere von, der mehr oder weniger reichhaltigen Zufuhr des Sauerstoffs an
die Kultur.

Bekannthch ist es möghch verschiedene Schimmelpilze wie Mucor-,
Aspergillus- und Penicilliumarten, welche unter optimalen Bedingungen gar
keinen Zucker vergären, durch besondere Massnahmen, wobei Sauerstoff-
enthaltung in den Vordergrund tritt, zu einer Produktion von Aethylalkohol
und Kohlensäure aus Zucker, d.h. zur Vergärung des Zuckers zu
zwingen i).

Die unverkennbare Verwandtschaft der sogenannten nicht-vergärenden
zu den vergärenden Hefearten verbürgt nun mit grösster Wahrscheinlich-
keit. dass es möglich sein wird für jede Hefeart solche Bedingungen aufzu-
decken unter welchen dieselbe zu einer mehr oder wenig starken Bildung
von Aethylalkohol und Kohlensäure aus Zucker im Stande sein wird.
Hieraus geht also hervor, dass den Merkmalen „Gärung — keine Gärungquot;
keine absolute Bedeutung beigemessen werden darf.

Falls nun Sauerstoffentziehung die einzige Bedingung für das Aufwecken
des Gärvermögens sein würde, wäre dem oben auseinandergesetzten in der
Praxis der Hefeuntersuchung leicht Rechnung zu tragen sein. Die Lage
wird jedoch wesentlich dadurch erschwert, dass es unter den Hefearten
keine wesentlich anaeroben Organismen gibt, d.h. bis auf jetzt sind keine
Hefearten bekannt, welche im Stande sind sich unter völhgem Sauerstoff-
ausschluss zu entwickeln.

Wenn man also wenige Zellen irgend einer Hefeart unter anaeroben
Bedingungen in ein geeignetes zuckerhaltiges Nährmedium impft, wird
nichts Bemerkenswertes geschehen. Doch würde es verfehlt sein hieraus zu
schliessen, dass der betreffenden Hefeart das Gärvermögen für den ver-
wendeten Zucker abgeht. Die spärlich vorhandenen Zellen können zwar
eine Gärung erregt haben, die gebildete Kohlensäuremenge wird jedoch zu
gering gewesen sein um sich als Gasblasen zu zeigen und da der Sauer-
stoffmangel die Zellvermehrung unterdrückt und auf die Dauer die einge-
impften Zellen durch Erstickung zu Grunde gehen lässt, ändert sich die
Lage nicht.

Hätte man dagegen grosse Quantitäten Hefezellen in das Medium
geimpft, dann wäre es durchaus denkbar, dass die anfangs gebildete
Kohlensäuremenge so gross gewesen sei, dass die Löshchkeitsgrenze der
Kohlensäure in dem Medium überschritten und damit zur Anwesenheit des

1) Vcrgl. z.B.: S. kostytschew, Pflanzenatmung, Berlin 1924 und die rezenten Arbeiten
von J. L. Yuill, Biochem. Journal, Vol. 22. p. 1504 (1928) und hiroshi Tamiya, Acta
phytochimica. Vol. 4, p. 77 (1928).

Gärvermögens konkludiert sein würde. Doch auch bei einem derartigen
Vorgehen kann es vorteilhaft sein den Zutritt einer gewissen Menge Sauer-
stoffs in das Medium zu sichern, weil dadurch die Wirksamkeit der einge-
impften Zellen sich während einer längeren Zeitfrist bewährt.

Das vorhergehende lässt sich in der Weise zusammenfassen, dass es
unter den Hefearten einen mehr oder weniger kontinuierlichen Übergang
zwischen den ausgesprochen oxydativen und den ausgesprochen vergären-
den Arten gibt. Dem Verhalten einer Hefeart der Gärung gegenüber, ist
aber — obgleich es also Übergangsfälle gibt — nicht jede Bedeutung abzu-
sprechen : es hiesse dies das Kind mit dem Bade ausschütten.

Ein zweiter Punkt, der bei der Feststellung des Gärvermogens einer
Hefeart verschiedenen Zuckerarten gegenüber in Betracht zu ziehen ist,
ist folgender. Man findet in der Literatur fast immer die Vorstellung ge-
weckt, dass das Gärvermögen einer Hefeart ganz willkürhch über die ver-
schiedenen Zuckerarten verteiU ist. Tatsächhch trifft dies jedoch nicht zu
und es gibt in der Literatur keine gut begründeten Angaben nach welcher
eine Hefeart irgend eine Zuckerart vergärt, jedoch Dextrose nicht. Im
Gegenteil spricht sehr- viel dafür, dass immer wenn bei einer Hefeart
Gärvermögen überhaupt vorhanden ist, nicht nur die Fähigkeit zur Ver-
gärung von Dextrose anwesend ist sondern auch Gärvermögen gegenüber

Laevulose und Mannosei).

Anders steht es mit dem Verhalten der verschiedenen Hefearten gegen-
über der vierten überhaupt gärfähigen Hexose : der Galaktose. Über die
Vergärung der Galaktose ist auch in der letzten Zeit sehr viel geschrieben
worden ; für unseren Zweck genügt es jedoch festzustellen, dass es Hefe-
arten gibt, welche diese Zuckerart wohl oder nicht nach vorheriger, leicht zu
realisieren, Anpassung vergären und solche die hierzu unter keinen Bedin-
gungen imstande sind. Dass die eventuell notwendige Anpassung an
Galaktose keine Fehlerquelle einzuschliessen braucht, geht hieraus hervor,
dass es für die Anpassung genügt junge kräftige Hefezellen auszusäen in
ein Nährmedium, welches neben Galaktose die übrigen zum Aufbau neuer
Zellen benötigten Nährstoffe enthält. Diese Bedingung wird nun leicht
erfüllt, wenn man als Nährmedium Hefedekokt mit Galaktose wählt. In
diesem Falle wird also Anpassung immer auftreten, wenn diese nur

irgendwie möglich ist.

Hiermit ist über das Gärvermögen den vier gärfähigen Hexosen gegenüber
und die Brauchbarkeit dieses Merkmals das nötige gesagt. Es bleibt jetzt
noch das Gärvermögen den Di-, Tri- und Polysacchariden gegenüber zu
betrachten. Entgegen den verwirrungstiftenden Schlussfolgerungen
WILLSTÄTTERS 2) ist es kaum zweifelhaft, dass alle letztgenannten Zucker-

1)nbsp;A I KluyveR Biochemische Suikerbepalingen, Delft, 1914, p. 22. Wie sich ergeben wird,
wurde diese Regeltiiässigkeit auch bei allen hierunter beschriebenen Gärversuchen bestätigt
gefunden.

2)nbsp;Zusammenfassung in: R. wlllstätter. Untersuchungen über Enzyme, Bd. II,

Abschnitt VII, Berlin, 1928.nbsp;, ... , nu ■ i^«

Vergleich dagegen : R. COHN, Zeitschr. f. physiol. Chemie, Bd. 168, p. 92 (1927).

arten vorangehend an einer eventuellen Vergärung einer Hydrolyse unter-
liegen. Die dabei wirksamen katalytischen Agentia, die sogenannten
Hydrolasen sind nun — im Gegensatz zu den bei der Gärung der Hexosen
wirksamen Oxydoredukasen ■— durchaus spezifisch und das Vorhandensein
oder das Fehlen des Vermögens ein bestimmtes Di-, Tri- oder Polysaccharid
zu vergären ist dann auch in den weitaus meisten Fällen ein durchaus
brauchbares Merkmal für die Differenzierung. Zwar darf nicht unberück-
sichtigt bleiben, dass es Hefearten gibt, worin die Menge der Hydrolasen
offenbar so gering ist, dass das Gärvermögen einzelnen Disacchariden
gegenüber sich erst auf die Dauer manifestiert. In diesem Zusammenhange
sei jedoch bemerkt, dass die bis jetzt bekannt gewordenen Angaben über
die Anpassung bestimmter Hefearten an die obengenannten Zuckerarten
einer kritischen Prüfung nicht standgehalten haben i).

Einen besonderen Fall bietet noch die Vergärung von Raffinose.
Während einzelne Hefearten dieses Trisaccharid vollständig vergären, gibt
es andere, welche diesen Zucker nur für ein drittel vergären, indem sie eine
Spaltung in Fruktose und das Disaccharid Melibiose herbeiführen, ohne
jedoch diese letzte Zuckerart anzugreifen. Bei der Prüfung der Vergärbar-
keit der Raffinose wird es daher vorteilhaft sein eine derartige Methode zu
benützen, welche die quantitative Bestimmung der gebildeten Kohlensäure
ermöglicht.

Zusammenfassend lässt sich also sagen, dass das Merkmal ob Gärver-
mögen überhaupt vorhanden ist in bestimmten Fällen mit grosser Vorsicht
gebraucht werden muss; wenn jedoch unzweideutiges Gärvermögen Dex-
trose, (Laevulose und Mannose) gegenüber vorhanden ist, hefert die
Prüfung auf ein Gärvermögen Galaktose, Di-, Tri- und Polysacchariden
gegenüber durchaus nützliche Merkmale für die Hefesystematik.

Wenn dagegen nur eine ganz schwache Gärwirkung Dextrose (Laevu-
lose und Mannose) gegenüber vorhanden ist und dieselbe sich nur schwierig
feststellen lässt, würde es auf Grund der unten gegebenen Ausführungen
über den relativen Wert der üblichen Methoden zum Gärungsnachweise
verfehlt sein einem positiven oder negativen Ausschlage der Unter-
suchungen nach, der Vergärbarkeit einer bestimmten Zuckerart wesentliche
Bedeutung für die Systematik zuzuschreiben.

Nebenbei sei noch bemerkt, dass die aus der älteren Literatur stammen-
den, jedoch auch in rezenten Arbeiten oft noch vorkommenden Angaben,
dass eine bestimmte Hefeart bestimmte Zuckerarten vergärt, jedoch nicht
assimiliert, durchaus verfehlt sind. Derartige Angaben haben einer kriti-
schen Prüfung niemals standgehalten 2) und sind überdem mit den heutigen
Ansichten über den Biochemismus des Stoffwechsels gänzhch unvereinbar.
Dagegen ist es für diejenigen Hefearten, welche die Zucker verbrennen
anstatt vergären, selbstverständlich, dass die geeigneten Zuckerarten neben

1) Vergl. A. J. KluYVER, I.e., p. 91 u. f. und A. KlöCKER I.e.. p. 207.
A. 1. Kluyver, 1. c., p. 37 u. f.

der Veratmung auch teilweise assimiliert werden, obgleich dabei von einer
Gärung gar nicht die Rede ist.

Hierunter wird jetzt auf die zur Feststellung des Gärvermögens üblichen
Methoden eingegangen werden.

a. Die LiNDNERsche Kleingärmethode i).

In der ursprünghchen Abfassung besteht die Methode darin, dass man
die Höhlung eines hohl geschliffenen Objektträgers flambiert, mit sterilem
Wasser anfüllt, hierin eine relativ grosse Menge der Hefereinkultur
suspendiert und eine Prise des zu untersuchenden Zuckers zufügt. Hierauf
deckt man die Höhlung mit einem ebenfalls flambierten Deckgläschen zu
und zwar in derartiger Weise, dass keine Luftblasen zurückbleiben. Dann
wird der Hohlraum sorgfältig mit Vasehn abgeschlossen. Der Objektträger
wird nun in einen Brutschrank bei optimaler Temperatur gestellt und man
beobachtet ob innerhalb 24 Stunden Gasblasen unter dem Deckgläschen
aufgetreten sind.

Es ist fast überflüssig auseinanderzusetzen, dass dieser Methode viele
Beschwerden anhaften. An erster Stelle wird die Menge der gebildeten
Kohlensäure direkt abhängig sein von der Stärke der Impfung, weil irgend
eine erhebliche Zellvermehrung unter den gewählten Bedingungen nicht
stattfindet (Sauerstoffabschluss und Mangel an Nährstoffe). Bei schwach
vergärenden Arten kann dieser Faktor eben einen positiven oder einen
negativen Ausschlag des Versuches bedeuten. Wenn man um diesen
Übelstand vorzubeugen sehr stark impft, muss man wieder damit Rechnung
tragen, dass man mit den Hefezellen oft gärfähige Reservestoffen
(Glykogen) mit hineinbringt und dies kann so weit gehen, dass man auch
in ein Medium mit reinem Wasser — also in Abwesenheit irgend einer
Zuckerart — eine merkbare Gasentwicklung bekommt. Ein Nachteil dieser
Methode ist ausserdem darin gelegen, dass der hinzugefügte Zucker nicht
sterilisiert wird, sodass immer der Möglichkeit einer bakteriellen Gärung
Rechnung getragen werden muss. Schliesslich ist der Vaselinverschluss oft
mangelhaft, was zur Folge haben kann, dass kleine Flüssigkeitsmengen
verdunsten\'und Luftbläschen eintreten, welche dann Gärung vortäuschen.
Dies lässt sich dann zwar feststellen, indem man nach Beendigung des
Versuches Kahlauge hinzutreten lässt und feststellt, ob die Gasbläschen

absorbiert werden.

Dass der Vaselinverschluss tatsächlich nicht immer zuverlässig ist, geht

schon aus der Angabe LindnERs hervor, nach welcher oft ein Teil des
Gases in Kalilauge unlöslich ist. Die hier ausgeübte Kritik wird genügen
um eine Erklärung zu geben für viele entgegengesetzten Angaben be-
züglich des Gärvermögens einer Hefeart und für das anscheinend willkür-
liche Benehmen einer Hefeart verschiedenen Zuckern, insbesondere
Dextrose, Laevulose, Mannose gegenüber. Es darf hier nicht unerwähnt

Vergl. z.B.: P. LiNDNER, Mikroskopische und biologische Betriebskontrolle in den
Gärungsgewerben. 6te Aufl.. Berlin, 1930. p. 207.

bleiben, dass die LiNDNERsche Kleingärmethode im Laufe der Zeit von
verschiedenen Untersuchern etwas abgeändert worden ist ; so hat
Guilliermond 1) den hohlen Objektträger durch einen Feuchtkammer
nach Böttcher ersetzt. Der grössere Inhalt dieses Kammers bringt nun mit
sich, dass die ursprüngliche Idee der Kleingärmethode, nämlich Gärungs-
beobachtung ohne dass Wachstum erforderlich ist, hier aufgegeben worden
ist. .Die Menge der im Kammer vorhandenen Flüssigkeit ist doch so gross,
dass die von den wenigen eingeimpften Zellen produzierten Kohlensäure
sich darin meistens ganz auflösen wird. Darum benützt GuiLLlERMOND
dann auch Hefedekokt statt Wasser für die Herstellung der Zuckerlösung.
Da er aber den Zucker auch nicht sterilisiert, wird die Möglichkeit einer
Bakterienentwicklung durch diese Massnahme noch stark vergrössert. Sehr
deuthch folgt aus dem Gebrauch von Hefedekokt, dass Guilliermond sich
bewusst ist, dass Zellvermehrung eine unentbehrliche Bedingung für einen
positiven Ausschlag des Versuches ist und in diesem Lichte ist es nicht
ohne Bedenken, dass er andererseits angibt, dass es absolut notwendig ist
die Luft vollständig auszuschliessen. In vielen Fällen wird zwar der in der
Flüssigkeit gelöste Sauerstoff genügen um einige Entwicklung zu ermög-
lichen, bei mehr oxydativen Hefearten wird jedoch bald Sauerstoffmangel
und damit Hemmung der Zellvermehrung auftreten. Auch hier wird also
in bestimmten Fällen der Ausschlag des Versuches von subtilen Schwan-
kungen in den äusseren Bedingungen abhangen.

b. Die Untersuchung in Gärungskölbchen nach EinhoRNS).

Bekanntlich werden zur Feststellung des Gärvermögens öfters Einhorn-
Gärungskölbchen benutzt. Hierbei wird das mit Wattenverschluss ver-
sehene Kölbchen zuerst im Trockenschrank sterihsiert und dann unter den
üblichen Kautelen soviel einer sterilen zweiprozentigen Zuckerlösung in
Hefedekokt eingefüllt, dass der geschlossene Schenkel sich vollständig
anfüllen lässt und die Flüssigkeit im offenen Schenkel eben genügt um
Luftzutritt in den geschlossenen Schenkel vorzubeugen. Nachdem wird
mit einer kleinen Menge der Hefereinkultur geimpft und das Kölbchen in
den Brutschrank übergebracht.

Es wird einleuchten, dass auch bei dieser Methode sich verschiedene
Schwierigkeiten ergeben. Die Flüssigkeitsmenge ist so gross, dass die von
den eingeimpften Zellen produzierte Gärungskohlensäure sich leicht löst
und dass es also nur zur Abscheidung gasförmiger Kohlensäure kommen

\') A. Guilliermond and F. W. Tanner, The Yeasts, New York, 1920.

A. Guilliermond, Clef dichotomique pour la détermination des Levures, Paris, 1928
2) M. Einhorn, Virchow\'s Archiv für pathologische Anatomie und Physiologie und
klin. Medicin, Bd. 102, p. 263 (1885). Diese Kölbchen werden mit Unrecht in der Literatur
oft als Gärungskölbchen nach Th. Smith angedeutet. smith ist zwar der erste der diese
Kölbchen in die bakteriologische Technik eingeführt hat, er bemerkt aber selber, dass
diese schon von elnhorn zur quantitativen und qualitativen Bestimmucg des Zuckers
im Harn gebraucht worden sind.

Th. Smith, Centr. f. Bakt., Bd. 7. p. 502 (1890).

wird, wenn eine beträchtliche Zellvermehrung eintritt. Die Anwendung
von Hefedekokt als Lösungsmittel für den zu untersuchenden Zucker ge-
währleistet eine sehr genügende Zellvermehrung falls der Zucker gärfähig
ist. Der Umstand, dass der Sauerstoff durch den offenen Schenkel frei
zutreten kann, ist zweifellos ein Vorzug für die beschriebene Unter-
suchungsmethode. Demgegenüber muss berücksichtigt werden, dass bei
dieser Versuchsanstellung ein ziemlich grosser Teil der produzierten
Kohlensäure entweder direkt oder durch Diffusion durch den offenen
Schenkel entweichen wird. Der direkte Verlust an Kohlensäure ist deshalo
so beträchtlich, weil eine bedeutende Menge der gebildeten Hefe sich
im niedrigsten Teile des Apparates absetzt und die durch diese Zellen
gebildete Kohlensäure in den offenen Schenkel aufsteigt. Fulleri) kommt
der Verdienst zu eine Abänderung des ElNHORN-kölbchens vorgeschlagen
zu haben, worin dieser Übelstand beseitigt worden ist.

In den üblichen Kölbchen wird ein positiver Ausschlag d.h. Gasanhäu-
fung im geschlossenen Schenkel oft gefährdet, nämlich dann, wenn die
Geschwindigkeit des Kohlensäureentweichens die Gärungsgeschwindigkeit
übertrifft. Man kann dann auch oft konstatieren, dass eine anfänglich im
geschlossenen Schenkel vorhandene Kohlensäuremenge bei Fortsetzung der
Bebrutung allmählich verschwindet.

Andererseits beschränkt die Entwicklung der mehr oxydativen Hefearten
sich oft zum offenen Schenkel ; im geschlossenen Schenkel tritt dann also
keine Bildung von Kohlensäure ein. Doch wäre es verfehlt hieraus zu
schliessen, dass der Organismus nicht zu einer Vergärung der betreffenden
Zuckerart im Stande ist. Der Gegenteil lässt sich öfters auf einfacher
Weise nachweisen, indem man nach etwa zwei Tagen die gebildete Hefe-
menge durch Umschütteln gleichmässig in die Flüssigkeit verteilt. In vielen
Fällen wird dann nach Fortsetzung der Bebrutung während etwa 24 Stun-
den eine bedeutende Gasmenge im geschlossenen Schenkel angetroffen.

Die beschriebene Methode hat den Vorteil, dass die Infektionsgefahr
auf ein Minimum reduziert ist und weiter ist der eigentümlich abgestufte
Übergang von Aerobiose zu Anaerobiose, welcher im Gärungskölbchen
realisiert ist, zweifellos sehr geeignet um zugleicherzeit Bedingungen für
die Zellvermehrung und für die Zuckervergärung zu ergeben.

Doch ist es nach dem Obengesagten klar, dass auch diese Methode
keine sichere Antwort auf die Frage, in wieweit eine Hefeart zur alkoholi-
schen Vergärung eines Zuckers im Stande ist, gibt.

c. Die Gärmethode im quantitativen Gärapparat 2).

Aus den vorhergegebenen allgemeinen Ausführungen geht hervor, dass
die sicherste Weise um festzustellen, ob eine bestimmte Hefeart im Stande

•) A. V. Füller. Joum. Ind. Eng. ehem.. Vol. 12, p. 595 (1920).

A. ]. Kluyver, 1. C., p. 59. Eine in deutscher Sprache abgefasste Beschreibung des
Apparates und der Methode findet man in: A. W. van der Haar, Anleitung zum Nach-
weis u.s.w. der Monosaccharide und Aldehydsäuren, Berlin, 1920.

ist einen Zucker zu vergären, folgende ist: man bringt eine grosse Menge
Hefezellen einer jungen Kultur unter mehr oder weniger vollständigem
Sauerstoffausschluss in ein kleines Volum einer Zuckerlösung; dabei
muss dann die Hefemenge so gross genommen werden, dass schon eine
geringe Kohlensäureproduktion pro Zelle zur Folge hat, dass die Sätti-
gungsgrenze der Flüssigkeit für Kohlensäure überschritten wird. Ein
Apparat, in welchem sich diese Bedingungen erfüllen lassen, ist der
für quantitative Zwecke hergestellte Gärungssaccharometer nach VAN

Iterson—Kluyver.

Da das Volum der zu untersuchenden Zuckerlösung hier auf 1 ccm.
beschränkt ist, ist es leicht ausführbar die benötigte Hefemenge einer
gewöhnlichen Schrägagarkultur zu entnehmen. Die mit diesem Apparate
gesammelten Erfahrungen lehren, dass es keinen Grund gibt um bei der
Hefeuntersuchung die Giftigkeit des als Sperrflüssigkeit benützten Queck-
silbers zu befürchten.

Auch bei dieser Methode ist es jedoch vorteilhaft eine Lösung des
Zuckers in Hefedekokt anstatt in Wasser vorzunehmen. Wahrscheinlich
wird hierdurch die Lebensdauer der eingeimpften Zellen verlängert,
während ausserdem, da doch immer eine kleine Quantität Sauerstoff in der
Flüssigkeit gelöst vorhanden ist, noch eine geringe Zellvermehrung ermög-
licht wird. Unter diesen Bedingungen lässt sich leicht bewirken, dass eine
2- bis 4-prozentige Zuckerlösung quantitativ vergoren wird. Dieser Um-
stand verhindert eine Vortäuschung der Vergärbarkeit eines Zuckers
durch die eventuell aus den Reservestoffen der Hefezellen gebildete kleine
Kohlensäuremenge.

20. Die Zuckerverarbeitung von nicht-vergären-
den Arten.

Die verschiedenen Stufen des Überganges von Atmung in Gärung,
welche wir bei den verschiedenen Hefearten realisiert finden, lassen ohne
weiteres folgern, dass von den mehr oxydativen Arten Zucker angegriffen
werden können, ohne dass dabei von einer Gärung die Rede zu sein
braucht. Wenn also die Gärversuche ausweisen, dass Dextrose nicht ver-
goren wird, jedoch wohl die Zellvermehrung ermöghcht, darf geschlossen
werden, dass ein Teil der Dextrose veratmet, d.h. verbrennt worden ist.
In diesem Falle erscheint es prüfungswert in wieweit andere Zuckerarter
ebenfalls oxydativ verarbeitet werden können. Leider ist die Feststellung
dieser Tatsache nicht mit Hilfe einer einfachen Versuchsanstellung durch-
zuführen. Denn die erste Bedingung für einen derartigen Versuch ist der
freie Zutritt des Sauerstoffs und die Notwendigkeit um auch den sonstigen
Nährungsbedürfnissen gerecht zu werden bringt mit sich, dass für diese
Versuche eine Zuckerlösung in Hefedekokt benützt werden soll. Aber
gerade die mehr oxydativen Hefearten entwicklen sich auch in Hefedekokt
ohne Zuckerzusatz nicht unbeträchtlich und verbrennen dabei einen Teil
der Nährstoffe ebenfalls zu Kohlensäure und Wasser.

Ein einfacher qualitativer Nachweis der Kohlensäure bei Wachstum
in einer solchen zuckerhaltigen Nährlösung berechtigt also nicht auf eine
Verarbeitung des betreffenden Zuckers zu schliessen.

Es würde daher vorteilhaft sein die Prüfung auf die Zuckerverarbeitung
in synthetischen Nährmedien mit ausschliesshch anorganischen Nähr-
salzen vorzunehmen. In diesem Falle würde eine eingetretene Zellver-
mehrung tatsächlich einen positiven Ausschlag bedeuten. Das Ausbleiben
einer derartigen Vermehrung würde jedoch nicht beweisen, dass die be-
treffende Zuckerart auch nicht bei Anwesenheit anderer mehr geeigneter
Nährstoffe angegriffen worden könnte.

Von verschiedenen Autoren wird nun in den Fällen, worin Di-, Tri-
oder Polysacchariden zur Untersuchung gelangen, Wert darauf gelegt
festzustellen, ob im Nährmedium die hydrolytischen Bausteine des
betreffenden Saccharids nachzuweisen sind. Oft wird diese Tatsache dann
so interpretiert, dass ein positiver Ausschlag dieses Nachweises den Beweis
liefert, dass der betreffende Zucker verarbeitet wird .und ein negativer
Ausschlag, dass das Umgekehrte zutrifft. Es wird jedoch ohne Weiteres
einleuchten, dass dem zweiten Teil dieses Schlusses alle Berechtigung
abgeht. Das eventuelle Auftreten der hydrolytischen Bausteine wird doch
gänzlich beherrscht von der relativen Geschwindigkeit der Hydrolyse
und des oxydativen Zuckerverarbeitungsprozesses. Irgend eine mehr prin-
zipielle Bedeutung kann man also der genannten Feststellung kaum
zuschreiben.

30. Die Hautbildung.

Das Auftreten einer Haut bei Kultur einer Hefeart in flüssigen
Medien ist ein Merkmal, welches in der Hefesystematik ausgebreitete
Anwendung gefunden hat. Es unterliegt dann auch keinem Zweifel,
dass eine ausgeprägte Hautbildung ein Symptom einer durchaus
wichtigen Eigenschaft ist, nämlich die Geneigtheit den Sauerstoff in den
Stoffwechsel zu beziehen. Es erscheint allerdings zweifelhaft ob umgekehrt
ein stark oxydativer Charakter einer Hefeart immer auch zu einer ausge-
prägten Hautbildung führt. Man bekon^mt mehr den Eindruck, dass neben
dem physiologischen Charakter auch die morphologischen Eigenschaften der
Zellen für die Hautbildung von Bedeutung sind. Überdem steht es auch
fest, dass es Hefearten mit ausgeprägt hautbildendem Vermögen gibt,
deren Zellen unter anderen Bedingungen sehr gut Gärung erregen können.

Fest steht, dass die Hautbildung in hohem Masse von der Zusammen-
setzung des benützten Mediums abhängig ist. Einerseits wird dieser Einfluss
sich direkt auf chemische Faktoren zurückführen lassen, andererseits ist
es nicht ausgeschlossen, dass auch physikalische Faktoren, insbesondere
die Oberflächenspannung des Mediums, mitspielen

Ein direkter Einfluss der Obenflächenspannung auf die Hautbildung in Bakterien-
kulturen ist von LarsoN und Mitarbeitern behauptet worden. Vergl.; W. P. Larson
w. F. Cantwell and J. B- hartzell, Journ. Infect. Dis. Vol. 25, p. 41 (1919) und
Verhandel. Afd. Natuurkunde (2e Sectie) Dl. XXVIILnbsp;A 2

Bei der Besprechung der Form der Zellen ist auch schon darauf hinge-
wiesen dass die Zusammensetzung der Nährflüssigkeit von grosser
Bedeutung für die Entwicklungsweise der Kultur ist. Man wird also bei
Angaben über Hautbildung berücksichtigen müssen, ob dieselbe sich z.B
auf die Kultur in gewöhnlicher Würze, in gehopfter Würze oder in

Kojiabsud beziehen.

Man soll also auch das Merkmal der Hautbildung mit grosser Vorsicht
gebrauchen und dies umsomehr weil sehr viele Hefearten, welche in der
ersten Entwicklungsphase in einem zuckerhaltigen Nährmedium gar keine
Neigung zur Hautbildung aufweisen, auf die lange Dauer doch dazu über-
gehen. Diese letzte Tatsache hängt zweifellos damit zusammen, dass die
betreffende Hefeart, wenn einmal die vorhandene Zuckermenge verarbeitet
worden ist, zu einer oxydativen Verarbeitung des vorhergebildeten Aethyl-
alkohols übergeht. Wenn dann auch das Merkmal der Hautbildung auf
die üblichen Nährflüssigkeiten vorläufig nicht entbehrt werden kann,
so erscheint es doch rationell ausserdem das Merkmal der Entwick-
lung in einer synthetischen Nährflüssigkeit mit Aethylalkohol als einzige
Kohlenstoffquelle in Betracht zu ziehen.

40. Die Verwendbarkeit der Nitrate als Stick-
st o f f q u e 11 e.

Während die üblichen Hefenährflüssigkeiten organische Stickstoffver-
bindungen enthalten, ist es bekannt, dass bei der überaus grossen Mehrzahl
der Hefearten diese Verbindungen sich mehr oder weniger (Biosphano-
men\') vollständig von Ammonsalzen ersetzen lassen. Als systematisches
Merkmal kommt diese Eigenschaft also wohl kaum in Betracht. Der Fall
liegt anders, wenn man anstatt Ammonsalze Nitrate auf ihre Geeignetheit
als Stickstoffquelle prüft. Es hat sich doch ergeben, dass relativ nur wenige
Arten, welche übrigens untereinander eng verwandt sind, imstande smd
die Nitrate für assimilatorische Zwecke zu reduzieren. Wenn man diese
Eigenschaft als systematisches Merkmal ausnützen will, so scheint es
angebracht in die betreffende Nährflüssigkeit eine Kohlenstoffverbindung
zu bringen, welche sich sowohl energetisch wie assimilatorisch optimal
verwerten lässt. Als solche ist dann Dextrose wohl vor allem geeignet.

50. Die Gelatineverflüssigung.

Ein ziemlich beliebtes Merkmal für die Hefedifferenzierung das wohl
der Bakteriologie entnommen sein wird, ist das Vermögen eine Verflüssi-
gung der Gelatine zu veranlassen. Beim Durchsicht der Literatur bekommt
man jedoch den Eindruck, dass das Gelatineverflüssigungsveiimögen bei
den Hefearten viel weniger ausgeprägt ist, als dies bei verschiedenen

W. p. LarsoN, Abstr. Bact., Vol. 5, p. 2 (1921). Die neueren Arbeiten auf diesem Ge-
biete SteUen jedoch die Bedeutung dieses Faktors in Abrede. Vergl.: W. M. gibbs,
H. W. BatcHELOR and T. N. SICKELS, Journ. Bact. Vol. U, p. 393 (1926): O. R.
pizarro, Journ. Bact., Vol. 13, p. 387 (1927).

Bakterienarten der Fall ist. Meistens tritt die Verflüssigung nur langsam
ein und sind die Unterschiede gradueller Natur. Ausserdem übt die
Vorbehandlung der Gelatinenährböden (Temperatur und Dauer der
Sterilisation) und die angewandte Konzentration der Gelatine einen unver-
kennbaren Einfluss aus auf die Intensität der Verflüssigung.

Bemerkt sei, dass BeijerinckI) angibt, dass insbesondere die Sporenbil-
dung auf einem Gelatinenährboden oft von einer Verflüssigung begleitet ist.
Aus den neueren Untersuchungen von Janke und Holzer 2) bekommt
man den Eindruck, dass die Hefearten ganz allgemein zu denjenigen
Mikro-organismen gerechnet werden müssen, wobei proteolytische
Wirkung nur von den lebensschwachen oder abgestorbenen quot;Zellen aus-
geht. Die gesteigerte proteolytische Wirkung bei der Sporenbildung steht
mit dieser Ansicht in gutem Einklang.

Unter diesen Umständen kann man der Eigenschaft der Gelatinever-
flüssigung für die Hefesystematik kaum grosse Bedeutung zuschreiben.

60. Die Temperaturkardinalpunkte.

Auf das Merkmal der Temperaturkardinalpunkte für Sprossung, Sporen-
bildung, Hautbildung u.d. ist namenthch von HansenS) und KlöCKER^)
in vielen Fällen grossen Wert gelegt worden.

Während dieses Merkmal in speziellen Fällen vielleicht von Bedeutung
sein wird, bekommt man doch den Eindruck, dass diese Eigenschaft nicht
genügend konstant ist um sie für die allgemeine Systematik zu verwerten ;
insbesondere steht zu befürchten, dass bei während längerer Zeit fortge-
setzter Kultur von Hefearten im Laboratorium die an und für sich meistens
nicht sehr bedeutenden Unterschiede in den Temperaturkardinalpunkten
verloren gehen werden.

\') M. W. BeiieRINCK. Arch. Néerl. d. Sciences exactes et natur., Sér. II, T. 2, p. 269
(1898).

2)nbsp;A. Janke und H. Holzer, Biochem. Zeitschr. Bd. 213, p. H2 (1929); Ibid. Bd. 226,
p. 243 (1930).

3)nbsp;E. Chr. Hansen, Compt. rend. trav. lab. Carlsberg, T. 2. p. 13 (1883); Ibid. T. 2,
p. 106 (1886): Ibid. T. 5, p. 68 (1902).

A. Klöcker, Die Gärungsorganismen, 3te Aufl. Berlin-Wien, 1924, p. 200.

KAPITEL IL

Kritische Ubersicht der bisher vorgeschlagenen Hefesystemen.

Die Systematik der Hefen nimmt einen Anfang mit einer Abhandlung
MeyensI) welcher für das erste Mal den Gattungsnamen Saccharomyces
für die Bierhefe vorschlug. Von Reess^) wurde dann in 1870 diese
Gattung schärfer definiert. Er rechnete zur Gattung Saccharomyces alle
Pilze, welche durch ein Vorkommen als Hefezellen und durch einen
Mangel an Myzelbildung charakterisiert sind und welche sich teils durch
Sprossung teils durch Ascosporenbildung vermehren.

Die eigentlichen Grundhnien der Systematik der sporogenen Hefen wur-
den jedoch von Hansen 3) gegeben, indem er die Gattung Saccharomyces
(Meyen) Reess mit einigen schon aufgestellten und einigen von ihm neu
begründeten Gattungen zu der Familie der Saccharomycetaceae vereinigte.
Die Charaktere dieser Familie wurden wie folgt angegeben : „Sprosspilze
mit Endosporen- und reichlicher Hefezellenbildung. Typisches Mycel nur
bei wenigen Arten. Jede Zelle kann als Sporenmutterzelle auftreten. Spore
einzeUig; Anzahl der Sporen gewöhnlich 1—4, selten bis 12.quot; Die
Familie umfasste dann die folgenden acht Gattungen :

1.nbsp;Saccharomyces (Meyen) Reess.

2.nbsp;Zygosaccharomyces Barker

3.nbsp;Saccharomycodes Hansen.

4.nbsp;Saccharomycopsis Schiönning»).

5.nbsp;Willia Hansen.

6.nbsp;Pichia Hansen.

7.nbsp;MonoSpora Metschnikoff (5).

8.nbsp;Nemafospora Peglion 7).

Hansen bemerkt jedoch, dass die Einteilung der beiden letztgenannten
Gattungen in der Familie der Saccharomycetaceae nur provisorischer Natur
ist; die systematische Stellung der Vertreter dieser Gattungen bedürfe
noch der näheren Aufklärung.

1)nbsp;Meyen, Wiegmans Archiv, Jahrg. IV. Bd. 2, p. 100 (1837).

2)nbsp;M. Reess. Unters, u. d. Alkoholgärungspilze. Leipzig. 1870. p. 80.

3)nbsp;E. Chr. Hansen. Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 12, p. 529 (1904).

4)nbsp;B. T. P. Barker, Phil. Transactions Royal Soc. Ser. B, Vol. 194, p. 467 (1901).

5)nbsp;H. Schiönning, Compt. rend. trav. lab. Carlsberg, T. 6. p. 103 (1903).

6)nbsp;E. MetschnikoFF, Virchow\'s Archiv, Bd. 96, p. 177 (1884).
V. Peglion, Rendic. d. R. Acad. dei Lincei, p. 276 (1897).

Die übrigen sechs Gattungen werden von Hansen in zwei Hauptgruppen
(Unterfamilien ?) eingeteilt. Die erste Hauptgruppe, welche die vier zuerst-
genannten Gattungen umfasst, unterscheidet sich von der zweiten dadurch,
dass in Nährlösungen sich aus der Aussaat zunächst ausschliesslich Boden-
satzhefe bildet und dass es erst viel später zur Hautbildung kommt, falls
solche überhaupt eintritt. Die Endosporen der Arten dieser Gruppe sind
kugelig, eiförmig oder nierenförmig, glatt, mit einer oder mit zwei Mem-
branen. Die Keimung der Sporen geschieht entweder durch Sprossung
oder durch Keimschlauchbildung (Promyzel). Die grosse Mehrzahl der
Arten vermag alkoholische Gärung hervorzurufen.

Die zweite Hauptgruppe der Saccharomycetaceae, welche also die
Gattungen Pichia und Willia umfasst, ist dadurch gekennzeichnet, dass
ihre Vertreter nach Aussaat in zuckerhaltigen Nährlösungen alsbald eine
typische Kahmhaut bilden.

KlÖCKER 1) der in 1906 eine Übersicht über die Systematik der Hefen
gibt, nimmt den Standpunkt ein, dass die beiden von Lindner aufgestellten
Gattungen Torulaspora und Hansenia-) nicht aufrecht zu erhalten
sind, weil die Vertreter dieser beiden Gattungen sich nur in Zellgestalt von
der Gattung Saccharomyces unterscheiden.

Tatsächlich war das Material, welches damals bezüglich der Vertreter
dieser beiden Gattungen vorlag, wohl ungenügend um eine Gattungsabtren-
nung zu berechtigen.

Ein wesentlicher Punkt in KlÖCKERs Abhandlung ist, dass er neben
der Familie der Saccharomycetaceae die Familie der Schizosaccharomyce-
taceae mit der einzigen Gattung Schizosaccharomyces Lindner 3) aufstellt.
Diese Gattung war von Hansen in systematischer Hinsicht ausser
Betracht gelassen.

Der bequemen Übersicht wegen folgt hier der von Klöcker in seiner
Abhandlung gegebene analytische Bestimmungsschlüssel der Gattungen
der Familie der Saccharomycetaceae.

l Sporen oval, rund, hut- oder zitronenförmig, mit oder ohne

1 / Leiste : Siehe 2.

{ Sporen nadel- oder spindelförmig : Siehe 7.

Die Zellen bilden sofort in zuckerhaltigen Nährflüssigkeiten Boden-
satzhefe und erst weit später eine\'Haut, falls eine solche überhaupt
gebildet wird : Siehe 3.
Die Zellen bilden sofort eine Haut (Kahmhaut) an der Oberfläche
zuckerhaltiger Nährflüssigkeiten ; die Haut besitzt durch einge-
schlossene Luftblasen ein trockenes Aussehen : Siehe 6.

A. Klöcker in: LafARs Handbuch der Technischen Mykologie, Bd. 4, p. 168 (1906).
P. Lindner, /ahrb. d. Versuchs- u. Lehranst. für Brauerei in Berlin, Bd. 7, p. 448
1904).

p. Lindner. Wochenschr. f. Brauerei, Bd. 10, p. 1298 (1893).

( Spore mit 1 Membran : Siehe 4.
^ ) Spore mit 2 Membranen :nbsp;Saccharomycopsis.

( Die Zellen fusionieren :nbsp;Zygosaccharomyces.

^ ) Die Zellen fusionieren nicht: Siehe 5.

Die Sporen keimen mittelst gewöhnlicher Sprossung: Saccharomyces.
Bei der Keimung der Sporen entwickelt sich ein Promycelium, von
welchem aus die Sprossung mit unvollständiger Abschnürung
stattfindet:nbsp;SaccharomyCodes.

Sporen rund oder halbkugelförmig oder unregelmässig und eckig.
Keine Gärung :nbsp;Pichia.

^ J Sporen hut- oder zitronenförmig mit verspringender Leiste:

Willia.

( Sporen nadeiförmig. Parasit in Flohkrebsen:
^nbsp;Monospora.

^ \\ Sporen spindelförmig, fast fadenförmig, mit einer langen Geissel-
\' Parasit in Haselnüssen :nbsp;Nematospora.

Wichtiges Material für den weiteren Ausbau der Hefesystematik wird
durch die grundlegenden Arbeiten von guilliermond i) gehefert. Aus
diesen geht hervor, dass die sporogenen Hefearten zweifellos grosse Ver-
wandtschaft haben zu der Famihe der Endomycetaceae. Guilliermonds
Untersuchungen zeigten die grosse Übereinstimmung in den Vorgängen
der Ascusbildung bei Eremascus [ertilis Stoppel 2) und bei verschiedenen
Arten der Saccharomycetaceae nndSchizosaccharomycetaceae, insbesondere
der Gattungen Zygosaccharomyces und Schizosaccharomyces. Während
nun aber Eremascus fertilis immer nur Myzel bildet, findet man in ver-
schiedenen Endomyces-arten eine intermediäre Form zwischen Eremascus
fertilis und den genannten Vertretern der Saccharomycetaceae, indem bei
diesen Endomyces-atten sowohl Myzelbildung als auch Vermehrung durch
Sprossung angetroffen wird. Einen ähnhchen Zusammenhang findet man
bei einigen anderen Endomyces-atien und den Vertretern der Gattung
Schizosaccharomyces.

Zur Erläuterung folgt hier eine Wiedergabe der von guilliermond
aufgestellten Verwandtschaftsreihe.

1)nbsp;A. Guilliermond. Revue gén. de Botan. T. 17, p. 337 (1905): idem Annales Myco-
logici, Vol. 5, p. 49 (1907): idem Revue gén. de Botan. T. 21, p. 353 (1909); idem
Annales Mycologici, Vol. 8, p. 287 (1910); idem Archiv, f. Protistenkunde, Bd. 28, p. 52
(1913). Zusammenfassende Uebersicht bei A. guilliermond, Les levures, Paris, 1912;
bei : A. guilliermond and . F. W. Tanner, The Yeasts, New-York, 1920 und bei :
A. Guilliermond, Titres et Travaux scientifiques, Laval, 1928.

2)nbsp;R. Stoppel, Flora, Bd. 97, p. 332 (1907).

Während hier nicht näher auf die Phylogenie der Hefearten eingegangen
werden wird, sind die obenstehenden Betrachtungen von Guilliermond
doch auch für den engeren systematischen Zweck darum sehr wichtig, weil
dadurch der Nachdruck gelegt wird auf die engen Beziehungen zwischen
bestimmten Gattungen der Saccharomycetaceae und Schizosaccharomyce-
taceae und der Gattung Endomyces, Dies kommt u.m. darin zum Ausdruck,
dass Guilliermond (1912) dazu übergeht Saccharomycopsis capsularis
Schiönning unter den Namen Endomyces capsularis in die Familie der
Endomycetaceae zu stellen.

Bevor wir jedoch dazu übergehen die weitere Entwicklung der Hefe-
systematik in Zusammenhang mit dem obenmitgeteilten zu behandeln, sei
zuerst darauf hingewiesen, dass noch eine Anzahl neue Gattungen an die
schon erwähnten der Familie der Saccharomycetaceae zugefügt wurden.
Als solche sind zu nennen :

1.nbsp;Debaryomyces Klöcker i).

2.nbsp;Schwanniomyces Klöcker i).

3.nbsp;Nadsonia Sydow2).

(syn. Guilliermondia Nadson et Konokotine^) ).

4.nbsp;Coccidiascus Chatton 4).

Hierzu sei noch bemerkt, dass von ZiKES 5) mit Recht die Aufmerksam-
keit darauf gelenkt ist, dass die Gattung Hansenia Lindner keine Gültigkeit
hat, weil schon früher von ZoPF den Namen Hansenia für eine ganz andere
Pilzgattung verwendet worden war, weshalb von ZiKES für die erstgenannte
Hefegattung den Namen Hanseniaspora vorgeschlagen wurde.

\') A. Klöcker, Compt. rend. trav. lab., Carlsberg, T. 7, p. 273 (1909).

2)nbsp;H. Sydow, Ann. Mycol., Vol. 10, p. 348 (1912).

3)nbsp;G. A. Nadson et A. G. KONOKOTINE, Bull. Jard. imp. de Botan., St. Petersbourg,
T. 11. p. 142 (I9II).

E. Chatton, Compt. rend. Soc. biol., T. 75. p. 117 (1913).

5) H. Zikes, Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 30, p. 145 (1911).

Hierunter folgt eine Wiedergabe des von GuiLLlERMOND (1912) gege-
benen Systems der sporogenen Hefen und engst verwandten myzelbilden-
den Pilze.

Familie Saccharomycetaceae
Gattungen:

1.nbsp;Schizosaccharomyces Lindner

2.nbsp;Zygosaccharomyces Barker

3.nbsp;Debaryomyces Klöcker

4.nbsp;Schwanniomyces Klöcker

5.nbsp;Torulaspora Lindner

6.nbsp;Saccharomycodes Hansen

7.nbsp;Saccharomycopsis Schiönning

8.nbsp;Saccharomyces (Meyen) Reess

9.nbsp;Hansenia Lindner

10.nbsp;Pichia Hansen

11.nbsp;Willia Hansen

12.nbsp;Monospora Metschnikoff

13.nbsp;Nematospora Peglion.

Familie Endomycetaceae
Gattungen:

1.nbsp;Eremascus Eidam i)

2.nbsp;Endomyces Reess.

Eine nähere Betrachtung dieses Systems, welches auch in der Ameri-
kanischen Bearbeitung des GuiLLiERMONDschen Buches (Guilliermond,
Tanner 1920) praktisch ungeändert beibehalten worden ist, veranlasst uns
zu den folgenden Bemerkungen. An erster Stelle erscheint es mit Hinsicht
auf die von Guilliermond selber gegebene Phylogenie der Hefen einen
Rückschritt, dass die von KlÖCKER (1906) aufgestellte Familie der Schizo-
saccharomycetaceae aufgegeben worden ist und die durch Vermehrung
durch Oidien scharf charakterisierte Gattung Schizosaccharomyces wieder
in die Famihe der Saccharomycetaceae untergebracht ist. Ausserdem fehlt
im GuiLLiERMONDschen System die ein Jahr zuvor aufgestellte Gattung
Nadsonia Sydow, damals noch bekannt als Guilliermondia Nadson et
Konokotine.

Die nächste allgemeine Bearbeitung der Hefen stammt von KlÖCKER
(1924).

Im grossen und ganzen ist das GuiLLlERMONDsche System ungeändert
gelassen. Klöcker zerlegt jedoch die Familie der Saccharomycetaceae in
zwei Hauptgruppen nämlich Saccharomycetes und Schizosaccharomycetes.
Der letzte Tribus umfasst nur die Gattung Schizosaccharomyces, der erstge-

\') E. Eidam, Beitr. z. Biologie der Pflanzen, herausgegeben von F. Cohn, Bd. 3, p. 385
(1883). Vollständigkeitshalber wird hier diese Gattung auch erwähnt, obgleich guilliermond
dieselbe in dem systematischen Teile seines Buches ausser Betracht lässt.

nannte alle übrigen Gattungen GuilliermonDs mit Inbegriff von Nadsonia
Sydow. Weiter ist noch Atichia Flotow unter den zweifelhaften Gattungen
erwähnt.

In die Famihe der Endomycetaceae ist wiederum Ecemascus ausser
Betracht gelassen und weiter ist neben der Gattung Endomyces Reess, die
Gattung Sacchatomycopsis Schiönning gestellt.

Obgleich die Absicht KlÖCKERs, einerseits die enge Verwandtschaft
zwischen Saccharomycopsis capsularis Schiönning und verschiedenen
Endomyces-avten zu betonen, andrerseits eine Zerlegung der Gattung
Endomyces Reess vorzunehmen, sehr zu begrüssen ist, ist es doch zweifel-
haft, ob die von KlÖCKER vorgenommene Abänderung in systematischer
Hinsicht zulässig ist. (Vergl. Kap. IV bei Saccharomycopsis und
Endomyces.)

Schliesshch ist nun vor einigen Jahren von Zenderi) der Versuch
gemacht worden die Systematik der sporogenen Hefearten und der
Endomycetaceae wesentlich neu zu begründen. Bevor dazu überzugehen die
Überlegungen Zenders einer Besprechung zu unterwerfen, sei hier das
Ergebnis, wozu dieser Forscher gelangt, in übersichtlicher Form wieder-
gegeben.

Protoasceae.

I. Untergruppe Ascoidineae.

1.nbsp;Fam. Ascoideae.

a. Ascoidea Brefeld.

2.nbsp;Fam. Endomycetaceae.

a.nbsp;Endomyces (Reess) Zender emend. .

b.nbsp;Williopsis Zender nov. gen.

c.nbsp;Schwanniomyces (Klöcker) Zender emend.

3.nbsp;Fam. Pichiaceae.

a. Pichia Hansen.

4.nbsp;Fam. Eremasceae.

a.nbsp;Eremascus Eidam.

b.nbsp;Magnusiomyces Zender nov. gen.

II. Untergruppe Saccharomycetineae.

1.nbsp;Fam. Schizosaccharomycetaceae.

a. Schizosaccharomyces Lindner.

2.nbsp;Fam. Saccharomycetaceae.

a.nbsp;Saccharomyces (Meyen) Reess.

b.nbsp;Zygosaccharomyces Barker.

c.nbsp;Torulaspora Lindner.

d.nbsp;Debaryomyces Klöcker.

e.nbsp;Saccharomycodes Hansen.

f.nbsp;Nadsonia Sydow.

g.nbsp;Saccharomycopsis Schiönning.

\') J. Zender, Bull. Soc. Botan. de Genève, Vol. 17. p. 272 (1925).

III. Untergruppe Non-Saccharomycetaceae.

a.nbsp;Monosporella (Metschnikoff) Keihn.

b.nbsp;Nematospora Peghon.

Die erste Veranlassung für die von Zender vorgenommene Umbildung
des Systems ist die Überlegung, dass eine scharfe Trennung der beiden
Famihen Saccharomycetaceae und Endomycetaceae, auf Grund des Vor-
kommens einer Myzelbildung bei der letzten Famihe, nicht durchführbar
ist. Zender weist darauf hin, dass auch bei verschiedenen Vertretern der
Gattungen Saccharomyces, Willia und Pichia typische Myzelbildung
beobachtet worden ist.

Ausserdem betont er die grosse Abhängigkeit der Myzelausbildung von
der Zusammensetzung der Nährmedien. Mit Hinsicht hierauf erscheint das
Merkmal der Myzelbildung tatsächhch wenig geeignet um ausschlaggebend
zu sein für die Trennung so hoher systematischer Einheiten wie Famihen
das sind.

An zweiter Stelle beanstandet Zender die grosse Bedeutung, welche vor
allem von guilliermond auf die Sexuahtät als Gattungsmerkmal gelegt
wird. Die Erfahrung hat doch gelehrt, dass der Parthenogenesis auch bei
den Arten, wobei Kopulation vor der Ascusbildung ausser Zweifel gesetzt
ist, durchaus nicht selten ist und dass umgekehrt Arten, welche während
Jahrzehnten als parthenogenetisch bekannt gewesen sind, unter Umständen
auch Kopulationserscheinungen aufweisen.

Demgegenüber betont Zender, dass von den früheren Autoren mit
Unrecht das Merkmal der Sporenform für die Systematik vernachlässtjTt
worden ist. Die Sporenform doch ist in vielen Fällen durchaus typisch und
gehört ausserdem zweifellos zu den konstantesten Merkmalen einer Hefe-
art. Zender bemerkt in diesem Zusammenhange u.m., dass jeder der die
typischen hutförmigen Sporen vieler Willia- und Endomyces-avten. be-
trachtet, dann auch nicht umhin können wird zU einer engen Verwandt-
schaft zwischen diesen Organismen zu schliessen.

Während man Zender auch in dieser Hinsicht beistimmen kann, so
muss doch andrerseits bemerkt werden, dass dies noch keine Berechtigung
gibt, um nun auch die ganze Gattung Willia in die Gattung Endomyces
aufzulösen. Es sind doch zweifellos andere Merkmale aufzuweisen, welche
in den weitaus meisten Fällen ermöglichen eine Trennung zwischen den
beiden Gattungen vorzunehmen.

Das Gleiche gilt für die von Zender ebenfalls auf Grund der Sporen-
form vorgenommene Einreihung von Endomyces javanensis Klöcker in die
Gattung Schwanniomyces und die provisorische Einteilung von Endomyces
capsularis (Schiönning) Guilliermond in die neu aufgestellte Gattung
Williopsis {Williopsis saturnus — Willia saturnus Klöcker).

Was die weitere Einteilung des ZENDERschen Systems anbelangt, sei
darauf hingewiesen, dass die Verteilung der sechs aufgestellten Famihen

über die Untergruppen der Äscoidineae und Saccharomycetineae ziemlich
willkürlich erscheint. Dies gilt ebenso für die Abgrenzung der Famihe der
Pichiaceae von der Familie der Endomycetaceae.

\'L^amp;t gibt Zender an, dass zwischen den beiden Untergruppen der
Äscoidineae und der Saccharomycetineae auch in physiologischer Hinsicht
Unterschiede vorhegen. Während die Vertreter der letzten Untergruppe
eine Alkohohsche Gärung der Dextrose hervorrufen, sollte das bei den
meisten Vertretern der ersten Untergruppe nicht der Fall sein. Zender
verbindet hieran jedoch die folgende Aussprache : ,,c\'est à dire que la
quantité d\'alcohol que ces champignons produisent en décomposant un sucre
donné, ne constitue pas, comme tel est le cas pour la plupart des Saccharo-
my cetinées le produit final de la décomposition du sucre, mais seulement une
étape dans la formation d\'éthers organiques tels que l\'éther acétique, l\'éther
propionique, l\'éther butyrique etc.quot;.

Es ist einleuchtend, dass diese letzte Hinzufügung das Merkmal der
Abwesenheit des Vermögens zur Hervorrufung alkoholischer Gärung ganz
hinfällig macht. Die Vorstellung, dass der gebildete Alkohol bei den
genannten Organismen nur Zwischenprodukt für die Esterbildung sei,
entspricht keineswegs den tatsächhchen Verhältnissen. Auch bei den stärkst
esterproduzierenden Hefearten wird immer nur ein geringer Teil des gebil-
deten Alkohols in Ester übergeführt. Wenn Zender dann auch bemerkt,
dass die Produktion von Essigsäure und die darauf anschliessende Produk-
tion von Estern ein Unterscheidungsmerkmal zwischen den Saccharomy-
cetineae und den Äscoidineae bilden, so muss darauf hingewiesen werden,
dass für sehr viele Vertreter der letzten Untergruppe eine derartige Ester-
produktion durchaus nicht festgestellt werden kann. Während im Allge-
meinen bei den Vertretern der ersten Untergruppe in Gegensatz zu denen
der zweiten Untergruppe die Atmung gegenüber der Gärung vorherrscht,
darf andererseits nicht ausser Betracht gelassen werden, dass verschiedenen
Vertretern der Saccharomycetineae, wie z.B. den meisten Debaryomyces-
arten, das Vermögen zur Hervorrufung der alkoholischen Gärung praktisch
vollständig abgeht.

Aus dem Obenstehenden geht hervor, dass allen bis auf jetzt gegebenen
Einteilungen der sporogenen Hefen noch überaus viele Unvollkommen-
heiten anhaften.

Bevor zu der Formuherung der eigenen Ansichten über die meist ratio-
nelle Einteilung der sporogenen Hefearten übergegangen wird, erscheint
es durchaus angebracht zuerst eine nähere Untersuchung der Eigenschaften
der verschiedenen Hefearten vorzunehmen.

In Kapitel IV wird nun über die systematisch durchgeführte Untersu-
chung der einzelnen vorhandenen Hefearten berichtet werden.

Die Behandlung dieser Hefearten geschah gattungsgeweise. Am Schlüsse
der Beschreibung einer jeden Gattung ist nun die systematische Bedeutung

der erhaltenen Resultate betrachtet worden, jedoch nur in soweit als dies
die Gehörigkeit der untersuchten Arten zu der betreffenden Gattung oder
zu anderen — eventuell neu zu begründenen — Gattungen anbelangt.

In Kapitel V wird dann noch eine kurz gedrängte Übersicht dieser
Ergebnisse gegeben und ein Versuch gemacht die einzelnen Gattungen zu
höheren systematischen Einheiten zu gruppieren.

KAPITEL III.

Einführung zu den angestellten Untersuchungen.

§ 1. umgrenzung und einteilung.

Wie schon in der Einleitung bemerkt wurde, bezwecken die vorliegenden
Untersuchungen an erster Stelle eine Kontrolle der zahlreichen in der
Sammlung des ,,Centraalbureau voor Schimmelculturesquot; vorhandenen
sporogenen Hefearten.

Zur Untersuchung gelangten also alle Hefekulturen, welche von den be-
treffenden Einsendern in Ascomi/cefes-Gattungen eingeteilt wurden. Wie
sich aber bald herausstellte, war ein grosser Teil dieser Arten nicht mehr
zur Sporenbildung zu veranlassen. Es wäre nun in theoretischer Hinsicht
konsequent gewesen diese Arten nicht aufzunehmen oder dieselbe nur als
zweifelhafte Species zu deuten. Es handelte sich jedoch hierbei fast immer
um Arten, welche während längerer Zeit im Laboratorium fortgezüchtet
waren, und die verschiedensten Autoren sind darüber einig, dass dies oft
ein Verlust an Sporenbildungsvermögen zufolge hat. Deshalb wurden diese
Arten in ihrer systematischen Stellung beibehalten, für soweit das ursprüng-
lich vorhandene Sporenbildungsvermögen in der betreffenden Original-
abhandlung ausdrücklich festgelegt worden war und die sonstigen Eigen-
schaften die Identität mit der beschriebenen Art gewährleisteten.

Der Vollständigkeit wegen sind diejenigen richtig umgrenzten Arten,
welche in der Sammlung nicht vertreten sind, ebenfalls kurz erwähnt worden.

Im nächsten Kapitel sind nun vorläufig die verschiedenen Arten nach
der von den Einsendern gegebenen Einteilung gattungsgeweise behandelt,
worden. Und zwar ist dies in der Weise geschehen, dass die verschiedenen
Gattungen in chronologischer Reihenfolge besprochen worden sind,
während innerhalb einer Gattung die Arten einander ebenfalls in chrono-
logischer Reihe folgen.

§ 2. ausgewählte merkmale und methoden.

In Kapitel I ist eine kritische Übersicht gegeben worden der bis jetzt in
der Hefesystematik angewandten Merkmale und der zur Feststellung der-
selben benützten Methodik.

Hierunter wird jetzt kurz zusammengefasst werden, welche Merkmale
und Methoden von uns angewandt worden sind.

a. Die morphologischen Merkmale.

10. Die Form der Zellen.

Um eine Vergleichung mit den Angaben der Mehrzahl der früheren
Autoren zu ermöglichen, schien es angebracht die Zellform in Würzekultur
festzulegen. Dabei wurde immer ungehopfte Würze benützt, welche in
folgender Weise hergestellt worden war.

1 KG. Malzmehl (getrocknete Langmalz) wärd mit 2.6 Liter Leitungs-
wasser innig vermischt und die Mischung hierauf während drei Stunden
unter Umrühren in einem Wasserbade auf 45° C. gehalten. Dann wird die
Temperatur auf 60° C. gesteigert und die Maische während einer Stunde
bei dieser Temperatur gehalten. Hiernach wird durch eine Haarsieb abfil-
triert und das Filtrat in» einem Autoklave bei 120° C. (15 Minuten)
sterilisiert. Zuletzt wird die erhaltene Würze auf 15° Big. gebracht, aber-
mals filtriert und sterilisiert. Von dieser Würze wurden dan je 30 cm^ in
sterilisierte Kölbchen von 100 cmS Inhalt gebracht und hierauf die
Kölbchen einer letzten Sterilisation im Autoklave unterworfen. Dann
wurde mit einer jungen Würzeagarkultur geimpft.

Die Beobachtung geschah immer wenn die Kultur 24 Stunden und
nachher wenn sie 3 Tage bei 25° C. bebrütet worden war. Dann wurde die
Kultur bei Zimmertemperatur gestellt und noch eine Beobachtung nach
längerer Zeit gemacht.

Hierneben wurde die Form der Zellen bei jungen Würzeagarplatten-
kulturen festgestellt.

Für die Bereitung von Würzeagar wurde auf 10° Big. verdünnte Würze
verwendet, welcher dann 2 % Agar hinzugefügt wurde.

20. Die vegetative Vermehrungsweise der Zellen.

Diese Eigenschaft ergab sich ohne weiteres aus der Beobachtung der
jungen Würzekulturen.

30. Die Art iind Weise der Sporenbildung.

Wie schon ausführhch auseinandergesetzt worden ist, ist es zur Fest-
stellung des Vermögens zur Sporenbildung durchaus notwendig die ver-
schiedensten Methoden nebeneinander anzuwenden.

Fast immer wurde mit der Kultur auf Gipsblöckchen angefangen. Falls
Erfolg ausblieb, wurde die Kultur auf Gorodkowa-agar, auf Kartoffelkeilen
und auf Mohrrübenscheiben versucht ; wenn auch hier das Ergebnis
negativ war, wurden spezielle Massnahmen getroffen. Als solche sind zu
erwähnen : die Kultur auf Gipsblöckchen, welche anstatt mit Wasser mit
Würze oder mit Mannit-Dikaliumphosphatlösung 1) durchfeuchtet waren
In besonderen Fällen wurden noch andere Methoden versucht, so z.B.
die Kultur auf ,,Gélose farhydrequot; nach kufferath und auf ausgewasche-
nem Agar nach Beijerinck.

•) Diese Lösung wurde erhalten durch Vermischung von 18 cc. 2\'\'/o-iger Mannit- und
2 cc. SO/fl iger Dikaliumphosphatlösung.

Die schon erwähnten Untersuchungen Stevens veranlassten uns ge-
legenthch zu einer Prüfung des Einflusses des ultravioletten Lichtes, wozu
die Kultur auf Gorodkowa-agar, 5, 10 und 15 Minuten der Bestrahlung
mit der Quecksilberlampe ausgesetzt wurden.

Schhesslich wurde für verschiedene Hefearten die Kultur auf Rosinen
und Rosinenagar und für die Debaryomyces-aiten die Kultur auf sterilisier-
ter frischer Wurst versucht. Insbesondere für die Endomyces-arten wurde
öfters mit gutem Erfolge die von Lindner empfohlene Methode, nach
welcher junge in Würze kultivierte Myzelflöckchen in sterilisiertes Wasser
übergebracht werden, angewandt.

Durch sorgfältiges mikroskopisches Studium der an einem dieser Ver-
fahren unterworfenen Hefezellen wurde versucht eine Einsicht zu bekom-
men in die Frage, ob die Sporulation wohl oder nicht von Kopulationserschei-
nungen begleitet worden war.

40. Die Form der Ascosporen.

Die Feststellung dieses Merkmals braucht wohl keine weitere Erläute-
rung.

50. Das makroskopische Bild der Hefekolonien.

Wie im Kapitel I bemerkt wurde, erscheint es nützhch das Aussehen
der gewöhnlichen Schrägagarkulturen in einer Beschreibung festzulegen.
Am charakteristischten sind in dieser Hinsicht die älteren Kulturen, d.h. die
Kulturen welche 2 bis 3 Monaten bei Zimmertemperatur aufbewahrt
worden sind. Um eine typische Entwicklung der Kultur zu gewährleisten
ist es wichtig, dass die Impfung auf einen geraden Strich entlang dei
Mediane der Agaroberfläche beschränkt wird.

Für Vergleichzwecke wurden auch Riesenkolonien auf Würzegelatine
gezüchtet. Dieser Nährboden wurde aus auf 10° Big. verdünnter Würze
unter Zugabe von 12 % Gelatine hergestellt.

Für die Herstellung der Riesenkolonien wurde mit der Spitze eines
Platindrahts möglichst wenige Zellen geimpft auf den Zentrum einer
kleinen Würzegelatineplatte. Mehrere dieser kleinen Petrischalen wurden
um Austrocknung vorzubeugen in eine gut schliessende Glasdose gestellt.
Das Ergebnis wurde dann nach 6 bis 8 Wochen beurteilt.

b. Die physiologischen Merkmale.

1°. Das Gärvermögen.

Benützt wurde die Untersuchungsmethode in Gärungskölbchen nach
Einhorn. Wenn das Ergebnis nach zwei oder drei Tagen negativ war.
wurde immer die vorhandene Hefemasse durch Umschütteln gleichmässig
in die Flüssigkeit verteilt, damit auch ein grösserer Teil der Zellen in das
geschlossene Bein geräte. Die Beobachtung der Gasbildung wurde dann
nach einiger Zeit wiederholt. Wenn nur auf dieser Weise ein positives
Ergebnis erhalten wurde, ist dies an der betreffenden Stelle durch :
-f- n. U. (,,nach Umschüttelnquot;) angegeben.

In zweifelhaften Fällen, d.h. wenn die Ergebnisse nicht mit denen

des betreffenden Autors übereinstimmten, wurde auch die Methode mit
dem quantitativen Apparate nach van Iterson-Kluvver herangezogen. In
diesem Falle sind die mit der letzten Methode erhaltenen Ergebnisse geson-
dert aufgenommen und mit einer Q vorgemerkt.

Nur in chemischer Hinsicht scharf charakterisierte Kohlenhydrate
gelangen zur Untersuchung. Neben Dextrose wurden Laevulose, Mannose.
Galaktose, Saccharose, Maltose und Laktose auf ihre Gärfähigkeit geprüft.
Immer wurde mit zweiprozentigen Lösungen in Hefedekokt gearbeitet. Das
Hefedekokt wurde wie folgt hergestellt:

200 Gramm Presshefe wird mit 1 Liter Leitungswasser und ein wenig
Eieralbumin gemischt und in einem Autoklave während 10 Minuten auf
120° C. erhitzt. Dann wird heiss filtriert und nach dem Erkälten abermals
filtriert. Die erhaltene klare Lösung wird dann einer endgültigen Sterili-
sation im Autoklave unterworfen.

Wo nötig — insbesondere zur Unterscheidung der Ober- und Unter-
hefen — wurde im quantitativen Gärungsapparate festgestellt, ob Raffi-
nose vollständig oder nur für ein Drittel vergoren wurde. In diesem Falle
wurde eine vierprozentige Lösung von Raffinose in Hefedekokt verwendet.

20. Hautbildung.

Die eventuelle Bildung einer Haut — wie wir in Kapitel I sahen ein
wichtiges Symptom für das Sauerstoffbedürfnis einer Hefeart — wurde
in derselben Würzekultur, welche für das Studium der Zellformen benützt
wurde, nachgegangen. In wie weit Hautbildung bzw. Ringbildung einge-
treten war, wurde auf die unter „Die Form der Zellenquot; erwähnten Zeit-
punkte Kontrolliert.

30. Die Tauglichkeit von Aethylalkohol als
Wachstum ssubstrat.

Das Vermögen einer Hefeart Aethylalkohol als einziges organisches
Wachstumssubstrat zu benützen, wurde geprüft durch Impfung einer
synthetischen Nährlösung folgender Zusammensetzung :

3 % Aethylalkohol, 0.1 % Ammonsulfat, 0.1 % Monokaliumphosphat.
0.05 % Magnesiumsulfat in Leitungswasser.

Für die Untersuchung wurden je 20 cm^ der Nährlösung in Kölbchen
von 50 cm3 Inhalt im Autoklave sterilisiert; das Resultat wurde nach
einer Bebrutung während vier bis sechs Tagen bei 25° C. festgestellt.

40. Die Verwendbarkeit der Nitrate als Stick-
stoffquelle.

Die Verwendbarkeit der Nitrate als Stickstoffquelle wurde durch kulti-
vieren der Hefen auf einem Nährboden folgender Zusammensetzung ge-
prüft : 2 % Dextrose, 0.1 % Kaliumnitrat, 0.1 % Monokahumphosphat.
0.05 % Magnesiulmsulfat und 2 % ausgewaschener Agar in destilliertem
Wasser.

Hierneben wurden immer Kontrollversuche angestellt auf einem Nähr-

boden von derselben Zusammensetzung, jedoch ohne Kaliumnitrat. Ein
schwaches Wachstum traf auch fast immer auf diesen Nährböden ein. Die
Nitratassimilation wurde nur dann als positiv gedeutet, wenn ein erhebhcher
Unterschied in Wachstum auf den beiden Platten festzustellen war.

50. Die Gelatineverflüssigung.

Die Gelatineverflüssigung wurde festgestellt bei der für die Riesen-
kolonien angestellten Kultur auf Würzegelatine.

60. Die Aeskulin-Spaltung.

Für die Arten der Gattung Pichia und Hansenula wurde ausserdem das
Vermögen zur Spaltung des Aeskulins untersucht. Diese Eigenschaft lässt
sich leicht feststellen, wenn man die betreffende Art kultiviert auf einer
Platte von Hefewasseragar mit 0,5 % Aeskulin und einigen Tropfen Eisen-
ammoniumcitratlösung.

Wenn das Glucosid gespalten wird, verrät sich dies durch die Bildung
eines schwarz-braunen Feldes rings um die Kolonien herum. Das Spaltungs-
produkt Aeskuletin gibt nämlich mit dem zugefügten Eisensalze eine
schwarzbraune Verfärbung.

§ 3. praktische bemerkungen bezüglich der wiedergabe
der ergebnisse.

Bezüghch der Wiedergabe der Ergebnisse sei hier das Folgende bemerkt.

Bei jeder Gattung wird an erster Stelle die Diagnose gegeben, wie die
von dem Autor, welcher die Gattung aufgestellt hat, veröffentlicht worden
ist. Eventuell sind die Synonymen der Gattung angeführt worden mit dem
Texte der ursprünglichen Umgrenzung. Schliesshch ist dann auch die
Umgrenzung der Gattung aufgenommen, wie diese von GuiLLlERMOND in
seiner rezentesten Zusammenfassung : Clef dichotomique pour la déter-
mination des levures (1928) gegeben worden ist.

Dann folgt eine alphabetisch geordnete Angabe der in der Sammlung
vertretenen und untersuchten Arten, sowie ein Verzeichnis der sonstigen
in „Guilliermond-Tanner, The Yeasts (1920)quot; angeführten, anscheinend
richtigen Arten. Hierbei ist die im letztgenannten Buche angegebene Lite-
ratur erwähnt.

Die untersuchten Arten werden nun weiter in chronologischer Folge
behandelt.

Bei jeder Art sind die Synonyme und die eventuellen Vulgärnamen, die
ursprüngliche Literatur, und bisweilen auch sonstige, für die Kenntnis der
Art wichtige, Abhandlungen angegeben worden. Dann folgen Angaben
über die Herkunft der untersuchten Kultur für so weit bekannt. In den
Fällen, worin die Gewissheit vorlag, dass die untersuchte Kultur authentisch
war, d.h. von derselben Kultur stammte, welche der Autor für die Beschrei-
bung der Art benützt hatte, wurde die betreffende Art mittels des

Verhand. Kon. kad. v. Wetcnsch. (2e Scctie) DI. XXVIII.nbsp;A 3

Zeichens * vorgemerkt. Die Ergebnisse der angestellten Untersuchungen
wurden immer in der selben Folge wiedergegeben und zwar in der
Weise, dass immer an der linken Seite über die diesbezüglichen Angaben
des Autors, insofern diese vorhanden sind, an der rechten Seite über
die eigenen Ergebnisse berichtet worden ist. Hierbei wurden bei allen
Arten Textfiguren aufgenommen, welche sich beziehen auf die Zellgestalt
in 24 Stunden alten Würzekulturen; wenn es dazu Veranlassung gab,
wurden auch Figuren von Zellformen aus älteren Kulturen gegeben. Für
jede Gattung sind ausserdem wenigstens bei einer Art die Sporen- und die
Ascusform bildlich wiedergegeben.

Alle Zeichnungen sind mit einem Zeichenapparate nach Abbe herge-
stellt ; die Vergrösserung der Abbildungen ist in allen Fällen tausendfach.

Falls die erhaltenen Ergebnisse keinerlei Veranlassung gaben die Iden-
tität der untersuchten Kultur und der ursprünglich beschriebenen Art anzu-
zweifeln, wird schhesslich eine, eventuell vervolkommnete, Artdiagnose
aufgestellt.

In bestimmten Fällen lag kein genügender Grund vor die Abtrennung
der Art von einer vorher beschriebenen Art zu übernehmen. Dann wurde
die betreffende Art entweder in die erste Art aufgelöst, oder als Varietät
oder Rasse derselben angereiht.

Für die Wahl dieser Untereinteilung waren die folgenden Überlegungen
massgebend:

Der Begriff subspecies wird heutzutage in der Botanik möglichst wenig
mehr gebraucht. In der Literatur über Hefen wird die Unterart häufig dazu
angewandt um eine bestimmte geographische Herkunft anzugeben. Dieses
ist in botanischer Hinsicht nicht richtig : quot;man sollte diese heber als Lokal-
rassen bezeichnen.

Sobald deutliche morphologische oder physiologische Unterschiede mit
der Hauptart auftraten, wurde daher die Kukur als Varietät bezeichnet.

Als Rassen wurden diejenigen Hefen bezeichnet, die mehr oder weniger
physiologisch von der Art verschieden sind. Deuthche morphologische
Unterschiede lagen in diesem Falle nicht vor.

Als Rassen haben wir auch bezeichnet, diejenigen Einheiten, die in der
Hefekunde als Typus angegeben werden. In der Botanik wird Typus nicht
mehr als genetischer Begriff anerkannt, sondern nur gebraucht für
bestimmtes Material, das für eine Beschreibung verwendet worden ist.

Ein starres Schema für die Einteilung der Arten ist überhaupt nicht zu
geben; die aufgestellten Einheiten gehen häufig graduell in einander über.

Nachdem die verschiedenen Arten der Gattung beschrieben worden sind,
werden in der Schlussfolgerung noch die erhaltenen Resultate zusammen-
gefasst. Hierbei werden dann eventuell die Gründe zur Aufstellung einer
neuen Gattung neben der ursprünghchen, oder zur Unterverteilung einer
Gattung in Untergattungen, u.s.w. näher auseinandergesetzt.

Am Ende wird dann noch eine neue, bezw. vervollkommnete, Diagnose
der Gattung gegeben.

Schliesslich folgt hier die Erklärung bezw. Zusammenfassung der Abkür-
zungen, wie diese im Texte öfters gebraucht worden sind.

„C. B. S.quot;nbsp;= „Centraal Bureau voor Schimmelcul-

turesquot; zu Baarn.

Centr. Lab. S. M. R.nbsp;= „The Central Laboratory of the South

Manchuria Railway Coquot; Dairen (Man-
churia ).

Nat. Coll. Type Cult.nbsp;= The National Collection of Type Cul-

tures, maintained at the Lister Institute
of Preventive Medicine, London.

Klöcker (1924)nbsp;=A. Klöcker, Die Gärungsorganismen.

Berhn-Wien, 1924.

Guilliermond (1912)nbsp;=A. Guilliermond, Les Levures, Paris,

1912.

Guilliermgnd-Tanner (1920) =A. Guilliermond and P. W. Tanner.

The Yeasts, New York—London, 1920.

Guilliermond (1928)nbsp;=A. Guilliermond, Clef dichotomique

pour la détermination des Levures
Paris, 1928.

Dextrose (L. M.)nbsp;= Dextrose, Laevulose, Mannose.

♦ vor den Artnamen deutet eine authentische Kultur an.

Die in Klammern gestellten Zahlen hinter der Angabe der Farbe der

Strichkultur korrespondieren mit denjenigen der Farbenskala in: P.

Klincksieck et Th. Valette, Code des Couleurs, Paris, 1908.

In der Tabelle bezüglich der Gärverhältnisse bedeutet:

n. u., dass der Autor die Vergärbarkeit der betreffenden Zuckerart

nicht untersucht hat.
n. U., dass das positive Ergebnis des Gärversuches im Einhornkölbchen
erst nach Umschütteln erhalten wurde.

Q, dass das Ergebnis eines Gärversuches auch mit dem quantita-
tiven Apparate nach van Iterson-Kluyver erhalten wurde.

VsTeil (bei der Angabe der Raffinosevergärung), dass die Raffinose
im quantitativen Apparate nur für 1/3 Teil vergoren wurde,
sodass offenbar die Melibiose nicht angegriffen wurde.

-f ganz (bei der Angabe der Raffinosevergärung), dass die Raffinose
im quantitativen Apparate vollständig vergoren wurde, sodass
offenbar auch die Melibiose angegriffen wurde.

a3«

KAPITEL IV.

Systematische Behandlung der einzelnen Hefegattungen und Arten.

§ L SACCHAROMYCES (MEYEN) REESS.

Einführung des Gattungsnamens durch Meyen [Wiegmanns Archiv.
IVJahrg., Bd. ILp. 100 (1837)] : \'

Runde, meistens aber ovale Zellen, gelbweiss, einzeln oder in Sprossver-
bänden von 2 bis 8 Zellen. Quer auf diesen Reihen stehen wieder neue
Reihen, so dass das ganze ein kleines Pflänzchen darstellt. Die einzelnen
Glieder können sich lösen und auf sich selbst weiter wachsen. Dies ist die
Zuckerhefe : Saccharomyces cerevisiae ^).

Umgrenzung der Gattung nach Reess (Unters, u. d. Alkoholgärungs-
pilze; Leipzig, 1870. p. 80) :

Einfache Ascomyceten ohne eigenthches Myzel. Die Zellen entstehen
durch Sprossung, und sprossen selbst auch wieder. Die so entstandenen
Knospen lösen sich von der Mutterzelle nach kurzer oder längerer Zeit und
vermehren sich dann selbstständig. Ein Teil dieser Zellen entwickelt sich
zum Ascus, welcher 1 bis 4 einzelhge Sporen bildet. Die keimenden Sporen
wachsen wieder wie die vegetativen Zellen weiter.

Umgrenzung der Gattung nach GUILLIERMOND (1928) :

Hefen, welche in Würze einen Bodensatz bilden und bisweilen (oft erst
nach 2—8 Monaten) einfen Ring oder eine schleimige Haut. Sie verfügen
meistens über kräftiges Gärvermögen. Riesenkolonie gewöhnlich glänzend
und feucht. Der Ascuswand öffnet sich erst bei der Keimung der Sporen.
Die Zahl der Sporen ist sehr wechselnd ; die Sporen keimen durch Spros-
sung, bisweilen kopulieren die Sporen vor der Keimung. Die Zellen sind
von verschiedener Gestalt, eiförmig, oval oder rund, elhptisch oder lang.

In der Sammlung sind vertreten:

1.nbsp;Saccharomyces anamensis Will et Heinrich.

2.nbsp;,,nbsp;annulatus Negroni.

3.nbsp;„nbsp;Awamori Inui.

4.nbsp;,.nbsp;batatae Saito.

1) Diese Umschreibung stammt eigentlich von schwann, aber Meyen ist der Erste,
welcher den Namen Saccharomyces einführt. Vergl.: Th. schwann, Poggendorffs Ann.
Bd. 41, p. 184 (1837).

Saccharomyces Bayanus Saccardo.

carlshergensis Hansen.
cartilaginosus Lindner.
cavernicula Redaelli.
cerevisiae Hansen.
cerevisiae Hansen, Rasse Frohberg,
cerevisiae Hansen, Rasse Saaz.
cerevisiae Hansen, Presshefe a Delft.
cerevisiae Hansen, Presshefe b Delft.
cerevisiae Hansen, Rasse II.
cerevisiae Hansen. Rasse XII.
cerevisiae subsp. orsati Steiner.
cerevisiae subsp. vetrozensis Steiner.
Chevalieri Guilliermond.
Chodati Steiner.
dairensis Naganishi.
disporus Beijerinck.
ellipsoïdeus Hansen.

ellipsoideus Hansen, Rasse Champagne Cramant,
ellipsoïdeus Hansen, Rasse Johannisberg I.
ellipsoïdeus Hansen, Rasse Johannisberg IL
ellipsoïdeus subsp. alpestris Steiner.
ellipsoideus var. alpinus Steiner.
ellipsoïdeus subsp. [ulliensis var. t y pica Steiner.
ellipsoideus subsp. montibensis Steiner.
ellipsoideus subsp. thermophilus Steiner.
exiguus (Reess) Hansen.
festinans Ward et Baker.
[ragilis Jörgensen.
globosus Osterwalder.
Hansenii Zopi,
heterogenicus Osterwalder.
hutensis Kufferath.
intermedius Hansen.
intermedius var. valdensis Osterwalder.
Lindneri Guilliermond.
Logos Van Laer et Denamur.
mandshuricus Saito.

mandshuricus Forma I. II und III Saito.
Mangini Guilliermond.
Marchalianus Kufferath.
Marxianus Hansen.
microellipsodes Osterwalder.
monacensis Hansen.
mongolicus Naganishi.

Miintzii (Kayser) Naganishi.

neoformans Sanfelice.

Odessa Schnegg et Oehlkers.

oviformis Osterwalder.

Pastorianus Hansen.

Pastorianus subsp. arbignensis Steiner.

pulmonalis Redaelli.

saké Yabe.

spec. (Plimmer).

tetrasporus Beijerinck.

thermantitonum Johnson.

torulosus Osterwalder.

tubiformis Osterwalder.

turbidans Hansen.

unisporus Jörgensen.

uvarum Beijerinck.

valesiacus Osterwalder.

validus Hansen.

Vordermannii Went et Prinsen-Geerhgs.
Willianus Saccardo.

Weiter sind noch beschrieben worden :

71.nbsp;Saccharomyces minor Engel.

Lit.: L. Engel, Les ferments alcooliques. Thèse, Paris, 1872.

72.nbsp;Saccharomyces conglomeratus Reess.

Lit.: M. Reess, Sitzungsber. d. physik. med. Soz. Erlangen; Bot. Zeit. (1878).

73.nbsp;Saccharomyces Rouxii Boutroux.

Lit. : L. Boutroux, Bull, de la Soc. Linn, de Normandie, Vol. 7, (1883) ; idem,
Ann. de se. nat. Botan. T. 17, (1884).

74.nbsp;Saccharomyces acidi lactici Grotenfelt.

Lit.: g. gr0tenfei.t, Fortschr. der Med. Bd. 7, (1889).

75.nbsp;Saccharomyces mali Risler Kayser.

Lit.: E. Kayser, Ann. Inst. Pasteur T. 4, p. 321 (1890).

76.nbsp;Saccharomyces mali Duclaux Kayser.

Lit. : s. Sacch. mali Risler.nbsp;*

77.nbsp;Saccharomyces flava lactis Krueger.

Lit.: R. Krueger, Centr. f. Bakt. Bd. 7, p. 464 (1890).

78.nbsp;Saccharomyces ilicis Grönlund.

Lit.: C. Grönlund, Vidensk. Med. fra den naturk. Toren, Kopenhagen (1892).

79.nbsp;Saccharomyces aquifolii Grönlund.
Lit. : s. Sacch. ilicis.

80.nbsp;Saccharomyces Jörgensenii Lasché.

Lit.: A. Lasché, Der Braumeister, Chicago, 1892; idem, Zeitschr. L d. ges.
Brauw. Bd. 15, (1892).

81.nbsp;Saccharomyces anginae Achalme et Troisier.

Lit.: Achalme et Troisier, Archiv, med. Exp. T. 3, (1895).

82.nbsp;Saccharomyces tumefaciens (Curtis) Busse.
Lit.: F. Curtis, Ann. Inst. Past. T. 10, p. 448 (1895).

83.nbsp;Saccharomyces comesii Cavara.

Lit.: F. Cavara, Revue mycolog. 1893; A. guilliermond, Bull. Soc. Myc.
T. 19, (1903).

84.nbsp;Saccharomyces Zopfii Artari.

Lit.: A. Artari, Abh. d. naturf. Ges. zu Halle, Bd. 21, (1897).
W. L. Owen, Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 39, p. 468 (1913).

85.nbsp;Saccharomyces piriformis Marshall Ward.

Lit.: M. WARD, Phil. Trans. Royal Soc. London Vól. 183, (1898).

86.nbsp;Saccharomyces granulatus Vuillemin et Legrain.

Lit.: P. Vuillemin et LeQRAIN, Arch. de Parasit, T. 3, (1900).

87.nbsp;Saccharomyces theobromae Preyer.
Lit. : A. Preyer, Der Tropenpflanzer 1901.

88.nbsp;Saccharomyces Shirokoji Saito.

Lit.: K. SaitO, Bot. Magaz. Tokyo. Vol. 15, (1902).

89.nbsp;Saccharomyces javanicus de Kruyff..

Lit.: E. de Kruyff, Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 21, p. 616 (1908).

90.nbsp;Saccharomyces multisporus Jörgensen.

Lit.: A. JöRGENSEN, Die Mikroorganismen der Gärungsindustrie, 5tc Aufl. Berlin,
1909. p. 366.

91.nbsp;Saccharomyces Tokyo Nakazawa.

Lit.: R. Nakazawa, Centr. L Bakt. Abt. II, Bd. 22, p. 529 (1909).

92.nbsp;Saccharomyces Yedo Nakazawa.
Lit. : s. Sacch. Tokyo.

93.nbsp;Saccharomyces coreanus Saito.

Lit.: K. SAITO, Ccntr. f. Bakt. Abt. H, Bd. 26, p. 369 (1910).

94.nbsp;Saccharomyces lactis Dombrowski.

Lit.: W. Dombrowski, Centr. f. Bakt. Abt. H, Bd. 28, p. 345 (1910).

95.nbsp;Saccharomyces Blanchardii (Blanchard) Guiart.

Lit. : R. Blanchard, E. Schwartz ef J. Binot, Archiv de Parasit. T. 7, (1903),
J. Guiart, Précis de parasitologic. Ballière 1910.

96.nbsp;Saccharomyces taette Olsen-Sopp.

Lit.: O. J. Olsen—sopp, Centr. f. Bakt. Abt. IL Bd. 33, p. 1 (1912).

97.nbsp;Saccharomyces-bruxellensis Lindner.

Lit.: P. Lindner und Genoud, Woch. f. Brau. Bd. 30, p. 363 (1913).

98.nbsp;Saccharomyces Etienne Potron.

Lit.: POTRON, Soc. de Méd. de Nancy (1914).

99.nbsp;Saccharomyces Lemonnieri Sartory et Lasseur.
Lit. : SartoRV et LasseuR, C. R. Soc. biol. 1915.

100.nbsp;Saccharomyces panis [ermentati Henneberg.

Lit.: W. Henneberg, Deutsche Essigind. Bd. 20, (1916).

101.nbsp;Saccharomyces Brassicae fermentatae Henneberg.
Lit. : s. Sacch. panis fermentatae Henneberg.

102.nbsp;Saccharomyces Ferrani de Mello, Paes et Sousa.

Lit. : F. de Mello, a. Paes et L. de Sousa, Arquivos de Higiene et Patologia
exoticas T. 6, p. 51 (1918), réf. in: Bull. Inst. Past. T. 17. p. 634 (1919).

103.nbsp;Saccharomyces labialis Ribeyro.

Lit.: Ribevro. Ann. Fa. med. Lenia (1918).

104.nbsp;Saccharomyces Ribis Ludwig.

Lit. : R. E. Ludwig. Bull. Soc. bot. de Genève, Sér. II, T. 9, p. 431 (1918).

105.nbsp;Saccharomyces Cerasi I u. II Schweizer.

Lit: Ch. Schweizer, Mitt. Lebensmittelunters, u. Hyg. Bd. 12, p. 289 (1921);
idem Ann. Inst. Past. T. 35, p. 820 (1921).

107. Saccharomyces Guilliermondii Schweizer.

Lit. : s. : Sacch. cerasi.

107. Saccharomyces Fischlinii Schweizer.

Lit. : s. : Sacch. cerasi.

Im Untenstehenden werden die vorhandenen Arten in chronologischer
Folge behandelt.

Bevor wir jedoch zu einer Beschreibung der untersuchten Stämme von
Saccharomyces cerevisiae Hansen übergehen, muss hier eine einleitende
Betrachtung vorausgehen, weil von dieser Art und der eng verwandten Art
Saccharomyces ellipsoïdeus Hansen — in welche beide Arten anfänglich
alle Kulturhefen (Bier-, Wein- und Presshefen) untergebracht sind —
später mehrere Arten abgetrennt worden sind. Es ist nun unerlässhch diese
letzten Arten, nämlich Sacch. carlshergensis, Sacch. monacensis und Sacch.
turbidans, in engem Zusammenhange mit den beiden Hauptarten zu
behandeln.

Ein genaues Studium der von HanseN\' gegebenen Merkmale für diese
beiden Hauptarten lehrt nun, dass der Unterschied zwischen diesen beiden
Arten sich fast nur auf die vegetativen Zellformen bei den zwei von ihm
untersuchten Kulturen bezieht.

Bei der als Saccharomyces cerevisiae beschriebene Bieroberhefe waren
die Zellen der Bodensatzhefe gross, rund bis oval, in der Hautvegetation
kamen jedoch eiförmige Zellen mehr auf den Vordergrund ; in den älteren
Kulturen wurden sogar sehr langgestreckte Zellen aufgefunden, oft in
langen Sprossverbänden zusammenhangend. Bei der als Saccharomyces
ellipsoïdeus beschriebenen, von reifen Weintrauben isolierten, Hefekultur
waren die Zellen in der Bodensatzhefe rund, oval, daneben auch wurst-
förmig, in der Haut und in den älteren Kulturen auch eiförmig und lang-
gestreckt, ebenfalls in Sprossverbänden. Wesentliche Unterschiede lassen
sich also hierbei nicht aufweisen.

Hansen gründet die Differenzierung der beiden Arten nun hauptsächhch
auf die Tatsache, dass die nach 15 bis 30 Tagen entstandene Hautvege-
tation von Saccharomyces ellipsoïdeus bei Kultur in gehopfter Würze bei
13—15° C. sich durch lange Sprossverbände von langgestreckten Zellen
auszeichnet, während die Hautvegetation einer gleichartigen Kultur von
Saccharomyces cerevisiae noch überwiegend runde bis ovale, neben wenigen
längeren, schon etwas in Sprossverbänden zusammenhangenden, Zellen
aufweist. Hierzu muss jedoch bemerkt werden, dass Hansen selber angibt,
dass dieser Unterschied sich auf die Dauer völlig ausgleicht.

Ein zweites von Hansen hervorgehobenes Unterscheidungsmerkmal ist
die Differenz in den Temperaturkardinalpunkten für die Sporenbildung
seiner beiden Arten. In Kapitel I wurde schon bemerkt, dass dieses Merkmal
wenig konstant ist und an und für sich sicher keine Arttrennung berechtigt.

Es ist dann auch in wissenschafthcher Hinsicht nicht durchführbar eine
Trennung zwischen beiden Arten aufrecht zu erhaben i).

Da Saccharomyces cerevisiae die ältere Art ist, soll man alle bis jetzt als
Saccharomyces ellipsdideus beschriebenen Stämme in die Art Saccharo-
myces cerevisiae überbringen.

Hierzu ist nun zu bemerken, dass der Begriff Saccharomyces ellipsdideus
allmählich in die Hefekunde eine bestimmte, von Hansens Originalbeschrei-
bung abweichende, Bedeutung erworben hat 2). Mit der Angabe ,,ellip-
soideus-\'artigequot; Zellen wird zur Zeit ausgedruckt, dass die betreffenden
Zellen eine länghch-elhpsoide bis birnförmige Gestalt haben.

Unter diesem Umstände empfiehlt es sich diejenigen Rassen von
S. cerevisiae, welche sich durch ein Vorherrschen dieser Zellgestalt kenn-
zeichnen, weiterhin als 5. cerevisiae var. ellipsdideus zu deuten. Dabei muss
berücksichtigt bleiben, dass es zwischen der Hauptform und der Varietät
viele Uebergänge gibt: nur die ganz typischen Rassen sollen daher in die
Varietät untergebracht werden.

Mit dem Obenstehenden soll jedoch keineswegs gesagt werden, dass
keine für praktische Zwecke bedeutenden Unterschiede zwischen den ver-
schiedenen Rassen anwesend sind. Es ist dann auch vollauf angebracht
diese Unterschiede, insoweit vorhanden, darin zum Ausdruck zu bringen,
dass man die verschiedenen Stämme als Varietäten oder Rassen der Art
Saccharomyces cerevisiae kennzeichnet.

Es scheint jedoch angebracht hier einen Unterschied zu betonen
welcher schon vor längerer Zeit von Bau ^) zwischen verschiedenen Rassen
der Art Saccharomyces cerevisiae aufgedeckt worden ist, aber in systema-
tischer Hinsicht keine Berücksichtigung gefunden hat.

Dieser Unterschied ist das abweichende Verhalten der Melibiose
gegenüber, indem weitaus die meisten obergärigen Rassen diesen Zucker
nicht angreifen, während die untergärigen Rassen denselben meistens gut
vergären. Diese Eigenschaft kommt auch darin zum Ausdruck, dass die
erstgenannten Heferassen das Trisaccharid Raffinose nur für 1/3 Teil ver-
gären, indem sie die neben der Fruktose abgespaltene Melibiose ungeändert
zurücklassen, während die letzteren Heferassen die Raffinose vollständig
vergären.

Von Bau wurde in Uebereinstimmung mit den in Kapitel I gegebenen
Ausführungen festgestellt, dass es sich hierbei um ein durchaus konstantes

Man könnte vielleicht gegen eine Vereinigung der beiden Arten Bedenken tragen,
weil es nun einmal üblich ist, in Übereinstimmung mit dem anfänglichen Vorgehen
Hansens, den Namen S. cerevisiae für die Bier- und Presshefen zu reservieren und die
Weinhefen als S. ellipsoideus anzudeuten. Darum sei darauf hingewiesen, dass steiner
schon mit dieser Sitte gebrochen hat, indem er z. B. eine Weinhefe mit ziemlich runden
Zellen als S. cerevisiae subsp. orsati beschrieben hat. (Siehe dort).

2) Dies findet zweifellos seine Erklärung darin, dass die späteren Forscher sich vor
allem auf HANSENs Abbildungen verlassen, während HANSEN selber angibt, dass in
seinen Zeichnungen die wurstförmigen Zellen unmässig vorherrschen.

•■\') A. BAU,.Woch. f. Brau. Bd. 11, p. 1366 (1894).

Merkmal handelt. Da es auch sonst in der Hefesystematik allgemein üblich
ist, einen Unterschied in der Vergärbarkeit eines Disaccharids als aus-
schlaggebend für die Artdiagnose zu betrachten, so erscheint es rationell
auch hier eine Arttrennung durchzufüren 1).

Angesichts der Tatsache, dass Hansen den Namen Saccharomyces cere-
visiae an eine Oberhefe gegeben hat, erscheint es zweckmässig die unter-
gärigen — d.h. die melibiosevergärenden — Rassen der früheren Arten
Sacch. cerevisiae und Sacch. ellipsotdeus von diesen abzutrennen und in
eine Art zu vereinigen. In diesem Zusammenhange ist nun zu bemerken,
dass auch Hansen später schon eine Aufteilung seiner ursprünglichen Art
Sacch. cerevisiae vorgenommen hat, indem er für die durchaus typische
Unterhefe der Carlsberg-brauerei — welche er anfänglich als ..Carlsberg
Sacch. cerevisiae N^. 1quot; bezeichnete — die neue Art Saccharomyces carls-
bergensis aufstellte. Auf Grund hiervon scheint es durchaus zweckmässig
und berechtigt die obengenannten melibiosevergärenden Rassen in die letzt-
genannte Art unterzubringen.

Diesen Ausführungen gemäss werden unten nun zuerst die best
beschriebenen oder in sonstiger Hinsicht wichtigen Stämme, welche unter
den Artnamen Saccharomyces cerevisiae oder Saccharomyces ellipsotdeus
in der Sammlung vorhanden sind, behandelt, d.h. so viel als möglich ist mit
den Originalbeschreibungen verglichen werden. In engem Zusammenhange
hiermit werden auch die Arten: Saccharomyces carlshergensis. Sacch.
monacensis und Sacch. turbidans beschrieben werden.

Das „C. B. S.quot; hat im Ganzen etwa 40 Stämme, welche zu dieser Arten-
gruppe gehören. Es werden jedoch hier nur einige typischen Vertreter
behandelt werden.

Saccharomyces cerevisiae Hansen 2).

Lit. : E. Chr. Hansen, Compt. rend. trav. lab. Carlsberg T. 2, p. 13 (1883);
ibid., T. 2, p. 106 (1886); diese Abhandlungen auch in: Ges. theor.
Abhandl. ü. Gärungsorg. p. 125 u. 182 (1911).

Hansen isolierte diese Art aus Bieroberhefe einer Brauerei in Edinburgh.
Das „C. B. S.quot; erhielt die unten beschriebene Kultur Februar 1925 von
van WlJK; die Rasse wurde von ihm aus der Bierhefe der „Bierbrouwerij
d\'Oranjeboomquot; zu Rotterdam isoliert.

Die von hansen festgestellte „Mutationquot;, wobei eine Unterhefe sich irreversibel
in Oberhefe umwandelte, beschränkt sich nur auf das Merkmal der vorübergehenden
Anhäufung der Zellen entweder am Boden oder an der Oberfläche der Kultur. Irgend
welche Andeutung, dass eine derartige Umwandlung von einer Änderung des Gärver-
mögens begleitet war, fehlt. Vergl. E. chr. hansen, Centr. f. Bakt. Abt. II, Bd. 15,
p. 353 (1905).

Obgleich der Namen Saccharomyccs cörcvisiae. sowie auch Sacch. ellipsotdeus
und Sacch. Pastorianus, schon von reess (I.e.) benützt worden sind, werden diese
Arten doch allgemein auf hansen zurückgeführt. hansen bemerkt selber dazu (Ges.
theor. Abhandl. ü. Gärungsorg. 1911, p. 157), dass es zweifelhaft ist, ob die von ihm
aufgestellten Arten vollständig mit den genannten, von reess nur unvollständig characte-
risierten, Arten zu identifizieren sind.

Beschreibung nach Hansen.

Wü

Nach 24 Stunden 26° C. in gehopf-
ter Würze Zellen der Bodensatz-
hefe rund oder oval, (5—10,5) X
(5—11) fx, kleine Sprossverbände.
Die nach 7—11 Tagen bei 20—
34° C. entstandene Hautvegetation
zeigt mehr Sprossverbände, oft auch
würstformige und barocke Zellen ;
bei 15—6° C. ähneln die Zellen den-
jenigen der Aussaat; die Haut-
vegetation in alten Kulturen bei
Zimmertemperatur zeigt auch sehr
langgestreckte Zellen, (3—7) X
(5—70) in mehr oder minder ver-
zweigten Kolonien.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
rund bis oval, 6 X (6—10) kleine
Sprossverbände.

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben, mehr Sprossverbände.

Nach 20 Tagen 15° C. im Boden-
satz mehr Sprossverbände.
Nur ein Bodensatz.

W ürzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen oval,
(4—8) X (7—12) /LI, einzeln oder
zu zweien.

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
gelbgrau (128B), weich, matt-
glänzend, etwas punktiert, Rand
zackig.

Riesenkolonie auf W ürzegelatine

Nach 40 Tagen 15° C. eine Rosette
mit in der Mitte ein Knopf, Rand
ein wenig gebuchtet.

Gelatineverflüssigung

Nach 45 Tagen positiv.

Sporenbildung

Leicht auf Gips, optimal bei 30° C.
Minimumtemperatur 9—11° C.,
Maximumtemperatur 37—37,5° C.

Sporen gefunden auf Gips nach 7
Tagen 25° C.

Sporen und Asci

Sporen 2,5—6 f.i, rund, 1 bis 4 pro
Ascus, bisweilen 5. Die Sporen in
einem Ascus von verschiedener
Grösse. Oft bildet die Mutterzelle
zugleicherzeit ein Spross und Sporen,
bisweilen hat der Spross auch wieder
Sporen.

gärung

4quot; Dextrose, Laevulose, Mannose

n. u.nbsp;Galaktosenbsp;-{-

Saccharose

nbsp;Maltose.nbsp;-f

—nbsp;Laktosenbsp;—

n.u.nbsp;Raffinosenbsp;-j- 1/3 Teil

Nitrat - Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Obgleich die untersuchte Kultur was Hautbildung anbelangt nicht mit
der von Hansen beschriebenen Rasse übereinstimmt — was wohl damit
zusammenhangen dürfte, dass die von ihm benützte Würze in ihrer Zusam-
mensetzung wesentlich von der hier verwendeten verschieden war ■— ver-
anlassen die übrigen Ergebnisse doch zur Identität der untersuchten Kultur
und der von HANSEN beschriebenen Art zu schliessen.

Für die Umgrenzung dieser Art. vergl. S. 87.

Saccharomyces carlshergensis Hansen.

Syn.: Carlsberg Unterhefe N^. 1; Carlsberg Sacch. cerevisiae N^. 1.

Lit.: E. Chr. Hansen Compt. rend. trav. lab. Carlsberg. T. 7, p. 179 (1908);
diese Abhandlung auch in: Ges. theor. Abh. u Gärungsorg. p. 428 (1911).
Hansen isolierte diese Art aus Bierunterhefe der Carlsbergbrauerei zu
Kopenhagen.

Das \'„C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur von SCHNEGQ ; weitere
Herkunft unbekannt.

Beschreibung nach HaNSEN.

würze

Nach 24 Stunden 26° C. in ge-
hopfter Würze Zellen ellipsoi-
disch, eiförmig oder birnförmig,
einzelne kurz-wurstförmig. Die
eiförmigen, etwas zugespitzten Zel-
len verleihen dieser Art ihren Cha-
rakter.

Ein dünner, teigartiger Bodensatz.
Beim Temperaturmaximum für die
Sprossung (33,5° C.) sind die Zel-
len ellipsoidisch, eiförmig oder birn-
förmig, daneben viele Riesenzellen ;
lange Sprossverbände. Nahe dem
Temperaturminimum (beiO—9° C.)
mehr kurz- oder langgestreckt-
wurstförmige Zellen in langen
myzehalen Kolonien.
Nach 30 Tagen 15° C. Anfang einer
schwachen Hautbildung.

Nach 75 Tagen 15° C. dicke
Hautinseln.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
oval oder eiförmig, (3—5) X (7—
10) kleine Sprossverbände.

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben ; ein Bodensatz.
Nach 2 Monaten 15° C. dünne
Hautinseln, Zellen wie oben.

r z e a q a r

Nach 6 Tagen 25° C. Zellen oval
oder eiförmig, (3,8—7) X (5—
11,5) f.1, einzeln.

0 0

o ^

0
o

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
graugelb (128A), weich, matt-
glänzend, fein gerunzelt, Rand fein
zackig.

Riesenkolonie auf Würzegelatine

Eine Rosette, meistens eine Vertie-
fung in der Mitte, aber auch wohl
ein hervorstehender Knoten, konzen-
trische Ringe, der Rand wellig.
Trocken und wachsartig.

Nach 40 Tagen 15° C. flach kegel-
förmig, viele konzentrischen Ringe
und einige radiären Falten, Rand
wellig.

Gelatineverflüssigung

Nach 60 Tagen negativ.

Sporenbildung

Keine Sporen gefunden auf Gips,
Mohrrüben, Gorodkowa-agar, Wür-
ze, Würzeagar, Würzegelatine und
Kartoffeln.

Sporen und Asci

gärung

nbsp;Dextrose, Laevulose, Mannose

n. u.nbsp;Galaktosenbsp;-f

-f-nbsp;Saccharosenbsp;-(-

nbsp;Maltosenbsp;-f

—nbsp;Laktosenbsp;—

n. u.nbsp;Raffinose ganz

Nitrat-Assimilation
Negativ.nbsp;Negativ.

A e t h y 1 a 1 k o h o 1 als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse sprechen dafür, dass die untersuchte
Kultur ein, was Sporenbildung anbelangt degenerierter. Stamm der von
Hansen\' beschriebenen Art ist.

Umgrenzung von Saccharomyces carlsbergensis Hansen.

Zellen oval, in junger Würzekultur (3—5) X —^0) jbi, kleine Spross-
verbände. In Würze ein Bodensatz und nach längerer Zeit eine Haut.
Sporenbildung schwierig. Vergärung von Dextrose (L.M.), Galaktose.
Saccharose, Maltose und Melibiose (Raffinose vollständig). Nitrat-Assimi-
lation negativ. Mit Aethylalkohol als Wachstumssubstrat kümmerliches
Wachstum. Strichkultur auf Würzeagar (75 Tage 15° C.) grau-gelb
(128 A), weich, matt-glänzend, fein gerunzelt, Rand fein zackig.

Für Sacch. carlsbergensis var. monacensis (Hansen) Dekker vergl. S. 51 ;
für Sacch. carlsbergensis var. valdensis (Osterwalder) Dekker S. 103; für
Sacch. carlsbergensis var. mandshuricus I (Saito) Dekker S. 164; für 5acc/i.
carlsbergensis var. polymorphus Dekker S. 166 ; für Sacch. carlsbergensis
Rasse montibensis S. 82.

Saccharomyces monacensis Hansen.

Syn. : Carlsberg Unterhefe N^. 2.

Lit. : S. Sacch. carlsbergensis Hansen.

Hansen isolierte diese Art aus Bierunterhefe der Carlsbergbrauerei zu
Kopenhagen.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur von SCHNEOG ; weitere
Herkunft unbekannt.

Beschreibung nach Hansen.

Wü

Nach 24 Stunden 26° C. in ge-
hopfter Würze Zellen rund oder el-
lipsoidisch, daneben Riesenzellen.
Zellen bei niedrigen Temperaturen
(1—9° C.) rund und ellipsoidisch,
erst nach 5 Tagen bei 9° C. wurst-
förmig. In der Nähe des Tempera-
turmaximums (32—33° C.) und
Minimums (1° C.) Sprossverbände.
Nach 30 Tagen 15° C. kleine Hau-
tinseln.

Eigene Beobachtungen.

r z e

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
oval, (5—8) X (5—14) /t, kleine
Sprossverbände.

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben ; ein Bodensatz.
Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz und ein Ring, Zellen wie oben.

Würzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen oval
oder rund, (3,5—7) X (6,5—8) fi.
einzeln oder zu zweien.

O CP

Cpo O

Verhand. Kon. Akad. v. Wetensch. (2e Sectie) Dl. XXVIII.nbsp;A 4

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
grau-gelb (128A), weich, feucht-
glänzend, schwach punktiert, gerun-
zelt, Rand fast recht.

R i e s e n k o 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Wie Carlsberg Unterhefe I, aber in
der Mitte keine Vertiefung doch
eine Warze und der Ring etwas
höher.

Nach 40 Tagen 15° C. kegelförmig,
in der Mitte ein Knopf, konzentri-
sche Ringe und radiäre Striche,
Rand etwas gelappt.
Zellen wurstförmig, ± 4 X /.t,
oder oval wie oben.

Gelatineverflüssigung

Nach 60 Tagen positiv.
Sporenbildung

Etwas leichter als Sacch. Carlsber- | Keine Sporen gefunden auf Gips,
gensis.nbsp;i Mohrrüben, Würze, Würzeagar,

Würzegelatine und Gorodkowa-
j agar.

SporenundAsci

Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Ziemlich gutes Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse sprechen dafür, dass die untersuchte
Kultur ein, was Sporenbildung anbelangt degenerierter. Stamm der von
Hansen beschriebenen Art ist. Jedoch ist die Abtrennung dieser Art von
Saccharomyces carlsbergensis Hansen von wissenschaftlichem Standpunkte
aus ungenügend begründet. Eine Vereinigung der beschriebenen Art mit
der letztgenannten ist daher vollauf angebracht. Weil jedoch kleinere

Unterschiede vorhegen, wie z.B. die grösseren Abmessungen der Zellen von
S. monacensis soll diese Hefe weiterhin als Saccharomyces carlshergensis
var. monacensis (Hansen) Dekker gedeutet werden.

Umgrenzung von Saccharomyces carlshergensis var. monacensis (Han-
sen) Dekker.nbsp;?

Zellen oval, elliptisch, wurstförmig, in junger Würzekultur (5—8) X
(5—14) jii, bisweilen kleine Sprossverbände. In Würze ein Bodensatz, ein
Ring und unter bestimmten Umständen eine Haut. Sporenbildung schwie-
rig. Vergärung von Dextrose (L.M.), Galaktose, Saccharose, Maltose und
Melibiose (Raffinose vollständig). Nitrat-Assimilation negativ. Mit Aethyl-
alkohol als Wachstumssubstrat ziemlich gutes Wachstum. Strichkultur auf
Würzeagar (75 Tage 15° C.) grau-gelb (128 A), weich, feucht-glänzend,
schwach punktiert, gerunzelt, Rand fast recht.

Saccharomyces cerevisiae Hansen, Presshefe a Delft.
Diese Rasse wurde nicht beschrieben.

beijerinck isolierte diese Rasse vor langer Zeit aus Presshefe der „Ned.
Gist- en Spiritusfabriekquot; zu Delft.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur von BEIJERINCK.

Beschreibung nach HanSEN.

Wü

Vergleiche die Beschreibung auf
S. 43 u.f.

Eigene Beobachtungen.

r z e

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
rund bis oval, (5—6) X (5,5—8) /lt;,
einzeln oder zu zweien.

Öioöo

0^0

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen rund
bis oval, einige länger, (4—7) X
(6—12) /{, einzeln oder zu zweien.

a4*

Nach 8 Tagen 25° C. ein Bodensatz
und ein Ring.

Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz, ein Ring und kleine Hautin-
seln ; Zellen wie oben, bisweilen zu
dreien vereinigt.

Würzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen rund,
oval oder langgestreckt-, (3—5,5) X
(5,5—16) ft, einzeln oder zu zweien.

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
grau-gelb (128 C), weich, matt-
glänzend, stark gerunzelt, Rand
zackig.

Riesenkolonie auf Würzege1atine

Nach 40 Tagen 15° C. flach kegel-
förmig, stark gerunzelt, Rand zackig.

Gelatineverflüssigung

Nach 60 Tagen negativ.

Sporenbildung

Sporen gefunden auf Gips nach 10
Tagen 25° C.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, ± 2,8 /n;
1—4 pro Ascus.

gärung

Dextrose, Laevulose, Mannosenbsp;-f-

Galaktose .nbsp;-)-

Saccharosenbsp;

Maltosenbsp;-j-

Laktosenbsp;—

Raffinosenbsp;-}- 1/3 Teil

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerhches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse in Zusammenhang mit den einführenden
Betrachtungen zu der betreffenden Artengruppe veranlassen zur. Iden-
tität der untersuchten Kultur und der von Hansen beschriebenen Art zu
schliessen. Weil aber diese Rasse charakterisiert ist durch ihre besondere
Anwendbarkeit für die Presshefebereitung soll sie von der eigentlichen Art
unterschieden werden, weshalb sie weiterhin als Saccharomyces cerevisiae
Hansen, Rasse Delft I angedeutet werden soll.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae vergl. S. 87.

Saccharomyces cerevisiae Hansen, Presshefe b Delft.
Diese Rasse wurde nicht beschrieben.

Beijerinck isolierte diese Rasse vor langer Zeit aus Presshefe der „Ned.
Gist- en Spiritusfabriekquot; zu Delft.

Das „C.B. S.quot; erhiek die untersuchte Kultur von BEIJERINCK.

Beschreibung nach HanSEN.

würze

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben.

Nach 8 Tagen 25° C. ein Bodensatz
und ein Ring.

Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz, ein Ring und Hautinseln.
Zellen wie oben.

Nach 2 Monaten 15° C. eine sehr
dünne Haut. Zellen lang-oval, kleine
Sprossverbände.

W ürzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen oval
(3—7) X (7-10) Sprossver-
bände.

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
leichtbraun (128 C), weich, matt,
ein faltiges Netz.

Riesenkolonie auf Würzege1at i n e

Nach 55 Tagen 15° C. stark gefal-
tet, lichenenartig.

Gelatineverflüssigung

Nach 60 Tagen negativ.

Sporenbildung

Sporen gefunden auf Gips nach 30
Tagen 25° C.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, ± 3,8 ;
1—4 pro Ascus.

gärung

Dextrose, Laevulose, Mannose

Galaktosenbsp;-f-

Saccharosenbsp;-j-
Maltose

Laktosenbsp;—

Raffinosenbsp; 1/3 Teil

N i t r a t - A s s i m i 1 a t i o n
Negativ.

Aethylalkohol äls Wachstumssubstrat

Fast gar kein Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse in Zusammenhang mit den einführenden
Betrachtungen zu der betreffende Artengruppe veranlassen zur Identität
der untersuchten Kultur und der von Hansen beschriebenen Art zu
schliessen. Weil sie jedoch grosse Uebereinstimmung mit der später zu
beschreibenen Varietät ellipsoideus (Hansen) Dekker aufweist und sie
überdem charakterisiert ist durch ihre besondere Anwendbarkeit für die
Presshefebereitung soll sie weiterhin als Saccharomyces cerevisiae var.
ellipsoideus (Hansen) Dekker, Rasse Delft II angedeutet werden.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae var. ellipsoideus vergl. S. 87.

Saccharomyces cerevisiae Hansen, Presshefe Rasse II.

Lit. : S. Sacch. cerevisiac Hansen und weiter : W. HenneBERO, Zeitschr. f.
Spiritusind. p. 91 (1903); reL in: Centr. L Bakt. Abt. IL Bd. 10.
p. 353 (1903) ; idem, Handb. d. Gärungsbakt. 2te Aufl., Bd. 2, p. 27 (1926).
Henneberg isolierte diese Rasse aus Presshefe.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur 1924 vom Institut f. Gärungs-
gewerbe zu Berlin (lindner).

Beschreibung nach Henneberg.

W ü r 2 e

Zellen meist einzeln, mit grossen
Vakuolen ; Grösse sehr verschieden,
4,2—11,2 jx, langgestreckt.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
langoval, (3—6) X (8—12)
einzeln oder zu zweien.

Ö

0 o^

Nach 13 Tagen eine feine Staub- | Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
haut, welche die Flüssigkeit leicht ! oben.

trübt; und ein Ring.nbsp;I Nach 8 Tagen 25° C. nur ein Bo-

I densatz.
Nach 14 Tagen 15° C. ein Ring
und ein Bodensatz; Zellen wie
I oben.

Würzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen kurz-
bis lang-oval, (4—8) X (7—20) ft.

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
grau-gelb (128 A), weich, feucht-
glänzend, fein gerunzelt, Rand
zackig.

R i e s e n ko 1 o n i e auf W ü r z e g e I a t i n e

Glatt mit konzentrischen und radi-
ären Strichen, Rand ziemhch recht
abgegrenzt.

Nach 45 Tagen 15° C. konzentri-
sche Ringe und einige radiären
Striche, Rand ein wenig gelappt.

Gelatineverflüssigung

Nach 24 Tagen positiv.

Sporenbildung

Viele Sporen gefunden auf Gips
nach 9 Tagen 25° C.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, 2,8—4 u,
1—4 pro Ascus.

gärung
Dextrose, Laevulose, Mannose

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse in Zusammenhang mit den einführenden
Betrachtungen zu der betreffenden Artengruppe veranlassen zur Identität
der untersuchten Kultur und der von Hansen beschriebenen Art zu schlies-
sen. Weil sie jedoch grosse Uebereinstimmung mit der später zu beschrei-
benen Varietät ellipsoideus (Hansen) Dekker aufweist, soll sie weiterhin
zu dieser Varietät gerechnet werden.

Es spricht weiter nichts dagegen die Kultur mit der von Henneberg
beschriebenen Rasse II zu identifizieren.

Für die Umgrenzung von Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus
vergl. S. 87.

Saccharomyces cerevisiae Hansen, Presshefe Rasse XII.

Lit. : S. Sacch. cerev. Rasse IL

Henneberg isolierte diese Rasse aus Presshefe.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur 1924 vom Institut L Gärungs-
gewerbe zu Berlin (Lindner).

Beschreibung nach Henneberg-nbsp;Eigene Beobachtungen.

W ü r z e

Nach 6 Tagen 28° C. eine Haut, I Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
welche schnell hinuntersinkt, und oval, (3—5,5) X (7—9) /t, einzeln
ein Ring.nbsp;j oder zu zweien.

O O ^
O O

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben.

Nach 8 Tagen 25° C. ein Boden-
satz und ein Ring.
Nach 14 Tagen 15° C. ebenso.

W ürzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen kurz-
oder lang-oval, (4—7) X (7—18) //.

c?

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
grau-gelb (128 A) weich, feucht-
glänzend, stark gefaltet.

R i e s e n k o 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Weiss, in der Mitte eine Vertiefung,
welche nach 8 Tagen verschwindet,
feine konzentrische Ringe mit radi-
ären Strichen.

Nach 55 Tagen 15° C. in der Mitte
ein Knopf von einigen konzentri-
schen Ringen umgeben und radiäre
Falten, in der Peripherie Fortset-
zung dieser Falten ; stark gerunzelt.

Gelatineverflüssigung

j Nach 60 Tagen negativ.

Sporenbildung

Nach 20 Tagen 25° C. auf Gips
viele Sporen.

SporenundAsci

Sporen rund und glatt, ±: 3,8 jii:
1—4 pro Ascus.

gärung

Dextrose, Laevulose, Mannose

Galaktosenbsp;-f-

Saccharose
Maltose

Laktosenbsp;—

Raffinosenbsp;-f- 1/3 Teil

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse in Zusammenhang mit den einführenden
Betrachtungen zu der betreffenden Artengruppe veranlassen zur Iden-
tität der untersuchten Kultur und der von Hansen beschriebenen Art zu
schliessen. Weil sie jedoch grosse Uebereinstimmung mit der später zu
beschreibenen Varietät ellipsotdeus (Hansen) Dekker aufweist, soll sie
weiterhin zu dieser Varietät gerechnet werden.

Weil unsere Kultur weder eine Haut auf Würze bildet, noch mycoder-

maähnliche Zellen und Sprossverbände, kann sie jedoch nicht mit der von
Henneberg beschriebenen Rasse XII identifiziert werden.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae var. ellipsdideus vergl. S. 87.

Saccharomyces cerevisiae Hansen, Rasse Frohberg (Untergärig).

Lit.: S. Sacch. cerevisiae Hansen und weiter: A. bau, Woch. f. Brau. Bd. 11
p. 1366 (1894) ; P. LiNDNER, Mikrosk. Bestriebskontr. p. 189, Iste AufL
Berlin, (1895); F. SCHöNFELD und W. ROMMEL, Woch. f. Brau. Bd. 23.
p. 523 (1906); A. JöRGENSEN, die Mikroorg. d. Gärungsind. 5te AufL, 1909.quot;
p. 334 ; W. HennebeRG, Handbuch der Gärungsbakt. 2te Aufl., Bd 2
p. 12 (1926).

Lindner isolierte diese Rasse aus Bierhefe der Frohbergbrauerei.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur von Bauch ; weitere

Herkunft unbekannt.

Beschreibung nach Henneberg.

W ü r z e

Zellen in jungen Kulturen meist
länglich eiförmig, (8—10,4) X (7,2
—4,8) fx; Sprossverbände.
Ringbildung.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
oval, (3—5) X {5—7) u, einzeln
oder zu zweien.

0 ^
^ 0 Q

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen rund
bis oval, 5—7 /i; Sprossverbände.

Nach 8 Tagen 25° C. nur ein Bo-
densatz.

Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz ; Zellen wie oben.

Würzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen rund,
4—10 jh, einzeln oder zu zweien.
Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
leichtbraun-grau (128 B), weich,
feucht-glänzend, glatt, Rand zackig.

R i e s e n ko 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Nach 40 Tagen 15° C. eine Rosette,
mit in der Mitte ein Knopf.

Gelatineverflüssigung

Nach 60 Tagen negativ.

Sporenbildung

Keine Sporen gefunden auf Gips
und Gorodkowa-agar.

Sporen und Asci

gärung

-]- Dextrose, Laevulose, Mannose -f
n. u.nbsp;Galaktose

Saccharosenbsp;-f-

-f-(und Isomaltose) Maltosenbsp;-f

—nbsp;Laktosenbsp;—

4quot; ganznbsp;Raffinosenbsp;ganz

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse sprechen anscheinend nicht dagegen, dass
die untersuchte Kultur ein, was Sporenbildung anbelangt degenerierter.
Stamm der von HANSEN beschriebenen Art ist. Den einführenden Betrach-
tungen zu der betreffenden Artengruppe gemäss soll die untersuchte Hefe

jedoch in die Art Saccharomyces carlshergensis Hansen gestellt werden Es
^heint aber kein genügender Grund vorzuhegen um sie als den quot;von
Henneberg beschriebenen Frohberg-Typus zu charakterisieren.
Für die Umgrenzung von Sacch. carlshergensis vergl. S. 48.

Saccharomyces cerevisiae Hansen, Rasse Saaz (Obergärig).

Lit. : S. Sacch. cerevisiae Rasse Frohberg und weiter : Wochenschr f Bran
Bd 7, p. 636 (1890) ; ibid. Bd. 8. p. 809 u. 1135 (1891) ; ibid. Bd 9
p. 833 (1892) und Zeitschr. f. Spiritusind., Ergänzungsheft p. 30 (1891) i)\'

Lindner isolierte diese Rasse aus Bierhefe der Saaz-Brauerei

Uas „C. B. S. erhielt die untersuchte Kultur von BAUCH ; weiterP
Herkunft unbekannt.

Beschreibung nach Henneberg.

W ü r z e

Zellen eiförmig, oft Riesenzellen von
14,4 X 15,2 /x, sonst (4,8—8,8) X
(6,4—12,8) In der Tröpfchen-

o

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen

rund bis oval, (3—6) X (4_8)

kleine Sprossverbände.

0

0

kultur Sprossverbände, welche leicht
auseinanderfallen.

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben, einzeln oder zu zweien.
Nach 8 Tagen 25° C. nur ein
Bodensatz.

Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz ; Zellen wie oben.

Diese letzten Angaben sind von Bau. sie waren nicht nachzuschlagen.

W ürzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen rund.
4—6 /t oder lang-oval, (1—3) X
(5-13) ^c.

Oo o^Ö ^

o

Stnchkultur nach 75 Tagen 15° C.
leichtbraun (128 D), weich, feucht-
glänzend, gefaltet, Rand zackig.

Riesenko1onie auf Würzege1at i n e

Nach 40 Tagen 15° C. leichtgelb,
radiäre Falten und konzentrische
Ringe, Rand gebuchtet; Zentrum
erhoben.

Gelatineverflüssigung

Langsam, aber schneller als bei Hefe
Frohberg.

Sporenbildung

Nicht beobachtet auf Würzegela-
tine, Gips, Gorodkowa-agar, und
Mohrrüben.

Sporen und Asci

gärung
Dextrose, Laevulose, Mannose
Galaktose
Saccharose
Maltose
—nbsp;Laktose

-f 1/3 Teil Raffinose

Nitrat-Assimilation
Negativ.

A e t h y 1 a 1 k o h o 1 als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse sprechen dafür, dass die untersuchte
Kultur ein, was Sporenbildung anbelangt degenerierter. Stamm der von
Hansen beschriebenen Art ist. Auch spricht vorläufig nichts dagegen sie
mit dem von Henneberg beschriebenen Saaz-Typus zu identifizieren.
Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae vergl. S. 87.

* Saccharomyces cerevisiae subsp. orsati Steiner.

Lit.: J. M. Steiner, Etude sur les Levures actives des vins valaisans, Thèse.
Genève, 1924, p. 23.

Steiner isolierte diese Art aus gärendem Most von Montibeux.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuche Kultur April 1928 von Steiner.

Beschreibung nach Steiner.

Würze

Zellen rund, oder selten oval, 6—8 ,u.
Ein Bodensatz und ein dünner Ring.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
kurz- bis lang-oval, (3—5) X
(4,5—13) fi. einzeln oder zu

zweien.

Cö O

dcP Oo^
CO oCPf^

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben ; ein Bodensatz.
Nach 15 Tagen 15° C. Zellen wie
oben ; ein Ring und ein Bodensatz.

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen rund
bis oval, (3—5,5) X (3,5—7,5) /n,
einzeln oder zu zweien.
Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
grau-gelb (153 C), weich, feucht-
glänzend, etwas körnig, Rand zackig.

R i e s e n k o 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Flach verbreitet, ein tiefer Krater in
der Mitte, Rand leicht gebuchtet.

Nach 40 Tagen 15° C. flach ver-
breitet, einige konzentrischen Ringe.
Rand leicht gebuchtet.

Gelatineverflüssigung

Nach 42 Tagen negativ.

Sporenbildung

Nicht beobachtet auf Würzegelatine.
Sehr schwierig auf Gips (nach 10
Tagen).

Beobachtet auf Gips in Mannit-
Dikaliumphosphatlösung nach 7
Tagen. (Nicht beobachtet auf Gips
in Wasser, Würzegelatine, Würze-
agar, Würze, Mohrrüben).

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, 1,5—2,5 /lt;,
meist 2 pro Ascus.

O® O ^

gärung

-f Dextrose, Laevulose,-Mannose -f-

V3 Teil

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Verhand. Kon. Akad. v. Wetensch. (2e Sectie) Dl. XXVIII.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Deutliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse geben keine Veranlassung die Identität
der untersuchten Kultur, und der von Steiner beschriebenen Subspezies
anzuzweifeln, wenn auch die Zellen unserer Kultur im allgemeinen etwas
mehr oval sind.

In Anbetracht der beträchthchen Variation in Eigenschaften welche die
verschiedenen Stämme von Saccharomyces cerevisiae aufweisen, scheint es
jedoch nicht berechtigt für diesen Stamm, welcher keine besonderen Merk-
male zeigt, den Rang einer Subspezies aufzufordern. Die angegebenen
Eigenschaften fallen doch ganz innerhalb der Variationsbreite der Art.
Weil jedoch möglicherweise bestimmte praktische Unterschiede mit anderen
Stämmen von Saccharomyces cerevisiae vorhanden sind, ist nichts dagegen
diese Hefe als Rasse orsati (Steiner) von den anderen Stämmen abzu-
trennen.

Eine Diagnose erübrigt sich unter diesen Umständen.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae sehe S. 87.

* Saccharomyces cerevisiae subsp. vetrozensis Steiner.

Lit. : S. Sacch. cerev. subsp. orsati Steiner.

Steiner isolierte diese Art aus gärendem Most von „Johannisberg de
Vétrozquot;.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur April 1928 von StEINER.

Beschreibung nach steiner.nbsp;Eigene Beobachtungen.

würze

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
oval, (4—6) X (5—9) fi, einzeln
oder zu zweien.

OCPCb

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen oval.
(3,5—5) X (4,5—7) einzeln oder
zu zweien.

Nach 35 Tagen 15° C. ein Boden-
satz und ein Ring, welcher beim
Umschütteln leicht hinunterfällt.

W ürzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen oval,
(3,5—6) X (4,5—9) 1.1, einzeln
oder zu zweien.

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
grau-gelb (128 B), matt-glänzend,
etwas körnig, Rand zackig, ein
durchsichtiger Saum.

Riesenko1onie auf Würzege1at i n e

Nach 40 Tagen 15° C. viele konzen-
trischen Ringe, einige radiären Fal-
ten, Rand gebuchtet.

Gelatineverflüssigung

Nach 40 Tagen negativ.

Sporenbildung

Langsam auf Gips und nicht auf
Gelatine.

Nach 10 Tagen 25° C. auf Gips
ziemlich gut.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, ± 3 fi,
meistens 2 pro Ascus.

Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse veranlassen zur Identität der untersuchten
Kultur und der von Steiner beschriebenen Subspezies zu schliessen. Auf
Grund der auf S. 66 gegebenen Ausführungen wird jedoch auch dieser
Stamm weiterhin als Saccharomyces cerevisiae Hansen, Rasse vetrozensis
(Steiner) bezeichnet werden.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae vergl. S. 87.

Saccharomyces ellipsoideus Hansen i).

Lit.: S.: Sacch. cerevisiae Hansen.

Hansen isolierte diese Art von der Oberfläche reifer Trauben.

Das „C. B. S.quot; hat etwa 16 Stämme, welche diesen Artnamen tragen 2). Eg

werden jedoch nicht alle beschrieben.

Das „C B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur Jan. 1922 von ClAUSSEN ;
weitere Herkunft unbekannt.

Beschreibung nach Hansen.

Wü

Nach 24 Stunden 26° C. in gehopf-
ter Würze Bodensatzzellen oval
oder wurstförmig, (2,5—6,5) X
(4,5—9,5) ju; kleine Sprossverbän-
de. Die Hautvegetation bei 20—34°
C. und 6—7° C. enthält kleinere
und verhältmässig mehr wurstför-
mige Zellen als die der Aussaat; bei
13—15° C. stark entwickelte, ver-
zweigte Kolonien von kurzen oder
langgestreckt-wurstförmigen bis fa-
denförmigen Zellen. In alten Kul-
turen dasselbe wie bei 13—15° C.;

Eigene Beobachtungen.

r z e

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
lang-oval, (3—6) X (6—11) /u, ein-
zeln. oder zu zweien.

co 3 0 cö

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen oval
oder langgestreckt, (3,5—7) X
(5—14) ju, einzeln oder zu zweien.

oft die Kolonien mit kreisstandigen
Zweigen. Hierneben kommen auch
normale Zellen vor, wie diejenigen
der Aussaat.

Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz und ein sehr dünner Ring. Zel-
len oval oder langgestreckt, (3—5,5)
X (3—19) jn, Sprossverbände.

Würzeagar

Nach 6 Tagen 25° C. Zellen oval,
(3—5,5) X (3—8) fz, einzeln oder

zu zweien.

o o

O Q) O

O O ^
O

o

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
leichtbraun-grau (128 B), weich,
feucht-glänzend, glatt, Rand zackig.

R i e s e n k o 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Nach 45 Tagen 15° C. viele radiären
und einige konzentrischen groben
Falten.

Gelatineverflüssigung

Nach 45 Tagen negativ.

Sporenbildung

Sehr leicht auf Gips, optimal bei
25° C.; Minimumtemp. 4—8,5° C.;
Maximumtemp. 31,5—32,5° C.

Auf Gips nach 9 Tagen 25° C.
ziemlich gut.

Sporen und Asci

Sporen 2—4 ju; 1—4 Sporen pro
Ascus.

Sporen rund und glatt, ± 3 ju, 1—4
pro Ascus.

gärung

Dextrose,. Laevulose, Mannose

n. u.nbsp;Galaktosenbsp;

Saccharosenbsp;-j-

nbsp;Maltosenbsp;-{-

Laktosenbsp;—

n.u.nbsp;Raffinosenbsp; 1/3 Teil

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als Wachstumssubstrat

Ziemlich gutes Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse, in Zusammenhang mit den einführenden
Betrachtungen zu dieser Artengruppe, veranlassen zur Identität der unter-
suchten Kultur und Saccharomyces cerevisiae Hansen zu schliessen. Die
gute Uebereinstimmung dieser Kultur mit dem von Hansen als Saccharo-
myces ellipsotdeus beschriebenen Organismus gibt jedoch Veranlassung sie
als Saccharomyces cerevisiae var. ellipsotdeus (Hansen) Dekker zu deuten.
Für die Umgrenzung dieser Varietät vergl. S. 87.

Saccharomyces ellipsotdeus Hansen, Weinhefe Johannisberg I Wortmann.

Lit. : S. Sacch. elUpsotdeus Hansen und weiter : J. WORTMANN, Landw. Jahr-
bücher, Bd. 21, p. 901 (1892) ; I^. AderhOLD, Landw. Jahrbücher, Bd. 2:J,
p. 535 (1894) ; A. GUILLIERMOND, Rev. gén. de Bot. T. 17, p. 337 (1905);
idem, Centr. f. Bakt. Abt. H, Bd. 26, p. 577 (1910).
WORTMANN isolierte diese Rasse aus gärendem Most des Johannisberg-
kellers.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur von SCHNEGG ; weitere Her-
kunft unbekannt.

Beschreibung nach WoRTMANNnbsp;„ , ,

und Aderhold.nbsp;Beobachtungen.

Wü

Zellen rund, oval oder zugespitzt.
Bei 26—27° C. eine Haut mit ovalen
Zellen.

quot;«

0 0

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben.

Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz und ein dünner Ring.
Nach 35 Tagen 15° C Zellen wie
oben.

Würzeagar

Nach 8 Tagen 25° C. Zellen rund
bis oval, (4—7) X (4—H) /t. ein-
zeln oder zu zweien.

C\'Ooo

Q

o O ^

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
graugelb (128B), weich, feucht-
glänzend, Peripherie ein wenig ge-
runzelt, Rand zackig.

Nach 40 Tagen 15° C. kegelförmig,
in der Mitte ein Knopf, radiäre
Striche und ein konzentrischer Ring.

Gelatineverflüssigung

Nach 45 Tagen negativ.

Sporenbildung

Beobachtet nach 28—30 Stunden bei
25 à 26° C.

Auf Gips nach 7 Tagen 25° C.
viele Sporen.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, ±3,5 jj,-,
I—4 pro Ascus.

a r u n g

-f-nbsp;Dextrose, Laevulose, Mannose

n. u.nbsp;Galaktosenbsp;

nbsp;Saccharose

nbsp;Maltosenbsp;

—nbsp;Laktosenbsp;—

n.u.nbsp;Raffinosenbsp; Vs Teil

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse geben keinerlei Veranlassung die Identität
der untersuchten Kultur und der von WoRTMANN beschriebenen Rasse
anzuzweifeln. Den einführenden Betrachtungen zu dieser Artengruppe
gemäss soll diese Rasse jedoch als Saccharomyces cerevisiae Hansen, Rasse
Johannisberg I (Wortmann) bezeichnet werden.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae vergl. S. 87.

Saccharomyces ellipsoideus Hansen, Weinhefe Johannisberg II Wortmann.

Lit. : S. Sacch. ellipsoideus Hansen, Weinhefe Johannisberg I Wortmann.

Wortmann isolierte diese Rasse aus gärendem Most des Johannisberg-
kellers.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur von BeijerincK ; weitere
Herkunft unbekannt.

Beschreibung nach wortmann
und Aderhold.

würze

Zellen oval, ziemlich lang, nie
zugespitzt.

Ein Bodensatz und eine Haut.
Hautzellen rund oder wurstförmig.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
lang-oval oder eiförmig, (4—6) X
(7—14) u, einzeln oder zu zweien.

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben.

Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz und ein Ring, keine Haut. Zel-
len wie oben, und einige langge-
streckt, ± 4 X 20 //.

Würzeagar

Nach 8 Tagen 25° C. Zellen gross,
oval, (5—11) X (6—16) /i, einzeln
oder zu zweien.

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
graugelb (128A), weich, feucht-
glänzend, etwas gerunzelt, Rand
etwas zackig.

Riesenkolonie auf W ürzegelatine

Nach 40 Tagen 15° C. flach, radiäre
Striche, granuliert.

Gelatineverflüssigung

Nach 45 Tagen negativ.

Sporenbildung

Viele Sporen gefunden auf Gips.

Sporen und Asci

Sporen 2—4 jj.-, fast immer 4 Sporen
pro Ascus. Die Sporen kopuheren
sehr oft bevor sie keimen (GUIL-
LIERMOND).

Sporen rund und glatt, ± 3,8 ;
1—4 pro Ascus.

gärung

nbsp;Dextrose, Laevulose, Mannose

n. u.nbsp;Galaktosenbsp;-f-

nbsp;Saccharosenbsp;-f-

nbsp;Maltosenbsp;

—nbsp;Laktosenbsp;■—

n.u.nbsp;Raffinosenbsp; i/s Teil

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Kümmerliches Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse geben keine Veranlassung die Identität
der untersuchten Kultur und der von Wortmann beschriebenen Rasse
anzuzweifeln, wenn auch unsere Kultur keine Hautbildung aufweist. Den
einführenden Betrachtungen zu dieser Artengruppe gemäss soll diese Rasse
als Saccharomyces cerevisiae Hansen, Rasse Johannisberg II (Wortmann)
bezeichnet werden.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae vergl. S. 87.

\'\'Saccharomyces ellipsoideus subsp. alpestris Steiner.

Lit. : S. Sacch. ccrcvisiac subsp. orsati Steiner.

Steiner isolierte diese Art aus gärendem Most von „Johannisberg de
Vétrozquot;.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur April 1928 von SteinER.

Beschreibung nach Steiner.nbsp;Eigene Beobachtungen.

würze

Zellen oval und eiförmig, selten
langgestreckt, (5—6) X (9—11)
Ein Bodensatz, kein Ring und keine
Haut.

d? cP
(fio

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben.

Nach 35 Tagen 15° C. Zellen wie
oben ; nur ein Bodensatz.

W ürzeagar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen oval
(3—5,5) X (4-8)

Ob 0 O oO

o

O
0 O

O

(Pö 0 o O

O O 0 0^0

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C
grau-gelb (128B), weich, feucht-
glänzend, Zentrum etwas gelber,
punktiert, Rand fein gezackt.

R i e s e n k o 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

In der Mitte ein kleiner Krater,
grosse, fein gestreifte Segmenten,
und viele konzentrischen Streifen.

Nach 40 Tagen 15° C. das Zen-
trum flach, ringsherum eine breite
Vertiefung, Peripherie etwas ge-
wölbt, Rand gebuchtet.

Gelatineverflüssigung

Nach 40 Tagen negativ.

Sporenbildung

Leicht auf Gips nach 10 Tagen
25° C.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, ± 3,8 /i ;
1—4 pro Ascus.

gärung

-j- Dextrose, Laevulose, Mannose -f

-f sehr schwierig. Galaktosenbsp;-f

Saccharosenbsp;-(-

Maltosenbsp;lt;

— Laktosenbsp;—

n-u. Raffinosenbsp;-f 1/3 Teil

Nitrat-Assimilation
Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Ziemlich gutes Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse veranlassen zur Identität der untersuchten
Kultur und der von Steiner beschriebenen Subspezies zu schliessen. Auf
Grund der einführenden Betrachtungen zu dieser Artengruppe und der auf
S. 66 gegebenen Ausführungen soll jedoch dieser Stamm als Saccharomyces
cerevisiae Hansen, Rasse alpestris (Steiner) beziechnet werden.
Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae vergl. S. 87.

* Saccharomyces ellipsotdeus var. alpinus Steiner.

Lit. : S. Sacch. ccrevisiac subsp. orsati Steiner.

Steiner isolierte diese Art aus gärendem Most von „Döle de Martigny\'
Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur April 1928 von STEINER.

Beschreibung nach SteineR.

Wü

Zellen rund bis eiförmig, (5—6)

X (6—8)

Ein staubiger Bodensatz, kleine
Hautinseln, und ein ziemhch dicker
Ring.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
rund oder oval, (4,5—6) X (5—
8) fi, einzeln oder zu zweien.

qcOOo^

00^ O ^o

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie

oben; ein Bodensatz.

Nach 30 Tagen 15° C. Zellen wie

oben ; ein Bodensatz und ein dünner

Ring.

rzea gar

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen oval,
(2,5—7) X (4,5-8) ^a. einzeln
oder zu zweien.

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
graugelb (128B), weich, matt-
glänzend, Zentrum punktiert, Peri-
pherie gerunzelt, Rand etwas ge-
buchtet.

R i e s e n k o 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Graubraun, mit tiefem Krater, wo-
von radiäre Striche ausgehen ; Rand
gelappt.

Nach 40 Tagen 15° C. in der Mitte
ein Knopf; grobe radiäre Falten
und einige konzentrischen Ringe,
Rand fein gezackt.

Gelatineverflüssigung

Nach 40 Tagen negativ.

Sporenbildung

Sehr viel Sporen nach 10 Tagen auf
Gips 25° C.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, ± 3,8 [x ;
1—4 pro Ascus.

gärung
Dextrose, Laevulose, Mannose -{-

Nitrat-Assimilation
Negativ.

lt;

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Ziemlich gutes Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse geben keinerlei Veranlassung die Identität
der untersuchten Kultur und der von Steiner beschriebenen Varietät anzu-
zweifeln. Auf Grund der einführenden Betrachtungen zu dieser Arten-
gruppe und der auf S. 66 gegebenen Ausführungen soll jedoch dieser
Stamm als Saccharomyces cerevisiae Hansen, Rasse alpinus (Steiner)
bezeichnet werden.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae vergl. S. 87.

* Saccharomyces ellipsoideus subsp. [ulliensis var. typica Steiner.

Lit. : S. Sacch. cercvisiac subsp. orsati Steiner.

Steiner isolierte diese Art aus gärendem Most von „FuIIyquot;.
Das „C. B.S.quot; erhielt die untersuchte Kultur April 1928 von SteINER.

Beschreibung nach Steiner.nbsp;Eigene Beobachtungen.

W ü r z e

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
oval, (4—5) X (5—9) einzeln
oder zu zweien.

cP
0

o q)

o

o

o

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben.

Nach 14 Tagen 15° C. ein Boden-
satz und ein dünner Ring.
Nach 35 Tagen 15° C. Zellen wie
oben.

W ürzeagar

Nach 8 Tagen 25° C. Zellen oval
(3.8—6) X (4-9,5)
Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
leichtbraun-grau (128B), weich,
feucht-glänzend, glatt, einige Sekun-
därkolonien, Rand gebuchtet-zackig.

R i e s e n k o 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Weiss, in der Mitte ein Krater,
hochwachsend ; viele radiären und
einzelne konzentrischen Striche;
Rand gelappt.

Nach 40 Tagen 15° C. kegelförmig,
einige konzentrischen und viele
radiären Striche, Rand gebuchtet.

Gelatineverflüssigung

Nach 45 Tagen negativ.

Sporenbildung

Schwierig auf Gips (nach 8 Tagen)
nie auf Würzegelatine.

Auf Gips 25° C. nach 9 Tagen
einige Asci, nach 30 Tagen mehr.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, ± 3,8 /{
1—4 pro Ascus.

G ä 1 u n g

-j-nbsp;Dextrose, Laevulose, Mannose -}-

nbsp;Galaktosenbsp;-f-

nbsp;Saccharosenbsp;4quot;

nbsp;Maltosenbsp;-(-

—nbsp;Laktosenbsp;—

n.u.nbsp;Raffinosenbsp; Va Teil

Nitrat-Assimilation

Negativ.
«

Aethylalkohol als Wachstumssubstrat

Ziemhch gutes Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse sprechen dafür, dass die untersuchte
Kultur mit der von Steiner beschriebenen Subspezies identisch ist.

Auf Grund der einführenden Betrachtungen zu dieser Artengruppe und
der auf S. 66 gegebenen Ausführungen soll jedoch dieser Stamm als
Saccharomyces cerevisiae Hansen, Rasse fulliensis (Steiner) bezeichne
werden.

Für die Umgrenzung von Sacch. cerevisiae vergl. S. 87.

* Saccharomyces ellipsoideus subsp. montibensis Steiner.

Lit. : S.Sacch. cerevisiae subsp. orsati Steiner.

Steiner isolierte diese Art aus gärendem Most von Montibeux.
Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur April 1928 von Steiner.

Beschreibung nach Steiner.nbsp;Eigene Beobachtungen.

würze

Zellen elhptisch, eiförmig und rund,
(4-6) X (8-16) /t.
Keine Haut und kein Ring.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
kurz- bis lang-oval, 4,5 X (5—
11) einzeln oder zu zweien.

CO CO OO

9 Ô Q

oO 03

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben.

Nach 35 Tagen 15° C Zellen oval,
(3—5) X (5—11) ein Bodensatz
und später ein dünner Ring.

Würzeagar

Nach 4 Tagen 25° C. Zellen oval,
(3—5) X (5—11) einzeln.
Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
grau-gelb, (128B) weich, feucht-
glänzend, punktiert.
Verhand. Kon. Akad. v. Wetensch. (2e Sectie) Dl. XXVIII.nbsp;A 6

R i e s e n k o I o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Ein tiefer Krater, Rand gelappt,
viele konzentrischen Ringe.

Gelatineverflüssigung

Nach 40 Tagen negativ.

Sporenbildung

Beobachtet auf Gips ; nicht auf
Gelatine.

Leicht auf Gips nach 10 Tagen
25° C.

Sporen und Asci

Sporen rund und glatt, ± 3,5 ^ ;
1—4 pro Ascus.

Negativ.

Aethylalkohol als W a c h s t u m s s u b s t r a t

Ziemlich gutes Wachstum.

Die obenstehenden Ergebnisse geben keine Veranlassung die Identität
der untersuchten Kultur und der von Steiner beschriebenen Subspezies
anzuzweifeln, wenn auch die Zellgrösse nicht ganz stimmt.

Auf Grund der einführenden Betrachtungen zu dieser Artengruppe soll
jedoch dieser Stamm als Saccharomyces carlsbergensis Hansen, Rasse mon-
tibensis (Steiner) bezeichnet werden.

* Saccharomyces ellipsoideus subsp. thermophilus Steiner.

Lit. : S. Sacch. ccrevisiac subsp. orsati Steiner.

Steiner isolierte diese Art aus gärendem Most von „Johannisberg dc
Vetrozquot;.

Das „C. B. S.quot; erhielt die untersuchte Kultur April 1928 von SteineR.

Beschreibung nach Steiner.nbsp;Eigene Beobachtungen.

W ü r z e

Zellen oval und eiförmig, (6—7) X

(8—11) iii.

Nur ein dicker grauer Bodensatz ;
Flüssigkeit klar.

Nach 24 Stunden 25° C. Zellen
oval, (3—6) X (6—9) ju, einzeln
oder zu zweien.

oOo^o

O^QO

Nach 3 Tagen 25° C. Zellen wie
oben.

Nach 35 Tagen 15° C. Zellen wie
auf Würzeagar ; nur ein Bodensatz.

W ürzeagar

Nach 4 Tagen 25° C. Zellen oval,
(3—8) X (4—11) jii, einzeln oder
zu zweien.

Strichkultur nach 75 Tagen 15° C.
grau-gelb (128B), weich, punktiert,
feucht-glänzend.

R i e s e n k o 1 o n i e auf W ü r z e g e 1 a t i n e

Segmentiert mit gelapptem Rand;
ein tiefer Krater mit flachem Boden.